山西農(nóng)業(yè)大學(xué)飼料分析方法

1、項目一 飼料中水分含量的測定一、實驗?zāi)康耐ㄟ^實驗，要求掌握各類飼料樣品中水分（干物質(zhì)）的測定方法。并實際測出樣品中的水分含量。二、實驗原理風(fēng)干樣品（注：本實驗所用樣品均為風(fēng)干樣品）在105±2烘箱中，在一個大氣壓下烘干到恒重（兩次重量之差小于規(guī)定數(shù)值稱為恒重），樣品逸失的重量即為水分（即吸附水）。三、實驗設(shè)備1、樣品粉碎機或研缽；2、分析篩：孔徑0.42mm（40目）；3、分析天平：電子天平，感量0.0001g；4、電熱式恒溫烘箱：可控制溫度為105±2；5、稱樣皿：鋁盒，直徑40mm以上，高25mm以下；6、干燥器：以變色硅膠作干燥劑（干燥時為藍色，吸水后變?yōu)榉?/p>

2、紅色）。7、手套：稱量操作或拿取鋁盒時用，以減少用手直接接觸時帶來的誤差。8、凡士林：干燥器的沿口涂敷凡士林可以增加其密閉性。四、測定方法與步驟1、潔凈的鋁盒（請記住各組的鋁盒號），放于105±2烘箱中烘1h（開蓋烘干），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（時間為30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），在分析天平上準(zhǔn)確稱重（蓋蓋稱，記錄數(shù)據(jù)），再放回烘箱烘干30in，同樣冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。2、在已恒重的鋁盒內(nèi)放入約25g樣品（約2藥匙），用分析天平準(zhǔn)確稱重（蓋上蓋子稱，注意記錄），重量之差即為樣品重。3、將裝有樣品的鋁盒放回105±2烘箱中，烘3h

3、（將蓋子揭開），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），稱重（記錄數(shù)據(jù)）。再同樣烘干lh，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.002g。五、結(jié)果計算 式中：m1105烘干前樣品及鋁盒重（g）； m2一105烘干后樣品及鋁盒重（g）； m0一已恒重的鋁盒重（g）。 每個試樣，應(yīng)取兩個平行樣進行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。兩個平行樣測定值相差不得超過0.2%，否則應(yīng)重做。六、注意事項1、鋁盒應(yīng)放于烘箱之中央，勿靠近箱壁（為什么？）。2、鋁盒在烘箱內(nèi)應(yīng)敞開蓋子，在干燥器中冷卻或用天平稱重時應(yīng)蓋嚴(yán)（為什么？）。3、取放鋁盒時應(yīng)戴手套操作（為什么？）。4、某些含脂肪高的樣品，烘

4、干時間長，反而增重，應(yīng)以增重前次的重量為準(zhǔn)（為什么？）5、含糖分高的、易分解的或易焦化的樣品，應(yīng)采用減壓干燥法測定。6、新鮮樣品的總水分計算 實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.鋁盒編號空鋁盒重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）空鋁盒+樣品重（g） 樣品重（g）烘干后的鋁盒+樣品重（g） 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）蒸發(fā)水分重量（g）平行樣品吸附水（%）重復(fù)性（相差%）樣品吸附水（%）樣品干物質(zhì)（%）項目二 飼料中粗灰分含量的測定一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中粗灰分的測定，掌握粗灰

5、分的測定原理和方法。二、實驗原理飼料樣品經(jīng)550的高溫灼燒，失去所有有機物，所剩余的殘渣即為灰分。殘渣中主要是氧化物、鹽類等礦物質(zhì)，也包括混入飼料的砂石、土等，故稱粗灰分(CA：crude ash)。三、實驗設(shè)備1、樣品粉碎機2、分樣篩，孔徑0.42mm（40目）；3、分析天平：感量0.0001g；4、高溫爐（茂福爐）：電加熱，控制爐溫在550±20；5、坩堝：（已標(biāo)記好號的）瓷質(zhì)坩堝；6、坩堝鉗：鍍鉻的金屬鉗，取放坩堝用；7、干燥器：用變色硅膠作干燥劑。8、手套：尼龍手套，稱重時使用。9、凡士林：涂抹干燥器蓋時使用。四、測定方法與步驟1、將干凈坩堝放入茂福爐（揭蓋放），在550&#

6、177;20下灼燒30min，取出（用坩堝鉗，小心燙傷），放入干燥器，lmin后蓋嚴(yán)干燥器蓋，冷卻30min（蓋蓋冷卻），用分析天平稱重（戴手套操作，記錄數(shù)據(jù)）。再重復(fù)灼燒，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.0005g為恒重。 2、在已恒重的坩堝中稱取12g（約1藥匙）樣品，在電爐上小心炭化（坩堝蓋需留一小縫隙，至無煙為止），再放人茂福爐（揭蓋放），于550±20下灼燒3h，取出（用坩堝鉗，小心燙傷），放入干燥器，lmin后蓋嚴(yán)干燥器蓋，冷卻30min（蓋蓋冷卻），用分析天平稱重（戴手套操作，記錄數(shù)據(jù)）。再同樣灼燒1h，稱重，直至兩次稱重之差小于0.001g為恒重。五、結(jié)果計算 式

