畢業(yè)設(shè)計(jì)論文HPLC測(cè)定PAM降解產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化

1、哈爾濱學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目： hplc測(cè)定pam降解產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化院 （系） 理學(xué)院專 業(yè) 化 學(xué)年 級(jí) 2007級(jí)姓 名 學(xué) 號(hào)07052123指導(dǎo)教師 職 稱高級(jí)實(shí)驗(yàn)師 2011年 6月 10 日目 錄摘 要1abstract2第一章 緒 論31.1引 言31.1.1聚丙烯酰胺和丙烯酰胺簡(jiǎn)介31.1.2常用檢測(cè)方法31.2 高效液相色譜法簡(jiǎn)介51.2.1高效液相色譜法的發(fā)展51.2.2 hplc的特點(diǎn)51.2.3高效液相色譜法的分類6第二章 實(shí)驗(yàn)部分72.1 儀器和試劑72.1.1儀器72.1.2試劑72.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容82.2.1波長的選擇82.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制82.2.3

2、hpam的降解82.2.4不同流動(dòng)相對(duì)降解產(chǎn)物的測(cè)定8第三章 結(jié)果與討論93.1 波長的選擇93.2 以生理鹽水為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物113.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較113.2.2分離效果的比較123.2.3 ph的影響123.2.4檢測(cè)效果的比較143.3 以甲醇為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物163.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較163.3.2分離效果的比較173.3.3不同酸對(duì)測(cè)定的影響183.3.4檢測(cè)效果的比較193.4 以乙腈為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物213.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較213.4.1分離效果的比較223.4.3不同酸對(duì)測(cè)定的影響223.4.4檢測(cè)效果的比較243.

3、5 不同流動(dòng)相對(duì)檢測(cè)丙烯酰胺和丙烯酸含量的影響26結(jié) 論28參考文獻(xiàn)29致 謝30摘 要本文采用高效液相色譜（hplc）法測(cè)定聚丙烯酰胺（hpam）降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量。首先用紫外分光光度計(jì)確定最大吸收波長，在以atlantis c18色譜柱為固定相，色譜柱溫度為25、流速為1ml/ min、波長為195nm的色譜條件下，分別以ph=3.8的0.9% nacl溶液、 ph=7.0的 nacl溶液、0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）溶液、0.1% 磷酸的甲醇-水（10:90）的溶液、0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液和0.1% 磷酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相，對(duì)

4、降解不同時(shí)間的樣品進(jìn)行定性定量分析，得出測(cè)定樣品中丙烯酰胺和丙烯酸含量的最佳色譜條件。 關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；聚丙烯酰胺；丙烯酰胺；丙烯酸abstractin this paper, the content of degradation products, acrylamide and acrylic acid, from polyacrylamide (hpam) is determined by high performance liquid chromatography (hplc) method. the maximum absorption wavelength is determ

5、ined by ultraviolet spectroscopy. the best chromatographic conditions to determine concentration of acrylamide and acrylic acid is concluded with diffrent mobile phase ,ph = 3.8 to 0.9% nacl solution, ph = 7.0 in nacl solution, 0.1% acetic acid in methanol - water (10:90) solution, 0.1% phosphoric a

6、cid in methanol - water (10:90) solution, 0.1% acetic acid in acetonitrile - water (20:80 ) 0.1% phosphoric acid solution and acetonitrile - water (20:80) solution , and atlantis c18 column as the stationary phase.the experiment temperature was 25 , the flow rate was 1ml/min, a wavelength of 195nm o

7、f the chromatographic conditions, respectively.key words：phlc;pam;acrylamide；acrylicacid 第一章 緒 論 1.1引 言1.1.1聚丙烯酰胺和丙烯酰胺簡(jiǎn)介聚丙烯酰胺簡(jiǎn)稱hpam，由丙烯酰胺單體聚合而成，是一種水溶性線型高分子物質(zhì)。主要用作絮凝劑，增稠劑，鉆井泥漿處理劑，用于石油工業(yè)、紡織工業(yè)、造紙工業(yè)等1-2 。在石油化工生產(chǎn)中主要用作驅(qū)油劑。丙烯酰胺是一種白色透明片狀晶體，分子式ch2chconh2，無臭，有毒，比重1.122(20/4)，熔點(diǎn)84.5，沸點(diǎn)125，易溶于水、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑。是一種中等

