實(shí)驗(yàn)三苦參生物堿的提取與鑒識(shí)

1、實(shí)驗(yàn)三 苦參生物堿的提取與鑒識(shí)背景1.1苦參的化學(xué)成分苦參,又名苦骨(見本草綱目川)、川參(見貴州民間方藥集、鳳凰爪(見翌廣西中獸醫(yī)藥植)、牛參(見湖南藥物志),陶宏景謂:“葉極似槐葉,花黃色,子作莢,根味至苦惡。”李時(shí)珍謂:“苦以味名,參以功名?！眑z始載于(神農(nóng)本草經(jīng),列為中品。為豆科(Leg姍z'n口sae)植物苦參(叩加rafla。escensAz't.)的干燥根。分布于我國(guó)南北各地Is,春秋兩季采挖,除去根頭及小支根,洗凈,干燥、或趁鮮切片,干燥?？鄥⑿晕犊嗪?歸心、肝、胃、大腸、膀膚經(jīng)。功能清熱燥濕、祛風(fēng)殺蟲、利尿通淋。用于熱痢、便血、黃疽尿閉、赤白帶下、陰腫陰癢、

2、濕疹、濕瘡、皮膚癌癢、疥癬麻風(fēng)等諸多病癥?？鄥⒅泻卸喾N有效成分,目前已知的主要有生物堿類、黃酮類、揮發(fā)油類化合物,還含有少量醒類、皂試類及氨基酸等其它化合物。下面分別介紹各類化合物的主要成分。1.LI生物堿國(guó)內(nèi)外學(xué)者從苦參根、苦參莖和葉及其花【4一l0中共分離出26種生物堿。苦參生物堿大多數(shù)是哇諾里西咤類(quinolizidine一type),極少數(shù)為雙呱陡類(dipiperidine-tyPe)。喳諾里西陡生物堿多數(shù)為苦參堿型生物堿,另有兩種金雀花堿型(eytisine一type)生物堿,兩種無(wú)葉豆堿型(Sparteine一type)生物堿,一種羽扇豆堿型(lupinine一type)生

3、物堿。包括苦參堿(matrine),氧化苦參堿(oxymatrine),槐果堿(sophoearpine)、氧化槐果堿(N一oxysophoearpine)、異槐果堿(isosoph。Carpine)、異苦參堿(isomatrine)、7,11一去氫苦參堿(7,11一dehydromatrine)、槐胺堿(Sophoramine)、異槐胺堿(isosophoramine)、新槐胺堿(neosophoramine)、'3一去氫槐胺堿(3一dehydrosophoramine)、一去氫槐胺堿(7-dehydrosophoramine)、槐醇(sophoranol),9。一經(jīng)基槐胺堿(9。一

4、hydroxysophoramine)、5。,9。一二輕基苦參堿(5。,ga一dehydroxymatrine)、氧化槐醇(sophoranolN一oxide)、雀花堿(lupanine)、臭豆堿(anagyrine)、膺靛葉堿(baptifoline)、Mamanine,Kuraramine、1sokuraramine等。1.1.2黃酮類化合物從苦參根和狹葉苦參根分離的黃酮類化合物己有29種ll,'2,多數(shù)為二氫黃酮和二氫黃酮醇類,少數(shù)為黃酮類、異黃酮類、查耳酮類和紫檀素類,其中僅有兩種化合物為試,取代基除了常見的輕基、甲氧基外,多數(shù)化合物還具有異戊烯基(取代基A1.1.3揮發(fā)油成分

5、王秀坤等!4】對(duì)苦參中的揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析,采用苦參粗粉與水共蒸餾,乙醚處理,無(wú)水硫酸鈉脫水干燥,回收乙醚得油狀物,再經(jīng)氣相色譜、質(zhì)譜分析,共鑒定出47個(gè)成分。鑒定出的化合物以二十烷烴為主成分,占58.12%。就結(jié)構(gòu)類型看,以烯烴為主,其次為烷烴和醇類,尚含酸醛酮酚等。1.1.4其它類型的化合物從苦參根中還分離得到一系列2一烷基色酮的衍生物I5、一種醒類化合物和兩種三砧皂試l6】。王秀坤等llvl對(duì)苦參中的游離氨基酸成分進(jìn)行了分析與鑒定,鑒定出巧種氨基酸,并計(jì)算了各成分的含量。發(fā)現(xiàn)苦參中總游離氨基酸含量為162.51mg/l00ml,其中含量最高的為脯氨酸,107.51mg/l00ml,其次