7、中，m0己恒重的空坩堝重（g）； m1坩堝加樣品重（g）； m2灰化后坩堝加灰分重（g）。每個樣品應(yīng)取兩個平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗灰分含量在5以上時，允許相對偏差為1；粗灰分量在5以下時，允許相對偏差5%。 六、注意事項1、坩堝在茂福爐中盡量往里放，勿靠近爐門。2、坩堝在茂福爐內(nèi)應(yīng)揭開蓋子，在干燥器或稱重時應(yīng)蓋嚴(yán)。3、從茂福爐取放坩堝時應(yīng)用坩堝鉗，小心燙傷。4、炭化時要小火，以防炭化過快，試樣飛濺。且坩堝蓋稍留一縫隙，不冒煙為止。5、灰化后的殘渣一般為灰白色，有紅棕色是飼料中含鐵高，呈藍色是含錳高，如有黑色碳粒說明灰化不完全，應(yīng)延長灼燒時間。6、測定灰分結(jié)束后，灰分勿倒掉

8、，保留之待測鈣、磷用。7、新坩堝的編號：用細(xì)木棍蘸取0.5%FeCI3·6H2O（用藍墨水做稀釋液）溶液在坩堝上標(biāo)記號碼，然后在茂福爐550下灼燒1h，灼燒后其號碼不會脫落。思考題1、為何灰化的溫度宜控制在550度？（過高會引起部分礦物質(zhì)如磷、硫、鉀、鈉等的揮發(fā)，過低則又燃燒不完全）2、灰化前為何要進行炭化？（1）防止在灼燒時，因溫度高樣品中的水分急劇蒸發(fā)使試樣飛濺；（2）防止糖、蛋白質(zhì)、淀粉等易發(fā)泡膨脹的物質(zhì)在高溫下發(fā)泡膨脹而溢出坩堝；（3）不經(jīng)炭化而直接灰化，飼料中磷酸鹽溶化凝成固形物，碳粒易被包住，灰化不完全）實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.坩堝

9、編號空坩堝重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）空坩堝+樣品重（g） 樣品重（g）灼燒后的坩堝+灰分重（g） 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）灰分重（g）平行樣品粗灰分（%）重復(fù)性（相對偏差%）樣品粗灰分（%）項目三 飼料中粗蛋白含量的測定 （半微量凱氏定氮法）一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中粗蛋白質(zhì)的測定，了解凱氏定氮法測定的基本原理，掌握半微量凱氏定氮法測定飼料粗蛋白質(zhì)的方法，掌握粗蛋白質(zhì)含量的計算方法。二、實驗原理飼料中的有機物質(zhì)在還原性催化劑(如CuSO4，K2SO4或Na2SO4或Se粉)的幫助下

10、，用濃硫酸進行消化作用，使蛋白質(zhì)和其它有機態(tài)氮（在一定處理下也包括硝酸態(tài)氨）都轉(zhuǎn)變成NH4+并與H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物質(zhì)，則以CO 2 ，H2O，SO 2狀態(tài)逸出。消化液在濃堿的作用下進行蒸餾，釋放出NH3，用硼酸溶液吸收之并與之結(jié)合成為四硼酸銨，然后以甲基紅-溴甲酚綠作指示劑，用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 0.1mol/L）滴定，求出氮的含量，根據(jù)不同的飼料再乘以一定的系數(shù)（通常用6.25系數(shù)計算），即為粗蛋白質(zhì)(CP：crude protein)的含量。其主要化學(xué)反應(yīng)如下：1、2NH4（CH2）2COOH+13H2SO4（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2（丙氨

11、酸）2、（NH4）2SO4 +2NaOH2NH 3+2H2O+Na2SO43、4H3BO3+ NH 3NH4HB4O7+5H2O4、NH4HB4O7+HCl+5H2ONH4C1+4H3BO3本法不能區(qū)別蛋白氮和非蛋白氮，只能部分回收硝酸鹽和亞硝酸鹽等含氮化合物。在測定結(jié)果中除蛋白質(zhì)外，還有氨基酸、酰胺，銨鹽和部分硝酸鹽、亞硝酸鹽等，故以粗蛋白質(zhì)表示之。三、儀器設(shè)備1、樣品粉碎機；2、分析篩：孔徑0.42mm(40目)；3、分析天平：電子天平，感量0.0001g；4、稱量紙：稱量用；5、毒氣柜或通風(fēng)櫥；6、消煮爐或電爐；7、滴定管：酸式，25或50ml；或半微量滴定管；8、凱式燒瓶：250或50

12、0m1，消化飼料用；9、凱氏蔗餾裝置：半微量水蒸氣蒸餾式；10、錐形瓶：150或250m1；接蒸餾液用11、容量瓶：100ml。放消化液用；12、小漏斗：轉(zhuǎn)移消化液用；13、玻璃棒：轉(zhuǎn)移消化液用；14、洗瓶：放蒸餾水用；15、滴管及小燒杯：定容用；16、移液管：10ml，吸取消化液用；17、洗耳球：吸取消化液用；18、量杯：10ml，加40%NaOH用；19、量筒或量杯：20ml，加硼酸用；20、pH試紙：檢驗是否蒸餾完全用；21、金屬鑷子：夾取pH試紙用。四、試劑1、硫酸：化學(xué)純（比重1.84）；2、混合催化劑：硫酸銅:硫酸鉀或硫酸鈉=1:10，均為化學(xué)純；3、40%氫氧化鈉溶液：40g氫氧

13、化鈉溶于100ml蒸餾水中；4、2%硼酸溶液：2g的硼酸溶于100ml蒸餾水中；5、混合指示劑：由甲基紅 0.1%乙醇溶液與溴甲酚綠0.5%乙醇溶液等體積混合配成，貯于棕色瓶中配用。這種指示劑酸性時為紫紅色，堿性時為藍綠色，變色范圍很窄且很靈敏。6、鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.05mol/L,4.5ml鹽酸注入1000ml蒸餾水中。標(biāo)定：稱取約0.08g在270300灼燒（或在550灼燒4050min）至恒重的無水碳酸鈉，加入50mL水使之溶解，加10滴溴甲酚綠一甲基紅混合指示劑，用配制的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定至溶液由綠色變?yōu)樽霞t色，煮沸2min，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈紫紅色。同時做空白試驗。鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩

