黃柏中小檗堿的提取分離和鑒定

1、黃柏中小檗堿的提取分離和鑒定第六小組：xxxxxxxxxxxx小檗堿的理化性質(zhì)及臨床應(yīng)用小檗堿又稱黃連素，廣泛分布在植物界，大約有4個科10個屬植物都已發(fā)現(xiàn)有小檗堿存在。小檗堿是黃色針狀晶體，表現(xiàn)為季銨型、醇型3種互變異構(gòu)體，其中以季銨堿型最穩(wěn)定。小檗堿能緩慢溶解于冷水(1 20)或冷乙醇(1 100)，在熱水或熱乙醇中溶解度比較大，難溶于丙醇、氯仿或苯，鹽類的溶解度都比較小，硫酸鹽在水中的溶解度約為1 30，鹽酸鹽微溶于冷水。小檗堿可從三顆針、黃連、黃柏等植物中提取。由于黃連生長緩慢，價格較高，黃柏來源也較少，現(xiàn)我國主要應(yīng)用三顆針作為提取原料。小檗堿是臨床上一種常用的廣譜抗菌藥，主要用于菌痢

2、、胃腸炎、癰腫等細(xì)菌性感染。 現(xiàn)代 研究證明小檗堿有抗腫瘤、抗心率失常、降壓、降血糖等作用，在臨床上有越來越廣泛的應(yīng)用，需求量日益增加。小檗堿的一般提取方法 酸水法提取小檗堿酸水法提取小檗堿 石灰乳法提取小檗堿石灰乳法提取小檗堿乙醇法提取小檗堿乙醇法提取小檗堿超聲波提取小檗堿超聲波提取小檗堿微波法提取小檗堿微波法提取小檗堿 酶法提取小檗堿酶法提取小檗堿小檗堿的提取原理小檗堿的提取原理 根據(jù)水溶性季銨堿在乙醇和堿水中溶解度大性質(zhì)，利用乙醇回流法和堿水提取法進(jìn)行提取。小檗堿的分離原理小檗堿的分離原理 (1)利用小檗堿的鹽酸鹽在水中溶解度?。?：500），采用鹽析法使小檗堿沉淀析出，達(dá)到純化的目的。

3、 (2)利用鹽析法分離小檗堿。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1. 用乙醇回流提鹽析法、醇索氏提鹽析法和堿滲漉提鹽析法提取黃柏中鹽酸小檗堿。 2. 溶劑重結(jié)晶精制鹽酸小檗堿。 3. 薄層顯色反應(yīng)鑒定鹽酸小檗堿 (四) 實(shí)驗(yàn)藥材儀器與試劑 1. 實(shí)驗(yàn)藥材 黃柏30g。 2. 儀器：250ml燒瓶、500ml燒杯，冷凝管、滲漉筒250ml，粉碎機(jī)、減壓過濾裝置、紗布、漏斗，層析缸等。 3. 試劑：氧化鈣，氨水，naci，鹽酸、h2so4，三氯甲烷，甲醇，乙醇，改良碘化鉍鉀等。 (五) 實(shí)驗(yàn)步驟及現(xiàn)象 day 1 （2011-5-21） 1. 小檗堿的提取(醇索氏提鹽析法) 稱取黃柏(圖3-1)15.00g，粉碎成粗粉，用

4、濾紙包成筒狀，置于索氏提取器(圖3-2)中(長度要適宜，使濾紙筒正好位于提取器上下兩孔之間)。用棉花包住提取器側(cè)管，防止蒸汽接觸使側(cè)管的溫度過高。一開始再燒瓶中加入105ml的95%乙醇，量不夠，回流4-5次顏色仍較深,后又補(bǔ)加少許。水浴提取，剛開始提取液是黃色的（圖3-3），回流七次后顏色變淡，大概用三個小時?；亓鬟^程中由于溶沸騰，有些蒸汽直接從下口進(jìn)入提取器，所以如果觀察到顏色變淡反應(yīng)程度不一定高（圖3-4）。取出燒瓶中的提取液加水約40ml，濾出沉淀，沉淀物深黃色，很黏。向?yàn)V液中加入6.05g nacl固體,溶解后靜置過夜,得到黃色的固液混合物,固體很少抽濾干燥,得到粗提物(3-52精制

5、 產(chǎn)物過少，沒有精制。3.鑒定 （1）檢識反應(yīng) 取鹽酸小檗堿少許，加蒸餾水3ml，緩緩加熱。第一次取樣過多，大量固體沒有溶解。后重新取樣，溶解顯黃色(3-7),和另一組已加堿液的溶液對照明顯（3-6），加氫氧化鈉試液2滴，顯橙色，但不明顯(3-8)，溶液放冷，加丙酮4滴，即發(fā)生混濁(3-9)。 （2）薄層色譜鑒定 吸附劑：硅膠gf254薄層板（5.0cm x 10.0cm）。 樣 品：自制鹽酸小檗堿（用甲醇溶解） 展開劑：三氯甲烷-甲醇-氨水（14 4 0.5） 兩個樣品同時展開,左側(cè)為提取樣品,右側(cè)為精制后的春樣品。 顯 色：a.展開前，點(diǎn)樣后，先在可見光下觀察（3-10），有亮點(diǎn)的痕跡，拖尾現(xiàn)象較明顯，粗體樣品的rf值較大（3-11），然后在紫外光下觀察，可以看到樣品的移動痕跡。 b.噴改良碘化鉍鉀液顯色，在熒光下觀察，樣品吸光明顯（3-13）。 (六) 結(jié)果計(jì)算及分析 小檗堿得率：濾紙+產(chǎn)物重 0.4603g 濾紙重0.4516g 原料重15.00g 得率=（0.4603-0.4516）/15.00=0.58%（過少） 原因：1、提取時間不夠； 2、溶劑量少； 3、溶劑（95%乙醇）極性小； 4、裝濾紙筒、過濾等過程損