8、毒性的親神經(jīng)毒物，可通過未破損的皮膚、粘膜、肺和消化道進(jìn)入人體，分布于人體液中。神經(jīng)毒性作用主要為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化3。生殖毒性作用表現(xiàn)為雄性大鼠精子數(shù)目和活力下降及形態(tài)改變和生育能力下降3。此外還有一些職業(yè)暴露人群出現(xiàn)盜汗、周圍血管擴(kuò)張、排尿困難等自主神經(jīng)功能紊亂的癥狀。丙烯酰胺還是一種急性的眼、皮膚、呼吸道刺激物，可以通過多種途徑被人體吸收，包括靜脈、腹膜、皮下、肌內(nèi)、口腔、皮膚等。丙烯酰胺的毒性已經(jīng)過充分的研究，記載于多篇文獻(xiàn)中4-6。聚丙烯酰胺中含有丙烯酰胺單體，尤其是在降解后的石油廢水中。石油廢水中丙烯酰胺的含量必須在一定量的范圍內(nèi)才

9、排放，所以降解后丙烯酰胺濃度的測(cè)定顯得及為重要。1.1.2常用檢測(cè)方法（1）濁度法 常用hyamine 1622(季銨鹽)或次氯酸鈉溶液與hpam反應(yīng)，生成不溶于水、懸浮在溶液中的化合物，然后用濁度計(jì)或分光光度計(jì)測(cè)量。由于hpam與次氯酸鈉、醋酸的比例不同,標(biāo)準(zhǔn)曲線也不同，在測(cè)量未知樣品時(shí)難以保證試液的加入量與所用標(biāo)準(zhǔn)曲線的要求一致。而且所需樣品量大，重金屬離子和陰離子表面活性劑干擾測(cè)量結(jié)果，在一定程度上影響了該方法的應(yīng)用。（2）粘度法7 利用已知的一定剪切速率下的粘度和濃度關(guān)系，測(cè)出樣品的粘讀法插值求出濃度。該方法要求粘度的變化正比于hpam濃度變化，僅能用于已知組份的體系。溫度、離子強(qiáng)度、

10、剪切速率、hpam的分子量、水解度和分子量分布的變化都影響hpam溶液的粘度。該方法的應(yīng)用受到嚴(yán)重限制。（3）熒光分光光度法 利用霍夫曼重排反應(yīng)使hpam轉(zhuǎn)化成酰胺衍生物，在鄰苯二醛和巰基乙醇的存在下，酰胺衍生物轉(zhuǎn)化成發(fā)強(qiáng)光的化合物。由于重排反應(yīng)進(jìn)行較慢,該方法測(cè)定費(fèi)時(shí)。（4）放射性同位素標(biāo)記法8 在合成hpam的反應(yīng)中把氚和14c兩種射線體定量地引入hpam分子鏈，使聚合物具有放射性，然后用放射性測(cè)量方法測(cè)定hpam的含量。該方法的測(cè)量范圍為1-100 mg/l，樣品用量為100l。應(yīng)用于室內(nèi)實(shí)驗(yàn)如hpam吸附研究中，該方法具有獨(dú)特的用途，但不能用于常規(guī)樣品分析。（5）uv/可見光光譜法9

11、hpam在191.5nm處有強(qiáng)的吸收，在010 mg/l范圍內(nèi)濃度和吸光度之間呈線性關(guān)系。樣品中任何對(duì)uv有吸收的物質(zhì)都產(chǎn)生干擾。（6）沉淀法10 用甲醇、丙酮或異丙醇等hpam的非溶劑緩慢地使hpam從溶液中沉淀，經(jīng)過濾分離、真空干燥、稱量后,測(cè)出hpam的含量。該方法相當(dāng)費(fèi)時(shí)。（7） 量熱法11 量熱法有兩種：一種是利用0.4mol/l hcl滴定,測(cè)量反應(yīng)熱,測(cè)出羧基含量，稱為測(cè)溫滴定法；另一種是利用堿性溴水滴定hpam的酰胺基團(tuán)，稱為直接注入量熱法。量熱法的測(cè)量范圍7400 mg/l。該方法的突出特點(diǎn)是能同時(shí)測(cè)出hpam的濃度和水解度。（8） 離子色譜法(ic)12 利用離子色譜測(cè)量n