14、爾濃度計算：C = m /（V1V2）× 0.0530式中：C鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度(mol/L)；m無水碳酸鈉的質(zhì)量（g）；V1樣品滴定消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(mL)；V2空白滴定消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（mL）；0.0530每毫摩爾無水碳酸鈉的克數(shù)。五、測定方法與步驟1、稱樣和消化：稱取0.51g試樣（可利用差減法），無損地放入凱氏燒瓶中（凱氏瓶上都寫上各樣品編號，以防拿錯），加入混合催化劑約3g（約2藥匙），與試樣混合均勻，再加硫酸10ml（稱樣量多于1g者酌情多加，注意安全），凱氏瓶上放一小漏斗，在毒氣柜內(nèi)的消煮爐上小心加熱，不時轉(zhuǎn)動凱氏瓶使受熱均勻，待樣品焦化，泡沫消失，再加

15、強火力（360410）直至溶液澄清后（呈淡藍色），再加熱消化15min。取出，冷卻至室溫，加蒸餾水20m1轉(zhuǎn)入100ml容量瓶（反復(fù)，少量多次用洗瓶的蒸餾水沖洗凱氏瓶），冷卻后用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液（容量瓶上編號，以防拿錯）。試劑空白測定：除不加樣品外其他相同。2、準(zhǔn)備吸收液：取潔凈錐形瓶（三角瓶，注意編號），加入2%硼酸溶液20ml（用量筒或量杯加入），滴入2滴混合指示劑（注意觀察顏色，不呈藍綠色），置于半微量蒸餾裝置的冷凝管口下端，并使管口浸入該吸收液中。3、蒸餾蒸餾裝置的蒸汽發(fā)生器的水中應(yīng)加甲基紅指示劑數(shù)滴，硫酸數(shù)滴，且保持此液為橙紅色，否則應(yīng)補加少許硫酸。準(zhǔn)確移取試樣分

16、解液10ml（利用移液管和洗耳球），注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中（通過小玻杯），用少量蒸餾水沖洗（用洗瓶），塞好入口玻璃塞，再加40氫氧化鈉溶液10ml（用量杯量好加），小心提起玻璃塞使之流入反應(yīng)室，將玻璃塞塞好，再用少量蒸餾水沖洗一次，并在小玻杯內(nèi)加水封密，防止漏氣，吸收液變色后（什么顏色，注意觀察）蒸餾5min，使冷凝管管口離開吸收液面，再蒸餾1min（是否蒸餾完全，可用pH檢查），用蒸餾水清洗管口末端，洗液均流入吸收液。移開錐形瓶待滴定用。關(guān)閉冷凝水，關(guān)閉電源，然后排放反應(yīng)室內(nèi)廢液，并清洗干凈留給下一組做。（排放廢液方法：用右手輕提樣品杯中棒狀玻塞，使水流入反應(yīng)室的同時，立即用左手關(guān)閉夾子，蓋

17、好玻塞。由于反應(yīng)室外層中蒸汽冷縮、壓力降低，反應(yīng)室內(nèi)廢液通過反應(yīng)室中插管自動抽到反應(yīng)室外殼中，再在樣品杯中加入2/3體積蒸餾水，如此反復(fù)三次既可排盡廢液及洗滌液。打開夾子將反應(yīng)室外殼中積存的廢液排出，關(guān)閉夾子再使蒸汽通過全套蒸餾儀13min，可進行下一次蒸餾。）4、滴定 微量滴定管內(nèi)裝入0.05mol/L的HCI標(biāo)準(zhǔn)溶液，調(diào)整液面，滴定吸收氨后的硼酸溶液（注意操作要領(lǐng)，接近等當(dāng)點時要逐滴滴入），溶液由藍綠色變?yōu)榛壹t色為終點（記錄鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的用量）。5、空白測定在測定飼料樣本中含氮量的同時，應(yīng)做一空白對照測定，即各種試劑的用量及操作步驟完全相同，但不加樣本（或用分析純的蔗糖0.01g），這樣可以

18、校正因藥品不純所發(fā)生的誤差。六、結(jié)果計算每m1的lmol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于0.0140g的N。因此， 式中：v2試樣滴定時所需鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（m1）； v1空白滴定時所需鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(m1)； c鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)； m一試樣的質(zhì)量（g）； v 試樣的分解液總體積（ml）； v試樣分解液蒸餾用體積（m1）； 0.0140每ml HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于N的克數(shù)； 6.25一氮換算成蛋白質(zhì)的平均系數(shù)。 每個試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。 當(dāng)粗蛋質(zhì)含量在25以上，允許相對偏差為1；當(dāng)粗蛋白質(zhì)含量在l025時，允許相對偏差為2；當(dāng)粗蛋白質(zhì)含量在10

19、以下時，允許相對偏差為3。 六、注意事項1、測定步驟的檢驗 精確稱取0.2g硫酸銨，代替試樣，按測定步驟文字中的各步驟操作，并按公式計算（但不乘系數(shù)6.25），測得硫酸銨含氮量為21.19±0.2，否則應(yīng)檢查加堿，蒸餾和滴定各步驟是否正確。2、消化時應(yīng)經(jīng)常轉(zhuǎn)動凱氏瓶,以使得消化進行得迅速而完全。瓶頸上若發(fā)現(xiàn)有黑色顆粒，應(yīng)小心地將凱氏瓶傾斜振搖，用消化液將它沖洗下來。3、蒸餾完畢應(yīng)先取下接收瓶，然后關(guān)閉電源，以免酸液倒流。4、每次蒸餾后必須徹底洗凈堿液，以免再次使用時引起誤差。實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.樣品重（g）凱氏燒瓶編號盛放分解液的容量瓶編號