6、為天冬氨酸29.64mg/100ml。張俊華等Is用色譜等方法分離,波譜等方法鑒定苦參中化學(xué)成分結(jié)構(gòu),分離得到5個(gè)化合物,分別為蔗糖、二十四碳酸、日一谷肖醇、芥子酸十六酷,傘形花內(nèi)酷,均為首次從苦參中獲得,其中芥子酸十六酷為新化合物。一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.本實(shí)驗(yàn)通過(guò)從苦參中提取苦參生物堿，考察鹽酸的濃度和滲漉速度對(duì)提取產(chǎn)率的影響2.了解化學(xué)反應(yīng)萃取分離在天然藥物提取過(guò)程中的應(yīng)用掌握滲漉法和離子交換提取生物堿的原理、方法與工藝過(guò)程，并熟悉用柱層析法分離生物堿。二.實(shí)驗(yàn)原理利用苦參生物堿具有弱堿性，可與強(qiáng)酸結(jié)合成易溶于水的鹽的性質(zhì)，將總堿從藥材中提取出來(lái)。結(jié)合動(dòng)態(tài)連接提取工藝過(guò)程，實(shí)現(xiàn)生物堿充分溶出。然

7、后，加堿堿化，即可得到苦參生物總堿。滲滾法(percolation)的提取過(guò)程類似多次浸取過(guò)程,浸出液可以達(dá)到較高濃度,浸出效較好。此法常溫操作不需加熱,溶劑用量少,過(guò)濾要求較低,使分離操作過(guò)程簡(jiǎn)化,尤其適用于熱敏性、易揮發(fā)且有效成分含量較低或貴重藥材提取。采用0.5%的硫酸溶液對(duì)中藥材黃連用滲轆法提取,收集7倍量滲媲液即可保證生物堿的提取率,與回流法比較,滲轆法提取物含雜質(zhì)少、提取率高、使用溶劑量少即l。滲渡法的操作技術(shù)要求較高,否則會(huì)影響提取效率,當(dāng)提取物為薪性、不易流動(dòng)的成分時(shí),不宜使用該法。三.實(shí)驗(yàn)流程鑒識(shí):定性反應(yīng).薄層色譜等四.實(shí)驗(yàn)過(guò)程1.離子交換樹脂的預(yù)處理將 70g 聚苯乙烯磺

8、酸型樹脂(交聯(lián)度3%)，放入燒杯中，加200ml 80的蒸餾水溶脹30 分鐘，傾出蒸餾水后加入2mol/L 鹽酸300ml，充分?jǐn)嚢瑁胖冒胄r(shí)(靜態(tài)轉(zhuǎn)型)，后裝入樹脂柱(2cm×100cm)，并使全部酸水溶液通過(guò)樹脂柱(動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)型)，流出液的速度以液滴不成串為宜。后用蒸餾水洗至中性，待用。注意從裝柱到洗滌過(guò)程中始終保持液面高于樹脂床。2.總生物堿的提取和分離（1）動(dòng)態(tài)連續(xù)提取 取苦參粗粉200g加一定濃度的鹽酸，拌勻，放置30min,使生藥膨脹。 然后裝入滲漉桶中，邊加邊壓，層層加緊，全部裝完后，藥面壓平，蓋一層濾紙，濾紙上壓一些洗凈的玻璃塞。 加入一定濃度的HCl溶液經(jīng)過(guò)藥面，以4

9、5mL/min的速度滲漉，收集滲漉液至無(wú)明顯的生物堿反應(yīng)為止，收集滲漉液約2500mL。（2）交換 將收集的滲漉液置于陽(yáng)離子交換樹脂進(jìn)行交換，如交換液有為交換的生物堿時(shí)，仍可以繼續(xù)交換，直至流出液無(wú)生物堿反應(yīng)為止。 將樹脂傾入燒杯中，用蒸餾水洗滌數(shù)次，除去雜質(zhì)，于布氏漏斗中抽干，倒入唐磁盤中晾干。（3）總生物堿的洗脫 將晾干的樹脂，加濃氨水適量，攪勻，使?jié)駶?rùn)度適宜，樹脂充分膨脹，蓋好放置20min。 裝入索氏提取器中，加三氯甲烷300mL在水浴上回流洗脫，提至盡生物堿為止。 回收三氯甲烷，得棕色粘稠物。 加無(wú)水丙酮適量，加熱溶解，過(guò)濾，減壓蒸干。必要時(shí)重復(fù)此操作，以脫除粗生物堿中的水，再在無(wú)水

