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1、1尿沉渣分析參數(shù)的臨床意義及影響因素2尿沉渣分析儀原理 尿沉渣分析儀是使用流式細(xì)胞和電阻抗原理。當(dāng)一個(gè)尿液標(biāo)本被稀釋液稀釋并以染色后,靠液壓作用通過(guò)鞘液流動(dòng)池。當(dāng)反應(yīng)樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動(dòng)室時(shí),它被一種無(wú)粒子顆粒的鞘液包圍,然后,每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形式通過(guò)池的中心軸線,在這里每個(gè)尿液細(xì)胞被氬激光束來(lái)照射。每個(gè)細(xì)胞有不同程度熒光強(qiáng)度,從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光主要反映細(xì)胞的是定量特性(如細(xì)胞膜、核膜、線粒體和核酸)、散射光強(qiáng)度(如前向角散射光)完成比例反映細(xì)胞大小,電阻的大小主要與細(xì)胞體積成比例。儀器正是將這種熒光、散射光和電阻抗的信號(hào)一起綜合分析,得出細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞橫切面積、染色片段

2、的長(zhǎng)度、細(xì)胞容積等信息。使每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出直方圖和散射圖,然后儀器通過(guò)分析每個(gè)細(xì)胞信號(hào)波形的特性來(lái)進(jìn)行分類。3UF對(duì)臨床有哪些有用價(jià)值 目標(biāo)樣本篩選,就是按照一定篩選條件,將需要的目標(biāo)樣本快速選出,對(duì)有問(wèn)題的樣本再仔細(xì)鏡檢。篩選的目的是為了提高效率,減少無(wú)效操作。根據(jù)NCCLS的規(guī)定尿樣品必須在2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。如果不進(jìn)行篩選,檢驗(yàn)科承擔(dān)不了巨大樣本量的規(guī)范的鏡檢工作,這樣不僅尿樣放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確,而且報(bào)告不及時(shí)也將影響病人和臨床;如果強(qiáng)行承擔(dān)大樣本量的鏡檢,將出現(xiàn)人為原因的檢驗(yàn)質(zhì)量下降,人為誤差加大,結(jié)果的可信性下降。所以我們講質(zhì)量?jī)?yōu)先,兼顧效率。給臨床提供定量數(shù)值。4UF

3、是否可以代替尿液干化學(xué)檢測(cè) 不可以。建議進(jìn)行兩者交叉檢驗(yàn),觀察結(jié)果。同時(shí)也應(yīng)該結(jié)合顯微鏡及臨床診斷。尿干化學(xué)法是通過(guò)化學(xué)方法提供尿液檢查的信息。但干擾因素很多。如紅細(xì)胞檢查中采取隱血的檢查其原理是利用RBC中Hgb具有過(guò)氧化物酶的活性,使色原氧化而產(chǎn)生顏色變化。但尿中出現(xiàn)的氧化污染物、易熱酶、微生物產(chǎn)生的過(guò)氧化物會(huì)引起它的假陽(yáng)性。對(duì)白細(xì)胞的檢查采取酯酶反應(yīng)的原理,但淋巴細(xì)胞內(nèi)不含酯酶所以無(wú)法被檢出。利用亞硝酸反應(yīng)的原理來(lái)檢測(cè)細(xì)菌,但部分細(xì)菌不含有亞硝酸鹽還原酶如假單孢類細(xì)菌就無(wú)法被檢出等。當(dāng)紅細(xì)胞全溶解時(shí)、尿液蛋白、酮體、尿膽紅素等只能靠干化學(xué)檢出。所以沉渣的檢測(cè)不能完全代替化學(xué)檢測(cè),尿液的一

4、體化檢測(cè)應(yīng)該受到重視。5臨床意義6789101112尿液檢驗(yàn)質(zhì)量控制 1取尿時(shí)間住院患者尿常規(guī)最好留取清晨第一次尿,顧可梁教授提出也可在上午7:008:00留取尿液作為第二次晨尿。門診或急診患者可隨時(shí)留取,但在標(biāo)本容器上必須注明留取時(shí)間。 2容器裝備使用一次性有蓋尿標(biāo)本容器,改變目前敞開無(wú)蓋尿杯。 3取尿指導(dǎo)(見表)13標(biāo)本類型應(yīng)用范圍 隨機(jī)尿 常規(guī)篩查 晨尿 常規(guī)篩查、妊娠試驗(yàn)、直立性蛋白尿 餐后2小時(shí)尿 糖尿病監(jiān)測(cè)、葡萄糖試驗(yàn) 葡萄糖耐量試驗(yàn) 與血液標(biāo)本一起做尿糖耐量 24h尿 化學(xué)成份定量 導(dǎo)尿 細(xì)菌培養(yǎng) 中段清潔尿 常規(guī)篩查、細(xì)菌培養(yǎng) 穿刺尿 細(xì)菌培養(yǎng)、細(xì)胞學(xué)檢查 三杯試驗(yàn)標(biāo)本 尿道炎

