植物細(xì)胞工程試題庫(kù)

1、植物細(xì)胞工程試題庫(kù)第一章 緒論一、 名詞解釋1、植物細(xì)胞工程:包括植物組織，器官培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，原生質(zhì)融合技術(shù)與培養(yǎng)技術(shù)，亞細(xì)胞水平的操作技術(shù)等。2、染色體工程：按照人們預(yù)定的目標(biāo)，采用類(lèi)似于工程學(xué)的步驟，通過(guò)染色體操縱改變生物染色體級(jí)成并進(jìn)而改變其遺傳性的過(guò)程。二、判斷題1、現(xiàn)代生物技術(shù)最大的特征是多學(xué)科性。（ ）2、狹義的細(xì)胞工程是指細(xì)胞融合和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。（ ）3、細(xì)胞學(xué)說(shuō)是由Schleiden和 Schwan提出的。（ ）4、植物細(xì)胞全能性學(xué)說(shuō)是由Haberlandt提出的。（ ）5、植物細(xì)胞具有變異性。（ ）6、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使多細(xì)胞生物的單細(xì)胞生命活動(dòng)研究成為可能。（ ）三、

2、問(wèn)答題1、植物細(xì)胞工程研究的內(nèi)容有哪些？植物組織，器官培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，原生質(zhì)融合技術(shù)與培養(yǎng)技術(shù)，亞細(xì)胞水平的操作技術(shù)2、植物細(xì)胞工程在育種上的應(yīng)用有哪些？1.快速獲得特殊倍性材料；2.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和；3.克服雜交胚早期夭折；4.導(dǎo)入外緣基因；5.突變體篩選；6.種質(zhì)資源何在。3、簡(jiǎn)述我國(guó)植物細(xì)胞工程取得的主要成就。 花藥培養(yǎng)和單倍體育種研究處于國(guó)際前列；利用花粉單倍體培育新品種的技術(shù)途徑在我國(guó)首先得以應(yīng)用；引進(jìn)和推廣植物脫毒和快繁技術(shù)；原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株的成功；植物細(xì)胞人工種子、植物細(xì)胞規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生產(chǎn)物取得進(jìn)展等。第二章 植物細(xì)胞全能性1、植物細(xì)胞全能性: 每個(gè)植物的體細(xì)胞或

3、性細(xì)胞都具有該植物的全套遺基因，因此在一定培養(yǎng)條件下每個(gè)細(xì)胞都可發(fā)育成一個(gè)與母體一樣的植株。2、外植體: 從植物體上分離下來(lái)的用于離體培養(yǎng)的材料。3、培養(yǎng)基: 人工配制的用于培養(yǎng)植物材料的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。4、基本培養(yǎng)基: 只含有無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、維生素和水等最基本成分的合成培養(yǎng)基。如Ms、White、Nitsch、N6等培養(yǎng)基。5、中間繁殖體: 在離體培養(yǎng)過(guò)程中形成的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的中間繁殖材料。6、大量元素: 培養(yǎng)基中濃度超過(guò)0.5 mmol/L的元素 C、H、O、氮（N）、磷（P）、硫（S）鉀（K）、鈣（Ca）、鎂（Mg）、九 種大量元素7、微量元素: 培養(yǎng)基中濃度低于0.5 mmol/L 的元素

4、, 鐵（Fe）、硼（B）、錳（Mn）、銅（Cu）、鋅（Zn）、鉬（MO）、氯（Cl）8、愈傷組織: 在離體培養(yǎng)過(guò)程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。9、胚狀體: 在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過(guò)程中,由一個(gè)或一些體細(xì)胞,經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和發(fā)育過(guò)程,形成的與合子胚結(jié)構(gòu)相類(lèi)似的中間繁殖體。14、繼代培養(yǎng): 更換新鮮培養(yǎng)基來(lái)繁殖同種類(lèi)型的材料（愈傷組織.芽等）。10、脫分化: 已分化好的細(xì)胞在人工誘導(dǎo)條件下，恢復(fù)分生能力，回復(fù)到原始無(wú)分化狀態(tài)或分生細(xì)胞狀態(tài)的過(guò)程。11、再分化: 脫分化后具有分生能力的細(xì)胞再經(jīng)過(guò)與原來(lái)相同的分化過(guò)程，重新形成各類(lèi)組織和器官的過(guò)程。12、器官發(fā)生:

5、 指在離體培養(yǎng)下的組織或細(xì)胞團(tuán)分化形成不定根、不定芽等器官的過(guò)程。13、體細(xì)胞胚胎發(fā)生: 指體細(xì)胞在未經(jīng)性細(xì)胞融合的情況下，模擬有性胚胎發(fā)生的各個(gè)階段而發(fā)育出新個(gè)體的形態(tài)發(fā)生過(guò)程。14、極性: 指植物的組織、器官甚至單個(gè)細(xì)胞在不同的軸向上存在的某種形態(tài)結(jié)構(gòu)以及生理生化梯度的差異.極性是植物細(xì)胞分化的前提15、細(xì)胞周期: 指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié) 束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過(guò)程。二、判斷題1、分化程度不同的植物細(xì)胞，其脫分化能力不同。（ ）2、不是每一個(gè)植物細(xì)胞都能表達(dá)出全能性。（ ）3、植物細(xì)胞全能性的表達(dá)程度是可以調(diào)控的。（ ）4、所有的植物細(xì)胞都具有全能性。（ ×

6、）5、胚狀體和合子胚一樣具有兩極性。（ ）6、生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比率平衡時(shí)有利于愈傷組織增殖。（ ）7、離體培養(yǎng)條件下，植物細(xì)胞全能性的表達(dá)是通過(guò)細(xì)胞脫分化和再分化實(shí)現(xiàn)的。（ ）8、細(xì)胞周期運(yùn)行的動(dòng)力主要來(lái)自cyclin。（ × ）-主要來(lái)自CDK,周期蛋白依賴(lài)酶9、生長(zhǎng)中心是愈傷組織中形成器官的部位，因此生長(zhǎng)中心的細(xì)胞體積大 。（ × ）10、體細(xì)胞胚胎發(fā)生是通過(guò)先芽后根的方式形成再生植株的。（ × ）11、生活細(xì)胞要表達(dá)全能性必須回復(fù)到分生狀態(tài)。（ ）-或胚性細(xì)胞狀態(tài)12、細(xì)胞脫分化調(diào)控的實(shí)質(zhì)是G0期細(xì)胞回復(fù)到分裂周期的調(diào)控過(guò)程。（ ）13、在同一個(gè)培養(yǎng)體系

7、中可以通過(guò)不同器官發(fā)生方式再生植株。（ ）14、連續(xù)的光照有利于培養(yǎng)細(xì)胞微管組織的形成，而一定的晝夜光周期則有利于極性建立和形態(tài)發(fā)生。（ ）15、植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生是從合子開(kāi)始的。（ × ）16、肌醇具有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，所以培養(yǎng)基中必須添加肌醇。（ × ）17、對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)，被子植物比裸子植物敏感，單子葉植物比雙子葉植物敏感。（ × ）18、幼葉比成熟葉易誘導(dǎo)形成愈傷組織。（ ）19、致密型胚性愈傷組織適合于快速建立細(xì)胞懸浮系。（ ）20、一般認(rèn)為體細(xì)胞胚是多細(xì)胞起源的。（ × ）21、培養(yǎng)物缺鉀時(shí)，生長(zhǎng)緩慢，葉片變黃。（ ）22、4-CPA具有促進(jìn)細(xì)

