油鏡及熒光顯微鏡的原理及使用方法

1、光學(xué)顯微鏡的使用方法光學(xué)顯微鏡的使用方法及注意事項(xiàng)及注意事項(xiàng)熒光顯微鏡的使用原理熒光顯微鏡的使用原理光學(xué)顯微鏡的使用方法光學(xué)顯微鏡注意事項(xiàng)熒光顯微鏡的使用原理123光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡（optical microscope，簡(jiǎn)寫om）是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。光學(xué)顯微鏡的使用方法低、高倍鏡觀察進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心光學(xué)顯微鏡的使用方法集光器上升到最高位置光圈開到最大光學(xué)顯微鏡的使用方法轉(zhuǎn)換油鏡時(shí)，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油光學(xué)顯微鏡的使用方法用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)

2、細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。不出現(xiàn)物象 目標(biāo)不理想加油區(qū)外加油區(qū)內(nèi)低倍高倍油鏡低倍油鏡油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。光學(xué)顯微鏡注意事項(xiàng)1.持鏡時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢(shì)；2.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺(tái)， 如果沾污應(yīng)立即擦凈；3.放置玻片標(biāo)本時(shí)要對(duì)準(zhǔn)通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡；4.不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞；5.使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)。熒光顯微鏡的使用原理什么是熒光？概念：物質(zhì)中的電子吸收光的能量由低能狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楦吣軤顟B(tài)，再回到低能狀態(tài)時(shí)釋放出

3、的光。即：物質(zhì)吸收短波光，發(fā)射出的長(zhǎng)波光。自發(fā)性熒光分類誘發(fā)性熒光細(xì)胞內(nèi)的成分經(jīng)短波長(zhǎng)照射后，可以發(fā)出熒光細(xì)胞內(nèi)的成分經(jīng)紫外線照射后不發(fā)熒光，但與熒光染料結(jié)合后可呈現(xiàn)一定顏色的熒光一般很微弱，如葉綠素。如吖啶橙，能使細(xì)胞內(nèi)的dna呈綠色熒光；rna呈紅色熒光。熒光顯微鏡熒光顯微鏡(fluorescence microscope) 是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。多采用200w的超高壓汞燈作光源。原理：電極間放電

4、使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。作用：它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。注意：超高壓汞燈也散發(fā)大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環(huán)境溫度不宜太高。汞燈光源激發(fā)濾板 紫外光紫外光激發(fā)濾板激發(fā)濾板紫紫 外藍(lán)光激發(fā)濾板外藍(lán)光激發(fā)濾板400nm紫外光紫藍(lán)光激發(fā)濾板紫藍(lán)光激發(fā)濾板400nm可見光可見光300-450nm光350-490nm光根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn)，可選用以下三類激發(fā)濾板，根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn)，可選用以下三類激發(fā)濾板，提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。分光鏡分光鏡反射短波，透射長(zhǎng)波。短波激發(fā)光在分

5、光鏡處反射，由物鏡到熒光物質(zhì)，產(chǎn)生的長(zhǎng)波長(zhǎng)發(fā)射光經(jīng)物鏡返回，并透過分光鏡。壓制濾板壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)波壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)波長(zhǎng)范圍的熒光。長(zhǎng)范圍的熒光。紫外光紫外光壓制濾板壓制濾板紫紫 外藍(lán)光壓制濾板外藍(lán)光壓制濾板紫藍(lán)光壓制濾板紫藍(lán)光壓制濾板可見光紫外光510nm460nm 熒光顯微鏡的種類 落射式 透射式 熒光顯微鏡的主要部件熒光顯微鏡的主要部件 透射式 汞燈光源 激發(fā)濾版 暗場(chǎng)聚光鏡 壓制濾版 落射式 汞燈光源 激發(fā)濾版 分光鏡 壓制濾版300-490nm510nm520-560nm熒光顯微鏡的使用方法1打開燈源，超高壓汞燈要預(yù)熱幾分鐘才能達(dá)到最亮點(diǎn)。2落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾版分光鏡壓制濾板。 透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾版，在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾板。 3用低倍鏡觀察，根據(jù)不同型號(hào)熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置，調(diào)整光源中心，使其位于整個(gè)照明光斑的中央。4放置標(biāo)本片，調(diào)焦后即可觀察。熒光顯微鏡的使用方法注意事項(xiàng)：1.末裝濾光片不要用眼直接