透明質(zhì)酸-增稠劑

1、3名稱及其來源3.1中文名稱 :透明質(zhì)酸3.2英文名稱 :Hyaluronic acid3.3 來 源 : 透明質(zhì)酸是從鏈球菌獸疫亞種的發(fā)酵液中提取和精制所得到的，是由 D-葡萄糖醛酸和 N-乙酰 -D- 葡萄糖胺組成的一種粘多糖。4. 化學(xué)結(jié)構(gòu)、分子式、分子量和理化特性（來源于動植物的，若無以上資料應(yīng)提供主要成分） 4.1 化學(xué)結(jié)構(gòu)4.2分子式 : (C 14H21NO11)n* n數(shù) : 3 106004.3分子量36: 1.13 x 10 4.01 x 104.4理化特性4.4.1 物理特性 : 是一種酸性粘多糖，有很強(qiáng)的吸濕性，溶于水，水溶液有粘性。不溶于醇、酮、乙醚等有機(jī)溶劑。4.4

2、.2以透明質(zhì)酸為主成份，因具有保持水份的作用，常用于食品物性改良。5. 使用范圍及使用量5.1使用范圍：一般食品 <一般飲料類（飲用純凈水除外）>使 用 量 ： 10mg/kg6. 添加劑的生產(chǎn)工藝及使用擬申請?zhí)砑觿┥a(chǎn)的食品的生產(chǎn)工藝 6.1 透明質(zhì)酸的制造工藝流程圖在經(jīng)過滅菌的葡萄糖、酵母粉、蛋白胨等培養(yǎng)液里接種所需菌種進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)酵，一定時間后通過過濾培養(yǎng)液除菌。過濾液經(jīng)濃縮精制后，用已經(jīng)過濾的乙醇進(jìn)行醇沉處理，過濾并干燥，將干燥后的粉末或顆粒在凈化室進(jìn)行潔凈包裝。接種物準(zhǔn)備 ( 獸疫鏈球菌 )發(fā)酵過濾超濾及濃縮微孔過濾 (0.45m)純化清除蛋白質(zhì)和其他原料醇沉PH 調(diào)節(jié)純化

3、 ( 醇沉)干燥篩選包裝透明質(zhì)酸6.2使用擬申請?zhí)砑觿┥a(chǎn)食品的生產(chǎn)工藝用途應(yīng)用領(lǐng)域使用方法使用量以粉末形態(tài)使增稠劑在酸性環(huán)境下穩(wěn)定，所以可用于包用無特別規(guī)定含酸性化合物的產(chǎn)品或溶于水后使用6.2.1生產(chǎn)稠狀飲料6.2.1.1概述通常飲用的飲料的口感主要是舌表面感覺到的黏度， 大部分飲料的物理黏度是 70CP以下，根據(jù)飲料的種類可以表述為稀 , 濃, 有粘性等。最近推出的飲料給飲料增加一定黏度， 一般情況下感覺稀， 但保存于低溫時能感覺到有一定黏度。 考慮與其他的整體原料配合比和使用量及食感可將透明質(zhì)酸用量進(jìn)行調(diào)整 , 也可調(diào)整感覺到的粘性和食感，也可以與其他輔助增稠劑混合使用。6.2.1.2

4、具有代表性的產(chǎn)品蘆薈凝膠飲料 , 綠藻凝膠飲料等6.2.1.3使用擬申請?zhí)砑觿┥a(chǎn)食品的生產(chǎn)工藝溶解及混合透明質(zhì)酸用精制水溶解，添加量為1g/kg均質(zhì)化讓各原料充分混合溶解 .在 95以上的溫度上殺菌 2040秒第一次殺菌先把裝飲料的容器洗滌、殺菌容器：洗滌 /殺菌灌裝已殺菌好的飲料倒入容器里產(chǎn)品檢測進(jìn)行理化學(xué)、微生物檢查合格產(chǎn)品出庫產(chǎn)品出庫7. 食品添加劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與指定編制說明 7.1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)7.1.1 性狀 : 白色至淡黃色粉末或顆粒7.1.2透明 質(zhì)酸 含量 :87% 以上 ( 干燥品計 )7.1.3水份 :10% 以下7.1.4 PH( 0.1% 水溶液 ):2.53.57.1.5灰

