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文檔簡(jiǎn)介

1、丙型肝炎的免疫測(cè)定目前最廣泛的是抗hcv測(cè)定,多采用elisa法篩檢,已經(jīng)經(jīng)歷了第一代、第二代和第三代試劑的發(fā)展過(guò)程。第一代是1990年美國(guó)ortho和abbott公司用c100-3抗原生產(chǎn)出來(lái)的,并廣泛應(yīng)用于獻(xiàn)血員的篩檢及臨床hcv感染的檢測(cè)。隨著對(duì)hcv研究的不斷深入,hcv的特異性核心區(qū)抗原p22(c22)和ns3區(qū)抗原c33c表達(dá)成功,第二代試劑應(yīng)用而生,靈敏度和特異性有所提高。第三代試劑所用的抗原由核心區(qū)的c22、ns3區(qū)的c33c、ns4區(qū)的5-1-1和c100及ns5抗原組成,檢測(cè)的靈敏度和特異性又得到改善。盡管已經(jīng)發(fā)展到第三代,但仍有不足,主要是由于批準(zhǔn)上市的試劑中,包被抗原有

2、多種不同的組合,而且每種抗原片段的濃度有較大差別,一旦出現(xiàn)抗原匹配不合或抗 原相互干擾而影響檢測(cè)結(jié)果,造成判斷困難,臨床實(shí)際工作中存在大量的不確定和假陽(yáng)性結(jié)果。丙型肝炎病毒核心抗原的檢測(cè)可以直接從患者血清中查出病毒抗原, 將目前使用hcv抗體檢測(cè)的窗口期(70天)縮短為平均35天左右,便于hcv感染的早期診斷和確認(rèn)診斷。 丙肝抗原(hcvcag)丙肝抗體(hcvab)丙肝rna(hcvrna)簡(jiǎn)要意義-沒(méi)有感染丙肝病毒或早于14天感染,低于試劑最低檢測(cè)靈感度-+-沒(méi)有感染丙肝病毒或丙肝病毒感染后病毒已清除+-+丙肝病毒感染早期,丙肝抗體檢測(cè)窗口期,有傳染性-+早期丙肝病毒感染,12-

3、14天感染,低于抗原最低檢測(cè)靈感度,有傳染性+-早期丙肝病毒感染,hcv rna103個(gè)拷貝或rna樣本降解,有傳染性+慢性丙肝病毒感染,有傳染性 抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)的必要性:提高檢出率減少抗檢窗口期漏診率(丙肝游離核心抗原檢測(cè)時(shí)間段:感染后14天至70天可檢出,70天后丙肝游離核心抗原消失丙肝抗體產(chǎn)生,抗體可檢測(cè)時(shí)間段為70天后產(chǎn)生)。建議:抗原和抗體聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí),應(yīng)增加檢測(cè)hcvrna或增加其它hcv確認(rèn)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)或檢測(cè)兩次以上都是陽(yáng)性結(jié)果時(shí)即可確診。 1病毒復(fù)制更為理想的新的指標(biāo):是一種比hbeag更為先進(jìn)可靠的病毒復(fù)制的指標(biāo)。  2彌補(bǔ)因

4、病毒變異和其它原因造成的五項(xiàng)檢測(cè)的缺陷:病毒變異后,雖然其病毒仍要復(fù)制,但乙肝五項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果hbeag陰性/hbeab陽(yáng)性。造成臨床上的誤診(認(rèn)為此類病人沒(méi)有病毒復(fù)制、不需要抗病毒治療)。加查前s1抗原為陽(yáng)性,則能提示病毒仍然在活動(dòng),應(yīng)予以治療。 3乙肝病毒感染性強(qiáng)弱的指標(biāo):前s1抗原為陽(yáng)性為病毒毒性強(qiáng)、容易入侵肝細(xì)胞的征象。 4機(jī)體對(duì)乙肝病毒免疫反映強(qiáng)弱并由此引起的肝細(xì)胞免疫損害的指標(biāo)(這是單純檢測(cè)hbvdna所無(wú)法做到的。hbvdna只是病毒復(fù)制的指標(biāo),但不能體現(xiàn)病毒的感染性及其所可能引發(fā)的免疫損害程度)。 5乙肝病毒血清學(xué)最早指標(biāo):早于表面抗原出現(xiàn)、早于轉(zhuǎn)氨酶