5、、前列腺炎、膀胱炎 14尿液標(biāo)本保存 (1)尿液標(biāo)本留取后應(yīng)及時(shí)送檢,以免細(xì)菌繁殖及有形成分破壞。凡留取超過(guò)2h、示注明留尿時(shí)間及尿量不夠的標(biāo)本應(yīng)拒收。檢驗(yàn)科收到合格的尿標(biāo)本后應(yīng)簽收,在送檢單位上注明收到時(shí)間,并應(yīng)及時(shí)檢查。15尿液標(biāo)本保存 ( 2)由于尿液中化學(xué)成分和細(xì)胞成分的不穩(wěn)定性,為保證分析結(jié)果的可靠性,尿液分析建議在收集標(biāo)本2h內(nèi)進(jìn)行,一般不推薦使用化學(xué)防腐劑。如延誤檢驗(yàn),應(yīng)將標(biāo)本置冰箱保存,適宜于一些化學(xué)成分的檢測(cè)(膽紅素和尿膽原除外),但會(huì)沉淀無(wú)晶形尿酸鹽和磷酸鹽,使顯微鏡視野模糊,如果同時(shí)做培養(yǎng),在運(yùn)送及處理過(guò)程中應(yīng)保存于冷藏條件下,如作多項(xiàng)分析應(yīng)將充分混勻的尿分作幾份,按用途

6、作不同處理。作為防腐措施冰箱保存的時(shí)間長(zhǎng)短要根據(jù)各個(gè)尿檢測(cè)項(xiàng)目,作為防腐措施的冷藏時(shí)間沒有統(tǒng)一的規(guī)定,但多數(shù)參考書推薦以6h為宜。16尿液標(biāo)本保存 (3)部分需留取24h尿標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)的項(xiàng)目,需在尿標(biāo)本中加適量防腐劑,但應(yīng)根據(jù)不同檢查目的而選用不同類型的防腐劑(大多使用400g/L的甲醛溶液,每升尿液加入5ml,應(yīng)注意甲醛過(guò)量時(shí)可與尿素產(chǎn)生沉淀物,干擾顯微鏡檢查),在使用防腐劑時(shí)必須慎重選擇,因某些防腐劑會(huì)干擾酶的測(cè)試。尿液標(biāo)本保存不當(dāng)或放置過(guò)久對(duì)試帶法和鏡檢結(jié)果均有影響。17尿液標(biāo)本保存18標(biāo)本檢測(cè) 尿液標(biāo)本收集后必須在2h內(nèi)(冷藏標(biāo)本必須在6h內(nèi))完成檢測(cè)。對(duì)于尿液檢測(cè)時(shí)間的問(wèn)題,有人研究

7、將1000份尿樣,置25下1h僅1份渾濁,2h有2份渾濁,3h時(shí)有997份變渾濁,故提出尿樣應(yīng)以2h內(nèi)檢測(cè)完畢為宜。尿液能否在2h內(nèi)檢查完畢,是尿常規(guī)檢查質(zhì)量的關(guān)鍵,尤其住院患者要做到尿液收集、運(yùn)送并在2h內(nèi)測(cè)定完畢,存在很多客觀困難,但一切事在人為,要做好住院患者及護(hù)士的宣傳工作,使他們了解遵照醫(yī)囑留取尿標(biāo)本、及在留尿容器上記下實(shí)際留尿時(shí)間的重要性,同時(shí)必須在2h內(nèi)送到檢驗(yàn)科,凡無(wú)特殊注明而超過(guò)2h的尿標(biāo)本及尿量不夠者應(yīng)拒收。 19尿干化學(xué)分析的影響因素 1.尿液放置時(shí)間如酮體,新鮮尿液內(nèi)以乙酰乙酸為主,隨放置時(shí)間越長(zhǎng),乙酰乙酸越少,而丙酮和羥丁酸越多;又如,紅細(xì)胞、白細(xì)胞的破壞,葡萄糖、蛋