5、份 :5.0% 以下7.1.6其他酸性粘多糖:不能檢測出7.2編制說明檢測項目指標(biāo)性狀白色至淡黃色粉末或顆粒PH(0.1%水溶液 )2.5 3.5透明質(zhì)酸含量87%以上干燥失重10%以下灰分5%以下其他酸性粘多糖不能檢測出參照標(biāo)準(zhǔn)1. 與韓國 KFDA的食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的規(guī)格一致1. 與韓國 KFDA的食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的規(guī)格一致2. 與日本 FDA公布的妝原基中透明質(zhì)酸鈉實驗方法一致1. 與韓國 KFDA食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的實驗法一致；2. 數(shù)值的設(shè)定比 KFDA的規(guī)格數(shù)

6、值 90%略低；3. 與中國山東富瑞達(dá)透明質(zhì)酸鈉的數(shù)值 87%一致1. 與韓國 KFDA的食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的規(guī)格一致2. 與日本 FDA公布的妝原基中的透明質(zhì)酸鈉實驗方法一致1. 與韓國 KFDA的食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的規(guī)格一致1. 與韓國 KFDA的食品添加物的公示( 天然添加物 .4.203) 中透明質(zhì)酸的規(guī)格一致2. 與日本 FDA公布的妝原基中的透明質(zhì)酸鈉實驗方法一致7.3質(zhì)量規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)中微生物指標(biāo)、理化指標(biāo)及相應(yīng)的檢驗方法檢測項目指標(biāo)檢測方法pH2.04.0將透明質(zhì)酸配制成0.5%的水溶液，然后用 pH計檢

7、測其 PH值透明質(zhì)酸87 %重金屬 20ppm砷 2ppm蛋白質(zhì) 0.1%干燥失重 10%本品干燥后精確稱取0.1g ，置于氯化鈉溶液中，充分振蕩 3個小時，定容至 100ml，取 5ml后用氯化鈉溶液稀釋至 100 ml，作為待試液。精確稱取葡萄糖醛酸內(nèi)酯 0.1g 左右，用氯化鈉溶液定容至 100ml，取3ml，再用氯化鈉定容至 100ml，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別在兩支具塞試管中加入硼砂的硫酸溶液 （ 0. 95-100 ）5ml，在冰水浴中冷卻后，加入待試溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液各1ml，溶液的溫度應(yīng)低于室溫， 剛開始緩慢搖晃使之混合均勻，然后劇烈振蕩，放于沸水浴中加熱 10分鐘后，立即用冰水浴冷卻，

8、再加入咔唑試劑（ 0.125-100 ）0.2ml 并充分混合，于沸水浴中加熱 15分鐘后，立即用冰水浴冷卻。 用1ml氯化鈉按上法制備對照溶液， 用波長 530nm測量待試液和標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度 AT及AS，按以下公式計算本品的純度：含量（ %）=( 葡萄糖醛酸內(nèi)酯（ mg）*AT)/ （待試樣（ mg）*AS）*3/5*2.148*1002.148=( 透明質(zhì)酸一單位分子量（ 378.3 ）/ 葡萄糖醛酸內(nèi)酯分子量（ 176.12 ）)AT：待試液的吸光度AS：標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度3/5: 稀釋的倍數(shù)將本品 1g投入石英質(zhì)或自制坩堝里，緩慢加熱碳化。冷卻后加硝酸 2ml 及硫酸 5滴，加熱到不發(fā)生

9、白煙， 然后強(qiáng)熱至450550灰化。冷卻后加 2ml 鹽酸在水浴中蒸發(fā)干燥，殘留物里加 3滴鹽酸后再加 10ml熱水，加熱 2分鐘后冷卻，然后加1滴酚酞試劑，滴加氨試劑至溶液呈淡紅色， 用水將其移到納氏比色管中，再加稀釋的醋酸 (1 20) 2ml及水，配成 50ml 做為待測溶液。標(biāo)準(zhǔn)色的配制應(yīng)該用與試劑材質(zhì)相同的坩堝，加硝酸 2ml 及硫酸 5滴，加 2ml 鹽酸，在水浴中蒸發(fā)干燥，殘留物里加 3滴鹽酸，然后與調(diào)制試驗溶液一樣進(jìn)行處理后， 移到納氏比色管，加入鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液 2ml, 再加稀釋的醋酸 (1 20) 2ml 及水，配成 50ml 溶液作為標(biāo)準(zhǔn)色。進(jìn)行重金屬試驗時，其結(jié)果應(yīng)小于 2