20、分解液總體積（ml）分解液蒸餾用體積（ml）滴定用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）平行樣品粗蛋白質(zhì)（%）重復(fù)性（相對偏差%）樣品粗蛋白質(zhì)（%）鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度(mol/L)：滴定空白時所用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）：項目四  飼料中粗纖維含量的測定一、實驗?zāi)康恼莆沼蔑暳现写掷w維的測定方法，了解粗纖維測定方法中存在問題及解決的方案。二、實驗原理用固定量的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醚、乙醇除去醚溶物，經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)的量，所余殘渣稱為粗纖維(CF: crude fiber)。它不是一個確切的化學(xué)實體，只是在公認(rèn)強制規(guī)定的條件下測出的概略養(yǎng)分。其中以纖維素為主，還有少量半纖維素和

21、木質(zhì)素。三、儀器設(shè)備1、樣品粉碎機；2、分析篩：孔徑0.42mm（40目）；3、分析天平：電子天平，感量0.0001g；4、電熱恒溫箱：烘箱，可控制溫度在130；5、茂福爐：電加熱，可控制溫度在550600；6、坩堝：瓷質(zhì)坩堝；7、電爐和電熱板：可控制溫度；8、抽濾裝置：抽真空裝置，吸濾瓶及布氏漏斗；9、濾器：200目不銹鋼網(wǎng)或尼龍網(wǎng)，或G2號玻璃濾器，也可用濾布（本實驗用濾布）；10、干燥器：用變色硅膠作干燥劑；11、刻度燒杯：500ml（酸處理及堿處理時用）；12、玻璃棒：酸堿處理及轉(zhuǎn)移時用；13、錐形瓶：3000ml（一瓶用于加熱酸，一瓶用于加熱H20）；14、表玻璃：酸堿處理時蓋上以防

22、水分過多蒸發(fā)；15、量筒：200ml（量酸）、50ml（量堿）；16、定量分析濾紙：快速（醇醚處理時用）；17、量杯：10ml（乙醇、乙醚處理時用）；18、手套：尼龍手套（取拿坩堝及稱量時用）；19、坩堝鉗：取拿灼燒后坩堝用；20、記號筆：燒杯等編號用；21、pH試紙：轉(zhuǎn)移時檢查是否至中性；22、金屬鑷子：夾取pH試紙用23、漏斗架：醇醚處理時用24、漏斗：醇醚處理時用25、小燒杯：接醇醚處理時廢液用四、試劑1、1.25%硫酸溶液：量取比重1.84的分析純硫酸7ml，溶于1000ml水中。2、5%NaOH溶液：稱取5g分析純NaOH，溶于100ml水中。3、乙醇：95%乙醇，化學(xué)純4、乙醚：化

23、學(xué)純5、防泡劑：正辛醇，分析純。五、測定方法與步驟1、稱坩堝和濾紙：潔凈的帶編號坩堝（注意記住各組的坩堝號）放于105±2烘箱中烘1h（開蓋烘干），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），在分析天平上準(zhǔn)確稱重（蓋蓋稱，記錄數(shù)據(jù)），再放回烘箱烘干30in，同樣冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。然后取定量分析濾紙一張，疊好放入坩堝內(nèi)，放于105±2烘箱中烘1h（開蓋烘干），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），在分析天平上準(zhǔn)確稱重（蓋蓋稱，記錄數(shù)據(jù)），再放回烘箱烘干30in，同樣冷卻，稱重，直至兩次重量之

24、差小于0.0005g為恒重。得出濾紙的重量。2、稱樣：稱取12g試樣(采用差減法)，置入500ml刻度燒杯3、 酸處理：量筒量取200ml的預(yù)熱1.25%硫酸溶液，置于加樣品的燒杯中，置電爐上使1-3min沸騰，在電熱板上保持微沸30±1min。注意保持硫酸濃度不變，樣品不可損失（不斷的補充熱水，同時沖洗燒杯壁上的樣品殘渣）。4、抽濾、洗滌和轉(zhuǎn)移：鋪濾布于布氏漏斗上，將酸處理后的燒杯拿下，開始抽濾，用熱的蒸餾水反復(fù)沖洗燒杯及殘渣，直到洗至中性（用pH試紙檢查濾液不變色）為止。轉(zhuǎn)移殘渣到原燒杯（用勺轉(zhuǎn)移），并用熱蒸餾水將濾布上的殘渣無損轉(zhuǎn)入（注意加水不宜過多，液面勿超過150ml）5、

25、堿處理：向燒杯內(nèi)加入濃度為5%的預(yù)熱的氫氧化鈉溶液50ml，補充熱蒸餾水于200ml刻度，依照酸處理方法同樣微沸30min。（堿處理時易起泡沫，注意防止外溢）6、抽濾、洗滌和轉(zhuǎn)移：抽濾和洗滌同步驟4，但轉(zhuǎn)移時注意，預(yù)先將步驟1所得到的濾紙放于漏斗架上的漏斗內(nèi)，將堿處理完畢的殘渣轉(zhuǎn)入此濾紙內(nèi)（注意刮凈和用少量水沖凈殘渣）。7、醇、醚處理：待濾紙中水過濾完后，先加10ml乙醇溶液（用量杯），濾凈后再加入10ml乙醚沖洗。當(dāng)乙醚濾凈后將殘渣用濾紙包好（用鑷子操作），移入已稱至恒重的原坩堝中。8、烘干并稱重：待乙醚揮發(fā)完畢，將帶有濾紙及殘渣的坩堝放入105±2烘箱中烘3h（開蓋烘干），取出，

