腎綜顆粒對阿霉素腎病大鼠形態(tài)和功能的影響

1、腎綜顆粒對阿霉素腎病大鼠形態(tài)和功能的影響 作者：劉霞 黃巖杰 吳文先 陳團營【摘要】 探討腎綜顆粒對阿霉素腎病大鼠腎組織形態(tài)及功能的影響。方法利用尾靜脈注射阿霉素（ADR）建立大鼠腎病模型，灌服腎綜顆粒，檢測尿蛋白定量、血清與腎組織勻漿中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量及觀察腎臟病理形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果腎綜顆粒能有效降低尿蛋白，降低血清及腎組織MDA水平，提高SOD活力，改善病理損傷。結(jié)論腎綜顆?？梢詼p少尿蛋白，對抗自由基引起的脂質(zhì)過氧化損傷，明顯改善阿霉素腎病大鼠腎臟病理形態(tài)和功能。 【關(guān)鍵詞】 腎綜顆粒；阿霉素腎??；病理性態(tài) Effect of Shenzong Granule

2、 on Shape and Function of Rats with Adriacin NephropathyLiu Xia，Huang Yanjie，WuWenxian，et al First Hospital Affiliated to Henan College of TCM,Zhengzhou（450005）ey words：Shenzong Granule；adriacin nephropathy；pathological form；function腎綜顆粒是我們多年來治療小兒腎病綜合征的有效良方，臨床上取得了滿意的效果。本實驗旨在觀察腎綜顆粒對阿霉素腎病大鼠脂質(zhì)過氧化損傷、病理形

3、態(tài)學(xué)等方面的影響，探討其對腎病綜合征的治療作用。1 實驗材料1.1 實驗動物及分組雄性SD大鼠，體重（150±10）g，30只，由河南省實驗動物中心提供（合格證號：醫(yī)動字第410101號）。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，無異常發(fā)現(xiàn)，30只大鼠隨機分為3組：對照組、模型組、治療組，每組10只。1.2 實驗藥物及試劑腎綜顆粒主要成份為黃芪、茯苓、生地、澤瀉、丹參、水蛭等，由河南中醫(yī)學(xué)院一附院制劑中心提供，臨用時用雙蒸水制成混懸液，使1ml含生藥2.5g；阿霉素由意大利法瑪西普強公司生產(chǎn)，規(guī)格10mg/瓶。SOD及MDA測試盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。2 實驗方法2.1 動物造模及給藥方法采用阿霉素

4、誘導(dǎo)的腎病綜合征模型。實驗第二周，模型組和治療組大鼠按6.5mg/kg阿霉素經(jīng)尾靜脈注射一次復(fù)制腎病綜合征模型。每天用試紙法檢測尿蛋白情況，若尿蛋白出現(xiàn)，并且呈進行性加重，尿蛋白定性3+，證明造模成功。造模一周后各組均灌胃給藥，對照組、模型組按10ml/（kg·d）蒸餾水灌胃；治療組按腎綜顆粒25g生藥/（kg·d）灌胃（溶入蒸餾水，1ml含生藥2.5g），療程均為6周。2.2 檢測指標及方法 （1）觀察大鼠的精神狀況、體重體毛、飼料量、飲水量、二便情況等。（2）尿蛋白檢測：分別于造模前，造模后第2、4、7周各測定24h尿蛋白定量1次，采用磺柳酸法。（3）血清與腎組織勻漿中

5、SOD、MDA于實驗結(jié)束時摘眼球取血，2ml/只，觀察血清SOD及MDA改變；處死大鼠后即剖腹取腎臟，剪下腎皮質(zhì)1小塊，用冰冷生理鹽水洗凈殘血，濾紙吸干，稱重，用生理鹽水按19（wv）在冰浴下制成約10%的組織勻漿（電動勻漿器），在最大功率300W的條件下，間斷勻漿10min，將勻漿液置低溫冷凍離心機中，以20000rpm離心10min，取上清液，置離心管中，低溫保存，用于測定腎組織中的SOD及MDA。SOD活性測定采用黃嘌呤氧化酶法，MDA測定采用硫巴比妥酸法，均嚴格按照試劑盒說明書進行。（4）腎臟病理學(xué)檢查常規(guī)石蠟切片，進行HE和PAS染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠腎小球及腎間質(zhì)的變化情況

6、；常規(guī)電鏡標本制作，用日立Ho7500型透射電鏡觀察腎臟病理變化。2.3 統(tǒng)計學(xué)處理所有的統(tǒng)計檢驗均采用雙側(cè)檢驗。數(shù)值變量采用均數(shù)（x）±標準差（s），組間比較采用單因素方差分析。3 實驗結(jié)果3.1 實驗大鼠的一般情況造模3d后，模型組和治療組大鼠出現(xiàn)不同程度的腹瀉、精神不佳、飼料量和飲水量減少、陰囊水腫、毛發(fā)蓬松、生長遲緩、消瘦等表現(xiàn)，尤以模型組最為顯著。在實驗過程中模型組有3只大鼠死亡，治療組有2只死亡。死亡大鼠均有嚴重腹瀉，消瘦明顯，其中有2只出現(xiàn)鼻部血性分泌物。3.2 對大鼠尿蛋白定量的影響通過以上實驗結(jié)果可以看出，治療組與模型組比較，具有顯著性差異（P0.05），說明腎綜顆

7、粒具有減少尿蛋白的作用。 表1 各組大鼠24h尿蛋白定量的比較（略） 與模型組比較，P0.053.3 對大鼠血清及腎組織勻漿SOD、MDA的影響表2結(jié)果表明：治療組能降低血清及腎組織MDA水平，提高SOD活力，與模型組比較有顯著性差異（P0.05）。表2 各組大鼠血清及腎組織勻漿SOD、MDA水平的比較（略）與模型組比較，P0.053.4 對大鼠病理形態(tài)學(xué)方面的影響光鏡下可見對照組腎小球系膜基質(zhì)無增生，腎小管管腔正常，腎間質(zhì)小血管無改變；模型組腎小球系膜基質(zhì)增生明顯，腎小管蛋白管型，腎間質(zhì)血管瘀血嚴重；治療組系膜輕度增生，腎小管蛋白管型較輕，病變程度較模型組明顯減輕。對照組電鏡觀察腎小球基底膜

8、光滑均勻，未見增厚，足突清晰完整、未見融合，血管腔開放好；模型組腎小球基底膜偶見增厚，足突融合嚴重，與對照組比較有明顯差異；治療組腎小球基膜平滑，未見增厚，足突融合程度與模型組比較減輕。4 討論 本實驗?zāi)Ｐ徒M血清及腎組織MDA均明顯升高，而SOD活力明顯下降，說明在腎病綜合征大鼠模型中確實存在過量的活性氧自由基及脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物，并且機體抗氧化能力降低。與模型組比較，治療組能降低血清及腎組織中MDA水平，提高SOD活力，所以我們不難發(fā)現(xiàn)腎綜顆粒能夠提高自由基清除酶的活性，增強機體的抗氧化能力，減輕脂質(zhì)過氧化引起的損傷。病理形態(tài)學(xué)觀察治療組大鼠上皮細胞足突融合程度較模型組明顯減輕，表明腎綜顆粒能夠減少上皮細胞足突融合、抑制系膜基質(zhì)的增生，改善腎臟的病理損害。由此我們推測，腎綜顆粒能夠有