虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)

1、-作者xxxx-日期xxxx虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)【精品文檔】虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）檢測(cè)布魯氏菌病的原理和方法由于布魯氏菌培養(yǎng)的營養(yǎng)條件苛刻而且時(shí)間長，所以布魯氏菌病的診斷以血清學(xué)診斷為主。其原理主要是根據(jù)相應(yīng)抗原抗體可以在體外發(fā)生特異性結(jié)合并呈現(xiàn)可見反應(yīng)，用已知抗原(或抗體)檢測(cè)體液中未知的抗體(或抗原)。虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）靈敏度高，價(jià)格便宜，操作方便，檢測(cè)快速，適于群體布魯氏菌病的普查。在國際貿(mào)易中是牛、羊、豬布魯氏菌病檢測(cè)的指定試驗(yàn)，在我國也用于人布魯氏菌病監(jiān)測(cè)的初篩。檢測(cè)布魯氏菌病所用的虎紅平板凝集抗原是用抗原性良好的布魯氏菌菌株經(jīng)培養(yǎng)，滅活，離心收集菌體用虎紅染料染色后，懸

2、浮于乳酸緩沖液中制備而成。試驗(yàn)原理：虎紅平板凝集試驗(yàn)又稱為班氏孟加拉紅平板凝集試驗(yàn)。由于所用的抗原是酸性（PH3.6-3.9）帶色的抗原，該抗原與被檢血清作用時(shí)能抑制血清中的IgM類抗體的凝集活性、檢查的抗體是IgG類，因此提高了反應(yīng)的特異性?；⒓t平板凝集試驗(yàn)具體方法如下：一、材料準(zhǔn)備1、虎紅平板凝集抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清由制標(biāo)單位提供，按說明書使用。2、被檢血清應(yīng)新鮮，無明顯蛋白凝塊，無溶血和無腐敗氣味。3、潔凈的玻片或玻璃板，其上劃分成4cm2的方格。4、吸管或移液器，適于滴加0.03mL液體。5、牙簽、混合棒或火柴桿，供攪拌用。二、操作方法1、實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將血清和抗原在室溫放置30-

3、60min。2、將玻璃板上各格標(biāo)記被檢血清號(hào)，然后加相應(yīng)被檢血清0.03mL。3、在被檢血清旁滴加虎紅平板凝集抗原0.03mL。4、用牙簽類小棒攪動(dòng)血清和抗原，使之充分混合，在5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。5、每次試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰性血清、陽性血清對(duì)照。三、結(jié)果判定1、在陰、陽性血清對(duì)照成立的條件下，方可對(duì)被檢血清進(jìn)行判定。2、受檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性(+)，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。四、方法評(píng)價(jià)1、虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)布魯氏菌病，方法簡便、快速、容易操作，適于基層大面積檢疫；2、該方法敏感性較好，檢查牛的陽性率稍高于綿羊、山羊。3、因?yàn)樵谒嵝原h(huán)境下IgM活性受抑，該法主要是檢查IgG類凝集抗體，所以特異性較好，與補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、二巰基乙醇（2-ME）試驗(yàn)和抗球蛋白試驗(yàn)有較