8、胞分裂的作用，而TDZ具有促進(jìn)芽增殖的作用 。（ ） 三、問(wèn)答題1、實(shí)現(xiàn)植物細(xì)胞全能性的條件是什么？ 1）內(nèi)在條件：有生命力的核；完整的膜系統(tǒng)，如：A、莖尖、根尖和形成層細(xì)胞; B、表皮細(xì)胞和各種薄壁細(xì)胞;C、特化細(xì)胞：導(dǎo)管、篩管、氣孔保衛(wèi)細(xì)胞2）組織或細(xì)胞和母體分離3）外在條件：溫、光、水、氣、營(yíng)養(yǎng)2、簡(jiǎn)述Skoog和Miller（1957）提出的有關(guān)植物激素控制器官形成的理論及意義。Skoog和Miller等所提出的生長(zhǎng)素和激動(dòng)素比例決定根和芽分化的觀點(diǎn)：生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比例高，誘導(dǎo)形成根，而當(dāng)生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比例低，誘導(dǎo)形成芽。這種器官發(fā)生激素調(diào)控模式的建立為植物組織培養(yǎng)中植物器

9、官的再分化奠定了理論基礎(chǔ)。3、植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基中的大量元素、微量元素都主要包括哪些，它們主要以哪些化合物的形式提供？大量元素：C、H、O、氮（N）、磷（P）、硫（S）鉀（K）、鈣（Ca）、鎂（Mg）九種大量元素；微量元素: 鐵（Fe）、硼（B）、錳（Mn）、銅（Cu）、鋅（Zn）、鉬（MO）、氯（Cl）。C：從培養(yǎng)基中加入的各種糖類(lèi)獲得，H和O主要從水中獲得，氮（N）從有機(jī)氮，無(wú)機(jī)氮（硝態(tài)氮，銨態(tài)氮）中獲得；磷通常以正磷酸（H2PO4）形式被植物吸收，因此培養(yǎng)基配制時(shí)常采用 KH2PO4；鉀（K）由KCl、KNO3或者KH2PO4供給；鈣（Ca）由CaCl2·2H2O和Ca（NO3

10、）2·4H2O 提供；鎂（Mg）由硫酸鎂（MgSO4·7H2O）提供；硫（S）由硫酸鎂（MgSO4·7H2O）提供4、蔗糖在培養(yǎng)基中有何作用？作為碳源為植物提供能源，為有機(jī)化合物的合成提供碳架，細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)滲透壓，對(duì)形態(tài)的發(fā)生的特殊作用等。5、生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì)大致可分為哪幾類(lèi)，目前植物組織培養(yǎng)中主要使用了哪些生長(zhǎng)素，生長(zhǎng)素在離體培養(yǎng)中有何作用？1.吲哚類(lèi)，2.奈酸類(lèi)，3.苯氧羧酸類(lèi)，生長(zhǎng)素中常用的吲哚乙酸、萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、吲哚丁酸；2-（3-氯-苯氧）丙酸 （3-CPA）；4-碘苯氧乙酸 （ ICPA ）。植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素一方面用于誘導(dǎo)愈傷組織的形成和

11、生根，另一方面是與一定量的細(xì)胞分裂素配合共同誘導(dǎo)不定芽的分化、側(cè)芽的萌發(fā)與生長(zhǎng)以及某些植物胚狀體的誘導(dǎo)。6、在植物組織培養(yǎng)中，細(xì)胞分裂素有何作用？在植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分裂素的主要功能是促進(jìn)細(xì)胞的分裂和分化，打破頂端優(yōu)勢(shì)，誘導(dǎo)芽分化與增殖，促進(jìn)組織和器官的不定芽發(fā)育。7、影響器官發(fā)生的因素有哪些？（1）外植體：母體植株的遺傳基礎(chǔ)與生理狀態(tài)，（2）激素(激素調(diào)控理論)，（3）培養(yǎng)基種類(lèi)和培養(yǎng)方法（物理因素，化學(xué)因素），（4）環(huán)境條件（溫度，光照）8、影響體細(xì)胞胚發(fā)生的因素有哪些？（1）、外源激素：生長(zhǎng)素特別是2，4-D；（2）培養(yǎng)基：低無(wú)機(jī)鹽濃度和較高的硝態(tài)氮濃度；（3）基因型；（4）組織起源，距

12、活體胚胎發(fā)育較近的組織和成熟及未成熟的胚胎在離體條件下更有利于細(xì)胞胚的誘導(dǎo)。9、簡(jiǎn)述植物細(xì)胞脫分化的過(guò)程啟動(dòng)階段：蛋白體的出現(xiàn)和細(xì)胞質(zhì)增生；演變階段：細(xì)胞核移向中央、質(zhì)體轉(zhuǎn)化成原質(zhì)體；脫分化終結(jié)期：回復(fù)到分生細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞開(kāi)始分裂10、簡(jiǎn)述器官發(fā)生的過(guò)程1.愈傷組織誘導(dǎo)，2.“生長(zhǎng)中心”形成，3. 器官原基和器官形成11、培養(yǎng)基內(nèi)加入活性炭的目的是什么？應(yīng)注意什么問(wèn)題？活性碳可以吸附非極性物質(zhì)和色素等大分子物質(zhì)，包括瓊脂中所含的雜質(zhì)、培養(yǎng)物分泌的酚和醌類(lèi)物質(zhì)、蔗糖在高在壓消毒時(shí)產(chǎn)生的5-羥甲糖醛、激素等。 12、何謂胚狀體?與合子胚有何異同?在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過(guò)程中,由一個(gè)或一些體

13、細(xì)胞,經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和發(fā)育過(guò)程,形成的與合子胚結(jié)構(gòu)相類(lèi)似的中間繁殖體。與合子胚相比體細(xì)胞胚子葉不規(guī)范，胚小、含水量高、對(duì)脫水敏感、沒(méi)有休眠13、胚狀體的發(fā)育大約要經(jīng)過(guò)哪幾個(gè)時(shí)期?體細(xì)胞胚的大多首先起源于一個(gè)胚性細(xì)胞，胚性細(xì)胞經(jīng)過(guò)一次分裂形成二細(xì)胞原胚，最后經(jīng)過(guò)球性胚、魚(yú)雷形胚、心形胚和子葉形胚形成胚狀體。14、離體培養(yǎng)條件下，胚狀體產(chǎn)生有幾種方式?（1）直接途徑：即不經(jīng)過(guò)愈傷組織階段，從外植體直接產(chǎn)生體細(xì)胞胚； （2）間接方式：外植體首先誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，再在愈傷組織上產(chǎn)生體細(xì)胞胚。 15、離體培養(yǎng)條件下，莖、芽和根的再生方式大致有幾種?在組織培養(yǎng)中，通過(guò)莖芽和根而再生植株的方式大致有3種：1.

14、先芽后根：多數(shù)植物；2.先根后芽：顛茄；3.在不同部位分別形成芽和根，最后通過(guò)微管組織聯(lián)系形成再生植株。 16、長(zhǎng)期培養(yǎng)物形態(tài)發(fā)生潛力喪失的原因是什么？1.由于細(xì)胞或組織內(nèi)激素關(guān)系的改變成的。當(dāng)改變外部的處理?xiàng)l件時(shí)這種內(nèi)在潛力能得到恢復(fù)。2.經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期培養(yǎng)后，由于培養(yǎng)細(xì)胞中發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)、數(shù)目變異、基因突變、染色體重排、DNA的甲基化等自發(fā)體細(xì)胞變異，這種由遺傳原因造成的形態(tài)發(fā)生潛力喪失是不可逆的。第三章 基本設(shè)備和基本技術(shù)一、基本概念1、滅菌是指用物理或化學(xué)的方法，殺死或者去除物品上所有生活的微生物的方法。2、消毒是指用消毒劑對(duì)活的植物材料進(jìn)行處理，以殺死其上所有生活的微生物的方法。3、繼代周

15、期從接種培養(yǎng)開(kāi)始到下一次接種繼代所經(jīng)歷的時(shí)間（周或天）4、生長(zhǎng)曲線(xiàn)在一個(gè)繼代周期內(nèi)中間繁殖體生長(zhǎng)變化的曲線(xiàn)5、接種經(jīng)表面消毒的試驗(yàn)材料按不同的要求經(jīng)過(guò)剪切和整理后，移至培養(yǎng)基上培養(yǎng)的過(guò)程。6、啟始脫分化時(shí)間外植體接種到第一個(gè)外植體開(kāi)始形成中間繁殖體所經(jīng)歷的時(shí)間二、判斷題1、接種器械一般采用照射滅菌。（ x ）2、IAA通常采用濕熱滅菌。（x ）3、紫外照射滅菌的時(shí)間為5 h。（x ）4、油污嚴(yán)重的器皿應(yīng)采用酸洗法。（ x ）5、過(guò)濾滅菌微孔濾膜的直徑以0.22mm為宜。（ ）6、用于滅菌的抗生素濃度通常為40-50 mg/L。（ ）7、采用氯化汞對(duì)外植體進(jìn)行消毒，時(shí)間越長(zhǎng)越好。（ x）8、大量