12、a+含量從而求出水溶液中hpam的濃度。該方法僅在na+含量和羧基含量相等時(shí)才能應(yīng)用。1.2 高效液相色譜法簡(jiǎn)介1.2.1高效液相色譜法的發(fā)展最早是由俄國植物學(xué)家茨維特（tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的，色譜法（chromatography）因之得名。后來在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長（常有幾個(gè)小時(shí)）。高效液相色譜法是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒

13、小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜法（high pressure liquid chromatography，hplc）。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法（high speed liquid chromatography，hslp）。也稱現(xiàn)代液相色譜13-14。 高效液相色譜法的原理是溶于流動(dòng)相（mobile phase）中的各組分經(jīng)過固定相時(shí)，由于與固定相（stationary phase）發(fā)生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。 1.2.2 hplc

14、的特點(diǎn)14 （1）hplc的特點(diǎn)1、高壓壓力可達(dá)150300kg/cm2。色譜柱每米降壓為75kg/cm2以上 。2、高速流速為0.110.0 ml/min。 3、高效可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。 4、高靈敏度紫外檢測(cè)器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。 （2）hplc 與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)： 1、速度快通常分析一個(gè)樣品在1530 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。 2、分辨率高可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果。 3、靈敏度高紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器可達(dá)0.1pg 。4、柱子可反復(fù)使用用一根色譜柱可分離不同的化合

15、物。 樣品量少，容易回收，樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。1.2.3高效液相色譜法的分類高效液相色譜法按分離機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法15。 （1）液固色譜法是使用固體吸附劑，被分離組分在色譜法上分離原理是根據(jù)固定相對(duì)組分吸附力大小不同而分離。（2）液液色譜法按固定相和流動(dòng)相的極性不同可分為正相色譜法和反相色譜法。（3）離子交換色譜法由于流動(dòng)相的鹽濃度大，則離子強(qiáng)度高，不利于樣品的解離，導(dǎo)致樣品較快流出。離子交換色譜法主要用于分析有機(jī)酸、氨基酸、多肽及核酸。 （4）離子對(duì)色譜法又稱偶離子色譜法，是

16、液液色譜法的分支。它是根據(jù)被組分離子與離子對(duì)試劑離子形成中性的離子對(duì)化合物后，在非極性固定相中溶解度增大，從而使其分離效果改善。主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。 （5）排阻色譜法常用于分離高分子化合物，如組織提取物、多肽、蛋白質(zhì)、核酸等。本實(shí)驗(yàn)主要用高效液相色譜法中的液液色譜法的反相色譜法，以c18柱為色譜柱，溫度為25，測(cè)定石油廢水中聚丙烯酰胺降解后產(chǎn)物的含量，通過更換不同的流動(dòng)相找出測(cè)定降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量的最佳條件。第二章 實(shí)驗(yàn)部分 2.1 儀器和試劑2.1.1儀器表2-1 實(shí)驗(yàn)儀器儀器名稱 生產(chǎn)廠家 cs501型超級(jí)恒溫槽中華人民共和國重慶試驗(yàn)設(shè)備廠制造真空泵天津奧特賽恩

17、斯儀器有限公司ph計(jì)賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司紫外分光光度計(jì)日本島津公司高效液相色譜儀日本島津公司2.1.2試劑表2-2 實(shí)驗(yàn)試劑試劑名稱分子式產(chǎn)品級(jí)生產(chǎn)廠家甲醇ch3oh色譜純manufactured by sk chemicals乙腈ch3cn色譜純山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠硫酸鉀k2so4分析純天津市塘沽新華化工廠丙烯酸ch2chcooh分析純天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所氯化鈉nacl分析純天津開發(fā)區(qū)海光化學(xué)制藥廠冰乙酸ch3cooh分析純天津市永大化學(xué)試劑有限公司丙烯酰胺ch2chconh2分析純天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司聚丙烯酰胺500萬分析純天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司 2

