NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第1頁
NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第2頁
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文檔簡介

1、 一、研究不同組織學類型的人肺癌細胞株和正常一、研究不同組織學類型的人肺癌細胞株和正常人肺成纖維細胞株人肺成纖維細胞株MRC-5中中KAI1的的mRNA表達表達水平及其差異水平及其差異二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中KAI1的的mRNA表達水平，探討表達水平，探討KAI1與與nm23-H1在在調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關系調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關系三、研究甲基化抑制劑三、研究甲基化抑制劑5-雜氮脫氧胞苷雜氮脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對肺癌細胞株對肺癌細胞株L9981、GLC-82和和NCI-H460中中KAI1的的mRNA表達水平和體外增殖能力的

2、影響表達水平和體外增殖能力的影響 第1頁/共21頁主要材料與方法主要實驗方法：主要實驗方法： 實時熒光定量實時熒光定量PCR MTT法繪制細胞生長曲線法繪制細胞生長曲線甲基化抑制劑：甲基化抑制劑： 第2頁/共21頁實 驗 結(jié) 果第3頁/共21頁比較MRC-5與不同組織類型肺癌細胞株間KAI1基因mRNA表達水平1. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-

3、1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細胞株;13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； P第4頁/共21頁不同細胞株間KAI1基因表達水平比較的P值表CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L9

4、9810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.000

5、0.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細

6、胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細胞株; 13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； 第5頁/共21頁在L9981細胞中轉(zhuǎn)染nm23-H1可顯著上調(diào)KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.000

7、0.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.002

8、0.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP第6頁/共21頁比較L9981細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0

9、000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SP

10、CA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77；8. NCI-H446；9. LTEP-2；10. YTMLC-90 第7頁/共21頁比較NL9980與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2

11、SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.11

12、10.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A2；6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9.

13、NCI-H446；10. LTEP-2；11. YTMLC-90 第8頁/共21頁比較A549A549細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000

14、.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020

15、.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77；7. NCI-H446；8. LTEP-2；9. YTMLC-90 第9頁/共21頁比較GLC-82GLC-82細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC

16、-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.00

17、00.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77；6. NCI-H446；7. LTEP-2；8. YTMLC-90 第10頁/共21頁比較A2A2細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCe

18、ll lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0

19、000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H4

20、46；6. LTEP-2；第11頁/共21頁比較SPCA-1SPCA-1細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000N

21、L99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000

22、.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SPCA-1；2. NCI-H460；3. SH-77；4. NCI-H446；5. LTEP-2；第12頁/共21頁比較NCI-H460NCI-H460細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.000

23、0.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.58

24、80.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. LTEP-2；第13頁/共21頁比較SH-77SH-77細胞與不同組織學類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H4

25、46LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.39

26、2GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP-2；第14頁/共21頁比較NCI-H446、 LTEP- -2和YTMLC-90細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL998

27、0L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.

28、0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H446；2. LTEP-2；第15頁/共21頁5-Aza-CdR上調(diào)了NCI-H460 和L9981細胞中KAI1

29、的mRNA表達水平1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsNCI-H4605-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)NCI-H4600.0010.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.005NCI-H460NCI-H460和和L9981L9981細胞株對照組與實驗組間細胞株對照組與實驗組間KAI1KAI1基因表達水平比較的基因表達水平比較的P P值表值表1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsL99815-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)L99810.0000.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.016NCI-H460 cellsL9981 cells第16頁/共21頁5-Aza-CdR對GLC-82細胞中KAI1的mRNA表達水平無顯著影響1

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