冠心病患者sPLA2與hsCRP聯(lián)合測定及其臨床意義

1、冠心病患者sPLA2與hs-CRP聯(lián)合測定及其臨床意義【關(guān)鍵詞】 冠心病 sPLA2 hs-CRP 聯(lián)合測定近年來，人們對各種炎癥因子對于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(簡稱冠心病)患者遠(yuǎn)期心血管事件的影響給予了很大的關(guān)注1。特別是高敏C反應(yīng)蛋白(high sensitivity c-reactive protein，hs-CRP)在各項(xiàng)研究中備受重視2，3。然而，僅僅測定hs-CRP是否有其局限性？有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2, sPLA2)在各種炎癥性疾病46中均有明顯升高。因此，本次研究對冠心病患者同時(shí)測定了hs-CRP和sPLA2，旨在觀

2、察兩者聯(lián)合測定對預(yù)測冠心病患者心血管事件的價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)道如下。 1資料與方法 1.1組織標(biāo)本選擇義烏市中醫(yī)院內(nèi)科2004年8月至2006年6月住院的冠心病患者172例，隨訪2年，所有病例的冠狀動(dòng)脈造影顯示至少1支以上主要冠狀動(dòng)脈狹窄大于50， 對冠狀動(dòng)脈狹窄70病變的患者行冠狀動(dòng)脈支架植入治療,已排除房顫、心肌病、腫瘤、嚴(yán)重外傷、嚴(yán)重肝腎功能不全以及感染等其他炎癥性疾病。其中男性132例，女性40例，年齡3879歲，平均年齡(64.18±10.28)歲。以0.03g/L作為hs-CRP的切點(diǎn)7，分為高h(yuǎn)s-CRP組(0.03g/L) 79例和低hs-CRP組(0.03g/L) 93例；

3、以sPLA2中位數(shù)66.48u/ml作為切點(diǎn)，分為高sPLA2組(66.48u/ml) 91例和低sPLA2組(66.48u/ml) 81例，冠心病各組患者的一般臨床特征比較見表1，各組資料情況比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均0.05）。 hs-CRP0.03g/L合并sPLA266.48u/ml者共有48例；低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）(1.3g/L)者148例。所有患者采血時(shí)均已簽署知情同意書。 1.2方法受試者于冠脈造影當(dāng)日術(shù)前采橈動(dòng)脈血5 ml，不作抗凝處理。以3000 r/min離心10 min后取血清，20保存

4、待測。采用日本Olympus AU2700全自動(dòng)生化分析儀測定高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C）、LDL-C和hs-CRP等。用ELISA法檢測血清sPLA2(試劑盒由美國R&D公司生產(chǎn))。檢測符合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。所有患者按照冠心病二級預(yù)防要求給予治療，包括阿司匹林、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或血管緊張素受體阻斷劑、受體阻斷劑和他汀類等藥物，有支架植入的病人常規(guī)給予氯吡格雷至少1年。 1.3隨訪隨訪時(shí)間2年，至2007年6月結(jié)束（死亡病例以死亡時(shí)間為終止時(shí)間），通過門診、病房或電話方式隨訪，未有失訪病例。主要

5、觀察sPLA2、hs-CRP對遠(yuǎn)期心血管事件的預(yù)測意義。心血管事件包括冠脈重建、需要住院的復(fù)發(fā)性心絞痛、心肌梗死、嚴(yán)重心衰（紐約心功能分級級）、腦卒中、心血管死亡（致死性心肌梗死、致死性心力衰竭、致死性卒中、猝死）。 1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。通過單樣本K-S檢驗(yàn)觀察計(jì)量資料的數(shù)據(jù)分布類型。以傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素如高血壓、糖尿病、吸煙史（每天10支超過10年）、冠脈3支病變?yōu)閰f(xié)變量，通過Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析高sPLA2以及高h(yuǎn)s-CRP水平與遠(yuǎn)期心血管事件的關(guān)系并分別計(jì)算其相對危險(xiǎn)度。計(jì)數(shù)資料用卡方趨勢檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)相關(guān)性分析采用Spearman' Rank相關(guān)性

