使用NC-800農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留步驟及應(yīng)注意的事項(xiàng)(圖文)

1、使用NC-800農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留步驟及應(yīng)注意的事項(xiàng)(圖文)論文導(dǎo)讀：本文主要介紹使用NC-800農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留流水步驟及需要注意的事項(xiàng)，該方法只能檢出農(nóng)殘超標(biāo)與否，不能準(zhǔn)確定量某種農(nóng)藥超標(biāo)。關(guān)鍵詞：蔬菜-農(nóng)藥殘留-檢測(cè)方法原 理NC-800農(nóng)殘速測(cè)儀采用酶抑制法，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/448-2001蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)方法，能快速檢測(cè)出被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留，廣泛應(yīng)用于蔬菜、水果、糧食、茶葉、水及土壤中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)，適用于各級(jí)農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心

2、、生產(chǎn)基地、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超級(jí)市場(chǎng)、學(xué)校、衛(wèi)生部門、環(huán)保部門、賓館、酒家等領(lǐng)域。在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制乙酰膽堿酶的活性，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。在正常情況下，酶催化底物水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨一定時(shí)間的變化值，來計(jì)算出抑制率，通過抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。說明：1、抑制率(%)= ；Ac為3min測(cè)量對(duì)照的吸光度變化值，A 為3min 測(cè)量樣品吸光度變化值。2、即抑制率越大樣品中農(nóng)藥殘留量越高，抑制率越小樣品中農(nóng)藥殘留量越低。3、該方法只能定性判斷農(nóng)殘超標(biāo)與否，不能準(zhǔn)

3、確定量某種農(nóng)藥超標(biāo)。判斷方法：抑制率40%時(shí)，農(nóng)殘不超標(biāo)；抑制率在4050%之間時(shí)，可疑農(nóng)殘超標(biāo)；抑制率50%時(shí)，農(nóng)殘超標(biāo)。4、當(dāng)抑制率40%，需重復(fù)2次以上檢測(cè)，并且重復(fù)檢測(cè)的重現(xiàn)性在80%以上。試 劑1、 pH8.0緩沖液：分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀，用1000ml水定溶。2、 乙酰膽堿酶：根據(jù)酶活性，用緩沖液溶解；要求3min吸光度變化A值控制在0.40.8之間；05保存，保質(zhì)期 4 天。3、 底物：25.0mg硫代乙酰膽堿用3.0ml水溶解；05保存，保質(zhì)期 2 周。4、 顯色劑：200mg二硫代二硝基苯甲酸，用25ml緩沖液溶解；貯存在西林瓶中，05保存，保質(zhì)

4、期 2 周。說明：配制試劑時(shí)，未作特別注明的試劑均指分析純?cè)噭?；未作特別注明的實(shí)驗(yàn)用水均指三級(jí)純水。操作步驟及應(yīng)注意事項(xiàng)1、取樣：在目標(biāo)田塊采用以下方法提取樣品：對(duì)角線法、梅花點(diǎn)法、盤式法、蛇形(S形)法，重量因情況而定(13公斤)。取樣時(shí)，只取可食部分,每個(gè)樣品必須用取樣袋分開裝入，不能用手直接抓取待測(cè)部分；將單個(gè)樣品放在經(jīng)清洗無污染的器皿上、絕不能將樣品裸露堆放在地板上，以免污染，影響測(cè)量值。2、儀器準(zhǔn)備：(1)新器皿用8%硝酸溶液浸泡24小時(shí)后，先用自來水沖洗2次，再用洗滌劑刷洗，用自來水再次沖洗6次，最后用純水清洗3次。直接接觸樣品器皿的洗滌，先用自來水沖洗3次，再用洗滌劑刷洗，用自來

5、水再次沖洗6次，最后用純水清洗3次。僅接觸待測(cè)液器皿的洗滌，可用自來水再次沖洗6次后，用純水清洗3次。洗滌用純水使用時(shí)，遵循“少量多次”原則；即每次用水量不要過多10-15ml即可，清洗次數(shù)不少于3次；特殊器皿洗滌按特殊要求處理；如農(nóng)殘定量分析時(shí)，按上述方法洗滌后還要用丙酮清洗。所需器皿均烘干后待用。調(diào)試移液槍:可調(diào)移液槍2.5ml和0.1ml（100ul）,將槍嘴先用清水沖洗再用純凈水沖洗，在電子天平上進(jìn)行吸液量校正，通過調(diào)節(jié)槍尾高度控制活塞行程，使吸液容量達(dá)到標(biāo)稱要求，電子儀器通電待機(jī)。3、試劑配制：(1)緩沖液，先用少量（100-150ml）的純水緩緩倒入放有緩沖劑干粉的量杯中，用玻棒攪

