動物細胞融合與單克隆抗體最新課件

1、動物細胞融合與單克隆抗體最新課件2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體 動物細胞融合與單克隆抗體最新課件植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁原生質體原生質體A原生質體原生質體B原生質體融合原生質體融合雜合的原生質體雜合的原生質體再生出細胞壁再生出細胞壁雜種細胞雜種細胞細胞分裂細胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株溫故知新:植物體細胞雜交過程植物體細胞雜交過程動物細胞融合與單克隆抗體最新課件材料1: 1970年，有兩位科學家做了一個人鼠細胞融合的實驗，以證明細胞膜的流動性。那么，如何實現(xiàn)人鼠細胞的融合，動物細胞融合后還有什么用途呢？人-鼠(想

2、像圖)動物細胞融合與單克隆抗體最新課件植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁原生質體原生質體A原生質體原生質體B原生質體融合原生質體融合雜合的原生質體雜合的原生質體再生出細胞壁再生出細胞壁雜種細胞雜種細胞細胞分裂細胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株 如何實現(xiàn)人鼠細胞的融合？閱讀教材52頁相關內容，思考下列問題：思考：1 1、動物細胞融合的概念是什么？、動物細胞融合的概念是什么？ 2 2、動植物細胞在結構上有何區(qū)別？這對它們雜交、動植物細胞在結構上有何區(qū)別？這對它們雜交或融合過程有什么影響？或融合過程有什么影響？ 3 3、植物體細胞雜交誘

3、導原生質體融合常用的方法、植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？那動物細胞融合呢？有哪些？那動物細胞融合呢？4 4、動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理、動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理是否相同？是什么原理？是否相同？是什么原理？5 5、動物細胞融合有什么意義？主要應用在哪些方、動物細胞融合有什么意義？主要應用在哪些方面？面？6 6、參照植物細胞雜交過程寫出動物細胞融合過程。、參照植物細胞雜交過程寫出動物細胞融合過程。動物細胞融合與單克隆抗體最新課件動物細胞動物細胞A動物細胞動物細胞B誘導、融合誘導、融合雜合的細胞雜合的細胞有絲分裂有絲分裂2個完整的雜交細胞AB 如何實現(xiàn)

4、人鼠細胞的融合？閱讀教材52頁相關內容，思考討論下列問題：小組活動，討論：7、植物體細胞雜交可得到雜種植株，動物、植物體細胞雜交可得到雜種植株，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎細胞融合后能形成雜種動物個體嗎?為什么？為什么？植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁去掉細胞壁原生質體原生質體A原生質體原生質體B原生質體融合原生質體融合雜合的原生質體雜合的原生質體再生出細胞壁再生出細胞壁雜種細胞雜種細胞細胞分裂細胞分裂分化發(fā)育分化發(fā)育愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株動物細胞融合與單克隆抗體最新課件獲得雜種植株獲得雜種植株物理、化學方法物理、化學方法（同左）（同左）滅活的

5、病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電激）蕩、電激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）直接誘直接誘導細胞融合導細胞融合去壁去壁原生質體原生質體融合融合誘誘導新壁導新壁雜種植株雜種植株細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性結果結果誘導方法誘導方法步驟步驟融合的原理融合的原理動物細胞融合動物細胞融合植物體細胞雜交植物體細胞雜交比較項目比較項目獲得雜種細胞獲得雜種細胞動物細胞融合與單克隆抗體最新課件材料材料2 2：在基因工程中在基因工程中, ,采用抗原采用抗原- -抗體雜交法檢測基抗體雜交法檢測基因表達產(chǎn)物需用到因表達產(chǎn)物需用到純度很高的抗體純度很高的抗體。材料材料3 3：

6、傳統(tǒng)：傳統(tǒng)獲得抗體的方法：把某種抗原反復注射獲得抗體的方法：把某種抗原反復注射到動物體內，然后從動物血清中分離出所需抗體。到動物體內，然后從動物血清中分離出所需抗體。 用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應不夠靈敏?？贵w的特異性差，純度低，反應不夠靈敏。思考：思考：1、抗體由哪種細胞產(chǎn)生的？、抗體由哪種細胞產(chǎn)生的？2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？3、能否通過相應效應、能否通過相應效應B細胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體細胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體?動物細胞融合與單克隆抗體最新課件材料4：效應B

7、淋巴細胞在體內只能由B淋巴細胞增殖分化而來,不再進行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。提示：提示：1 .1 .什么細胞可以產(chǎn)生抗體？什么細胞可以產(chǎn)生抗體？2 .2 .什么細胞可以無限增殖？什么細胞可以無限增殖？思考：用什么方法才能讓B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?動物細胞融合與單克隆抗體最新課件材料5： 1975年, 米爾斯坦和柯勒首先將抗原注射入小鼠體內，然后從小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞，與小鼠骨髓瘤細胞融合，得到多種雜交細胞。 在特定的選擇性培養(yǎng)基中可篩選出雜交瘤細胞。 經(jīng)過再次篩選和抗體檢測,得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。但純度達不到100%。 對單一雜

