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1、嘌呤(腺嘌呤a,鳥嘌呤g)嘧啶(尿嘧啶u,胸腺嘧啶t,胞嘧啶c)喀陡環(huán)4n9氫u七 l兩成h3c氫三成形對(duì)the'c2.戊糖脫氧核糖(deoxyribose)(dna成分)3.核卄nhho ch核糖(ribose) (rna成分)ho2堿基與核糖或脫氧核糖生成核苷或脫氧核苷 戊糖的c一r原子和嘌呤的n9原子或嘧啶的n 一 1原子通過(guò)縮合反應(yīng)形成了 p n糖苷鍵第二章核酸的結(jié)構(gòu)和功能一.核酸的化學(xué)組成及一級(jí)結(jié)構(gòu)(一)核酸1. 概念:以核苷酸為基本組成單位的生物信息大分子,具科儲(chǔ)存、攜帶和傳遞遺傳信息的功能。2. 核酸的分類及分布: 脫氧核糖核酸dna:存在于細(xì)胞核,線粒體,葉綠體,攜帶遺

2、傳信息 核糖核酸rna:分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體,參與遺傳信總的復(fù)制與表達(dá)。3. 元素組成:c、h、0、n、p (9-11%)(二)核酸的難本單位核苷酸 堿®:嘌呤堿,詠啦堿戊糖:核糖,脫氧核糖磷酸1. 堿基構(gòu)成dna的堿基有a, g, c, t構(gòu)成rna的堿基有a, g,c, u(宥的rna還含宥少量稀存 堿基)oh oh4. 核苷酸hoohnh2核苷或脫氧核苷c一5原子上的輕 基與磷酸反應(yīng),脫水后生成磷酯鍵, 構(gòu)成核苷酸或脫氧核苷酸。ohhohofirohoao =pl核苷一磷酸_mp核苷二磷酸_dp核卄三磷酸_tp5. 核酸3',5'-鱗酸二酯鍵|ci多個(gè)核

3、苷酸由前一位的3-0h與下一位的5一磷酸菽之間形成的3,5-磷酸二醋鍵連接、 形成的鏈狀聚合物,即多聚核苷酸。核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu):1、定義:核酸中核苷酸的排列順序/堿葙序列。2、連接:3,5 磷酸二酷鍵3、方向:5 一3二.dna的空間結(jié)構(gòu)與功能(細(xì)胞內(nèi)含m最穩(wěn)定的成分) (-)dna的二級(jí)結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu)1. dna雙螺旋結(jié)構(gòu)的研究背景 chargaff 規(guī)則: 所有 dna 分子,a=t,c=g,a/t=g/c=1, a+g=t+c 不同生物種屬的dna堿基不同: 同一個(gè)體不kd器官或不同組織的dna具有相m的堿蕋組成; 對(duì)于一特定組織的dna,其堿®組分不隨其年齡,營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和環(huán)境變化

4、3)大拗艦3.54nm3.dna雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性2. dna螺旋雙梭邢結(jié)構(gòu)要點(diǎn)(damp,dgmp, dcmp,dtmp) dna是反相平行,右手螺旋的雙鏈結(jié)構(gòu), 兩鏈鬧繞同一螺旋軸; 由脫氧核糖和磷酸基閉構(gòu)成的親水性骨 架位于雙螺旋結(jié)構(gòu)外側(cè),疏水的堿基位于內(nèi)側(cè); 直徑2. 37nm,螺跑為3. 54nm,每一個(gè)螺 旋有10. 5個(gè)堿基對(duì);(a)b dna(b) a dna(c)z dna 堿基對(duì)之間的氫鍵維持雙螺旋結(jié)構(gòu)橫向 穩(wěn)定,堿基平面間的疏水性堆積力(范德華力) 維持縱向穩(wěn)定。4.dna雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性b型dna是dna在水性環(huán)境下和生 理?xiàng)l件卜最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),屬右手螺旋結(jié) 構(gòu);當(dāng)環(huán)境

