全自動(dòng)電泳儀完整版

1、 電泳是指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電極的作用下在液體介質(zhì)中的泳動(dòng)。 電泳技術(shù)的分類(lèi)1、基礎(chǔ)的電泳技術(shù)淀粉凝膠電泳 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種實(shí)用的電泳技術(shù)。它用的介質(zhì)是一種純化的、主要是中性部分的瓊脂，即瓊脂糖。這一技術(shù)已成功能應(yīng)用到血清蛋白、血紅蛋白、乳酸脫氫酶及肌酸激酶、脂蛋白等物質(zhì)的分離。瓊脂糖優(yōu)點(diǎn)是對(duì)蛋白質(zhì)的親和力低，干燥后透明度高，便于密度檢測(cè)。 醋纖膜電泳 圓盤(pán)電泳 聚丙酰胺凝電泳 等電聚焦電泳 二維電泳 高分辨電泳 1、毛細(xì)管電泳 2、與免疫學(xué)技術(shù)結(jié)合衍生出的電泳技術(shù) 免疫電泳 交叉免疫電泳 對(duì)流免疫電泳 免疫固定電泳 廣泛用于蛋白質(zhì)的鑒定。它是免疫蛋白混合液在瓊脂糖凝膠上進(jìn)

2、行電泳，再在膠上直接加入相應(yīng)抗血清，抗原抗體復(fù)合物沉淀下來(lái)。這些免疫沉淀物在凝膠上固定下來(lái)，不沉淀的蛋白質(zhì)在膠上可以洗脫。對(duì)凝膠進(jìn)行染色，即可將蛋白質(zhì)鑒定出來(lái)。目前廣泛應(yīng)用于骨髓病蛋白的評(píng)價(jià)上。 電泳技術(shù)與自動(dòng)化 1、電泳系統(tǒng)：HYDRASYS全自動(dòng)電泳系統(tǒng)，以瓊脂糖凝膠為載體，自動(dòng)點(diǎn)樣、電泳孵育、染色、脫、烘干。采用微孔濾紙滲透的專(zhuān)利點(diǎn)樣技術(shù)，電腦程控化管理，快捷簡(jiǎn)便的人機(jī)對(duì)話(huà) 2、HYRYS-PHORFSIS光密度掃描儀，程序化多功能全自動(dòng)學(xué)密度儀。 血清蛋白電泳 血清蛋白質(zhì)在一種指定的緩沖液，直流電場(chǎng)中，每種蛋白質(zhì)按各自的速度遷移，根據(jù)它們所帶的電荷而分離。 正常血清電泳分離出5個(gè)區(qū)帶：

3、白蛋白、1球蛋白、2球蛋白、球蛋白、球蛋白。 每個(gè)區(qū)帶含1種或多種血清蛋白成分。 按遷移遞減次序排列依次是 1、白蛋白:遷移最快，最大的部分，靠近凝膠的陽(yáng)極 2、1球蛋白:相當(dāng)于1-抗胰蛋白酶及血清類(lèi)粘蛋白 3、2球蛋白:相當(dāng)于：觸珠蛋白、2巨球蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白、GC球蛋白及脂蛋白 4、球蛋白:相當(dāng)于：轉(zhuǎn)鐵蛋白、脂蛋白及補(bǔ)體、特殊情況下，可遷移成清晰的1和2帶。 5、球蛋白:相當(dāng)于血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）圖譜(正常) 特殊情況 1、單克隆免疫球蛋白病 出現(xiàn)異常的尖峰，通常出現(xiàn)遷移到區(qū)，但有時(shí)遷移到或2區(qū)。但并非所有的單克隆免疫蛋白均為惡性型的。單克隆免疫球蛋白電泳圖譜本周蛋白

4、(免疫固定電泳)2、非惡性型或獨(dú)特型球蛋白病有下列特征 單克隆的峰值弱小 單克隆組分的濃度整個(gè)過(guò)程無(wú)變化 多克隆免疫球蛋白不減少 本周蛋白很少出現(xiàn) 此類(lèi)病人可檢測(cè)免疫固定電泳，確定為哪類(lèi)單克隆免疫球蛋白且必須有規(guī)律地監(jiān)控這類(lèi)病人 3、年齡變化 :10到16歲以前，球蛋白未達(dá)到正常水平。達(dá)到40歲時(shí)，白蛋白和球蛋白通常增加。 4、臍帶的表現(xiàn):白蛋白減少，和2球蛋白減少。球蛋白正常（主要來(lái)自母體）白蛋白區(qū)帶的改變 1、雙白蛋白血癥遺傳性變異、大劑量酰胺類(lèi)抗生素治療、胰蛋白酶對(duì)白蛋白內(nèi)部水解所致胰腺炎 2、近乎完全缺乏區(qū)帶先天性白蛋白缺乏癥 3、白蛋白減少 4、高白蛋白血癥血液濃縮1球蛋白區(qū)帶的改變