5、升高。 6空窗期的補(bǔ)檢措施、篩查獻(xiàn)血員必要項(xiàng)目之一。 7干擾素敏感與否的參考指標(biāo):治療前、前s1抗原滴度低者,干擾素敏感,治療過(guò)程中前s1抗原滴度下降明顯。治療前、前s1抗原滴度高者,干擾素不敏感,治療過(guò)程中前s1抗原滴度下降不明顯。 8乙肝治療有效的最早轉(zhuǎn)陰指標(biāo),早于hbeag陰轉(zhuǎn)。 9預(yù)示乙肝預(yù)后的最準(zhǔn)確指標(biāo):前s1抗原與肝臟的病理進(jìn)展高度相關(guān)。前s1陰轉(zhuǎn),預(yù)后好;前s1抗原持續(xù)陽(yáng)性,則較易進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌。這一指標(biāo)比e抗原與hbvdna更能提示乙肝病人的預(yù)后。 10乙肝病毒攜帶者母嬰傳播的可能性評(píng)估。hbsaghbsabhbeaghb

6、eabhbcabpre-s1ag簡(jiǎn)要意義乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗體乙型肝炎e抗原乙型肝炎e抗體乙型肝炎核心抗體乙肝病毒前s1抗原h(huán)bsag是乙肝病毒標(biāo)志物,陽(yáng)性提示乙肝攜帶;hbeag、pre-s1ag、陽(yáng)性提示乙肝病毒復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng),是治療療效評(píng)價(jià)的重要指標(biāo);hbsab、hbeab陽(yáng)性提示機(jī)體產(chǎn)生免疫力抵抗病毒,趨于恢復(fù)。-沒(méi)有乙肝病毒感染,不具備免疫力-+-接種疫苗,乙肝恢復(fù),具備免疫力+-表面抗原攜帶;急性乙肝病毒感染潛伏期后期+-+-+急性乙肝早期,病毒復(fù)制,有傳染性強(qiáng)+-+-+急慢性乙肝,病毒復(fù)制,有傳染性強(qiáng)+-+-急慢性乙肝,沒(méi)有傳染性或傳染性弱+-+-急慢性乙肝,沒(méi)有傳

7、染性或傳染性弱+-+急慢性乙肝,病毒復(fù)制有傳染性,乙型肝炎e抗原變異-+-乙肝核心抗隱性攜帶,有乙肝既往有感染史-+-急性乙肝恢復(fù)期或既往有感染史-+-+-乙肝恢復(fù)期或既往有輕度乙肝病毒感染史+-+-慢乙肝病毒感染攜帶,沒(méi)有傳染性或傳染性弱+-+急性乙肝趨于恢復(fù),表面抗原攜帶,病毒復(fù)制,有傳染性強(qiáng)-+提示乙肝病毒早期感染,有傳染性前s1:1.主要存在于完整乙肝病毒表面  2.肝細(xì)胞膜上存在有前s1蛋白受體 3.誘導(dǎo)乙肝病毒吸附在肝細(xì)胞表面  4.促使病毒進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵詞:乙肝檢查結(jié)果模式乙運(yùn)用 trfia 對(duì)乙肝五項(xiàng)進(jìn)行定量 檢測(cè)極 大地彌補(bǔ)了酶標(biāo)法定

8、性檢測(cè)的不足,成為乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志 物現(xiàn)代 臨床檢驗(yàn)的發(fā)展方向,新波公司為此研制了 hbv 的 trfia 試劑盒,并獲得國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),這是一個(gè)可喜的成果,它將推動(dòng)我國(guó)乙肝防治工作和進(jìn)展,同時(shí)亦將推動(dòng) trfia 技術(shù)的普遍應(yīng)用。 trfia 在 hbv 感染診斷及免疫力監(jiān)測(cè)方面的定量檢測(cè)具有如下優(yōu)越性:     極大地提高了檢測(cè)的靈敏度   時(shí)間分辨熒光免疫定量技術(shù)( trfia )檢測(cè) hbsag 靈敏度可達(dá) 0.2ng/ml, 而酶標(biāo)( eiasa )檢測(cè)的靈敏度是 2ng/ml ,極大地提高檢測(cè)的靈敏度。因此,在急性乙肝早期能及早檢出 hbsa