5、的相對(duì)濕度降低后,甩然dna 仍為右手螺旋的雙鏈結(jié)構(gòu),但它的空間 參數(shù)發(fā)生變化,稱為a型一dna;左手 螺旋結(jié)構(gòu)在天然dna分子中同樣存在, 稱為z型一dna (rich提出)在酸性環(huán)境屮,胞嘧啶的n-3 原了被質(zhì)了化,可與鳥嘌呤的 n-7原子形成氫鍵;胞嘧啶的 n-4的氫原子也川*與鳥嘌呤的 0-6形成氫鍵.這種氫鍵叫 hoogsteen 氛鍵。dna屮只奮模板鏈可為一條缶g質(zhì)編碼。(二)dna的高級(jí)結(jié)構(gòu)超螺旋結(jié)構(gòu)dna雙螺旋鏈冉盤繞即形成超螺旋結(jié)構(gòu)。正負(fù)超螺旋:盤繞方向與dna相同的為正 超螺旋。tl然界的閉合雙鏈dna主要以負(fù)超螺旋形式存在。環(huán)狀和超螺旋dna結(jié)構(gòu)示意圖2.真核生物dna

6、以核小體為單位形成尚度奮序致密結(jié)構(gòu)i. 原核生物dna的環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)大多原核生物的dna是共價(jià)封閉 的環(huán)形dna雙螺旋,在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步盤 繞,與蛋白質(zhì)結(jié)合成類核真核細(xì)胞中的dna的三級(jí)結(jié)構(gòu)與5種組蛋d的結(jié)合有關(guān)。 由dna雙螺旋在八聚體組蛋白之外盤旋形成核小體,由核小 體組成串珠結(jié)構(gòu),再經(jīng)過(guò)多次螺旋形成染色體。核小體(染色體基本組成單位).核心穎粒核小體y 的構(gòu)成 1核心組蛋白:組蛋白八聚體 m、h,b、h3、 h各2分子dna雙蠓旋分子(150bp)在 核心組蛋白纏繞1.75困真核細(xì)胞連接區(qū)c:)卜繼30nm纖維400nm的超螺旋旋管纖維 染色單體rna種類細(xì)胞核和胞液線粒體功能核蛋白體r

7、narrnamtrrna組成核糖核蛋白體信使rnamrnamtmrna合成蛋白質(zhì)模版(密碼)轉(zhuǎn) igrnatrnamt trna轉(zhuǎn)運(yùn)、活化氨基酸核內(nèi)不均一 rnahnrnamrna前體核內(nèi)小rnasnrna參與hnrna剪接、轉(zhuǎn) 運(yùn)核仁小rnasnornarrna的加工修飾胞漿小rnascrna/7sl rna蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成 的信號(hào)識(shí)別體的組分三.rna的結(jié)構(gòu)與功能(amp,gmp,cmp, ump)rna通常以單鏈形式存在,但鏈內(nèi)的堿基配對(duì)形成局部的雙鏈二結(jié)構(gòu)和空間的高級(jí)結(jié)構(gòu)。(一)蛋白質(zhì)合成的模板mrna1. 在生物體閃,mrna的豐度蛣小,占細(xì)胞rna總fi的2%5%2. 真核生物

8、mrna結(jié)構(gòu)5'帽子結(jié)構(gòu)密巧子3'多聚a尾i。i invg叩pmwnv囑議ug卜巾人jaaa. .an 5啡i譯區(qū)編碼區(qū) 3啡上譯區(qū)結(jié)構(gòu)特點(diǎn):5'帽子結(jié)構(gòu):反式的7-甲基鳥嘌呤-三磷酸糖苷(m7gppp) 3末端多聚a尾polya;真核生物hnrna的編碼區(qū)(外顯子)和非編碼區(qū)(內(nèi)含子)顯子1s子2顯子3(exon)(exon)(exon)hnrna內(nèi)含子1子2(intron) |(intron)mrnamrnamrna經(jīng)前體hnrna的剪接而成熟。內(nèi)含子被剪切掉,使得外顯子連接在一起。mrna二級(jí)結(jié)構(gòu)為單鏈,局部可形成雙鏈。功能:把dna的遺傳信總,轉(zhuǎn)錄成mrna的密

9、碼序列、指導(dǎo)缶白質(zhì)合成的氨基酸排列順 序。(二)trna是蛋白質(zhì)合成中的氨基酸載體功能:把活化的aa搬運(yùn)到核糖體,trna的反密碼子與mrna的密碼子特異性結(jié)合,使氨 基酸對(duì)號(hào)入座l .trna占細(xì)胞總rna的15%2. trna的結(jié)構(gòu)(磷酸,甲基化核糖,堿基)(1)trna含冇多種稀冇堿葙trna中的稀有堿基占所有堿基的10%20%,均是轉(zhuǎn)錄后 修飾加工而成的。如尿嘧啶核苷酸,次黃嘌呤核苷酸,二鉍尿嘧啶核苷酸等。(2)trna的二級(jí)結(jié)構(gòu)一三葉草形trna具有四個(gè)莖和三個(gè)環(huán),從53,三個(gè)環(huán)依次 為:dhu環(huán),反密碼子環(huán)(功能:讀碼),twc環(huán)。四臂為:氨基酸臂(功能:攜帶氨基 酸),dhu臂,