16、元素一般用感量為0.001g天平稱(chēng)量。（x ）9、培養(yǎng)室通常采用紫外線(xiàn)滅菌。（ ）三、問(wèn)答題1、怎樣洗滌污染的培養(yǎng)瓶？p253、簡(jiǎn)述高壓滅菌鍋的工作原理和使用方法. 原理是通過(guò)較強(qiáng)的蒸汽壓力及高溫使蛋白質(zhì)變性，從而殺滅微生物。 4、簡(jiǎn)述MS培養(yǎng)基中鐵鹽母液的配制方法。配法是將5.57克的硫酸亞鐵和7.45克的乙二胺四乙酸二鈉分別溶于蒸餾水中,加熱溶解,然后兩者混合,冷卻后定容至1升,再加熱制成穩(wěn)定溶液,用時(shí)每配1升培養(yǎng)基取5毫升。5、 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素母液如何制備？生長(zhǎng)素類(lèi)(NAA、IBA等)先用12毫升95%酒精將其溶解,然后緩緩加入蒸餾水定容。細(xì)胞分裂素類(lèi)(6BA、KT等)先用少量(0.

17、51當(dāng)量濃度鹽酸),然后緩緩加入蒸餾水定容,倒入瓶?jī)?nèi),存于冰箱。如發(fā)現(xiàn)貯存后又產(chǎn)生沉淀,可加溫使之溶解后再用。6、 簡(jiǎn)述固體培養(yǎng)基的制備過(guò)程。 （1）量取母液（2）稱(chēng)取瓊脂、蔗糖和其他相關(guān)物質(zhì)（3）溶化瓊脂，加母液、蔗糖和其他相關(guān)物質(zhì)（4）加水約至所需體積（5）調(diào)酸堿度 （6）定容（7）分裝7、已知所有激素母液濃度為0.5 mg/ml，問(wèn):欲配制MS+6-BA2 mg/L+KT1mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖2.5%+瓊脂0.5%的培養(yǎng)基400 ml，應(yīng)取6-BA、KT和NAA母液各多少ml，稱(chēng)取蔗糖和瓊脂各多少g？若配制MS+2,4-D1 mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.5%的培養(yǎng)基25

18、0 ml，則應(yīng)吸取2,4-D多少ml，稱(chēng)取蔗糖和瓊脂各多少g？8、 目前，常用的培養(yǎng)基種類(lèi)有哪些？各有什么特點(diǎn)？p479、 配制培養(yǎng)基時(shí)，為什么要先配母液？如何配制母液？p5010、怎樣進(jìn)行外植體的消毒？消毒：消毒液浸泡； 沖洗：無(wú)均水沖洗; 材料內(nèi)部帶菌處理11、如何減少接種過(guò)程中造成的污染？環(huán)境無(wú)菌控制呼吸控交叉污染控制接種動(dòng)作快12、簡(jiǎn)述超凈工作臺(tái)的工作原理和使用方法原理是以過(guò)濾裝置凈化空氣，在操作者和操作臺(tái)之間形成無(wú)菌風(fēng)幕，保證臺(tái)面及其上空呈無(wú)菌空間,同時(shí)紫外光燈可以殺滅臺(tái)面上的微生物防止交叉污染。 13、怎樣管理培養(yǎng)室？（1）消毒殺菌（2）溫度和濕度控制（3）光照控制（4）污染材料的

19、處理14、怎樣對(duì)初代培養(yǎng)進(jìn)行觀察的記錄？15、現(xiàn)要研究活性炭對(duì)芽分化的影響，怎樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)？16、簡(jiǎn)述采用紫外線(xiàn)滅菌的原理和方法。P2517、簡(jiǎn)述過(guò)濾滅菌的原理和方法。P27第四章 培養(yǎng)方法一、名詞解釋1.分批培養(yǎng)2.連續(xù)培養(yǎng)是在培養(yǎng)過(guò)程中不斷加入培養(yǎng)基，使培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能夠連續(xù)得到補(bǔ)充的培養(yǎng)方法3.半連續(xù)培養(yǎng)是介于成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)之間的一種培養(yǎng)方法。是在完成成批培養(yǎng)一個(gè)周期后，只從反應(yīng)器中取出大部分的細(xì)胞懸浮液，保留小部分細(xì)胞懸浮液作為下一次培養(yǎng)的種子細(xì)胞，然后加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的方法。4、固體培養(yǎng)在培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑（如瓊脂、明膠等）形成固體培養(yǎng)基，將植物的植物器官、組

20、織、細(xì)胞或原生質(zhì)體接種于培養(yǎng)基上（中）的組織培養(yǎng)方法。5、靜止液體培養(yǎng)是指在培養(yǎng)基中不加入凝固劑，而直接將培養(yǎng)物接種到液體中或其他支持物上進(jìn)行培養(yǎng)的方法。6、懸浮培養(yǎng)是指將離體的細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。7、光自養(yǎng)培養(yǎng)是指培養(yǎng)容器中的植物在人工光照條件下，吸收CO2進(jìn)行光合作用，通過(guò)完全自養(yǎng)的方法進(jìn)行生長(zhǎng)和繁殖的方法。二、判斷題1、培養(yǎng)方法是影響植物組織培養(yǎng)效率的重要因素。（ ）2、固體培養(yǎng)是組織培養(yǎng)中最常用的方法。（ ）3、靜止液體培養(yǎng)易使培養(yǎng)物玻璃化。（ ）4、懸浮培養(yǎng)只能用于細(xì)胞培養(yǎng)。（ x ）5、光自養(yǎng)培養(yǎng)因不需糖，因而減少了污染。（ ）三、問(wèn)答題1、比較分析固體

21、培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)。適合于各種外植體和組織培養(yǎng) 的各個(gè)階段有利于氣體交換防止或減少玻璃化不利于代謝物的擴(kuò)散可用于組織培養(yǎng)的誘導(dǎo)、繁殖和分化階段增加培養(yǎng)物與液體接觸面，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收利于代謝物的擴(kuò)散有利于氣體交換需要一定的設(shè)備2、研究培養(yǎng)方法有何重要意義？培養(yǎng)方法是影響植物組織培養(yǎng)效率的重要因素 培養(yǎng)方法研究推動(dòng)植物細(xì)胞工程研究的進(jìn)步 3、靜止液體培養(yǎng)的特點(diǎn)是什么？可用于組織培養(yǎng)的各個(gè)階段減少成本（淺層液體培養(yǎng)）利于代謝物的擴(kuò)散,減小自體抑制效應(yīng)擴(kuò)大營(yíng)養(yǎng)接觸面不利于氣體交換易誘導(dǎo)玻璃化4、懸浮培養(yǎng)有什么作用？能夠提供大量均一的懸浮細(xì)胞5、試比較成批培養(yǎng)和聯(lián)系培養(yǎng)的特點(diǎn)。6、光自養(yǎng)培養(yǎng)的特點(diǎn)是什