26、于干燥器內(nèi)冷卻30min后稱重（記錄數(shù)據(jù)），再烘1h，冷卻后稱重，直到兩次重量之差小于0.001g為恒重。9、炭化和灰化：將坩堝蓋半開置于電爐上加熱，無煙為止（切忌著火），然后轉(zhuǎn)入茂福爐內(nèi)，于550±20灼燒1h，取出，于干燥器內(nèi)冷卻30min后稱重（記錄數(shù)據(jù)），再灼燒30min，冷卻稱重至恒重（兩次重量之差小于0.001g）。六、結(jié)果計算七、注意事項1、酸、堿處理后應(yīng)稍微靜止片刻，待殘渣下沉后迅速濾過上清液，并用熱水沖洗殘渣至中性，否則抽濾困難。2、在酸堿處理的加熱過程中，火力不可過猛，保持微沸即可。堿處理加熱時小心起泡沫溢出。實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號N

27、o.No.坩堝編號空坩堝重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）坩堝+濾紙：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）恒重的濾紙重（g）樣品重（g）烘干后的坩堝+濾紙+殘渣重 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）灰化后的坩堝+灰分重 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）平行樣品粗纖維（%）重復(fù)性（相差或相對偏差%）樣品粗纖維（%）項目五 Van soest中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的測定傳統(tǒng)的粗纖維分析過程中，有部分半纖維素、纖維素和木質(zhì)素溶解于酸、堿中，

28、使測定的粗纖維含量偏低，同時又增加了無氮浸出物的計算誤差。為了改進粗纖維分析方案，Van Soest(1976)提出了用中性洗滌纖維(Neutral Detergent Fiber,縮寫NDF)、酸性洗滌纖維(Acid Detergent Fiber, 縮寫ADF)、酸性洗滌木質(zhì)素(Acid Detergent Lignin,縮寫ADL)作為評定飼草中纖維類物質(zhì)的指標(biāo)。同時將飼料粗纖維中的半纖維素、纖維素和木質(zhì)素全部分離出來，能更好地評定飼料粗纖維的營養(yǎng)價值。見下圖中性洗滌纖維（NDF）：包含全部植物細(xì)胞壁成分，如纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、硅酸鹽等酸性洗滌纖維（ADF）：包含纖維素、木質(zhì)素、二

29、氧化硅等ADF-NDF=半纖維素 ADF-ADL=纖維素一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中NDF和ADF的測定，掌握各類飼料樣品中NDF和ADF的測定原理和方法。二、測定原理植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細(xì)胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。植物性飼料經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）的含量。三、儀器設(shè)備同粗纖維的測

30、定四、試劑1、中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）：準(zhǔn)確稱取18.61g乙二胺四乙酸二鈉（Na2EDTA，分析純）和6.81g四硼酸鈉 （Na2B4O710H2O，分析純）放入燒杯中，加入少量蒸餾水，加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S，分析純）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析純）；再稱取4. 65 g無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，分析純）置于另一燒杯中，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后，倒入前一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml，其中pH 值約為6.97.1（pH值一般勿需調(diào)整）；2、酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）：稱取20g十六烷三甲基溴化銨（CT

31、AB，分析純）溶于1000ml已經(jīng)標(biāo)定過的0.5mol/L硫酸溶液中，攪動溶解，必要時過濾；3、0.5mol/L硫酸溶液：量取約27.87 ml濃硫酸（分析純，比重1.84，98%），慢慢加入已裝有500ml蒸餾水的1000ml容量瓶中，冷卻后加水至刻度定容，標(biāo)定；4、其他試劑：丙酮（化學(xué)純）；無水亞硫酸鈉（化學(xué)純）；十氫化萘（防泡劑，化學(xué)純）五、測定方法與步驟1、中性洗滌纖維測定（1）稱坩堝和濾紙：潔凈的帶編號坩堝（注意記住各組的坩堝號）放于105±2烘箱中烘1h（開蓋烘干），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），在分析天平上準(zhǔn)確稱重（蓋蓋稱，記錄數(shù)據(jù)）

32、，再放回烘箱烘干30in，同樣冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。然后取定量分析濾紙一張，疊好放入坩堝內(nèi)，放于105±2烘箱中烘1h（開蓋烘干），取出，蓋好蓋，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），在分析天平上準(zhǔn)確稱重（蓋蓋稱，記錄數(shù)據(jù)），再放回烘箱烘干30in，同樣冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。得出濾紙的重量。（2）稱樣：稱取0.51g試樣(采用差減法)，置入500ml高型燒杯（燒杯注意編號，也可用三角瓶？）（3）中性洗滌劑處理：量筒量取100ml中性洗滌劑置于加樣品的燒杯中，再加2ml十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉，置電爐上

33、，裝上冷凝裝置（若無，則蓋以表玻璃），使5-10min沸騰，在電熱板上保持微沸60min。注意保持硫酸濃度不變，樣品不可損失（不斷的補充熱水，同時沖洗燒杯壁上的樣品殘渣，注意泡沫外溢）。（4）抽濾、洗滌和轉(zhuǎn)移：煮沸完畢后，取下燒杯，將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的布氏漏斗上的濾布上進行抽濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗燒杯與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。用20ml丙酮沖洗二次，抽濾（無丙酮時此項步驟可忽略）。預(yù)先將步驟1所得到的濾紙放于漏斗架上的漏斗內(nèi)，將洗滌完畢的殘渣轉(zhuǎn)入此濾紙內(nèi)（注意刮凈和用少量水沖凈殘渣）。（5）烘干并稱重：殘液濾盡后，用鑷子夾取殘渣及濾紙放于坩堝內(nèi)，置于105&#