18、.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容2.2.1波長的選擇通過紫外分光光度計(jì)在190300nm的波長范圍內(nèi)掃描聚丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺的最大吸收波長。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別準(zhǔn)確移取1.0×10-4g/ml的丙烯酰胺和1.05×10-4g/ml的丙烯酸儲(chǔ)備液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml置于5個(gè)不同的10ml的容量瓶中，稀釋至刻度。分別得到 5×10-645×10-6g/ml范圍的標(biāo)準(zhǔn)溶液。通過0. 45m微孔過濾和超聲波脫氣。經(jīng)hplc測(cè)定后，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，分別繪制丙烯酰胺和丙烯酸標(biāo)準(zhǔn)品的工作曲線。2.2.3 hpam的降解以ti板為陰極

19、，pbo2為陽極，飽和氯化鉀甘汞電極為參比電極，陰陽極表觀面積均為1×2 cm2。電解液在無隔膜的電解槽中（配制模擬廢水，加入電解質(zhì)k2so4）、水浴溫度為60、磁力攪拌器的攪拌速度為中速、電流密度為200 macm-2的條件下，對(duì)已配置好的聚丙烯酰胺的模擬廢水進(jìn)行電解。2.2.4不同流動(dòng)相對(duì)降解產(chǎn)物的測(cè)定在柱溫為25、流速為1ml/min和檢測(cè)波長為195nm為色譜條件下，分別以不同的流動(dòng)相繪制丙烯酰胺和丙烯酸的工作曲線，并對(duì)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品中丙烯酸和丙烯酰胺的含量進(jìn)行測(cè)定。（1）ph=3.8的0.9% 的nacl溶液為流動(dòng)相（2）ph=7.0的0.9% 的nacl溶液為流動(dòng)相（3）甲醇

20、水（10:90）的溶液加入0.1% 的乙酸為流動(dòng)相（4）甲醇水（10:90）的溶液加入0.1% 的磷酸為流動(dòng)相（5）乙腈水（20:80）的溶液加入0.1% 的乙酸為流動(dòng)相（6）乙腈水（10:90）的溶液加入0.1% 的乙酸為流動(dòng)相第三章 結(jié)果與討論3.1 波長的選擇利用紫外分光度計(jì)對(duì)聚丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺在190nm300nm波長范圍內(nèi)掃描，吸光度于波長的關(guān)系如圖3-1，圖3-2，圖3-3所示，得出最大吸收波長。圖3-1 聚丙烯酰胺波長掃描 圖3-2 丙烯酸的波長掃描圖3-3 丙烯酰胺的波長掃描由圖3-1可知聚丙烯酰胺在206nm處有最大吸收；由圖3-2可知丙烯酸在195m處有最大吸收；

21、由圖3-3可知丙烯酰胺在195nm處有最大吸收。由于本實(shí)驗(yàn)主要用高效液相色譜法研究聚丙烯酰胺降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量的測(cè)定條件，所以采用195nm為檢測(cè)波長。3.2 以生理鹽水為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物3.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較在色譜條件下，分別以ph=3.8和ph=7.0的生理鹽水做流動(dòng)相測(cè)定hpam的降解產(chǎn)物。(1) 丙烯酰胺的工作曲線相關(guān)系數(shù)比較，如圖3-4和圖3-5所示。 圖3-4 ph=3.8工作曲線 圖3-5 ph=7.0工作曲線(2) 丙烯酸的工作曲線相關(guān)系數(shù)比較，如圖3-6和圖3-7所示 圖 3-6 ph=3.8工作曲線 圖 3-7 ph=7.0工作曲線由圖3-4