22、么？是植物組織培養(yǎng)的一種創(chuàng)新，也是環(huán)境控制技術(shù)和生物技術(shù)的結(jié)合。它采用環(huán)境控制的手段，用二氧化碳代替糖來(lái)作為植物體的碳源，通過(guò)人工控制，提供適宜植株生長(zhǎng)的光、溫、水、氣、營(yíng)養(yǎng)等條件，以促進(jìn)植株的光合作用。其適用范圍涵蓋所有植物的微繁殖。第五章 薄層培養(yǎng)和單細(xì)胞培養(yǎng)一、名詞解釋1、薄層細(xì)胞培養(yǎng)：從外植體的表皮撕下數(shù)層細(xì)胞于合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行的離體培養(yǎng)；現(xiàn)也將外植體橫切成1mm厚的薄片2、單細(xì)胞培養(yǎng):指從植物器官，愈傷組織或細(xì)胞懸浮培養(yǎng)液中游離出單個(gè)細(xì)胞，于無(wú)菌條件下，進(jìn)行體外培養(yǎng)，使其繁殖，生長(zhǎng)，發(fā)育的一門(mén)技術(shù)。3、平板培養(yǎng)法 ：將懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞接種到一薄層固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。 4、最低

23、有效密度：在植物懸浮培養(yǎng)液中，使懸浮培養(yǎng)細(xì)胞能夠增殖的最少接種量。5、看護(hù)培養(yǎng)法：指用一塊愈傷組織或植物離體組織看護(hù)單細(xì)胞使其生長(zhǎng)并增殖的一種單細(xì)胞培養(yǎng)方法。 6、植板率：長(zhǎng)出的細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞在接種細(xì)胞中所占的百分比數(shù)。二、判斷題1、細(xì)胞培養(yǎng)周期是指一定起始密度的單細(xì)胞，從開(kāi)始培養(yǎng)到細(xì)胞數(shù)目和總重量停止增長(zhǎng)的過(guò)程。（ ）2、薄層細(xì)胞培養(yǎng)是從外植體的表皮撕下數(shù)層細(xì)胞于合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行的離體培養(yǎng)。（ ）3、能被酚臧紅花染成紅色的細(xì)胞為活細(xì)胞。（ × ）-死細(xì)胞4、細(xì)胞密度是影響細(xì)胞培養(yǎng)的重要因素。（ ）5、Gelrite是懸浮劑，而Ficoll是凝固劑。（×）三、問(wèn)答題1、為

24、什么要進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)？1.建立單細(xì)胞無(wú)性系（cell line）2.排除體細(xì)胞干擾3.觀察單細(xì)胞如何進(jìn)行分裂、分化、生長(zhǎng)及發(fā)育，為大規(guī)模培養(yǎng)作準(zhǔn)備2、薄層培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？1.薄層培養(yǎng)細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 2.對(duì)調(diào)控因子敏感 3.培養(yǎng)容易成功3、怎樣進(jìn)行薄層培養(yǎng)？外植體 外植體消毒 切取或分離材料 接入培養(yǎng)基中培養(yǎng) 結(jié)果觀察4、制備單細(xì)胞的方法有哪些？機(jī)械分離法 酶解法 愈傷組織誘導(dǎo)法1.從培養(yǎng)愈傷組織中游離單細(xì)胞，通過(guò)反復(fù)繼代使愈傷增殖并提高其松散性；2.機(jī)械研磨法； 3.果膠酶分離法5、簡(jiǎn)述從愈傷組織中游離單細(xì)胞的步驟600800mg生長(zhǎng)旺盛的愈傷組織250mL含3040mL培養(yǎng)基的三角瓶中90

25、130r/min連續(xù)振蕩培養(yǎng)23周用100130目網(wǎng)過(guò)濾除去大的細(xì)胞團(tuán)濾液離心收集游離細(xì)胞，棄上清液加入適當(dāng)體積的培養(yǎng)基使細(xì)胞懸浮6、怎樣進(jìn)行平板培養(yǎng)？（1.）單細(xì)胞懸浮液的制備（2）調(diào)節(jié)細(xì)胞密度（3）培養(yǎng)基和凝固劑選擇，澆平板 （4）接種培養(yǎng) 做好標(biāo)記7、簡(jiǎn)述影響單細(xì)胞培養(yǎng)的因素。1.條件培養(yǎng)基的作用；2.細(xì)胞密度；3.生長(zhǎng)激素；4.揮發(fā)性物質(zhì)的影響；5.適當(dāng)?shù)腜H值，提高培養(yǎng)基中鐵的含量等第六章 植物原生質(zhì)體培養(yǎng)一、名詞解釋1、植物原生質(zhì)體：原生質(zhì)體（protoplast）是指除去細(xì)胞壁的裸細(xì)胞2、植物原生質(zhì)體培養(yǎng)：原生質(zhì)體培養(yǎng)是指將原生質(zhì)體放在人工配制的培養(yǎng)基上和人工控制的條件下培養(yǎng)成再

26、生植株的過(guò)程。 3、亞原生質(zhì)體：不完整的原生質(zhì)體經(jīng)物理化學(xué)處理得到的小原生質(zhì)體。4、微小原生質(zhì)體亞原中具薄層細(xì)胞質(zhì)和完整細(xì)胞核的部分5、微核原生質(zhì)體亞原中具薄層細(xì)胞質(zhì)和部分細(xì)胞核的部分6、胞質(zhì)體： 即無(wú)細(xì)胞核，只有細(xì)胞質(zhì)的原生質(zhì)體二、判斷題1、原生質(zhì)體起始材料的特性和生理狀態(tài)是決定原生質(zhì)體質(zhì)量的重要因素之一。（ ）2、用沉降法純化原生質(zhì)體常引起原生質(zhì)體破碎，這是因?yàn)楦邼B溶液的作用。（ × ）3、對(duì)分離原生質(zhì)體的材料進(jìn)行低溫預(yù)處理的目的是為了提高原生質(zhì)體的產(chǎn)量。（ ）4、植物原生質(zhì)體是觀察大分子吸收和轉(zhuǎn)移的良好材料。（ ）5、機(jī)械法適合于從分生組織細(xì)胞中分離原生質(zhì)體。（×）6

27、、分離原生質(zhì)體的酶液中加入氯化鈣是為了穩(wěn)定原生質(zhì)膜。（ ）7、在原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)中，蔗糖是一種廣泛使用的滲透壓調(diào)節(jié)劑。（ ）8、酶解處理一般在光照條件下進(jìn)行。（ ×）9、分離原生質(zhì)體的原始細(xì)胞狀態(tài)影響其脫分化的進(jìn)行。（ ）10、一般認(rèn)為原生質(zhì)體出芽與培養(yǎng)基成分有密切關(guān)系。（ ）三、問(wèn)答題1何謂原生質(zhì)體，原生質(zhì)體作為遺傳飾變和生理生化研究的材料有何特點(diǎn)？Ø 原生質(zhì)體（protoplast）是指除去細(xì)胞壁的裸細(xì)胞v 是體細(xì)胞雜交育種的材料v 是轉(zhuǎn)基因的良好受體v 是開(kāi)展基礎(chǔ)理論研究的良好材料v 是分離細(xì)胞器的良好材料2簡(jiǎn)述酶法分離植物原生質(zhì)體的基本原理。植物細(xì)胞壁由纖維素，半

28、纖維素，果膠質(zhì)等組成，通過(guò)用酶把原生質(zhì)體外的細(xì)胞壁分解，便能得到完整的原生質(zhì)體。3簡(jiǎn)述兩步法分離植物原生質(zhì)體的程序。先用果膠酶離析植物組織，使植物組織從組織細(xì)胞中分離出來(lái)，然后手機(jī)細(xì)胞經(jīng)洗滌后用纖維素酶解離細(xì)胞壁，最后獲得原生質(zhì)體。4如何純化原生質(zhì)體并鑒定其活力?P2725與其它組織、細(xì)胞培養(yǎng)相比，原生質(zhì)體培養(yǎng)有何特點(diǎn)?v 是體細(xì)胞雜交育種的材料v 是轉(zhuǎn)基因的良好受體v 是開(kāi)展基礎(chǔ)理論研究的良好材料v 是分離細(xì)胞器的良好材料6簡(jiǎn)述X平板法培養(yǎng)植物原生質(zhì)體的原理和方法。為了減少一部恩細(xì)胞和組織所產(chǎn)生的有害物質(zhì)對(duì)其他存活細(xì)胞的影響，將一定量的活性炭加到培養(yǎng)基，以改善細(xì)胞或組織的生長(zhǎng)與細(xì)胞群落的形成