10、反密碼子臂,twc臂。其屮反密碼子環(huán)屮的反密碼子能識(shí)別mrna屮相 應(yīng)的密碼子。trna的3 一末端均為cca序列,是攜帶氨基酸的部位。a-oh3'trna的三葉草結(jié)構(gòu)aa-cca y 結(jié)合活化的aaddgaacqgp dhu環(huán) i jdddaagggc,a,auguccccgcu camtill 1丁識(shí)環(huán)廣gggcg c eg ag ag u 三 u 環(huán)l反密碎環(huán):含反密碼子、與mrna s碼環(huán)的密碣子結(jié)合u ap一反密碼子含稀有減jl多(3) trna的三級(jí)結(jié)構(gòu)一倒l形 trna是分子量最小的rnar我(三)以rrna為組分的核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所功能:參與組成核蛋內(nèi)體,為蛋a質(zhì)

11、生物合成的場(chǎng)所。核糖體rna (rrna)是細(xì)胞內(nèi)含景最多的rna,約占rna總暈的80%以上。rrna與核 糖體蛋a構(gòu)成核糖體,是蛋a質(zhì)合成的裝配機(jī)。核糖體ih大小兩個(gè)亞基組成。核蛋白體大小亞基所含的rrna成分,s為沉降系數(shù)。真核生物 5s rrna原核生物 s rrna 3s rrna8s rrna -大亞28s rrna 18s rrna小亞基成分j6s rrna(注:為記憶方便,5 是厚核和真核都有的,帶8的 是真核具有的,厚核的不帶.)三種 rnai、mrnatrnarrna局部雙局部雙令5 m7gpppnm、3z polya遺傳密碼三葉草形、倒l形呈花狀含稀有堿基多 反密碼子 c

12、caoh 3z功蛋白質(zhì)合成的模板能分子大小不一, 量少5%,代謝快搬運(yùn)活化的aa 到核糖體分子小120堿基 量約15%,穩(wěn)定組成核蛋白體分子大20減基 量多約80%,穩(wěn)定四.核酸的理化性質(zhì)核酸含有磷酸基m和堿基,屈于酸堿兩性物質(zhì),可發(fā)生兩性電離,每種核酸有f=l己的等 電點(diǎn),可電泳分離。由于溶液中的核酸分子在引力場(chǎng)中,可用超速離心法純化核酸。dna是線性分子,溶液的黏度大,而rna遠(yuǎn)小于dna,溶液的黏度小。(一)260nm紫外吸收性質(zhì)核酸的嘌呤,嘧啶含奮共軛雙鍵(二)dna變性:雙鏈解為單鏈1.在某些理化因素(高溫,強(qiáng)酸,強(qiáng)堿,加尿素,w機(jī)溶劑)作用下,會(huì)導(dǎo)致dna雙 連互補(bǔ)堿基對(duì)之間氫鍵發(fā)

13、生斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)的dna解離為單鏈。dna變性只改變其二級(jí)結(jié)構(gòu),不改變其一級(jí)結(jié)構(gòu)。破壞雙螺旋穩(wěn)定的力:靜電斥力2. 變形后的dna剛性減弱,黏度降低,浮力密度增加,沉降速度增加,產(chǎn)生增色效應(yīng) (在260nm波長(zhǎng)處的紫外線吸收增強(qiáng))dna變性并不產(chǎn)生吸收波長(zhǎng)發(fā)生轉(zhuǎn)移。3. 鏈解溫度dna變性特點(diǎn):驟然、突發(fā)式鏈解溫度tm:熱變性是在一個(gè)相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成,在這一范圍內(nèi),紫外光吸收 值達(dá)到最大值的50%時(shí)的溫度稱為dna的解鏈溫度,又稱熔解溫度tm。tm=4 (g+c) +2 (a+t)寡核苷酸片段核酸愈純,tm范圍愈??;核酸分了愈小,tm范圍愈小 在此溫度吋,50%的dna雙鏈被打幵。tm與g+c含量成正比(三)dna的fi性與分子雜交熱變性的dna經(jīng)緩慢冷卻后即可重新恢復(fù)雙螺旋的過(guò)程,這一過(guò)程稱為復(fù)性/退火。dna濃度高時(shí),形成氯鍵

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