9、g ,確證 hbv 感染,縮短窗口期;其次,可發(fā)現(xiàn)低濃度 hbsag 攜帶者;在部分慢性乙肝患者中,由于機(jī)體缺乏對(duì) hbv 包膜蛋白的免疫應(yīng)答, hbsag 表達(dá)較低,酶標(biāo)檢測(cè)可出現(xiàn) hbsag 和 hbsab 均陰性的情況, trf 技術(shù)則可避免這些情況的發(fā)生,為正確判斷病情提供依據(jù)。    能動(dòng)態(tài)觀察療效和監(jiān)測(cè)病情  1 )定量分析 hbsag 和 hbsab 的濃度變化,可預(yù)見(jiàn)急性乙肝是否處于恢復(fù)期。如 hbsag 濃度降低, hbsab 濃度逐漸升高,可說(shuō)明病情正往恢復(fù)期發(fā)展;反之, hbsag 濃度處于較高水平或上升趨勢(shì),而 hbsab 一直處于較低水平

10、,則易發(fā)展為慢性乙肝或病毒攜帶者。   2 )定量分析 hbeag 和 hbeab 的濃度變化,可反映病情變化和治療效果。定量測(cè)定能明確檢測(cè) hbeag 向 hbeab 轉(zhuǎn)換的時(shí)期,即表現(xiàn)為 hbeag 濃度下降和 hbeab 升高的過(guò)程。高濃度的 hbeag 還可間接提示病毒處于高復(fù)制狀態(tài),具有較高的傳染性。高濃度的 hbeab 一方面提示病情好轉(zhuǎn),而在某些時(shí)候(如肝功能指標(biāo)很差)則可能與肝壞死、肝硬化、肝癌有關(guān)。   3 )hbcab 濃度的高低可反映病毒感染的狀態(tài)。高濃度的抗 - hbc 提示乙肝急性感染,恢復(fù)期濃度降低。慢性 乙肝呈抗 - hbc

11、 持續(xù)高濃度。而低濃度的抗 - hbc 一般為恢復(fù)期或既往感染。   4 )有利于對(duì)慢性肝炎活動(dòng)性或非活動(dòng)性的判斷。非活動(dòng)性慢性乙肝各項(xiàng)指標(biāo)相對(duì)穩(wěn)定,活動(dòng)性往往呈現(xiàn)進(jìn)行性變化。  關(guān)鍵詞:時(shí)間分辨技術(shù)定量乙肝兩對(duì)半 肝 兩 對(duì) 半 簡(jiǎn) 明 臨 床 意 義 hbsag hbsab hbeag hbeab hbcab 簡(jiǎn)明臨床意義 + - - - - 急性hbv感染潛伏期后期,病毒攜帶者 + - + - - 急性乙肝早期,傳染性強(qiáng) + - + - + 急、慢性乙肝,病毒復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng) + - - - + 急、慢性乙肝 + - - + + 急、慢性乙肝,傳染性弱 -

12、 - - - + hbv隱性攜帶者,窗口期,有既往感染史 - - - + + 急性hbv感染恢復(fù)期或有既往感染史 - + - - - 接種乙肝疫苗后或hbv感染后康復(fù),已有免疫力 - + - + + 乙肝恢復(fù)期,已有免疫力 檢驗(yàn)項(xiàng)目 正常參考 臨床意義 乙肝表面抗原(hbsag) 2ml不抗凝全 血 陰性 hbv病毒感染的依據(jù) 梅毒非特異性抗體(trust) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性時(shí)建議加做“梅毒確證試驗(yàn)” 梅毒確證試驗(yàn)(tp-ab,tp·pa) 2ml不抗凝全 血 <1:80 增高:梅毒的主要診斷指標(biāo) 肥達(dá)氏反應(yīng)(widals) 2ml不抗凝全 血 o、a、b<

13、1:80h<1:160 o、h增高:傷寒??;a、b、c增高:副傷寒?。p份血清測(cè)定,后次凝集價(jià)增高更有診斷價(jià)值) 外斐氏反應(yīng)(weil-felix) 2ml不抗凝全 血 <1:160 增高:流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病 冷凝集試驗(yàn) 2ml不抗凝全 血 <1:32 增高:冷凝集素病、支原體肺炎、原發(fā)性非典型性肺炎、免疫性溶血性貧血 嗜異性凝集試驗(yàn) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肺炎、白血病 抗eb病毒殼抗原iga(vca-iga) 2ml不抗凝全 血 <1:5 增高:eb病毒感染、鼻咽癌 抗eb病毒早期抗原iga(ea-iga) 2

14、ml不抗凝全 血 <1:5 增高:eb病毒感染、對(duì)鼻咽癌的診斷比vca-iga特異性好 肺炎支原體抗體(a-pm) 2ml不抗凝全 血 <1:40 增高:支原體肺炎 艾滋病抗體(抗-hiv) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:hiv感染、非特異性試驗(yàn),只用于初篩試驗(yàn) 結(jié)核抗體(tb-ab) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:各種結(jié)核病 抗核抗體(ana) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:sle、混合性結(jié)締組織病、硬皮病、皮肌炎、干燥綜合癥、ra、慢活肝等 ena多肽抗體譜 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:sle、混合性結(jié)締組織病、硬皮病、皮肌炎、干燥綜合癥等 抗雙鏈dna抗體( ds-

