機能試驗設(shè)計

1、機能實驗設(shè)計（一）課題名稱：新斯的明對筒箭毒和琥珀膽堿肌松作用的影響（二）選題目的和思路1實驗?zāi)康耐ㄟ^觀察新斯的明如何影響筒箭毒和琥珀膽堿對蟾賒離體腹直肌的肌松作用，分析藥物相互作用機制。2設(shè)計思路乙酰膽堿可以激動骨骼肌上的N2膽堿受體，是骨骼肌收縮；筒箭 毒為非去極化型N2膽堿受體阻斷劑，通過與乙酰膽堿競爭骨骼肌N2膽 堿受體，而引起肌松作用。琥珀酰膽堿為去極化型N2膽堿受體阻斷 劑，產(chǎn)生與乙酰膽堿相似的去極化作用，但不易被膽堿酯酶水解，妨礙 了復極化，而引起肌松作用。新斯的明主要可抑制乙酰膽堿酯酶的活性，減少乙酰膽堿的破壞， 使乙酰膽堿積累，與非去極化肌松藥在神經(jīng)肌肉接頭處競爭受體，從而

2、恢復正常的神經(jīng)肌肉傳遞。新斯的明的抗膽堿酶活性使琥珀堿膽堿更難 水解，加重其肌松作用。本實驗通過新斯的明和琥珀酰膽堿，新斯的明和筒箭毒同時作用于蟾賒 腹直肌而產(chǎn)生的抗肌松作用，探究新斯的明對筒箭毒，琥珀酰膽堿的肌 松作用的影響。（三）實驗動物生長狀況，體型相當?shù)捏纲d60只（來自動物房）（四）實驗材料1、試劑（由醫(yī)學院實驗室提供） 10-3氯乙酰膽堿溶液，10-3氯化琥珀酰膽堿溶液，2X10-4氯化筒箭 毒 堿溶液，任氏液，022、器材（由醫(yī)學院實驗室提供）生物信號處理系統(tǒng)，張力換能器，蛙類手術(shù)器械，蛙板，蛙釘，麥氏浴 槽，鐵支架，雙凹夾，培養(yǎng)皿，燒杯，絲線，注射器，滴管等。（五）觀察指標蟾賒腹

3、直肌的活動曲線。（六）實驗步驟與方法1、動物處理將60只蟾賒隨機分為6組，為甲A,甲B,甲C,乙A,乙B,乙Co每組10只。2、實驗操作Q對6組蟾賒分別制備離體腹直肌標本。b實驗裝置將張力換能器與生物信號處理系統(tǒng)相連，并通過雙凹夾固定 在鐵支架上，麥氏浴槽內(nèi)加入5 0ml常溫任氏液。C儀器準備MSP- 0 0 7生物信號處理系統(tǒng)：信號選擇：張力；控制： 增益4、紙速lmn必濾波：50Hz。d標本連接將張力換能器一段連接離體腹直肌標本，另一端與通氧氣鉤 連接，使其置于5 Oml常溫任氏液麥氏浴槽內(nèi)，打開氧氣，調(diào)整氣流使 其不影響標本。腹直肌標本的前負荷為50g左右。C給藥順序(1)穩(wěn)定1 Oml

4、 n描記一段正常曲線。加入10 3氯乙酰膽堿溶液 0 .2ml,觀察腹直肌的曲線，作用明顯后立即用任氏液換洗3 次，待基線穩(wěn)定。 甲A組分別加入任氏液0 .4ml，甲E組加入10 3氯化琥珀酰 膽堿0 .2ml、任氏液0 .2ml，甲C組分 別加入氯化琥珀酰膽堿 0 .2ml、新斯的明0 .2ml。觀察腹直肌的活動曲線，作用明顯 后，記錄各組肌張力。(3)乙A組分別加入任氏液0 ,4ml，乙E組加入10 3筒箭毒0 .2ml、任氏液0 .2ml，乙C組分別加入筒 箭毒0 .2ml、新斯的 明0 .2ml o觀察腹直肌的活動曲線，作用明顯后，記錄各組肌 張力。(七) 實驗記錄加入藥品后分別記錄每

5、組離體腹直肌標本的肌張力。實驗記錄列表如下:X12345678910甲A甲B甲C乙A乙B乙C（A）實驗數(shù)據(jù)處理 分別計算甲A,甲B,甲C乙A,乙B,乙C六組數(shù)據(jù)的平均數(shù)，標準差，標 準誤。用方差分析的方法分別處理甲B、甲C和甲A,乙B乙C和乙A數(shù) 據(jù)差異 有無統(tǒng)計學意義。從而驗證新斯的明對筒箭毒和琥珀堿膽堿肌松作用有無影響。（九）實驗注意事項1腹直肌標本對藥物的敏感性有個體差異，蟾賒腹直肌對藥物較不敏 感，因此給藥量可以根據(jù)實際情況酌情增減。2. 懸掛腹直肌時，相連的線必須垂直。3. 加藥時不要將藥液滴在連線和麥氏浴槽壁上，應(yīng)直接滴在液面上。4. 每支注射器只能用來抽取一種藥物，不要相互混淆。

6、5. 實驗中不能隨便改變儀器設(shè)置參數(shù)及標本的負荷量。6. 腹直肌在加藥前無自發(fā)的節(jié)律性收縮。（十）實驗結(jié)果預(yù)期新斯的明可使筒箭毒對腹直肌的肌松作用減弱，其對筒箭毒的肌松作 用有拮抗作用。新斯的明對琥珀酰膽堿的肌松作用無顯著影響。（十一）實驗結(jié)果討論1. 筒箭毒堿能與ACh競爭神經(jīng)肌肉接頭的N膽堿受體，但不激動受 體，能競爭性阻斷ACh的除極化作用使骨骼肌松弛。新斯的明可通過抑制膽堿酯酶使ACh聚集，與筒箭毒競爭受體，產(chǎn)生拮抗肌松的作用。2.珀酰膽堿的分子結(jié)構(gòu)與ACh相似，能與神經(jīng)肌肉接頭后膜的膽堿受體有 較強的親和力，且在神經(jīng)肌肉接頭處不易被膽堿酯酶分解，因而產(chǎn)生與ACh相似但持久的除極化作用，使神經(jīng)肌肉接頭的N膽堿受 體 不能對ACh起反應(yīng)，此時神經(jīng)肌肉接頭的阻滯方式已由除極化轉(zhuǎn)變?yōu)榉?除極化，從而使骨骼肌松弛。新斯的明拮抗膽堿酯酶活性，使琥珀酰膽堿更難水解，加重其肌松作 用。（十二）參考文獻1、楊寶峰.藥理