高中生物選修一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課件人教版

1、人教版選修人教版選修1專題專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物包括哪五類：微生物包括哪五類：病毒病毒細(xì)菌細(xì)菌放線菌放線菌真菌真菌原生動(dòng)物原生動(dòng)物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界1、培養(yǎng)基可以分為哪兩類？2、培養(yǎng)基一般都含有哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外 還要滿足哪些要求？3、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？ 4、避免雜菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面 5、什么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟 7、如何倒平板？（1）按物理狀態(tài)來(lái)分：培養(yǎng)基可分為）按物理狀態(tài)來(lái)分：培養(yǎng)基可分為固體固

2、體培養(yǎng)基培養(yǎng)基和和液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。于菌種分離、鑒定菌落等。（2）按功能來(lái)分，可分為）按功能來(lái)分，可分為選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基和和鑒鑒別培養(yǎng)基別培養(yǎng)基。（3）按成分來(lái)分，可分為）按成分來(lái)分，可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基和和合合成培養(yǎng)基成培養(yǎng)基。1、培養(yǎng)基分類：、培養(yǎng)基分類：一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基2、選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基: : 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基: : 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基: : 分離固氮菌

3、分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基: : 分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基: : 分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、碳源、和氮源、 無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)ph、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),例如:生長(zhǎng)因子(即細(xì)菌生長(zhǎng)必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。 3、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（1）培養(yǎng)基一般都含有哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足哪些要求？（2）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？ （3）避免雜

4、菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面 （4）什么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？消毒與滅菌消毒與滅菌消毒：指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌：指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普通也是最重要的技術(shù)。通也是最重要的技術(shù)。二、無(wú)菌技術(shù)二、無(wú)菌技術(shù)消毒的方法：消毒的方法：1、煮沸消毒法、煮沸消毒法:100煮沸煮沸5-6min2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 下煮下煮30min或或 80 下煮下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法、化學(xué)藥劑消毒法:

5、用用75%酒精、新潔爾酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒滅等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源氯氣消毒水源4、紫外線或化學(xué)藥物消毒、紫外線或化學(xué)藥物消毒滅菌的方法：滅菌的方法：1、灼燒滅菌、灼燒滅菌2、干熱滅菌：、干熱滅菌：160-170 下加熱下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：、高壓蒸汽滅菌：100kpa、121 下維持下維持15-30min.6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟 7、如何倒平板？三、實(shí)驗(yàn)操作三、實(shí)驗(yàn)操作1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1 1、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時(shí)，左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基

6、的才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？溫度？ 答：答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2 2、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？ 答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。生物污染培養(yǎng)基。問(wèn)題討論：?jiǎn)栴}討論：3 3、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4 4、在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基、在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與

7、皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微

8、生物。培養(yǎng)微生物。2 2、純化大腸桿菌、純化大腸桿菌接種方法有：接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法 平板劃線法平板劃線法: :通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作, ,將聚集的菌鐘將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面. . 在數(shù)次畫線后在數(shù)次畫線后, ,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體, ,這就這就是菌落是菌落. . 1 1、為什么在操作的第一步以及每次劃線之、為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線

9、操作結(jié)束時(shí)，仍然前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目

10、逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。感染操作者。問(wèn)題討論：?jiǎn)栴}討論： 2 2、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3 3、在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，、在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線答：劃線后，線條

11、末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。的菌落。 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第操作要求，想一想，第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？菌操作？ 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要