22、和圖3-5可知，流動(dòng)相為ph=7.0生理鹽水的溶液，對(duì)丙烯酰胺進(jìn)行hplc測(cè)定，得到的工作曲線相關(guān)系數(shù)較好。由圖3-6和圖3-7可知，流動(dòng)相為ph=3.8生理鹽水的溶液，對(duì)丙烯酸檢測(cè)所得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)較好。由于丙烯酸的極性比丙烯酰胺強(qiáng)，ph對(duì)丙烯酸在流動(dòng)相中的分配比影響較大，所以流動(dòng)相的酸度越強(qiáng)越有利于對(duì)丙烯酸的測(cè)定。綜上所述，檢測(cè)降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量時(shí)，向流動(dòng)相中加酸，增加流動(dòng)相的酸度更有利這兩種物質(zhì)含量檢測(cè)。3.2.2分離效果的比較 不同ph值的流動(dòng)相對(duì)hpam的降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量進(jìn)行測(cè)定，丙烯酰胺和丙烯酸含量的比較如圖3-8和圖3-9所示。 圖3-8 丙

23、烯酰胺含量比較 圖3-9丙烯酸含量比較由圖3-8和圖3-9可知，從檢測(cè)出樣品中丙烯酰胺和丙烯酸的含量也可以得到：流動(dòng)相為ph=7.0的生理鹽水溶液對(duì)丙烯酰胺的檢測(cè)效果較好。流動(dòng)相為ph=3.8生理鹽水有利于對(duì)丙烯酸進(jìn)行檢測(cè)。從這兩種物質(zhì)檢測(cè)含量的比較可以的出，流動(dòng)相偏酸性對(duì)降解產(chǎn)物的測(cè)定效果較好。 3.2.3 ph的影響 由圖3-10和圖3-11可看到丙烯酸的保留時(shí)間隨著酸度的增強(qiáng)而提前，而丙烯酰胺的變化不明顯，流動(dòng)相為ph=3.8的生理鹽水的色譜峰形較好，基線平穩(wěn)，雜質(zhì)峰干擾少。相對(duì)于ph=7.0的流動(dòng)相，ph=3.8的流動(dòng)相更有利于降解產(chǎn)物的測(cè)定。 所以流動(dòng)相的酸度的增大使得對(duì)降解產(chǎn)物的測(cè)

24、定效果優(yōu)化。圖3-10流動(dòng)相ph=3.8生理鹽水的色譜圖1.丙烯酰胺2.丙烯酸圖3-11 流動(dòng)相為ph=7.0的生理鹽水的色譜圖。1.丙烯酸2.丙烯酰胺3.2.4檢測(cè)效果的比較不同ph值的流動(dòng)相對(duì)降解樣品測(cè)定色譜圖的比較，如圖3-12和圖3-13所示。降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)間 3 h圖3-12 流動(dòng)相為0.9% nacl ph=3.8的溶液降解樣品的色譜圖降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)間 3 h圖3-13 流動(dòng)相為0.9% nacl ph=7.0 降解樣品的色譜圖根據(jù)圖3-12和圖3-13所示兩種不同流動(dòng)相譜圖的峰形相似，但對(duì)降解樣品的分離效果較差，由于丙烯酰胺和丙烯酸

25、極性跟流動(dòng)相相比而且相差較大，在流動(dòng)相中的分配比較小，所以用水做流動(dòng)相對(duì)丙烯酰胺和丙烯酸分離效果不太理想，不適合分離極性較小的物質(zhì)。色譜出中有一個(gè)較突出的3號(hào)峰，在降解產(chǎn)物中含量較多，而且隨著降解時(shí)間的增加也在增加。該物質(zhì)在講解過程中不斷生成，確不容易再繼續(xù)降解。3.3 以甲醇為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物3.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較在色譜條件下，分別以0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）和0.1%磷酸的甲醇-水（10:90）溶液為流動(dòng)相，對(duì)hpam降解產(chǎn)物的測(cè)定結(jié)果比較。（1）丙烯酰胺的工作曲線相關(guān)性比較，如圖3-14，圖3-15所示：圖3-14 0.1% 乙酸工作曲線 圖3-15 0.1