15、dna抗體) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:診斷sle較特異性的診斷指標(biāo) 抗平滑肌抗體(sma) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:自身免疫性(狼瘡樣)肝炎、慢活肝、原發(fā)性膽汁性肝硬化 抗線粒體抗體(ama) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝炎、肝硬化等 抗胃壁細(xì)胞抗體(pca) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:伴萎縮性胃炎病變的惡貧,胃潰瘍、胃癌、單純性萎縮性胃炎、甲亢、甲低、ida等 抗腎上腺抗體(aaa) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退(阿狄森氏?。?抗角質(zhì)蛋白抗體(aka) 2ml不抗凝全 血 陰性 aka是ra高價(jià)值診斷指標(biāo)與早期診斷

16、指標(biāo) 抗心肌抗體(hra) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:急性風(fēng)濕熱(肌纖維膜下型)、心肌梗塞、局部缺血性心臟病等 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(anca) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:提示原發(fā)性小血管性疾病 抗蛋白酶3抗體(c-anca) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:可做為韋格氏肉芽腫(wg)處于活動(dòng)期的標(biāo)志之一 抗髓性過(guò)氧化物酶(p-anca) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:壞死性新月體性腎小球腎炎、顯微型多動(dòng)脈炎等 抗dnp抗體 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:sle尤其是活動(dòng)性sle d-栓溶二聚休(d-聚體) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:dic、體內(nèi)深靜脈栓塞、心梗、肺梗塞、

17、冠心病等 抗血小板抗體(pa-ig) 2ml不抗凝全 血 igg:0-108iga:0-22igm:0-40ng/102pa 增高:各種原因所致的血小板自身免疫性疾病 輪狀病毒抗原(srv-ag) 2ml不抗凝全 血 陰性 陽(yáng)性:急性輪狀病毒胃腸炎 總補(bǔ)體溶血活性(ch50) 2ml不抗凝全 血 23-46iu/ml 降低:見(jiàn)于c1-c9任何一個(gè)成份缺陷 免疫功能 igg 3ml不抗凝全血 8.00-17.00g/l 體液免疫功能監(jiān)測(cè),檢測(cè)k或型ig含量,k/比率可直接用于m蛋白的篩選,漿細(xì)胞惡性增殖時(shí)可有過(guò)多的輕鏈產(chǎn)生或重鏈的合成被抑制,k/比值變化明顯 iga 1.0-4.90g/l ig

18、m 0.50-3.45g/l c3 0.90-1.80g/l c4 0.10-0.45g/l k輕鏈(kapp) 2.00-4.40g/l 輕鏈(lamb) 1.10-2.40g/l 尿腎功 尿igg 2ml任意尿標(biāo)本 0.00-10.0mg/l igg增高為非選擇性蛋白尿,表示病情rtrf增高為選擇性蛋白尿,病情不太嚴(yán)重白蛋白尿是糖尿病性腎病的最早期臨床表現(xiàn),a1mu增多為腎小管性蛋白尿,輕鏈異常見(jiàn)于漿細(xì)胞惡性增殖,多發(fā)性骨髓瘤,巨球血癥,腎淀粉樣變,慢性腎盂腎炎,惡性淋巴瘤 轉(zhuǎn)鐵蛋白(trfu) 0.00-2.40mg/l 尿白蛋白(albu) 0.00-30.0g/l a1微球蛋白(a1mu) 0.00-12.0mg/l k輕鏈 0.00-0.00mg/l 輕鏈 0.00-2.40mg/l 炎癥指標(biāo) crpm 3ml不抗凝全血 0-5.00mg/l crpm,aag,hpt,cor為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,增設(shè)見(jiàn)于急性細(xì)菌、病毒或其它感染,非感染性炎癥疾病如風(fēng)濕熱、組織損傷和壞死,cor對(duì)wison和menkes癥的診斷最不意義 a1酸性糖蛋白(aag) 0.50-3.20g/l 結(jié)合珠蛋白(hpt) 0.50-3.20g/l 銅籃蛋白(cor) 0.20-0.60g/l 風(fēng)濕指標(biāo) 類風(fēng)濕因子(rf) 3ml不抗凝全血 0-10.0iu/ml asl,ands為診斷鏈球

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