8、交瘤細胞進行克隆培養(yǎng),獲得足夠數(shù)量的細胞，在體外培養(yǎng)或注射到小鼠體內增殖。從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗體。 （由于產(chǎn)生抗體的細胞來自一個雜交瘤細胞,故產(chǎn)生的抗體稱為單克隆抗體.）請根據(jù)以上材料,討論設計單克隆抗體制備過程圖.討論：動物細胞融合與單克隆抗體最新課件B B淋巴細胞淋巴細胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合融合多種多種雜交細胞雜交細胞在具有在具有篩選篩選作用的培作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢專一抗體檢驗陽性驗陽性克隆上述雜交細胞克隆上述雜交細胞分開不同雜交細胞分開不同雜交細胞，克隆專一抗體，克隆專一抗體，檢驗陽性

9、細胞檢驗陽性細胞專一抗體檢專一抗體檢驗陽性驗陽性單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠體內注射到小鼠體內體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體結合單克隆抗體的制備過程，思考結合單克隆抗體的制備過程，思考以下問題：以下問題：1、（只考慮兩兩融合）融合細胞、（只考慮兩兩融合）融合細胞幾種類型？幾種類型？2、本過程中進行了兩次篩選，目、本過程中進行了兩次篩選，目的分別是什么？第的分別是什么？第1次篩選要淘汰次篩選要淘汰哪些細胞？哪些細胞？3、本過程利用的那些技術？、本過程利用的那些技術？4、雜交瘤細胞有何特點？、雜交瘤細胞有何特點？動物細胞融合與單克隆抗體最新課件動物細胞融合與單克隆抗體最新課件單克隆抗體的應

10、用信息材料6：動物細胞融合與單克隆抗體最新課件診斷疾病診斷疾?。ㄗR別作用，如同位素（識別作用，如同位素標記單克隆抗體，可診斷腫瘤、標記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）心血管畸形等）優(yōu)點：優(yōu)點：單克隆抗體的應用單克隆抗體的應用用于治療疾病和運載藥物（用于治療疾病和運載藥物（主要用于主要用于癌癥治療，如單克隆抗體癌癥治療，如單克隆抗體+藥物藥物= “生物生物導彈導彈”）優(yōu)點：優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速準確、高效、簡易、快速位置準確、療效高、副作用小位置準確、療效高、副作用小 閱讀教材閱讀教材P54相關內容，試說明單克隆抗體有何應用？相關內容，試說明單克隆抗體有何應用？優(yōu)點是什么？優(yōu)點是什么

11、？動物細胞融合與單克隆抗體最新課件單克隆抗體單克隆抗體B B淋巴細胞淋巴細胞骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞誘導誘導融合融合選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)雜交瘤雜交瘤細胞細胞克隆化克隆化培養(yǎng)培養(yǎng)抗體抗體檢測檢測產(chǎn)生所需產(chǎn)生所需抗體的雜抗體的雜交瘤細胞交瘤細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內增殖小鼠腹腔內增殖單克隆抗體單克隆抗體多種雜多種雜交細胞交細胞1、該過程中用到了兩種技術、該過程中用到了兩種技術單克隆抗體的制備過程：單克隆抗體的制備過程：動物細胞培養(yǎng)技術動物細胞培養(yǎng)技術動物細胞融合技術動物細胞融合技術2、單克隆抗體的制備過程的三個、單克隆抗體的制備過程的三個“一一”：一種一種誘導細胞融合的新方法，產(chǎn)生了誘導細胞融合的新方

12、法，產(chǎn)生了一種一種新細胞，得到了新細胞，得到了一種一種優(yōu)勢優(yōu)勢抗體?？贵w。滅活病毒誘導融合滅活病毒誘導融合雜交瘤細胞雜交瘤細胞單克隆抗體單克隆抗體優(yōu)勢：特異性強、靈敏度高，優(yōu)勢：特異性強、靈敏度高，可大量制備可大量制備動物細胞融合與單克隆抗體最新課件1 1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（ ） A.A.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B B淋巴細胞淋巴細胞 B.B.沒經(jīng)過免疫的沒經(jīng)過免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞C.C.經(jīng)過免疫的經(jīng)過

13、免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞 D.D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞A2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導融合的方法完全相同誘導融合的方法完全相同 B.所用的技術手段基本相同所用的技術手段基本相同 C. 操作步驟基本相同操作步驟基本相同 D. 都能形成雜種細胞都能形成雜種細胞 D動物細胞融合與單克隆抗體最新課件3. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合淋巴細胞與肝細胞融合 B.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞誘導

14、融合而成淋巴細胞誘導融合而成 C.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導融合而成淋巴細胞與肌瘤細胞誘導融合而成 D.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導融合而成淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導融合而成 D4.4.只能使動物細胞融合的常用誘導方法是（只能使動物細胞融合的常用誘導方法是（ ）A APEGPEG B B滅活的病毒滅活的病毒 C C電刺激電刺激 D D離心離心B動物細胞融合與單克隆抗體最新課件5. 5. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B B淋巴細胞誘導融合后，淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是殖的細胞是 （ ）淋巴細胞淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞小鼠骨髓瘤細胞 B B淋巴細胞自身融合細胞淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞雜交瘤細胞A.A. B. B.C.C. D.D. C C6.“6.“生物導彈生物導彈”是指是指 （ ）A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B.B.雜交瘤細胞雜交瘤細胞C.C.產(chǎn)生特定抗體的產(chǎn)生特定抗體的B B淋巴細胞淋巴細胞 D.D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D動物細胞融合與單克隆抗體最新課件有夢想，才會有