26、% 磷酸工作曲線由圖3-14和圖3-15可以看出，用流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）溶液與0.1%磷酸的甲醇-水（10:90）作出的工作曲線的相關(guān)系數(shù)相差不多，相關(guān)系數(shù)的不同與檢測(cè)器和流動(dòng)相的條件有關(guān)，加入磷酸的相關(guān)系數(shù)較好。（2）丙烯酸的工作曲線相關(guān)性比較，如圖3-16，圖3-16所示由圖3-16和圖3-17可以看出，檢測(cè)丙烯酸的相關(guān)系數(shù)較好的是以0.1% 磷酸的甲醇-水（10:90）溶液為流動(dòng)相的色譜條件，由于磷酸的電離系數(shù)比乙酸的大，所以向流動(dòng)相中加入相同量的酸，加入磷酸的流動(dòng)相酸度變化較大，有利于對(duì)極性較大的丙烯酸的檢測(cè)。加入乙酸的流動(dòng)相酸度若與加磷酸的流動(dòng)相相同時(shí)，相關(guān)

27、系數(shù)也會(huì)提高。圖3-16 0.1% 乙酸工作曲線 圖3-17 0.1% 磷酸工作曲線3.3.2分離效果的比較向流動(dòng)相為甲醇-水（10:90）溶液中加入0.1% 乙酸的溶液和0.1% 磷酸的溶液時(shí)，檢測(cè)到同一降解樣品中丙烯酰胺和丙烯酸的含量比較。如圖3-18和圖3-19所示： 圖3-18 丙烯酰胺的含量比較 圖3-19丙烯酸的含量比較由圖3-18和圖3-19可知：對(duì)同樣的降解樣品進(jìn)行檢測(cè)，以0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）溶液為流動(dòng)相條件檢測(cè)降解樣品中丙烯酰胺和丙烯酸的含量效果較好，而在以0.1% 磷酸的甲醇-水（10:90）溶液為流動(dòng)相條件下檢測(cè)丙烯酸效果較好，由于丙烯酰胺和加入磷酸對(duì)極

28、性較大的丙烯酸的檢測(cè)效果較好。3.3.3不同酸對(duì)測(cè)定的影響圖3-20 流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水的標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖1.丙烯酰胺2.丙烯酸 圖3-21 流動(dòng)相為0.1%磷酸的甲醇-水的標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖1.丙烯酰胺2.丙烯酸由圖3-20和圖3-21可知：用上述兩個(gè)不同流動(dòng)相為色譜條件對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)色譜圖的峰形相似，保留時(shí)間基本相同。3.3.4檢測(cè)效果的比較流動(dòng)相中加入不同酸對(duì)hpam降解產(chǎn)物測(cè)定色譜圖的比較，如圖3-22和圖3-23。降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)間 3 h圖3-22 流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水的降解樣品的色譜圖降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)

29、間 3 h 圖3-23 流動(dòng)相：0.1% 磷酸的甲醇-水的降解樣品的色譜圖由圖3-22和圖3-23可以看出流動(dòng)相中加入磷酸時(shí)，色譜峰出現(xiàn)較多，峰拖尾現(xiàn)象較嚴(yán)重，分離效果不理想。向甲醇-水（10:90）溶液中加入0.1%的乙酸對(duì)丙烯酰胺和丙烯酸的測(cè)定的色譜圖出峰較少，分離效果較好。色譜圖的3號(hào)峰隨著降解時(shí)間的增加峰面積也隨著增加，跟流動(dòng)相為水的色譜條件測(cè)定結(jié)果相似，降解產(chǎn)物中產(chǎn)生了一種極性較大確不容易降解的化合物。3.4 以乙腈為流動(dòng)相測(cè)定hpam降解產(chǎn)物3.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)比較 在色譜條件下，分別以0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）和0.1% 磷酸的乙腈-水（20:80）溶液做流動(dòng)相