8、白成分的分解等,均可能造成同一份標(biāo)本在不同時(shí)間出現(xiàn)不同結(jié)果的現(xiàn)象。(如圖)20尿樣保存不當(dāng)或放置過(guò)久對(duì)結(jié)果影響2122尿干化學(xué)分析的影響因素 維生素的干擾在應(yīng)用維生素后,可造成干化學(xué)法測(cè)定尿液紅細(xì)胞、葡萄糖、膽紅素、亞硝酸鹽等的假陰性,班氏尿糖定性試驗(yàn)假陽(yáng)性。所以有專家認(rèn)為:在大劑量口服或靜脈滳注維生素后,原則上在h內(nèi)不要留取尿液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)。必須檢驗(yàn)時(shí),要靜脈滴注劑量、開始滴注時(shí)間和留取尿樣時(shí)間,以便檢驗(yàn)人員及時(shí)采用適當(dāng)措施以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。23尿干化學(xué)分析的影響因素 青霉素的影響大劑量應(yīng)用青霉素后,可造成尿蛋白檢測(cè)干化學(xué)法假陰性;磺柳酸法假陽(yáng)性,其機(jī)制未明,但此現(xiàn)象應(yīng)引起相關(guān)人員重視。

9、尿液的影響干化學(xué)法進(jìn)行尿比重和尿蛋白的測(cè)定都基于模塊上的變化(如下圖)2425尿液PH對(duì)比重的干化學(xué)法測(cè)定產(chǎn)生影響,這可能是尿PH增高時(shí),尿液中的氫氧離子中和掉一部分由Na+離子解離產(chǎn)生的酸性基團(tuán),而使比重結(jié)果偏低,因此,當(dāng)尿PH7,尿比重應(yīng)增加0.005作為補(bǔ)償;而當(dāng)尿液PH9.0時(shí),可引起干化學(xué)法尿蛋白測(cè)定假陰性。不論是生理、病理,還是藥物引起的尿液的PH過(guò)高或過(guò)低均會(huì)引起尿蛋白和比重的檢驗(yàn)誤差。實(shí)際上,試帶法尿PH檢測(cè)有兩個(gè)含義,一是臨床資料,提示體內(nèi)酸堿平衡變化,二是質(zhì)控資料,提示尿比重和尿蛋白的測(cè)定結(jié)果是否受PH的干攏。26尿沉渣的影響因素 一、紅細(xì)胞檢測(cè)的影響因素從機(jī)外因素和機(jī)內(nèi)因

10、素來(lái)分析:機(jī)外因素。尿樣本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),結(jié)晶增加,細(xì)菌繁殖,導(dǎo)致RBC假性升高;酵母樣細(xì)胞,如白色念珠球菌等增多,導(dǎo)致RBC假性升高。溶血,樣本污染,灰塵,酒精等進(jìn)入。藥物,尤其是尿中有含有熒光染料類的藥物的影響,而檢驗(yàn)人員和醫(yī)生都不知道。機(jī)內(nèi)因素。試劑長(zhǎng)時(shí)間過(guò)期變質(zhì),管道污染等。紅細(xì)胞檢測(cè)的篩選設(shè)置問(wèn)題,Negative Lmits,Review Limit設(shè)定值過(guò)低。 27尿沉渣的影響因素二、管型、白細(xì)胞的影響因素隨著時(shí)間的延長(zhǎng),尿中細(xì)菌增多,粘液絲增多,白細(xì)胞碎片增加凝集并被作為管型計(jì)數(shù)。所以使用UF 要強(qiáng)調(diào)新鮮原尿(有時(shí)當(dāng)細(xì)菌和粘液絲在同一時(shí)間通過(guò)時(shí)被作為假管型Path.CAST計(jì)數(shù)在內(nèi)。),白細(xì)胞放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)容易破碎28尿沉渣的影響因素 三、對(duì)細(xì)菌檢測(cè)的影響因素UF對(duì)一個(gè)尿液標(biāo)本的檢查需要23秒。在開始的2秒內(nèi)進(jìn)行高敏感度(FSC)的細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)。也就是在這個(gè)時(shí)間段中得到的顆粒計(jì)數(shù)作為細(xì)菌的結(jié)果報(bào)告。必須指出的是由于UF是從顆粒大小,染色性上進(jìn)行判斷,所以尿中類似細(xì)菌的細(xì)小顆粒(如紅細(xì)胞碎片等小顆粒)UF都會(huì)把它們

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