34、177;2烘箱中烘3h（開蓋烘干），取出，于干燥器內(nèi)冷卻30min后稱重（記錄數(shù)據(jù)），再烘1h，冷卻后稱重，直到兩次重量之差小于0.001g為恒重。2、酸性洗滌纖維測定（1）稱坩堝和濾紙：同上述中性洗滌纖維測定（1）（2）稱樣：同上述中性洗滌纖維測定（2）（3）酸性洗滌劑處理：量筒量取100ml酸性洗滌劑置于加樣品的燒杯中，再加2ml十氫化萘。以下同上述中性洗滌纖維測定。（4）抽濾、洗滌和轉(zhuǎn)移：煮沸完畢后，取下燒杯，將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的布氏漏斗上的濾布上進行抽濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗燒杯與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。用少量丙酮洗滌殘渣至沖下的丙酮液無色為止，并抽凈丙

35、酮（無丙酮時此項步驟可忽略）。以下步驟同上述中性洗滌纖維測定。（5）烘干并稱重：同上述中性洗滌纖維測定（5）六、結(jié)果計算中性洗滌纖維或酸性洗滌纖維含量的計算：中性洗滌纖維實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.坩堝編號空坩堝重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）坩堝+濾紙：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）恒重的濾紙重（g）樣品重（g）烘干后的坩堝+濾紙+殘渣重 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）平行樣品NDF（%）重復(fù)性（相差或相對偏差%）樣品NDF（%）酸性洗

36、滌纖維實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.坩堝編號空坩堝重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）坩堝+濾紙：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）恒重的濾紙重（g）樣品重（g）烘干后的坩堝+濾紙+殘渣重 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）平行樣品ADF（%）重復(fù)性（相差或相對偏差%）樣品ADF（%）項目六 飼料中粗脂肪含量的測定（殘余法）一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中粗脂肪的測定，掌握各類飼料樣品中粗脂肪的測定原理和方法。二、測定原理飼料中脂類均可溶于乙醚，用

37、乙醚反復(fù)浸提，使溶于乙醚中的脂肪隨乙醚流集于盛醚瓶中，乙醚蒸發(fā)后盛醚瓶增加的重量或者的失重即為粗脂肪量。由于提取的物質(zhì)中，除脂肪外，還有有機酸、磷脂、固醇、脂溶性維生素，葉綠素等，因而測定結(jié)果稱粗脂肪或醚浸出物（EE：ether extract）。三、儀器設(shè)備和試劑1、樣品粉碎機；2、分樣篩；孔徑0.42mm（40目）；3、分析天平：感量0.0001g；4、電熱恒溫水浴鍋，室溫100；5、恒溫烘箱；6、索氏脂肪浸提器：100或150ml；7、濾紙或濾紙筒：中速，脫脂；8、干燥器：用變色硅膠為干燥劑；9、乙醚：化學(xué)純，無水乙醚。四、測定方法與步驟1、索式浸提器的準(zhǔn)備：索式浸提器由三部分組成，下部

38、為盛醚瓶，中間為浸提管，上部為冷凝管。浸提器應(yīng)洗凈烘干，安裝在水浴鍋上，冷凝管上端加棉花塞，以防乙醚逸出。2、取樣、包樣和烘樣：將脫脂濾紙疊成濾紙筒，濾紙筒的長度約為虹吸管的2/3，以全部浸泡于乙醚中為準(zhǔn)。用鉛筆在濾紙筒上編號。稱取試樣12g，準(zhǔn)確至0.0002g，放于濾紙筒中包好，然后置入有編號的鋁盒內(nèi)，放入105烘箱中，烘干3h（除去水分，因乙醚難以滲入含水樣品的組織內(nèi)部；若用測完水分的樣品則烘干1h即可）后取出，在干燥器中冷卻至室溫（30min，注意將蓋子蓋嚴(yán)），稱重（記錄數(shù)據(jù)）。再同樣烘干lh，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.002g。3、浸提：將烘干后包有樣品的濾紙筒放入浸提管（

39、用鑷子，每個浸提管可放入34包），加無水乙醚80100ml（浸泡一夜更利于浸提），在6075的水浴(用蒸餾水，否則盛醚瓶底出現(xiàn)水垢)上加熱，開通冷凝水，使乙醚回流，控制乙醚回流次數(shù)為每小時約10-15次，共回流約50次(含油高的試樣約70次)，是否浸提完全，用表玻璃接一滴浸提管流出的乙醚，揮發(fā)后不留下油跡即可。4、濾紙筒烘干及稱重：脂肪浸提干凈后取出濾紙筒，置于原鋁盒，揭開蓋子晾干2030min，然后放入105±2烘箱中烘干2h，干燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min,，同樣冷卻稱重，兩次稱重之差小于0.001g為恒重（記錄數(shù)據(jù)）。5、回收乙醚：繼續(xù)蒸餾當(dāng)乙醚積聚到虹吸管高度