10、0ppm。將本品 0.5g 投入鉑金質(zhì)、石英質(zhì)或自制坩堝中，加入硝酸鎂的乙醇溶液 (1 50)10ml ，將乙醇點(diǎn)火燃燒后， 緩緩加熱至 450550 使之灰化，如果存在碳化物，加入少量硝酸再強(qiáng)熱至 450 550 使之灰化。冷卻后殘留物里加鹽酸 3ml ，用水浴加熱融解后用于檢測砷的試驗溶液，其結(jié)果砷含量應(yīng)小于 2ppm用lowry 法檢測蛋白質(zhì)含量本品 1g，105干燥 4個小時，減少量應(yīng)在 10%以下精確稱取 0.5g 左右的樣品放入已經(jīng)灼熾過的坩堝中，用少量灼熾殘渣 5%的硫酸潤濕樣品，并緩慢加熱至無白煙放出，然后高熱至450550 C，直到樣品變成灰狀（大約 4小時），在干燥器中冷卻

11、，稱重并計算灰分含量。取本品 0.5g 加入滅菌生理鹽水中溶解后精確配置成50ml。 各取其溶液 1ml 涂抹在 2個培養(yǎng)基（培養(yǎng)基 1）上，在 37, 培養(yǎng) 48小時，培養(yǎng)完畢后數(shù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的集群數(shù)，綜合考慮溶液的稀釋倍數(shù)計算每克的總菌數(shù)。培養(yǎng)基 1) ：標(biāo)準(zhǔn)瓊脂培養(yǎng)基 (Plate Count Agar)總菌落數(shù)1103胰化蛋白胨5.0 gCFU/g酵母提取物2.5 g葡萄糖1.0 g瓊脂15.0 g上述成份加入 1000 ml 蒸餾水， pH調(diào)整為 7.0 ± 0.2 ，在 121 滅菌 15 分鐘。溶血性鏈球菌陰性反應(yīng)溶血性陰性反應(yīng)取本品 0.5g加入滅菌氯化鈉溶液，確配置

12、成 100ml 。 取其液 0.5ml ，各涂抹于2個血液瓊脂培養(yǎng)基（培養(yǎng)基）在237, 培養(yǎng) 48 小時后，不能確認(rèn)有溶血性菌落，有菌落時，用顯微鏡觀察時不能有鏈球菌。培養(yǎng)基 2)血液瓊脂培養(yǎng)基(Blood Agar)胰蛋白示10.0 g牛肉浸膏3.0 g氯化鈉5.0 g瓊脂15 g將上述成份溶解于 1,000 ml 蒸餾水，在 121 滅菌 15 分鐘，冷卻到 50 ，然后加 去纖維蛋白血液 50mL混合后噴注到培養(yǎng)皿使之固化。將 0.4g 的透明質(zhì)酸溶于到 40ml 的滅菌后的氯化鈉溶液（ 8.5g 氯化鈉溶于到 1000ml蒸餾水中，然后在 121 C滅菌 15分鐘，下同）中，用滅菌后

13、的 0.01N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) PH值到67，然后，用氯化鈉溶液定容至 100ml。移取 0.5ml 上述溶液，加入 0.5ml 1% 的血溶液（ 1ml兔血，用滅菌后的氯化鈉溶液定容至 100ml）。同時，用 0.5ml 的氯化鈉溶液和 0.5ml 的 1% 兔血溶液混合作為對照。 37 C條件下培養(yǎng)兩個小時， 然后離心得到紅細(xì)胞，檢查表面的顏色，測試溶液和對照溶液的顏色應(yīng)保持一致。用分子排阻色譜法測量透明質(zhì)酸的分子量待測溶液： 精確稱取 50mg的透明質(zhì)酸樣品溶于到混合試劑 (200mM NaCl, 0.1% NaN3的水溶液 ) 中，待完全溶解后，用0.45um的微孔濾膜過濾標(biāo)準(zhǔn)溶液： 精確稱取 10mg的聚合體標(biāo)準(zhǔn)品（ PEOX 50K， PEOX 100K，PEOX 270K，PEOX 400K，PEOX 1000K），溶于到10ml的混合試劑 (200mM NaCl, 0.1% NaN3的水溶液 ) 中，待完全溶解后，用 0.45um的微孔濾膜過濾分子量0.010.2MDa測量儀器： Viscotek TriSEC GPC system