29、。將固體平板分成四塊，在2和4中加入儲(chǔ)備培養(yǎng)基（含1%活性炭），1和3不加活性炭培養(yǎng)原生質(zhì)體。7簡(jiǎn)述幾種原生質(zhì)體培養(yǎng)方法的特點(diǎn)。固體：培養(yǎng)基用瓊脂固化，滅菌后在45度植入原生質(zhì)體。生長(zhǎng)速度慢，容易觀察培養(yǎng)效果和生長(zhǎng)情況。液體利用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，通氣性好，排泄物容易擴(kuò)散，易于補(bǔ)加培養(yǎng)基，易于轉(zhuǎn)移，一旦有污染就導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。混合兩相：兼顧以上。8簡(jiǎn)述影響植物原生質(zhì)體培養(yǎng)的因素。植物種類(lèi)，原生質(zhì)體活力，原生質(zhì)體起始密度，滲透調(diào)節(jié)，原生質(zhì)體粘連，培養(yǎng)條件和方法。9簡(jiǎn)述滲透劑在植物原生質(zhì)游離中的作用。使酶能較快地發(fā)揮作用而原生質(zhì)體有維持在一定滲透壓下，使之不漲破不收縮。10.生質(zhì)體培養(yǎng)的應(yīng)用。體細(xì)胞雜交

30、，遺傳轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞器轉(zhuǎn)移，無(wú)性系變異的良好體系，分離植物細(xì)胞器的理想材料，基礎(chǔ)研究的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。第七章 植物胚胎培養(yǎng)一、名詞解釋1、離體胚培養(yǎng)：胚培養(yǎng)就是采用人工的方法將胚從種子中分離出來(lái)，在人工培養(yǎng)的條件下，使其他發(fā)育成正常植株。2、成熟胚培養(yǎng)3、幼胚培養(yǎng)4、早熟萌發(fā)：幼胚接種后，離體胚不繼續(xù)進(jìn)行胚性生長(zhǎng)，而是在培養(yǎng)基上迅速發(fā)成幼苗5、植物胚乳組織培養(yǎng)6、胚性發(fā)育：幼胚接種到培養(yǎng)基上以后，仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育，最后形成成熟胚(有時(shí)甚至可能類(lèi)似種子)，然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株二、判斷題1、胚培養(yǎng)可用于克服雜種不活性。（ ）2、早熟萌發(fā)的胚一般能形成許多植株。（） 3、幼胚培

31、養(yǎng)的初期需在黑暗條件下進(jìn)行。（ ） 4、胚乳培養(yǎng)的再生植株都是三倍體。（ X ）5、游離胚乳核時(shí)期和成熟胚乳時(shí)期是胚乳培養(yǎng)的最佳時(shí)期。（ ）三、問(wèn)答題1 何謂胚培養(yǎng)？簡(jiǎn)述胚培養(yǎng)的意義。胚培養(yǎng)就是采用人工的方法將胚從種子中分離出來(lái)，在人工培養(yǎng)的條件下，使其他發(fā)育成正常植株。2 離體幼胚培養(yǎng)胚發(fā)育有幾種類(lèi)型？各有何特點(diǎn)？1)、胚性發(fā)育：幼胚接種到培養(yǎng)基上以后，仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育，最后形成成熟胚(有時(shí)甚至可能類(lèi)似種子)，然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株，這種途徑發(fā)育的幼胚一般一個(gè)幼胚將來(lái)就是一個(gè)植株。(2)、早熟萌發(fā)：幼胚接種后，離體胚不繼續(xù)胚性生長(zhǎng)，而是在培養(yǎng)基上迅速萌發(fā)成幼苗，通

32、常稱(chēng)之為早熟萌發(fā)。在大多數(shù)情況下，一個(gè)幼胚萌發(fā)成一個(gè)植株，但有時(shí)會(huì)由于細(xì)胞分裂產(chǎn)生大量的胚性細(xì)胞，以后形成許多胚狀體，從而可以形成許多植株，這種現(xiàn)象就是所謂的叢生胚現(xiàn)象。(3)、愈傷組織： 在許多情況下，幼胚在離體培養(yǎng)中首先發(fā)生細(xì)胞增殖，形成愈傷組織。一般來(lái)講由胚形成的愈傷組織大多為胚3 影響離體幼胚培養(yǎng)的主要因素有哪些？1. 基因型2、胚齡和放置方式3、培養(yǎng)基：蔗糖：球形胚8-12%，魚(yú)雷形胚4-6%外源激素：赤霉素，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素有機(jī)附加物：活性炭，椰子汁等滲透壓：提高滲透壓，防止早熟萌發(fā)培養(yǎng)基的酸堿度：大麥4.9；水稻5.0 番茄6.5 桃5.8 4、培養(yǎng)條件光照：培養(yǎng)早期采用暗培養(yǎng)

33、；培養(yǎng)后期給予光照溫度：有些幼胚早期培養(yǎng)需要一定的低溫處理，然后轉(zhuǎn)入適宜溫度下培養(yǎng)4 胚培養(yǎng)中用“小液流法”測(cè)定幼胚滲透壓的目的是什么?有何意義？5 簡(jiǎn)述胚乳培養(yǎng)的意義。1）胚乳細(xì)胞的全能性。在離體培養(yǎng)條件下，胚乳細(xì)胞是否與其它體細(xì)胞和花粉一樣，具有全能性而再生植株。 2）大多數(shù)被子植物的胚乳是三倍體，能否通過(guò)胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株而得到無(wú)籽結(jié)實(shí)；通過(guò)胚乳培養(yǎng)技術(shù)，探索改良農(nóng)、林及園藝植物三倍體育種技術(shù)的可能性。3） 研究離體培養(yǎng)條件下胚和胚乳的關(guān)系。6.簡(jiǎn)述被子植物的胚乳發(fā)育類(lèi)型與胚乳愈傷組織器官發(fā)生的關(guān)系。第八章 胚珠和子房培養(yǎng)一、名詞解釋1、 胚珠和胚珠培養(yǎng)2、 子房和子房培養(yǎng)3、 離體

34、授粉:在離體培養(yǎng)的胚珠、胎座或柱頭上授粉，然后通過(guò)胚珠或子房培養(yǎng)形成有萌發(fā)能力的種子的過(guò)程，稱(chēng)為離體受精4、 離體受精:應(yīng)用人工培養(yǎng)的方法在人工控制的條件下分離精卵細(xì)胞，并使其融合形成合子的過(guò)程5、 合子培養(yǎng)6、 6、雌核發(fā)育二判斷題1、采用授粉后的子房培養(yǎng)不可能得到單倍體。（ ）2、處于四核胚囊期的子房離體培養(yǎng)成功率高。（ X ）3、離體授粉可以克服自交不親和性。（ ）4、離體受精合子培養(yǎng)與精卵細(xì)胞親緣關(guān)系遠(yuǎn)近有關(guān)，親緣關(guān)系越近，越難培養(yǎng)。（ X ）5、子房的離體培養(yǎng)效果與接種方式無(wú)關(guān)。（ X ）三、問(wèn)答題1、簡(jiǎn)述胚珠培養(yǎng)的方法2、影響胚珠培養(yǎng)的因素有哪些？3、怎樣進(jìn)行子房培養(yǎng)選取適宜大小的

35、花蕾 無(wú)菌的花蕾 分離子房 接種培養(yǎng) 試管苗移栽 單倍體植株4、為什么要進(jìn)行離體子房培養(yǎng)？可以獲得單倍體 獲得種子 建立離體受精系統(tǒng)7、 影響子房培養(yǎng)的因素有哪些？1.基因型 2. 胚囊發(fā)育時(shí)期，培養(yǎng)時(shí)選接近成熟的子房 3.培養(yǎng)基1）基本培養(yǎng)基的影響2）植物激素的影響 3）蔗糖濃度 蔗糖濃度多在310之間，因不同植物材料而異，一般是誘導(dǎo)培養(yǎng)階段蔗糖濃度要高一些，分化培養(yǎng)時(shí)蔗糖濃度要低一些。 4.接種方式 極性； 營(yíng)養(yǎng)吸收：花柄直接插入誘導(dǎo)頻率高 5單倍體的來(lái)源和發(fā)育途徑8、 簡(jiǎn)述離體受精的一般程序。精卵細(xì)胞的分離精卵細(xì)胞的融合1、電融合2、高Ca，高pH 3、一般鈣條件下的融合4、PEG誘導(dǎo)融