10、丙酮中重結(jié)晶。3氧化苦參堿的分離（1）柱色譜法 取100目色譜用氧化鋁50g，用漏斗緩慢加入色譜柱內(nèi)（1cm×24cm，干法裝柱），取苦參0.2g，加入適量氧化鋁，攪勻，研細(xì)，裝入色譜柱頂端，先用50ml三氯甲烷通過(guò)色譜柱，再用三氯甲烷-甲醇（9:1）洗脫，流速為1mL/min。每10mL為一份（約收集15份），經(jīng)薄層層色譜鑒定，相同流出成分合并，在水浴上揮發(fā)去溶劑，剩余物加無(wú)水丙酮溶解，放置，析出結(jié)晶為氧化苦參堿。（2）溶解度差異法 將苦參總堿溶于少量三氯甲烷中，加入10倍量乙醚，放置后有沉淀析出，過(guò)濾吸出的沉淀，濾液濃縮后再溶于少量三氯甲烷中，加入乙醚放置，再過(guò)濾析出沉淀，合并兩

11、次的沉淀物，用丙酮重結(jié)晶，即為氧化苦參堿。4.苦參生物堿的沉淀反應(yīng) 取自制苦參總生物堿約 0.1g 加 1% 鹽10ml 使溶解,過(guò)濾,取濾液分置于三支試管中,進(jìn)行以下試驗(yàn): (1)碘化鉍鉀試驗(yàn):于上述一支試管中加入碘化鉍鉀試劑 12 滴,立即有桔紅色沉淀產(chǎn)生 . (2)碘化汞鉀試驗(yàn):于上述另一支試管中加入碘化汞鉀試劑 23 滴,有白色沉淀產(chǎn)生. (3)碘碘化鉀試驗(yàn) : 于上述第三支試管中加入碘一碘化鉀試劑 23滴,有褐色或棕褐色沉淀產(chǎn)生.5苦參生物堿的薄層層析鑒定(1)氧化鋁薄層層析法 吸附劑:中性氧化鋁(級(jí),過(guò) 160 目篩),干法鋪板(軟板). 樣品: a. 自制苦參堿乙醇溶液; b.

12、苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品乙醇溶液; c. 自制氧化苦參堿乙醇溶液; d. 氧化苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品乙醇溶液; e. 自制苦參總生物堿乙醇溶液 展開劑: 氯仿甲醇 (19:1) 展開三次; 氯仿甲醇濃氨水(5:0.6:0.2) 顯色劑:噴霧改良碘化鉍鉀試劑,觀察斑點(diǎn)顏色,并與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照(2) 硅膠薄層層析法 吸附劑:2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠 G 硬板,于 110烘干半小時(shí). 樣品:同 (1) 項(xiàng)下 展開劑: a. 先以甲苯乙酸乙酯甲醇水(2:4:2:1) 展開,展距約 8cm, 取出,晾干,再以甲苯丙酮乙醇濃氨試液(20:20:3:1)展開,展距第一次相同; b. 氯仿甲醇乙醚(44:0.6:3) 顯色劑:噴霧改

13、良碘化鉍鉀試劑和亞硝酸鈉乙醇液,觀察斑點(diǎn)顏色,并與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照五.思考題1. 敘述酸水法及離子交換法提取純化生物堿的原理。2. 應(yīng)如何檢查(1) 滲漉液中是否含有生物堿？(2) 滲漉液中生物堿是否被交換在樹脂上？(3) 離子交換樹脂是否已飽和？3. 簡(jiǎn)述索氏提取器提取原理及特點(diǎn)。4. 在收集滲漉液的過(guò)程中，溶液的顏色有何變化？在回流提取中，有何現(xiàn)象發(fā)生？5.制備性薄層色譜的特點(diǎn)是什么？六.主要參考文獻(xiàn)1.胡晶紅，苦參生物堿的提取和氧化苦參堿的純化，山東大學(xué)碩士學(xué)位論文，20072. AUeno et alChemPharmBull1978，26，18323.陳德昌中藥化學(xué)對(duì)照品工作手冊(cè)北京：中國(guó)

14、醫(yī)藥科技出版社，2000：1424.楊云等天然藥物化學(xué)成分提取分離手冊(cè)北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2003：454另外的方案1.4.1.2浸漬浸漬法(maceration)可在常溫或加熱的條件下浸泡藥材獲取有效成分,操作簡(jiǎn)單易行,但所需時(shí)間長(zhǎng),溶劑用量大,有效成分浸出率低。常溫浸漬是較為常用的生物堿提取方法,如秦學(xué)功等圈考察了苦豆子種子中生物的冷浸工藝條件,室溫下用稀鹽酸提取苦豆籽中的苦參總生物堿,研究不同條件下的總堿浸出率,最高可達(dá)3.7%以上。陳月圓等Ivol以小聚堿為指標(biāo),對(duì)黃柏中的總生物堿提取方法進(jìn)行了優(yōu)化,分別用水、乙醇和酸作為溶劑,使用乙醇為溶劑的提取率為84.4%,遠(yuǎn)高于其它兩種溶劑