30、，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和降解產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定（1）丙烯酰胺的工作曲線的相關(guān)性比較，如圖3-24，圖3-25所示。由圖3-24和圖3-25可知，向乙腈-水（20:80） 溶液中加入0.1% 的磷酸和0.1% 的乙酸工作曲線的相關(guān)系數(shù)相近，說明加入不同酸對(duì)丙烯酰胺工作曲線的影響不大。圖3-24 0.1% 乙酸的工作曲線 圖3-25 0.1% 磷酸的工作曲線（2）丙烯酰胺的工作曲線的相關(guān)性比較，如圖3-26，圖3-27所示。由圖3-26和3-27表明，以加入0.1% 磷酸和0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相，對(duì)丙烯酸的測(cè)定相關(guān)系數(shù)接近，且沒有明顯的差別。說明加入不同酸對(duì)乙腈為流動(dòng)相的條件對(duì)測(cè)定丙烯

31、酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)性影響不大。圖3-26 0.1% 乙酸的工作曲線 圖3-27 0.1% 磷酸的工作曲線3.4.1分離效果的比較圖3-28丙烯酰胺的含量比較 圖3-29丙烯酰胺的含量比較圖3-28和圖3-29表明，以不同流動(dòng)相條件對(duì)同一降解樣品中丙烯酰胺和丙烯酸進(jìn)行檢測(cè)的含量比較，得到以0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相的色譜條件效果最佳。3.4.3不同酸對(duì)測(cè)定的影響向流動(dòng)相中加入不同酸，通過圖3-30和圖3-31可以看出色譜圖的檢測(cè)效果。圖3-30流動(dòng)相為0.1% 乙酸的乙腈-水的標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖1.丙烯酰胺 2.丙烯酸 3.雜質(zhì)峰圖3-31 流動(dòng)相為0.1% 磷酸的乙腈-水的

32、標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖1.丙烯酰胺2.丙烯酸由圖3-30和圖3-31可看出，流動(dòng)相中加入0.1% 乙酸有三個(gè)特征峰，但不影響分離效果，而且使得兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜峰時(shí)間間隔增大，有利于實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化。流動(dòng)相中加入磷酸使得丙酰胺和丙烯酸在流動(dòng)相中分配比增大，所以兩個(gè)特征峰都有所提前，但色譜峰拖尾嚴(yán)重，會(huì)影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)性。3.4.4檢測(cè)效果的比較降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)間 3 h圖3-32 流動(dòng)相為0.1% 乙酸的乙腈-水的降解樣品的色譜圖降解時(shí)間 1 h降解時(shí)間 2 h降解時(shí)間 3 h圖3-33 流動(dòng)相為0.1% 磷酸的乙腈-水的降解樣品色譜圖 圖3-32和圖3-33表明：乙腈-水溶液

33、中加入磷酸做流動(dòng)相，在檢測(cè)降解樣品是出峰較多，而且各個(gè)峰距離較近不容易區(qū)分，對(duì)降解產(chǎn)物的分離效果不佳，與甲醇-水中加入0.1% 的磷酸溶液做流動(dòng)相的色譜圖相似。在以0.1% 的乙酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相的色譜條件對(duì)降解樣品中丙烯酰胺和丙烯酸的檢測(cè)效果較好。從色譜圖可以看出，兩種流動(dòng)相的色譜圖中3號(hào)峰都隨著降解時(shí)間的增加含量也增加，4號(hào)峰面積在減小。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明降解產(chǎn)物中生成的該物質(zhì)不容易降解，極性較強(qiáng)。3.5 不同流動(dòng)相對(duì)檢測(cè)丙烯酰胺和丙烯酸含量的影響（1）不同流動(dòng)相檢測(cè)丙烯酰胺的結(jié)果比較由上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知：測(cè)定同一降解樣品中丙烯酰胺的含量實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較好的有流動(dòng)相為ph=7.0的