6、檢驗(yàn)。設(shè)P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2結(jié)果 2.12年的隨訪結(jié)果 隨訪2年，共發(fā)生心血管事件49例，其中包括冠狀動(dòng)脈血管重建12例、需要住院的復(fù)發(fā)性心絞痛患者18例、嚴(yán)重心力衰竭8例、急性心肌梗死2例、腦卒中3例、心血管系統(tǒng)疾病致死6例。 2.2Spearman's Rank分析結(jié)果sPLA2與hs-CRP呈正相關(guān)（r =0.23，P0.05），但sPLA2與年齡、BMI、LDL-C無明顯相關(guān)性(r分別= -0.17、0.04、0.02，P均0.05)。 2.3sPLA2和hs-CRP各水平組患者的624月的心血管事件發(fā)生率見表2 由表2可見，高sPLA2組患者的心血管事件發(fā)生率在

7、12月、18月、24月，與低sPLA2組患者比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2分別= 6.58、9.32、4.35，P均0.05)；高h(yuǎn)s-CRP組的心血管事件發(fā)生率在6月、12月、18月、24月與低hs-CRP組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2分別=4.05、8.56、16.41、8.81，P均0.05)。高sPLA2+ 高h(yuǎn)s-CRP患者的心血管事件發(fā)生率在12月、18月、24月，分別與高sPLA2組及高h(yuǎn)s-CRP組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2分別=3.78、10.21、8.78、 4.21、9.66、4.60，P均0.05)。 2.4遠(yuǎn)期心血管事件在調(diào)整了傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素如高血壓、糖尿病、吸煙、冠脈

8、3支病變后，高sPLA2、高h(yuǎn)s-CRP和高sPLA2+ 高h(yuǎn)s-CRP患者的相對危險(xiǎn)度（relative risk，RR）分別為2.76、2.55、3.34。在低LDL-C冠心病患者中，高sPLA2、高h(yuǎn)s-CRP及高sPLA2高h(yuǎn)s-CRP組患者2年后發(fā)生心血管事件的RR分別為2.66、2.77、3.73。 3討論 近年來，有研究提示，即使低LDL-C的個(gè)體仍然有發(fā)生冠心病及遠(yuǎn)期心血管事件的風(fēng)險(xiǎn)8，于是炎癥因子逐步受到關(guān)注，特別是hs-CRP被認(rèn)為在動(dòng)脈粥樣斑塊的形成和破裂中起到了關(guān)鍵作用。本次研究以0.03g/L為切點(diǎn)7，將冠心病患者分為高h(yuǎn)s-CRP組和低hs-CRP組。經(jīng)過2年隨訪，

9、兩組發(fā)生心血管事件的風(fēng)險(xiǎn)在6個(gè)月之后開始差異統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義（P 0.05)；調(diào)整了相關(guān)傳統(tǒng)事件危險(xiǎn)因素后，提示高h(yuǎn)s-CRP為預(yù)測遠(yuǎn)期心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這與之前的研究結(jié)果一致3。然而，對于冠心病，特別是伴低LDL-C的患者，僅僅觀察hs-CRP預(yù)測心血管事件是否足夠，文獻(xiàn)報(bào)道較少。 在本次研究中，同時(shí)測定了血清sPLA2的水平。sPLA2屬于磷脂酶家族的小分子酶類(14 kDa)，存在鈣離子依賴性，經(jīng)白介素-1、腫瘤壞死因子-等9炎癥因子的刺激，主要由血管平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生并在體內(nèi)組織有廣泛的分布。它能夠水解細(xì)胞膜及脂蛋白包括LDL、高密度脂蛋白的磷脂酰膽堿的第2位?；?，產(chǎn)生游離脂

10、肪酸和溶血磷脂膽堿，后者能進(jìn)一步水解產(chǎn)生其他細(xì)胞因子如血小板活化因子、溶血磷脂酸等，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣斑塊的形成或破裂10。sPLA2還可以水解修飾LDL顆粒，使其更容易進(jìn)入動(dòng)脈內(nèi)膜，這些顆粒經(jīng)sPLA2修飾后易被氧化，與蛋白聚糖的親和力增加、在細(xì)胞外大量積聚，引起脂質(zhì)沉積并介導(dǎo)泡沫細(xì)胞及粥樣斑塊的形成有關(guān)11。有研究發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣斑塊中有sPLA2的高度表達(dá)12，且在冠心病特別是急性冠脈綜合征患者的外周循環(huán)血中明顯升高6，提示sPLA2的增高與冠心病及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定有關(guān)。在本次研究中所有對象的sPLA2中位數(shù)以66.48u/ml為切點(diǎn)，分為高sPLA2組和低sPLA2組，觀察各自的心