5、 減少肝功能衰竭、營(yíng)養(yǎng)不良、蛋白丟失、先天性1抗胰蛋白酶缺乏 增多炎癥，常伴有2球蛋白2球蛋白區(qū)帶的改變 1、雙區(qū)帶現(xiàn)象結(jié)合珠蛋白表型差異、單克隆性游離輕鏈遷移 2、減少肝功能衰竭、營(yíng)養(yǎng)不良、蛋白丟失、血管內(nèi)溶血結(jié)合珠蛋白下降 3、增多炎癥綜合征、腎病綜合征球蛋白區(qū)帶改變 1、減少肝功能衰竭、低補(bǔ)C3 2、增多非單克隆因素球蛋白區(qū)帶變化 1、低球蛋白血癥 2、高球蛋白血癥 血清蛋白電泳圖譜變化表血紅蛋白電泳pH8.6 TEBpH8.6 TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳緩沖液醋酸纖維膜電泳 點(diǎn)樣點(diǎn)樣 E D G K J H (異常條帶) - A2 F A +（正常條帶）在在HbA前出現(xiàn)前出現(xiàn)快速異常：

6、快速異常：HbH，J，K組組在在HbA后出現(xiàn)后出現(xiàn)慢速異常：慢速異常：HbG，D，E組組 圖譜1磷酸鹽緩沖液磷酸鹽緩沖液(pH 6.5) 主要用于主要用于HbH和和HbBarts的檢出的檢出 HbH泳向（泳向（+ +），），HbBarts則在點(diǎn)樣點(diǎn)則在點(diǎn)樣點(diǎn)不動(dòng)，而其余的血紅蛋白都向（不動(dòng)，而其余的血紅蛋白都向（- -） TEB緩沖液緩沖液(pH 8.6) 適合于檢出適合于檢出HbA、HbA2、HbS、HbC，但，但HbF不易與不易與HbA分開(kāi)，分開(kāi)，HbH與與HbBarts不能分開(kāi)和顯示不能分開(kāi)和顯示 箭頭所指處為點(diǎn)樣點(diǎn)箭頭所指處為點(diǎn)樣點(diǎn)3 和和 6 為正常對(duì)照標(biāo)本，為正常對(duì)照標(biāo)本，1、2、

7、4、5為病人標(biāo)本為病人標(biāo)本圖2臨床應(yīng)用：臨床應(yīng)用：珠蛋白生成障礙性貧血珠蛋白生成障礙性貧血 -珠貧珠貧 ：正常：正常-珠蛋白合成減少的珠蛋白合成減少的Hb病病 -珠貧：正常珠貧：正常-珠蛋白合成減少的珠蛋白合成減少的Hb病病 -珠貧：正常珠貧：正常-珠蛋白合成均減少的珠蛋白合成均減少的Hb病病 尿蛋白電泳分析與臨床應(yīng)用 尿蛋白的電泳分析主要根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量及電荷特性而將其分離，形成電泳區(qū)帶，染色，并用光密度掃描儀結(jié)合總蛋白定量，便可得出各區(qū)帶蛋白的含量。 用尿標(biāo)本進(jìn)行電泳分析，并將尿標(biāo)本中的各種蛋白成分按分子量大小排列，明確各種蛋白成分及所占比例，從而了解腎臟的病變部位。 方法準(zhǔn)確、靈敏度高

8、，容易實(shí)現(xiàn)，僅用常規(guī)尿標(biāo)本。（最好是晨尿） 可以對(duì)腎臟疾病作早期診斷/鑒別診斷及分型、治療效果的觀察、腎活檢（屬創(chuàng)傷性診斷）前的篩查、甚至代替腎活檢。尿蛋白的概念： 1）生理尿：50-150mg/每天。通常小于100mg/每天，主要成分是白蛋白。 2）病理尿：大于180毫克/每天，成分可能有大或中或小分子蛋白。尿蛋白升高的原因： 1）生理性：餐后，運(yùn)動(dòng)，直立，緊張。 2）腎前性：高血壓、高熱、心臟、肝臟衰竭，溢出性尿。 3）腎性：腎小球損傷、腎小管重吸收障礙及混合性損傷。 4)腎后性：輸尿管炎癥及損傷。圖原理瓊脂糖凝膠蛋白尿電泳圖譜病理蛋白尿的分型及診斷 腎前性蛋白尿 腎前性蛋白尿常是由于高血壓、高燒、心臟功能衰竭等原因所致。另一些情況血漿中高濃度蛋白，使得腎小球超負(fù)荷濾過(guò)及腎小管重吸收的相對(duì)減低，從而過(guò)量地出現(xiàn)于尿中。 腎性蛋白尿 1.腎小球損傷的特征：由于腎小球?yàn)V膜的損傷，引致大分子蛋白分子透過(guò)濾膜，而腎小管無(wú)法將大分子蛋白重吸收，終尿可發(fā)現(xiàn)大中分子蛋白，主要包括：白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、IgG、IgA、IgM、2巨球蛋白、觸珠蛋白； 2.腎小管損傷的特征：由于腎小管受損，重吸收功能障礙，由于腎小球功能完好，大分子未被濾過(guò)，終尿可發(fā)現(xiàn)小分子蛋白，主要包括：2微球蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白、輕鏈、1微球蛋白、溶菌酶及少量的白蛋白； 3.混合性損傷：即腎小管、腎小球同時(shí)受損，