34、0.9% nacl溶液、流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）溶液、流動(dòng)相為0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液。圖3-34是以上述三種溶液為流動(dòng)相檢測(cè)出同一降解樣品中丙烯酰胺含量的比較，從而得到測(cè)定降解樣品中丙烯酰胺含量的最佳色譜條件。（2）不同流動(dòng)相檢測(cè)丙烯酸的結(jié)果比較由上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知：測(cè)定同一降解樣品中丙烯酸的含量實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較好的有流動(dòng)相為ph=3.8的0.9% 的nacl溶液、流動(dòng)相為0.1% 磷酸的甲醇-水（10:90）溶液、流動(dòng)相為0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液。圖3-35是以上述三種溶液為流動(dòng)相檢測(cè)出同一降解樣品中丙烯酸含量的比較，從而的到測(cè)定降解樣品

35、中丙烯酸含量的最佳色譜條件。如圖3-35。圖 3-34 丙烯酰胺的含量比較 圖3-35丙烯酸的含量比較由圖3-34通過測(cè)定降解樣品中丙烯酰胺的含量比較不難發(fā)現(xiàn)，測(cè)定丙烯酰胺的最佳色譜條件的流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）溶液。說明檢測(cè)丙烯酰胺再流動(dòng)相中加入有機(jī)酸對(duì)極性偏小的丙烯酰胺的分離和含量檢測(cè)有利。由圖3-35可得到高效液相色譜法檢測(cè)丙烯酸的最佳色譜條件是以0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相。由于乙酸的極性比磷酸小，乙酸的加入對(duì)流動(dòng)相的極性影響較小，所以無論測(cè)定丙烯酰胺還是丙烯酸相流動(dòng)相中加入乙酸比較好。 本實(shí)驗(yàn)主要測(cè)定hpam降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量

36、。對(duì)比發(fā)現(xiàn)：雖然在流動(dòng)相為0.1% 乙酸的甲醇-水（10:90）的條件下測(cè)定降解產(chǎn)物中丙烯酰胺的效果較好，但是該流動(dòng)相測(cè)定丙烯酸的含量確與其他流動(dòng)相相差甚遠(yuǎn)，綜合考慮，本實(shí)驗(yàn)確定測(cè)定降解產(chǎn)物中丙烯酰胺和丙烯酸的含量的最佳條件的流動(dòng)相為0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液。結(jié) 論采用已確定的高效液相色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以柱溫25、流速為1ml/min和uv 195nm的色譜條件對(duì)降解樣品中的丙烯酰胺和丙烯酸的含量進(jìn)行測(cè)定。得到以下結(jié)論：1. 以0.1% 乙酸的乙腈-水（20:80）溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)降解樣品中丙烯酰胺和丙烯酸的實(shí)驗(yàn)條件效果最佳。2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明在電解模擬廢水的降解樣品中含有

37、丙烯酰胺和丙烯酸，但是含量較少。在電解過程中，降解的主要產(chǎn)物經(jīng)過紅外掃面，在波數(shù)為2300-2400cm-1的范圍內(nèi)有最強(qiáng)吸收，推測(cè)出此物質(zhì)由cc的重疊鍵或存在cc鍵、cn或nn鍵的化合物。 3. 由降解樣品的不同色譜圖中的峰形也可以看到，主要產(chǎn)物的色譜峰隨著降解時(shí)間的增加含量也在增加，而且保留時(shí)間較短?？梢猿鼋Y(jié)論：該物質(zhì)在電解過程中容易生成，但不容易再繼續(xù)降解，極性較大，需進(jìn)一步研究以確定該種物質(zhì)的種類。參考文獻(xiàn)1 王洪偉，徐雅琴.南瓜功能成分研究進(jìn)展j.食品與機(jī)械，2004，20(4) :55-57. 2 丁云花.南瓜的食療保健價(jià)值及開發(fā)前景j.中國食物與營養(yǎng)，1998(6) :49.3

38、馬紅蓮，楊建一丙烯酞胺遺傳毒性研究進(jìn)展.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，38(8):80-82.4 scoggins m w,miller j w.spectrophotometric determination of water soluble organic amides j.anal chem,1975,47(1):152-154.5 allison j d, wimbeley j w, ely t l. automated and manual method for the determination of polyacrylamides and other anionic polymers,spe 13589 c.proceedings of the spe international symposium on oi