6、拌完全溶解后倒入2000ml以上容量容器中然后加進(jìn)純水至1000ml處充分?jǐn)嚢?搖勻)待用；(2)顯色液，用移液槍吸緩沖液注入顯色劑瓶中，蓋上蓋搖勻待用，緩沖液用量根據(jù)顯色劑瓶身說明操作。(3)酶液，用另一移液槍吸緩沖液注入酶劑干粉瓶中蓋上蓋搖勻待用緩沖液用量根據(jù)顯色劑瓶身說明操作。(4)底物, 用另一移液槍吸純水3ml注入底物干粉瓶中蓋上蓋搖勻待用，純凈水用量根據(jù)顯色劑瓶身說明操作。4、解樣：將生產(chǎn)基地或市場(chǎng)取回的樣品進(jìn)行分解整個(gè)過程控制在10min內(nèi)完成(對(duì)單個(gè)樣品而言)；一般樣品不需要洗滌，當(dāng)表面有泥土?xí)r，可洗去泥土甩干水后再取樣。取樣時(shí)，因蔬菜品種和個(gè)體大小的差異分別對(duì)待，一般取樣量控

7、制在100150g之間(便于復(fù)測(cè)或氣相色譜和液相色譜確證)，未用完的樣品冷凍保存。大葉蔬菜(如青菜、大白菜等)：把取出的810片葉樣每片從中對(duì)分，棄去一半，把留下的另一半從中攔腰截?cái)啵?-1/4片葉樣分別取其上、下部分棄去，用留下部分制樣；如果制得的樣品量仍然較多，充分混勻后，棄去多余部分即可。小葉蔬菜(如韭菜、豌豆尖等)：要增加取樣量，并以整株為取樣單元，整體取出100150g用于制樣。大塊莖、瓜果蔬菜(如蘿卜、茄子等)：減少取樣個(gè)體為46個(gè)，把每個(gè)樣品用刀順切成4份，棄去對(duì)角2份，把留下的部分從中攔腰截?cái)啵?份樣分別取其上、下部分棄去，用留下部分制樣；如果制得的樣品量仍然較多，充分混勻

8、后，留出100150g用于制樣后棄去多余部分即可。小塊莖、瓜果蔬菜(如青豆、蔥頭等)：要增加取樣量，并以整株或整顆為取樣單元，整體取出100150g用于制樣。樣品裝瓶上標(biāo)簽（時(shí)間、產(chǎn)地、品種、編號(hào)，如20100412tjmyws01即2010年4月12日臺(tái)江梅影萵筍01號(hào)）待用，每瓶150g，置于冰柜冷藏，便于復(fù)測(cè)用。5、樣品液：將樣品瓶中取2g樣品放入50ml三角瓶并用20ml吸液管吸20ml緩沖液注入瓶中，在恒溫振蕩器上振蕩(浸提)2-3min以后，為避免受濃度、渣滓影響測(cè)量值，取出浸提液后用濾紙先將浸提液3-5ml濾丟，然后再將浸提液濾入經(jīng)清洗、烘干無水漬的三角瓶中備用，濾渣丟棄。6、用

9、不同吸液槍分別給對(duì)照比色皿加注緩沖液(2.5ml/皿)、樣品色皿加注樣品液(2.5ml/皿)，和酶液0.1ml/皿、顯色液0.1ml/皿。用2.5ml用吸液槍2.5檔，0.1ml用吸濾槍100ml檔，加注酶液、顯色液時(shí)槍咀對(duì)準(zhǔn)液皿中間懸空快速加注(避免酶液或顯色液因加注時(shí)粘上皿身或槍嘴而未與樣品液或?qū)φ站彌_液充分混合導(dǎo)致因濃度變化影響測(cè)量值)，兩液通過沖擊力與緩沖液和樣品液均勻混合，加注樣品液時(shí)不同樣品必須換槍咀。根據(jù)測(cè)量需要，對(duì)照組要多制4-6個(gè)。7、將對(duì)照液皿與樣品液皿作標(biāo)記同時(shí)放入37恒溫水浴鍋中（水溫以插入浴鍋中的溫度計(jì)實(shí)際溫度為準(zhǔn)），加熱20分鐘取出放置室溫30分鐘。8、先將對(duì)照組2-4個(gè)置于速測(cè)儀上迅速懸空加注0.1ml底物進(jìn)行Ac值測(cè)量，對(duì)照Ac值值度在0.3-0.8之間且各個(gè)對(duì)照相差值0.02說明速測(cè)儀性能穩(wěn)定，所測(cè)值準(zhǔn)確。否則說明測(cè)試儀不穩(wěn)定或操作不正確。9、將對(duì)照液與樣品液同時(shí)放入速測(cè)議皿座上，迅速分別給液皿懸空加注0.1ml底物（提前加注或忘記加注均使樣品液、對(duì)照液報(bào)廢），合上速測(cè)儀蓋進(jìn)行檢測(cè)。3分鐘后，記錄讀數(shù)（抑制率）。注：(1)抑制率