36、合合子的培養(yǎng) 微室培養(yǎng) 飼喂層培養(yǎng)第九章 植物快繁技術(shù)一、名詞解釋1、快速繁殖：利用細(xì)胞的再生特性，在組織培養(yǎng)條件下加速繁殖材料的個(gè)體生產(chǎn)，提高繁殖系數(shù)的方法。2、組織培養(yǎng)快速繁殖: 應(yīng)用組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物新品種或新品系，使其在一定時(shí)間內(nèi)繁衍出一定數(shù)量與母本相同的植株。3、芽分化4、根分化5、污染:指在組織培養(yǎng)過(guò)程中，微生物進(jìn)入培養(yǎng)體系，在培養(yǎng)的材料上或培養(yǎng)容器內(nèi)的其他部位繁殖和生長(zhǎng)的現(xiàn)象。6、玻璃化：植物組織培養(yǎng)中分化出半透明的畸形試管植株（玻璃化苗）的現(xiàn)象，稱(chēng)為玻璃化現(xiàn)象。7、褐變：外植體在脫分化和再分化過(guò)程中，分泌褐色物質(zhì)使培養(yǎng)基和外植體本身變褐的現(xiàn)象。8、變異：在試管苗中出

37、現(xiàn)和供體材料不一樣植株的現(xiàn)象9、繁殖系數(shù)：指在一次繼代培養(yǎng)中由一個(gè)苗（芽或芽叢）得到新苗的個(gè)數(shù)。二、判斷題1、以10個(gè)芽為材料，如果增殖倍率為3、繼代周期為1個(gè)月，則6個(gè)月內(nèi)最多可生產(chǎn)7290個(gè)芽。（ ）2、植物離體微繁屬無(wú)性繁殖范疇。（ ）3、植物快速繁殖中，繁殖系數(shù)越高越好。（ × ）4、褐變是植物離體組織中的多酚氧化酶被激活造成的。（ ）5、繼代培養(yǎng)次數(shù)越多，變異率越高。（ ）6、提高培養(yǎng)中的細(xì)胞分裂素濃度能有效降低玻璃化苗的形成。（ × ）-與細(xì)胞分裂素呈正相關(guān)三、問(wèn)答題1、 什么叫植物快速繁殖2、 植物的快速繁殖有什么優(yōu)點(diǎn)快速 周年生產(chǎn) 省地、省勞力 提高種苗質(zhì)量

38、 固定雜種優(yōu)勢(shì) 適合于各種類(lèi)型的作物3、 采用組織培養(yǎng)快速繁殖種苗的條件（1）快繁植物有較高的科學(xué)、經(jīng)濟(jì)或生產(chǎn)利用價(jià)值;（2）增殖效率高，能產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益;（3）用其他方法繁殖速度慢4、 植物快速繁殖種苗的程序是什么1. 培養(yǎng)材料的選擇1）母株的選擇：健壯無(wú)病蟲(chóng)害；具有該品種的典型性狀；生命力旺盛2. 中間繁殖體誘導(dǎo) 1）外植體消毒（2）接種培養(yǎng)3）觀察記錄和污染材料的處理特點(diǎn)：一般用固體培養(yǎng)基；每瓶接種的外植體數(shù)少；及時(shí)搶救污染材料；對(duì)培養(yǎng)條件要求高3. 中間繁殖體的繁殖 1）選擇無(wú)污染的材料2）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制培養(yǎng)基（3）切割接種4）培養(yǎng)和繼代 直接關(guān)系到植物快繁的效益4. 中間繁殖體

39、再生1）芽分化（2）根分化3）壯苗5. 試管苗移栽：（1）移栽基質(zhì)的選擇、消毒（2）試管苗出瓶（3）試管苗移栽（4）移栽后的管理5、 植物快速繁殖種苗的具體方法是什么6、 什么叫外植體？怎樣選取外植體？外植體: 從植物體上分離下來(lái)的用于離體培養(yǎng)的材料。 確定外植體的原則:植物在自然條件下繁殖特點(diǎn)外植體的取材部位、大小和生理狀態(tài)易培養(yǎng)易消毒7、 怎樣獲得無(wú)菌的外植體？P1098、 什么叫中間繁殖體？中間繁殖體包括那些類(lèi)別？在離體培養(yǎng)過(guò)程中形成的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的中間繁殖材料。包括：原球莖、根狀莖、叢芽、胚狀體、愈傷組織等。9、 影響中間繁殖體誘導(dǎo)的因素有那些？10、怎樣進(jìn)行中間繁殖的繁殖？（1）

40、選擇無(wú)污染的材料（2）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制培養(yǎng)基（3）切割接種（4）培養(yǎng)和繼代直接關(guān)系到植物快繁的效益11、影響中間繁殖體繁殖的因素有那些？12、什么叫芽分化？影響芽分化的因素有那些？13、什么叫根分化？影響根分化的因素有那些？14、怎樣進(jìn)行試管苗移栽？（1）移栽基質(zhì)的選擇、消毒（2）試管苗出瓶（3）試管苗移栽（4）移栽后的管理15、影響試管苗苗移栽成活率的因素有那些？1.試管苗出瓶后的水分平衡；2.栽培介質(zhì)的疏松通氣；3.周邊環(huán)境中的細(xì)菌滋生；4.光照與溫度16、什么叫褐變？影響褐變的因素有那些？褐變：外植體在脫分化和再分化過(guò)程中，分泌褐色物質(zhì)使培養(yǎng)基和外植體本身變褐的現(xiàn)象。影響褐變的因素

41、：基因型；外植體：取材部位、時(shí)間和大小等；光照；溫度；培養(yǎng)基：培養(yǎng)基狀態(tài)、無(wú)機(jī)鹽、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、吸附劑；抗氧化劑；吸附劑；鰲合劑；pH值；培養(yǎng)方式：外植體在培養(yǎng)基中的放置方式，培養(yǎng)方法，轉(zhuǎn)瓶時(shí)間、原生質(zhì)體密度。在導(dǎo)致褐變的諸多因素中,膜結(jié)構(gòu)的破壞或細(xì)胞中物質(zhì)區(qū)域化分布的破壞是酚類(lèi)物質(zhì)的酶促氧化和組織發(fā)生褐變的關(guān)鍵。17、怎樣減輕褐變？1.選擇適當(dāng)?shù)耐庵搀w；2.加入抗氧化劑和抑制劑對(duì)外植體進(jìn)行預(yù)處理；3.控制培養(yǎng)基的成分、硬度、pH值等；4.培養(yǎng)條件：適宜的溫度，光照強(qiáng)度等18、什么叫玻璃化，為什么會(huì)出現(xiàn)玻璃化？植物組織培養(yǎng)中分化出半透明的畸形試管植株（玻璃化苗）的現(xiàn)象，稱(chēng)為玻璃化現(xiàn)

42、象。 1.外植體類(lèi)型及大小顯著影響玻璃化的發(fā)生；2. 試管苗在培養(yǎng)過(guò)程中的光照，溫度，溫度，PH；3.培養(yǎng)基的成分；4.固化劑的種類(lèi)和數(shù)量；5.激素和糖濃度等19、怎樣克服玻璃化？ 1.選擇合適的外植體；2.改善培養(yǎng)基組成；3.改善培養(yǎng)條件：加強(qiáng)氣體交換，提高光強(qiáng)，降低相對(duì)濕度等；4.采用適宜的激素、糖和固化劑；5.采用其他化學(xué)物質(zhì)如青霉素、氯化膽堿，激素合成前體等。20、植物快繁過(guò)程中污染的類(lèi)型和原因是什么？（1）材料帶菌(各種種細(xì)菌、真菌等微生物);（2）接種污染;（3）環(huán)境污染21、怎樣控制污染，提高快繁效率？（1）材料帶菌:選擇帶菌少或不帶菌材料;材料的預(yù)處理;建立可靠高效消毒技術(shù)體系

