
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1、在進(jìn)行分析測(cè)試方面的研究時(shí),一般采用移液槍(pipette)量取少量或微 量的液體。對(duì)于移液槍的正確使用方法及其一些細(xì)節(jié)操作,是很多人都會(huì)忽略的。 現(xiàn)在分幾個(gè)方面詳細(xì)敘述。量程的調(diào)節(jié)在調(diào)節(jié)量程時(shí),如果耍從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí) 針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí),則可先順吋針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕 至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。 在該過程中,干萬不要將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液 槍。槍頭(吸液嘴)的裝配在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時(shí),很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲 兒下,這時(shí)錯(cuò)誤的做法,因?yàn)檫@樣會(huì)導(dǎo)
2、致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn) 生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移 液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合。如果是 多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭,然 后傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過c®環(huán), 并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。移液的方法移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí),移液器 保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液 體以潤(rùn)濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí))。這時(shí)可以采取 兩種移
3、液方法。一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn),然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)。 接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的 液體。最后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液休、生物活性液休、易起泡液體或極 微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出 殘余的液體。先按下按鈕至第二停點(diǎn),慢慢松開按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至第 一停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(diǎn)(千萬別再往下 按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。移液器的正確放置使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里 有液體時(shí),切勿將移
4、液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)的注意事項(xiàng)> 如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈贊處于松弛狀態(tài)以保 護(hù)彈簧。> 最好定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸僻水清洗, 自然晾干。> 高溫消毒之前,耍確保移液器能適應(yīng)高溫。> 校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境屮,通過重復(fù)幾次秤量蒸錮水的方法來進(jìn)行。> 使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時(shí)吸取液休后懸空垂直放置兒秒中,看 看液面是否下降。>如果漏液,原因大致有一下幾方面:1、槍頭是否匹配;2彈簧活塞是否正常;艮如果是易揮發(fā)的液體(許多有機(jī)溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽
5、壓的 問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液??烧{(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法:用擁指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋紐,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容蚩體枳的數(shù)字,在取液湍下端插上一個(gè)槊料吸頭,并旋緊以保證氣密,然 后四指并攏握住取液器上部,用拘指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點(diǎn),將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕, 吸上液體,并停8m2秒蝕(粘性人的溶液町加長(zhǎng)停留時(shí)何),將吸頭沿器壁滑出容器用吸水紙擦去吸頭表面可能附若的液體,排液時(shí) 吸頭接觸傾斜的器壁(移液器保持豎宜狀態(tài)),先將按鈕按到第-停點(diǎn),停留秒鐘(耕性大的液體要加長(zhǎng)停留時(shí)間).再按壓到第二停點(diǎn), 吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸
6、頭.可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸移液湍使用注總事項(xiàng)(1)吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸収-次樣品溶液.然后再正式移液.因?yàn)槲鼌а?qǐng)蛋白質(zhì)洛液或冇機(jī)溶劑時(shí),吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層” 液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。(3) 濃度和粘度大的液體,會(huì)產(chǎn)生課差,為消除其保差的補(bǔ)償量,可由試驗(yàn)確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋紐改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。(4) 可用分析天平稱晝所取純水的垂量并進(jìn)行計(jì)算的方法,來校正取液器,1ml蒸憎水20'c時(shí)重09982g(5) 移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非
7、常不可取的,長(zhǎng)期操作會(huì)便內(nèi)部零件松散而損壞移液器。(6) 移液器未裝吸頭時(shí).切莫移液。(7) 在設(shè)置量程時(shí),請(qǐng)注意所設(shè)斌程在移液器娥程范慟內(nèi)不耍將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住機(jī)械裝站 損壞了移液器。數(shù)字清淸楚楚在顯 示窗中,旋轉(zhuǎn)到所需量程(8) 移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性.強(qiáng)腐蝕性的液體(如濃酸.濃堿.有機(jī)物等)。(9) 嚴(yán)禁便用移液器吹打混勻液體。(10) 不耍用人晟程的移液器移取小體積的液體,以免影響準(zhǔn)確度。同時(shí),如果需耍移取晟程范用以外較人駅的液體.請(qǐng)使川移液管進(jìn)行操 作移液器的種類和使用準(zhǔn)確的分析方法對(duì)于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是極為重要的,在各種生物化涕分析技術(shù)中,首先要熟練學(xué)握的就旻準(zhǔn)確的移液技術(shù)。
8、為此要用到各 種形式的移液管,其中有一些是學(xué)生們?cè)诨瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)中未用過而在生化實(shí)驗(yàn)中是常用的。1滴管使用方便,可用于半定量移液,其移液量為1ml5ml.常用2ml.可換不同大小的滴頭。滴管有長(zhǎng)、短兩種,新出的一種帶刻度和緩 沖泡的滴骨,可以比普通滴管更準(zhǔn)確地移液,并防止液體吸入滴頭。2移液管(吸管)吸管便用就應(yīng)洗至內(nèi)壁不掛水珠.1ml以上的吸管用吸管專用刷刷洗,0.1ml. 0.2ml和0.5ml的吸管可用洗滌劑浸泡.必要時(shí)可以川 超聲淸洗器淸洗。由于倂酸洗液致癌,應(yīng)盡鍛避免使用。若有大駅成批的吸管洗后沖洗.可使用沖洗桶.將吸管尖端向上置于桶內(nèi).用 自來水多次沖洗后再用蒸懈水或無離子水沖洗。吸骨分
9、為兩種,一種是無分度的,稱為大肚吸符(移液管),粘確度較離,其相對(duì)誤差a級(jí)為07%08%, b級(jí)為45%0.16%,液 體自標(biāo)線流至口端(留有殘液).a級(jí)等待15s. b級(jí)答待3s。另一種吸管為分度吸管(吸量管),管身為一粗細(xì)均勻的玻璃管,上而均 勻刻有表示容積的分度線,其準(zhǔn)確度低于胖肚吸管,相對(duì)誤差a級(jí)為0.8%0.2%, b級(jí)為1.6%0.4%, a級(jí).b級(jí)在吸管身上有a、 b字樣.有快好則為快流式,有”吹”字則為吹出式.無pt字的吸管不可將管尖的殘留液吹岀。吸.放溶液前耍用吸水紙擦拭管尖。3微量進(jìn)樣器微址進(jìn)樣器常用作氣相和液相色譜儀的進(jìn)樣器,在生化實(shí)驗(yàn)中主要是用作電泳實(shí)驗(yàn)的加樣器,通???/p>
10、分為無存液和有存液兩種。(1) 10pl以下的極微量液體進(jìn)樣。無存液微雖進(jìn)樣器:進(jìn)樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處,不會(huì)出現(xiàn)存液。(2) 10pl100pl有存液微晟進(jìn)樣器:不銹鋼的針尖管部分是空管進(jìn)樣器的柱塞不能到達(dá),因而管內(nèi)會(huì)存有空氣或液體其使用注意事 項(xiàng)是:不吋吸取濃堿溶液,以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件;因?yàn)橛写嬉核晕簳r(shí)要來冋多拉兒次,將針尖管內(nèi)的氣泡全部排盡: 針尖管內(nèi)孔極小,使用后尤其是吸取過蛋白質(zhì)溶液后,必須立即活洗針尖管,防止堵塞。若遇針尖管堵塞,不可用火燒,只能用q>0.1 mm的不銹鋼絲耐心昭通;進(jìn)樣器未潤(rùn)濕時(shí)不可來回干拉芯子,以免磨損而漏氣;若進(jìn)樣器內(nèi)發(fā)黑,有不銹鋼氧
11、化物.可用芯子薩 少量肥皂水,來回拉幾次即可除之。4自動(dòng)取液器這種取液器在生化實(shí)驗(yàn)中大址地使用,它們主要用于多次垂復(fù)的快速定眾移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的準(zhǔn)確度(即容址 誤差)為±(0.5%仁5%),移液的粘密度(即重復(fù)性誤差)更小些,為<0.5%.収液器可分為二種:一種是固定容雖的,常用的有100p l等多種規(guī)格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭,吸頭通常是一次性 使用.當(dāng)然也可以超聲淸洗后重復(fù)使用,而11此種吸頭還可以進(jìn)行120'c高壓滅菌:另一種是可訓(xùn)容駅的取液器.常用的有200pl. 50 opl和1000pl等兒種??烧{(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法
12、是用捋指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體枳的數(shù)字,在取液器下端插上一個(gè)塑 料吸頭,并旋緊以保證氣密,然后四指并攏握住取液湍i:部,用押指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點(diǎn),將取液器的吸頭插入 待取的溶液中,緩慢險(xiǎn)開按鈕,吸上液體,并停tyf 1-2秒鐘(粘性大的溶液可加長(zhǎng)停留時(shí)何).將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸 頭表面可能附若的液體,排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器咯 先將按鈕按到第一停點(diǎn),停留-秒鐘(粘性大的液體耍加長(zhǎng)停留時(shí)間),再按壓到第 二停點(diǎn),吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。自動(dòng)取液器的使用注總事項(xiàng)是: 吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。 為
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