40、的2/3時，取下盛醚瓶回收乙醚，直至乙醚全部收完。五、結(jié)果計算()式中：m風(fēng)干樣品重（g）； m1浸提后的已恒重的鋁盒+濾紙筒+樣品重（g）； m2浸提前己恒重的鋁盒+濾紙筒+樣品重（g）。每個試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗脂肪含量在10以上（含10）時，允許相對偏差為3；粗脂肪含量在10以下時，允許相對偏差為5。實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.鋁盒編號濾紙筒編號樣品重（g）浸提前鋁盒+濾紙筒+樣品重：第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次稱重（g） 第四次稱重（g）浸提后鋁盒+濾紙筒+樣品重： 第一次稱重（g） 第二次稱重（g） 第三次

41、稱重（g） 第四次稱重（g）平行樣品粗脂肪（%）重復(fù)性（相差%）樣品粗脂肪（%）項目七  飼料中鈣含量的測定 （高錳酸鉀法）一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中鈣的測定，掌握鈣的測定原理和方法。二、實驗原理將試樣中有機物破壞（本實驗采用干灰化法，即采用測過灰分的灰分），使鈣變成易溶于水的鈣鹽（本實驗用鹽酸溶解灰分，使鈣成為CaCl2），鈣鹽與草酸銨作用生成白色草酸鈣沉淀。然后用硫酸溶解草酸鈣，再用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定與鈣結(jié)合的草酸根離子，根據(jù)高錳酸鉀溶液的用量可間接測定鈣的含量。反應(yīng)式如下：CaCl2 +(NH4)2C2O4 = CaC2O4+ 2NH4ClCaC2O4 + H2SO

42、4 = CaSO4 + H2C2O45H2C2O4 + 2KMnO4 + 3H2SO4 = 2MnSO4 + K2SO4 + 8H2O + 10CO2三、儀器設(shè)備1、樣品粉碎機；2、分樣篩：孔徑0.45mm（40目）；3、分析天平：感量0.0001g；4、電爐；普通，或電熱板；5、坩堝：瓷質(zhì)；6、容量瓶：100ml；7、滴定管：酸式，25或50ml；8、漏斗架：9、玻璃漏斗：6cm直徑；10、定量濾紙：中速，79cm；11、移液管：10，20ml；12、洗瓶13、洗耳球14、玻璃棒15、量杯或量筒：10ml；20ml；50ml16、燒杯：250ml；17、滴定管：50ml；18、滴管；19、表

43、玻璃。四、試劑1、1:3鹽酸溶液2、1:4氨水溶液3、1:100氨水溶液4、1:4醋酸溶液5、1:3硫酸溶液6、甲基紅指示劑：0.1克溶于100ml95%的乙醇中7、4%草酸銨溶液8、0.1%硝酸銀溶液9、0.05mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。0.05mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置：取高錳酸鉀約1.6克,溶于1000ml水中，緩慢煮沸15分鐘,冷卻且靜置12日，過濾后移至棕色玻璃瓶中，密塞，貼上標(biāo)簽在暗處放置以備標(biāo)定。標(biāo)定：稱取經(jīng)105烘干,并于干燥器中冷卻至室溫的基準(zhǔn)試劑草酸鈉1.675克， 放入燒杯加入50ml水加熱溶解，移入500ml容量瓶，加水至刻度?；靹蚝笥?0ml移液管取3份，分別

44、放入150ml錐形瓶，然后加入1:3硫酸溶液4ml，加熱至直到錐形瓶口有蒸氣冒出 (約7580，不可超過85)，趁熱用待標(biāo)定的 KMnO4溶液進行滴定。開始滴定時，速度宜慢，在第一滴 KMnO4 溶液滴入后，不斷搖動溶液，當(dāng)紫紅色褪去后再滴入第二滴。待溶液中有Mn2+產(chǎn)生后，反應(yīng)速率加快，滴定速度也就可適當(dāng)加快，但也決不可使KMnO4溶液連續(xù)流下，近終點時，應(yīng)減慢滴定速度同時充分搖勻，滴定至溶液呈現(xiàn)粉紅色，并保持30秒不褪色，即為終點.同時做空白.（當(dāng)?shù)味ńK點時，溶液溫度應(yīng)不低于55）。計算：C（1/5KMnO4）=0.05×20/(V-V0)五、測定方法與步驟1、試樣的分解液的制備

45、利用測完粗灰分的灰分進行，首先量取1:3熱的鹽酸5ml放入盛灰分的坩堝（用量杯量?。?，再滴加3滴濃硝酸，用玻璃棒輕輕攪動使灰分溶解，靜置片刻，漏斗上放入濾紙一張疊好（無灰定量濾紙），漏斗下接入100ml容量瓶，將灰分溶液通過濾紙轉(zhuǎn)移至容量瓶，反復(fù)洗滌坩堝及灰分殘渣，洗液也收集入容量瓶中，至到用AgNO3溶液檢查無Cl-為止（檢查方法：在漏斗下用表玻璃接幾滴濾液，加1滴AgNO3溶液，如無白色沉淀說明濾紙等已經(jīng)沖洗干凈），冷卻至室溫；用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液（妥善保存，做完鈣后，測磷及別的元素時也用之）。2、沉淀草酸鈣 準(zhǔn)確移取試樣分解液10ml于250ml燒杯中（用移液管），加蒸

