第13章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析

1、第十三章莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第一節(jié)第一節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)莨菪烷類抗膽堿藥物莨菪烷衍生的氨基醇與各種不同有機(jī)酸縮合酯+生物堿一一. 典型藥物典型藥物莨菪烷NH3C含氮的生物堿(氨基)12345678N莨菪烷(Tropane)一一. 典型藥物典型藥物莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)NH3COH12345678NOHH莨菪醇(Tropine)一一. 典型藥物典型藥物H2SO4NH3CH22H2OOHOOH性質(zhì)區(qū)別硫酸莨菪堿H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品熔點(diǎn)、溶解度、旋光度、分子量一一. 典型藥物典型藥物氫溴酸后馬托品HBrNH3CHOOOH一一.

2、典型藥物典型藥物氫溴酸山莨菪堿HBrNH3CHOOHOH一一. 典型藥物典型藥物氫溴酸東莨菪堿3H2OHBrNH3CHOOHOHO一一. 典型藥物典型藥物甲溴酸東莨菪堿BrNH3CHOOHOHOH3C一一. 典型藥物典型藥物丁溴酸東莨菪堿BrNH3CHOOHOHOH3C1.水解性（酯水解生成醇和酸）OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.堿性：阿托品和東莨菪堿結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)含有叔胺氮原子， 較強(qiáng)的堿性，易于酸成鹽，如阿托品pKb1為4.353.旋光性：可用于鑒別阿托品和東莨菪堿一、托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)(Vitaili反應(yīng))HOOCOH+3HNO3HOOCOH

3、NO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙?3滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。莨菪酸硝基化脫羧化共軛結(jié)構(gòu)深紫二、氧化反應(yīng)(與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2O藥物水藥物水解后生成莨菪酸，可與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反應(yīng)式如下：三、與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應(yīng)生物堿在酸性溶液中與重金屬鹽或大分子酸生成難溶性鹽、復(fù)鹽或配合物沉淀。四、光譜

4、鑒別法紫外光譜法一般通過比較藥物的 或吸收光譜的一致性來進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)。minmax、四、光譜鑒別法紅外光譜法CHP收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進(jìn)行鑒別五、色譜鑒別法色譜法一般用于已知生物堿的鑒別，主要有TLC、HPLC、GC、PC等六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在通過加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色一、氫溴酸東莨菪堿制備工藝洋金花粗粉乙醇/滲漉滲漉液減壓蒸餾浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3, CHCl3/提取總生物堿Na2CO3, CHCl3/分離東莨菪堿HBr/成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C2H5OH

5、/精制成品根據(jù)其制備工藝，本品可通過酸度、其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進(jìn)行控制一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查1. 酸度如氫溴酸東莨菪堿為弱酸弱堿鹽、通過其5%的水溶液pH為4.05.5可控制酸性雜質(zhì)一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查2. 易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色NH3CHOOCH2(雜質(zhì))NH3CHOOOCH2(雜質(zhì))一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查3. 其它生物堿本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。二、硫酸阿托品硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢

6、查CHP用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保留時(shí)間來控制雜質(zhì)限度莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測(cè)定方法要專屬、靈敏酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色譜法有機(jī)相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 酸性染料比色法在一定的pH條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進(jìn)而可用分光光度法進(jìn)行測(cè)量酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對(duì)，且可以被有機(jī)溶劑定量萃取，通過測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)的特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)

7、行含量測(cè)定應(yīng)用示例氫溴酸東莨菪堿片的含量測(cè)定 精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2ml，分別置預(yù)先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液4ml，振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外-可見分光光度法，在420nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得。影響因素1. 水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 pH過低抑制酸性染料的解離、使酸性陰離子濃度過低影響離子對(duì)的形成； pH過高，有機(jī)藥物呈游離態(tài)，也抑制離子對(duì)的形成，因此須有一個(gè)最佳pH值存在，使離子對(duì)生成最有利。 其選擇方法一般根據(jù)藥物與染料的pK值及水相與有機(jī)相的分配系數(shù)而定影響因素2. 2. 酸性染料及其濃度：酸性染料及

8、其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量。定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量。一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以；一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以；但濃度過高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，但濃度過高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測(cè)定結(jié)果。往往影響測(cè)定結(jié)果。影響因素3.有機(jī)溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想；一般應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子對(duì)萃取效率高、能與離子對(duì)形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。影響因素4. 水分的影響： 影響結(jié)果，脫水劑或?yàn)V紙除去水分5. 酸性染料里面的有色雜質(zhì) 影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去二.

9、非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶劑中進(jìn)行的酸堿滴定測(cè)定法。主要用來測(cè)定有機(jī)堿及其氫鹵酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽以及有機(jī)酸堿金屬鹽類的含量。 硫酸是二元酸，在水溶液中可以發(fā)生二級(jí)解離，生成SO42-。但是冰醋酸非水介質(zhì)中，只能發(fā)生一級(jí)解離，生成HSO4-,即只提供一個(gè)H+。所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，可用高氯酸滴定液直接滴定。 (BH+)2 SO42- + HClO4 (BH+)ClO4 + (BH+) HSO42- 硫酸阿托品與高氯酸反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量摩爾比為1:1.三.高效液相色譜法 莨菪烷類藥物莨菪烷類藥物HPLCHPLC分析測(cè)定時(shí)，常采用烷基磺酸鹽作為分析測(cè)定時(shí)，常采用

10、烷基磺酸鹽作為離子對(duì)試劑，流動(dòng)相一般呈酸性，以利于堿性藥物的質(zhì)子離子對(duì)試劑，流動(dòng)相一般呈酸性，以利于堿性藥物的質(zhì)子化。化。ChP2010ChP2010中采用中采用HPLCHPLC測(cè)定氫溴酸東莨菪堿測(cè)定氫溴酸東莨菪堿及其片劑和注射液的含量。及其片劑和注射液的含量。測(cè)定測(cè)定丁溴酸東莨菪堿的有關(guān)物質(zhì)丁溴酸東莨菪堿的有關(guān)物質(zhì)及及其膠囊和注射液其膠囊和注射液含量時(shí)，均采用含量時(shí)，均采用十十二烷基硫酸鈉二烷基硫酸鈉作為離子對(duì)。作為離子對(duì)。BP2009BP2009中中HPLCHPLC測(cè)定測(cè)定硫酸阿托品制劑硫酸阿托品制劑（滴眼液、片劑和注射劑）含量時(shí)，（滴眼液、片劑和注射劑）含量時(shí)，均采用均采用磺基丁二酸鈉二辛脂磺基丁二酸鈉二辛脂作為離子對(duì)試劑（作為離子對(duì)試劑（USPU