43、;培養(yǎng)基中加入抗生素;（2）接種污染:防止呼吸污染;維護(hù)超凈工作臺(tái)的功能;防止交叉污染;減少接種室的菌源;（3）控制環(huán)境污染: 及時(shí)清理污染物;經(jīng)常對(duì)環(huán)境進(jìn)行滅菌處理;環(huán)境溫濕度控制;用塑料袋代替培養(yǎng)瓶22、什么叫變異？植物快繁過(guò)程中為什么會(huì)出現(xiàn)變異？變異：在試管苗中出現(xiàn)和供體材料不一樣植株的現(xiàn)象。影響組培苗變異頻率的因素：基因型；外植體；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑；培養(yǎng)條件；繼代次數(shù)23、怎樣檢驗(yàn)變異？怎樣減少變異？檢驗(yàn)：1.遺傳分析；2.與基因產(chǎn)物改變相關(guān)的生化機(jī)制分析；3.變異頻率；4.變異細(xì)胞離開(kāi)選擇劑后的穩(wěn)定性；5.分子差異分析。 減少試管苗變異的措施：選擇合適的基因型；選擇合適的外植體；采用適

44、宜的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑；采用適宜的培養(yǎng)條件；控制繼代次數(shù)24、簡(jiǎn)述植物快速繁殖現(xiàn)狀和展望？1快繁植物的種類(lèi)不斷增加；2快速繁殖的方法不斷改進(jìn)；3快速繁殖的規(guī)模不斷擴(kuò)大；4快速繁殖技術(shù)向自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展；5種苗質(zhì)量不斷提高第十章 植物脫毒苗生產(chǎn)一、名詞解釋 1、植物脫毒培養(yǎng)2、脫毒苗3、指示植物：具有能夠辨別某種病毒專(zhuān)化性狀的寄生植物4、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定二、判斷題1、植物莖尖中病毒少，而根尖中病毒較多，因此脫毒苗生產(chǎn)常以莖尖分生組織為外植體。（ X ）2、孔雀綠能夠抑制病毒的合成，但不能使病毒失活。（X ）3、植物脫毒處理的溫度和時(shí)間因植物的種類(lèi)而異，和處理器官的生理狀況無(wú)關(guān)。（X ）4、莖尖越小

45、，脫毒效果越好。（ ）5、指示植物法是病毒檢測(cè)中最古老最準(zhǔn)確的方法。（X ）三、問(wèn)答題1.植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)脫毒苗木上有何意義？ 2.植物脫毒的主要方法有哪些？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？應(yīng)如何選擇應(yīng)用?3.熱處理為什么可以去除部分植物病毒？熱處理方法分為幾種，常用的是哪一種？ 4.論述莖尖培養(yǎng)脫毒的原理，方法及影響其脫毒效果的因素。 脫毒的原理：病毒在植物體內(nèi)的分布是不均一的，越靠近生長(zhǎng)點(diǎn)，病毒濃度越稀，因此，采用小的莖尖進(jìn)行離體培養(yǎng)有可能消除植物病毒。方法：1、被脫毒植物攜帶病毒的診斷：根據(jù)病毒病的癥狀特征；借助指示植物；血清學(xué)（；2、母體材料的選擇母體植株性狀的典型性外植體的健康程度 3、莖尖分生組織

46、的分離和培養(yǎng)（1）外植體消毒（2）莖尖剝離 解剖鏡，解剖針，鑷子和手術(shù)刀（3）莖尖培養(yǎng)1)病毒種類(lèi)（2）莖尖大?。?）快繁途徑（4）脫毒方法（5）其他病毒干擾5.什么叫脫毒苗?6.如何鑒定莖尖培養(yǎng)而成的苗確實(shí)是無(wú)毒的？1）指示植物鑒定:將待測(cè)植物的汁液接種到指示植物上，如果被測(cè)植物帶有病毒，指示植物就會(huì)出現(xiàn)特定癥狀（ 2）血清鑒定試管沉淀反應(yīng):在抗原和抗體最適比例的條件下觀察有無(wú)沉淀來(lái)確定被測(cè)植物是否帶有病毒的方法 免疫雙擴(kuò)散 ：是在半固體的凝膠中測(cè)定在其中擴(kuò)散的抗原和抗體間沉淀反映的一種方法 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 分子檢測(cè) RT-PCR法 7.怎樣保存和利用無(wú)毒苗？脫毒苗的保存與繁殖；脫毒苗的離

47、體保存與繁殖；建立脫毒種苗生產(chǎn)繁殖網(wǎng)絡(luò)體系；木本植物建立隔離的脫毒苗母本園第十一章 花藥和花粉培養(yǎng)一、名詞解釋1、花藥和花藥培養(yǎng)：植物花藥培養(yǎng)是指在離體條件下，對(duì)植物花藥組織進(jìn)行培養(yǎng)，通過(guò)誘導(dǎo)花藥中小孢子的雄核發(fā)育，產(chǎn)生植物單倍體，進(jìn)而通過(guò)染色體加倍產(chǎn)生加倍單倍體的技術(shù)。2、花粉和花粉培養(yǎng)：處于一定發(fā)育階段的花粉從花藥中分離出來(lái)，再加以離體培養(yǎng)成為植株的過(guò)程。有時(shí)花粉培養(yǎng)也稱(chēng)為小孢子培養(yǎng)3、雄核發(fā)育：在離體條件下由花粉產(chǎn)生單倍體胚和植株的過(guò)程。4、花粉的二型性：在天然花粉群體中，除正?；ǚ弁?，還存在一部分發(fā)育遲緩、體積小、染色淺的異?；ǚ鄣默F(xiàn)象叫花粉的二型性。這些異常花粉具有雄核發(fā)育的潛力（胚

48、胎發(fā)生能力），叫E花粉。5、E花粉6、預(yù)處理7、預(yù)培養(yǎng)二、判斷題1、花藥和花粉培養(yǎng)屬于同一組織培養(yǎng)范疇。（ X ）組織、細(xì)胞2、花藥培養(yǎng)的再生植株均為單倍體。（X ）雙子葉3、首先進(jìn)行花藥培養(yǎng)的科學(xué)家是Guha和 Maheshwari。（x ）4、對(duì)花藥進(jìn)行預(yù)處理的主要目的是為了提高誘導(dǎo)率。（ ）5、培養(yǎng)基中銨離子含量過(guò)高對(duì)花藥培養(yǎng)不利。（ ）6、外源激素不僅影響花粉發(fā)育類(lèi)型，而且會(huì)影響體細(xì)胞二倍體組織的脫分化和增值。（ ）7、花藥培養(yǎng)一步成苗的基本培養(yǎng)基和多步成苗基本相同。（ ）8、花藥和花粉培養(yǎng)中，雄核發(fā)育具有階段性。（ ）9、白化苗是禾本科植物花藥培養(yǎng)中常見(jiàn)現(xiàn)象。（ ）10、花粉植株的白

49、化現(xiàn)象是不可逆轉(zhuǎn)的。（ ）三、問(wèn)答題1、什么是花藥和花藥培養(yǎng)？什么是花粉和花粉培養(yǎng)？2、為什么要進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)？3、怎樣進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)？外植體選擇 外植體(花蕾)預(yù)處理 外植體消毒 剝?nèi)』ㄋ?接種 誘導(dǎo)培養(yǎng) 分化培養(yǎng) 染色體加倍 植株倍性鑒定4、影響花藥和花粉培養(yǎng)的因素？1）外植體的選擇：供試材料的遺傳背景 不同種品種花藥培養(yǎng)能力不同： 花藥培養(yǎng)能力是可以遺傳的供試材料的生理狀態(tài)：供體植株的年齡和所處的生長(zhǎng)環(huán)境條件均影響花藥培養(yǎng)2.花粉發(fā)育時(shí)期3.花藥的預(yù)處理： 花藥培養(yǎng)前給予一定的低溫處理是十分必要的。預(yù)處理的方法包括冷處理、熱處理、化學(xué)物質(zhì)（乙烯利）、滲透處理等4.培養(yǎng)基：（1）花