11、血管事件，兩組在12個(gè)月之后開始出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P 0.05)，2年后高sPLA2組的事件發(fā)生率為38.46，調(diào)整了其他傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后，提示也是冠心病發(fā)生遠(yuǎn)期心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。 另外，本次研究通過Spearman's Rank分析發(fā)現(xiàn)sPLA2與hs-CRP呈正相關(guān)，推測sPLA2可能在一定程度上反映了冠心病患者的炎癥狀態(tài)。然而，在高sPLA2合并高h(yuǎn)s-CRP患者，其心血管事件發(fā)生率則明顯高于前兩者（P 0.05)，隨訪2年后觀察相對危險(xiǎn)度，與單因子升高者相比（P 0.05)，大大增加了對心血管事件的預(yù)測價(jià)值。即使在低LDL-C的冠心病患者，仍然可見到類似的結(jié)果，這提示對

12、于冠心病患者，與單獨(dú)測定hs-CRP相比，聯(lián)合測定入院時(shí)sPLA2及hs-CRP水平將更有助于預(yù)測遠(yuǎn)期的心血管事件。hs-CRP、sPLA2是冠心病及心血管事件獨(dú)立危險(xiǎn)因素的重要補(bǔ)充，在伴低LDL-C的患者，聯(lián)合測定sPLA2和hs-CRP仍然表現(xiàn)出其重要意義。 由于受到本次研究樣本量和觀察時(shí)間的限制，以及在隨訪中冠心病二級預(yù)防藥物的使用未能完全一致，對遠(yuǎn)期心血管事件的發(fā)生可能存在一定的影響，或許使用sPLA2抑制劑能更好闡明其作用機(jī)制13?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 Ozeren A, Aydin M, Tokac M, et al. Levels of serum IL- 1beta, IL-2, IL

13、-8 and tumor necrosis factor-alpha in pa-tients with unstable angina pectorisJ. Mediators Inflamm, 2003, 12(6): 361-365.2 Nader R, Paul M. High-sensitivity C-reactive protein: a novel and promising marker of coronary heart diseaseJ. Clin Chem, 2001, 47(3):403-411.3 Laurie G, Louis L. High-sensitivit

14、y C-reactive protein is the most effective prognostic measurement of acute coronary ev-entsJ. Am J Crit Care, 2002, 11(5): 482 - 486.4 Masuda S, Murakami M, Komiyama K, et al. Various secre- tory phospholipase A2 enzymes are expressed in rheumatoid arthritis and augment prostaglandin production in c

15、ultured synovial cellsJ. FEBS J, 2005, 272(3):655-672.5 Dullemen H, Wolbink G, Wever P, et al. Reduction of circulating secretory phospholipase A2 levels by anti-tumor necrosis factor chimeric monoclonal antibody in patients with severe Crohn's disease. Relation between tumor necrosis factor and

16、 secretory phospholipase A2 in healthy humans and in active Crohn's diseaseJ. Scand J Gastroenterol, 1998, 33(10): 1094-1098.6 于路, 姜文兵, 傅國勝, 等. 冠心病患者分泌型磷脂酶A2 的變化及其與白細(xì)胞介素8、溶血磷脂酸的關(guān)系J. 中華心血管病雜志, 2006, 34(9): 812-815.7 Pearson TA, Mensah GA, Alexander RW, et al. Markers of inflammation and cardiovas

17、cular disease: application to clin-ical and public health practiceJ. Circulation, 2003, 107(3): 499-511.8 Kannel WB. Range of serum cholesterol values in the population developing coronary diseaseJ. AM J Cardiol, 1995, 76(9): 69C-77C.9 Adibhatla RM, Hatcher JF. Secretory phospholipase A2 IIA is up-r

18、egulated by TNF-alpha and IL-1alpha/beta after tra-nsient focal cerebral ischemia in ratJ. Brain Res, 2007,1134(1): 199-205.10 Niessen H, Krijnen P, Visser C, et al. Type II secretory phospholipase A2 in cardiovascular disease: a mediator in atherosclerosis and ischemic damage to cardiomyocytesJ? Cardiovasc Res, 2003, 60(1): 68-77.11 Hurt-Camejo, Eva A, Camejo, et al. Phospholipase A2 and small, dense low-density lipoproteinJ. Curr Opin Lipidol, 2000, 11(5): 465-471.12 Ghesquiere S, Gijbels M, Anthonsen M, et al. Macrophage- specific overexpression of group