46、餾水50ml（用量筒或量杯），加2滴甲基紅指示劑（觀察顏色變化），滴加1:4氨水溶液至溶液呈橙黃色，再加1:4醋酸溶液使溶液變粉紅色（此時pH為2.53.0，酸度過大，則草酸鈣生成不完全；酸度過小，如在中性或堿性溶液中形成沉淀的話，有可能是堿式草酸鈣或氫氧化鈣沉淀，使測定結(jié)果不準(zhǔn)），置于電爐上小心煮沸，并慢慢滴加熱的草酸銨溶液l0ml，不斷攪拌使沉淀生成（如溶液變回橙黃色，應(yīng)補滴醋酸溶液至粉紅色）。放置過夜，使沉淀生成完全（或水浴上加熱2h）。3、過濾和洗滌將沉淀完全的溶液用定量無灰濾紙過濾，用1:100的氨水溶液20ml洗滌沉淀，再以蒸餾水反復(fù)沖洗燒杯及沉淀，至無草酸根離子（表玻璃接濾液數(shù)滴

47、，加1滴AgNO3溶液無沉淀即可）。4、溶解與滴定將沉淀和濾紙轉(zhuǎn)入原燒杯，加1:3硫酸溶液10ml和蒸餾水50ml，置于電爐上（或電熱板）加熱至7580（如何判斷？大約在剛開始冒泡時），用0.05mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液呈粉紅色且半分鐘不褪色為終點（該反應(yīng)不需要加指示劑，因為高錳酸鉀本身呈深紫色，在水中著色能力很強）（注意如何準(zhǔn)確讀數(shù)）5、空白滴定取一潔凈250ml燒杯，加入和步驟3相同的濾紙一張，加1:3硫酸溶液10ml和蒸餾水50ml，置于電爐上（或電熱板）加熱至7580，用0.05mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液呈粉紅色且半分鐘不褪色為終點。六、結(jié)果計算每m1的lmol/

48、L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于0.02g的Ca。因此， 式中：v2滴定樣品時高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗量（m1）； v1滴定空白時高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗量(m1)； c高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)； m一樣品重（g）；（注：同灰分測定） v 試樣分解液總體積（ml）； v 滴定時移取試樣分解液體積（m1）； 0.02每ml 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于Ca的克數(shù)； 每個試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。含鈣量1%以下時，允許相對偏差3%；含鈣量1%5%時，允許相對偏差5%；含鈣量1%以下時，允許相對偏差10%。七、注意事項1、過濾或洗滌沉淀時，勿使液面超過濾紙高的1/2，否則沉淀易

49、上移至濾紙邊沿。2、草酸鈣充分溶解后才能開始滴定。3、滴定時溫度保持在7580，溫度低，反應(yīng)慢，溫度高，易引起草酸分解。4、滴定時最初要慢，過快易使高錳酸鉀在酸性溶液中出現(xiàn)分解反應(yīng)（產(chǎn)生氧氣）。5、測草酸鈣沉淀是否完全的檢查：沾取1-2滴燒杯中的澄清液于表玻璃，加一滴1%CaCl2溶液，若有白色沉淀出現(xiàn)，說明溶液里有多余的草酸根離子，從而證明沉淀的完全實驗記錄表樣品名稱： 編號： 分析時間：平行樣品編號No.No.樣品重（g）容量瓶編號灰分溶液定容容量（ml）測定時移取灰分溶液量（ml）：滴定樣品時KMnO4消耗量（m1）滴定空白時KMnO4消耗量（m1）KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)平

50、行樣品Ca（%）重復(fù)性（相對偏差%）樣品Ca（%）項目八  飼料中總磷含量的測定 （釩鉬黃比色法）一、實驗?zāi)康耐ㄟ^飼料樣品中磷的測定，掌握用釩鉬黃比色法測定飼料樣品中總磷含量的原理和方法。二、實驗原理將試樣中有機物破壞，使其中的磷變?yōu)橛坞x狀態(tài)，在酸性溶液中，磷與釩鉬酸銨生成黃色的磷-釩-鉬酸復(fù)合體【（NH4）3PO4·NH4VO3·16MoO3】，其顏色深淺與磷的含量成正比，在波長420nm下進行比色測定，即可求出樣品中的磷含量。此法測得為總含磷量，其中包括動物難以吸收的植酸磷。化學(xué)反應(yīng)式如下：H3PO4 + NH4VO3 + 16(NH4)2MoO4

51、+ 29HNO3 =（NH4）3PO4·NH4VO3·16MoO3 + 29NH4NO3 + 16H2O三、儀器設(shè)備1、樣品粉碎機或研缽；2、分樣篩：孔徑0.45mm（40目）；3、分析天平：感量0.0001g；4、分光光度計：有10mm比色池，可在420nm下測吸光度；5、高溫爐：電加熱，可控制溫度在550±20；6、坩堝：瓷質(zhì)；7、容量瓶：50ml、100ml或1000ml；8、容量瓶或具塞比色管：50ml；9、移液管：10ml；10、洗耳球；11、洗瓶。四、試劑1、釩鉬酸按顯色劑：稱取偏釩酸銨（分析純）1.25g，加硝酸250ml。另取鉬酸銨（分析純）25g

52、，加蒸餾水400ml使之溶解，在冷卻條件下將后者倒入前者，并加蒸餾水稀釋至1000ml，搖勻備用。2、磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：將磷酸二氫鉀（分析純）105烘干1h，干燥器冷卻30min后，準(zhǔn)確稱取0.2195g溶于少量蒸餾水，無損的轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶，加濃硝酸3ml，然后以蒸餾水稀釋至刻度，搖勻備用。此溶液每ml含磷50g。五、測定方法與步驟1、試樣的分解（同鈣的測定，直接利用其試樣分解液）2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確移取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(50g/m1)0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色劑10ml。用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10min以上。以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長下，用分光光度計測各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、樣品的測定 準(zhǔn)確移取試樣分解液25ml（含磷量50500g）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，按上述的方法顯色和比色測定，測得試樣分解液的吸光度。用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量。六、結(jié)果計算式中：m一樣品重（g）；（注