50、藥培養(yǎng)常用的基本培養(yǎng)基：MS ； Nitsch；N6；B5。（2）無(wú)機(jī)鹽成分 無(wú)機(jī)鹽濃度、銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的濃度和比值（3）蔗糖濃度： （4）、激素對(duì)花藥培養(yǎng)有重要影響：高濃度的2,4-D主要誘導(dǎo)花藥形成愈傷組織，而不能形成胚狀體，從而增加了二倍體細(xì)胞發(fā)育的機(jī)會(huì)。（5）有機(jī)附加物：水解酪蛋白，水解乳蛋白等 （6）活性炭，加0.5-1%有利5、培養(yǎng)方法 6、接種密度4、培養(yǎng)條件對(duì)花藥培養(yǎng)有一定的影響溫度：不同植物對(duì)溫度的要求不同，如：光照：先弱后強(qiáng)5、花藥培養(yǎng)中存在的問(wèn)題、原因和解決方法1）提高愈傷組織誘導(dǎo)率和植株再生率（2）白化苗禾谷類(lèi)植物經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)白化苗，影響白化苗形成的因素有： 供體植物基因

51、型 花粉發(fā)育時(shí)期 培養(yǎng)基成分 培養(yǎng)溫度6、花藥培養(yǎng)的現(xiàn)狀和展望7、一步成苗有哪些優(yōu)點(diǎn)？8、影響白化苗形成的因素都有哪些？9、簡(jiǎn)述白化苗的形成機(jī)理。10、與常規(guī)育種比較，花粉單倍體育種有哪些優(yōu)點(diǎn)？11、與花藥培養(yǎng)比較，花粉培養(yǎng)有何優(yōu)點(diǎn)？12、分離花粉有哪些方法？（1）機(jī)械分離花藥 少量培養(yǎng)基或等滲的蔗糖溶液中 平頭玻璃棒輕壓 過(guò)篩 離心（500-1000rpm，1-5min） 洗滌 懸浮 活力和密度測(cè)定（適合于雙子葉植物）（2）花粉漂浮培養(yǎng)自然釋放（3）磁拌法花藥+少量玻璃珠 放入盛液體培養(yǎng)基的三角瓶中 用磁力攪拌器攪拌 其余步驟同上第十二章 體細(xì)胞雜交一、名詞解釋1、體細(xì)胞雜交：兩種不同基因型

52、個(gè)體或不同種、屬、科生物細(xì)胞的原生質(zhì)體分別分離出來(lái)，再用一定的技術(shù)融合成一個(gè)新的雜種細(xì)胞，乃至發(fā)育成雜種植株的過(guò)程。2、 微細(xì)胞雜交3.自體融合：發(fā)生在親本原生質(zhì)體自身，結(jié)果是獲得“同核體”。4、異體融合：由不同種的雙親原生質(zhì)體融合而得到“異核體5、對(duì)稱(chēng)融合：是指兩個(gè)完整的細(xì)胞原生質(zhì)體融合6、非對(duì)稱(chēng)融合：利用物理或化學(xué)的方法使親本的核或細(xì)胞質(zhì)失活后再進(jìn)行融合7、胞質(zhì)雜種8、核質(zhì)雜種9、亞原生質(zhì)體10、互補(bǔ)選擇法： 兩個(gè)具有不同遺傳或生理特性的親本，在形成雜種細(xì)胞時(shí)能產(chǎn)生互補(bǔ)作用，根據(jù)這一特性進(jìn)行雜種細(xì)胞選擇的方法11、機(jī)械選擇法：利用原生質(zhì)體的某些可見(jiàn)標(biāo)志，如形態(tài)色澤上的差異將融合的細(xì)胞從混合

53、群體中選擇出來(lái)的方法。12、組織培養(yǎng)篩選法：根據(jù)不同植物細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件的要求與反應(yīng)的不同來(lái)選擇雜種細(xì)胞的方法二、判斷題1、原生質(zhì)體融合首先是細(xì)胞質(zhì)融合，最后是細(xì)胞核融合。（x ）細(xì)胞質(zhì)不融合2、羅丹明是一種親脂染料，能夠抑制線(xiàn)粒體的氧化磷酸化過(guò)程而使細(xì)胞質(zhì)失活。（ ）3、亞原生質(zhì)體可以通過(guò)密度梯度離心的方法制備。（ ）4、細(xì)胞松弛素B能引起植物原生質(zhì)體排核，因此可以獲得胞質(zhì)體。（ ）5、不同來(lái)源的原生質(zhì)體融合需要誘導(dǎo)才能實(shí)現(xiàn)。（ ）6、原生質(zhì)體培養(yǎng)是體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)。（ ）7、體細(xì)胞雜交能克服遠(yuǎn)緣雜交障礙。（ ）三、問(wèn)答題1、簡(jiǎn)述影響原生質(zhì)體融合的因素1)、原生質(zhì)體的質(zhì)量2）、融合

54、方法3、融合參數(shù)4.融合體的類(lèi)型Ø 影響PEG融合率的因素主要有：PEG的相對(duì)分子質(zhì)量、純度、濃度、處理時(shí)間、原生質(zhì)體的生理狀況和密度等。Ø 影響電融合的因素主要有：原生質(zhì)體的密度，融合液的成分，電極的材料和間距，交變電場(chǎng)強(qiáng)度，直流脈沖的強(qiáng)度、寬幅及次數(shù)等。2、何謂亞原生質(zhì)體？用于原生質(zhì)體融合的亞原生質(zhì)體都有哪些？3、何謂胞質(zhì)雜種和核質(zhì)雜種？它們是怎樣形成的?4、以激素自養(yǎng)型互補(bǔ)、營(yíng)養(yǎng)缺陷型互補(bǔ)和抗性互補(bǔ)為例，說(shuō)明利用互補(bǔ)選擇體細(xì)胞雜種的原理和方法。5、簡(jiǎn)述非對(duì)稱(chēng)融合體細(xì)胞雜種的遺傳特點(diǎn)。6、簡(jiǎn)述體細(xì)胞雜種cpDNA的遺傳特點(diǎn)。7、簡(jiǎn)述體細(xì)胞雜種mtDNA的遺傳特點(diǎn)。8、試

55、論原生質(zhì)體融合在外源基因轉(zhuǎn)移上的作用和潛力。9、細(xì)胞雜種的選擇方法有哪些？10、 簡(jiǎn)述體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用。1）、通過(guò)體細(xì)胞雜交合成新物種2、培育作物新種質(zhì)和新品種3、轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)基因控制的性狀11、與有性雜交相比，原生質(zhì)體融合有何特點(diǎn)？第十三章 突變體篩選一、名詞解釋1、突變體篩選：從離體培養(yǎng)的植物材料中，篩選擬定目標(biāo)突變體的方法，稱(chēng)為突變體篩選2、正選擇：是指在培養(yǎng)物中加入對(duì)正常細(xì)胞有毒的化學(xué)物質(zhì)，使正常細(xì)胞不能生長(zhǎng)，而突變體可以生長(zhǎng)，從而選出突變體的方法。3.負(fù)選擇：在特定的培養(yǎng)基上或培養(yǎng)條件下使突變的細(xì)胞死亡，而正常細(xì)胞可以生長(zhǎng)，從而選出突變體的方法。4、變異體：不加任何選擇壓力而篩選出的變異個(gè)體稱(chēng)為變異體。5、突變體： 經(jīng)過(guò)施加選擇壓力所選出的無(wú)性系變異，6、體細(xì)胞無(wú)性系變異吧：植物的組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體在離體培養(yǎng)的