15、。1.4.1.3回流回流法(circumfluence)是以乙醇等易揮發(fā)的有機(jī)溶劑為溶媒,對(duì)浸出液加熱蒸餾,其中揮發(fā)性溶劑餾出后再次冷凝,重新回到浸出器中繼續(xù)參與浸取過(guò)程,多采用索氏提取器完成。此法操作簡(jiǎn)便,提取率較高。龍德清等Ivll用酸性醇回流法提取魔芋中總生物堿,得到最佳的工藝條件為在pH值2一3的酸性醇中回流3h,總生物堿含量為0,39%。回流法操作時(shí)間較長(zhǎng),且整個(gè)過(guò)程處于加熱狀態(tài),不適用于熱敏性生物堿的提取。1.4.1.4滲流滲滾法(percolation)的提取過(guò)程類似多次浸取過(guò)程,浸出液可以達(dá)到較高濃度,浸出效果較好。此法常溫操作不需加熱,溶劑用量少,過(guò)濾要求較低,使分離操作過(guò)程

16、簡(jiǎn)化,尤其適用于熱敏性、易揮發(fā)且有效成分含量較低或貴重藥材提取。采用0.5%的硫酸溶液對(duì)中藥材黃連用滲轆法提取,收集7倍量滲媲液即可保證生物堿的提取率,與回流法比較,滲轆法提取物含雜質(zhì)少、提取率高、使用溶劑量少即l。滲渡法的操作技術(shù)要求較高,否則會(huì)影響提取效率,當(dāng)提取物為薪性、不易流動(dòng)的成分時(shí),不宜使用該法。1.4.2生物堿提取新技術(shù)隨著科學(xué)的發(fā)展,針對(duì)傳統(tǒng)提取過(guò)程中存在的能耗大、有效成分損耗大雜質(zhì)較多、效率較低等問(wèn)題,一些新技術(shù)應(yīng)用于生物堿提取工藝中,在傳統(tǒng)方法的基礎(chǔ)上利用新技術(shù)的強(qiáng)化作用或流體在超臨界狀態(tài)下進(jìn)行萃取大大提高了提取效率,降低了過(guò)程能耗,因其顯著優(yōu)勢(shì)而成為研究熱點(diǎn)。1.4.2.

17、1超聲輔助提取超聲輔助提取(ultrasound一assistedextraetion,UAE)的3個(gè)理論依據(jù)是超聲波熱學(xué)機(jī)理、超聲波機(jī)械機(jī)制和空化作用側(cè)。利用超聲技術(shù)可以縮短提取時(shí)間、提高提取率,并且無(wú)需加熱,提高了熱敏性生物堿的提取率且對(duì)其生理活性基本沒(méi)有影響,溶劑使用量相對(duì)較少,可以降低成本。郭孝武曰】對(duì)比研究了超聲、回流和浸泡3種方式提取益母草中總生物堿的產(chǎn)率,超聲可以使益母草莖組織形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,造成莖內(nèi)組織細(xì)胞損傷,促使益母草總生物堿快速提取,縮短了提取時(shí)間。超聲提取4Omin比回流提取Zh產(chǎn)率高42.86%,而所得總生物堿無(wú)化學(xué)結(jié)構(gòu)改變。國(guó)外對(duì)于超聲提取生物堿也有研究,A.pj

18、ilani等175】利用超聲技術(shù)在不同溶劑系統(tǒng)中提取阿托品(atropine),得到最有效的提取溶劑系統(tǒng)為CH30H/CH3CN(80:20),提取率為1.01%。1.4.2.2微波萃取微波萃取又稱微波輔助提取(mierowave一assistedextraCti。n,MAE),利用介電損耗和離子傳導(dǎo)的原理,根據(jù)不同結(jié)構(gòu)物質(zhì)吸收微波能力的差異,對(duì)某些組分選擇性加熱,可使被萃取物質(zhì)從體系中分離進(jìn)入萃取劑附l。郭錦棠等腳l對(duì)微波與索氏回流方法提取生物堿進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合微波與索氏提取法對(duì)黃連中鹽酸小聚堿的提取效果優(yōu)于單獨(dú)索氏提取。高姍vs利用微波萃取,采用正交試驗(yàn)優(yōu)化了十大功勞葉中小璧堿的提取條

19、件。Feizhang等f(wàn)79對(duì)比不同方法提取博落回(Macleayaeordata(wsnd)R.Br.)中的血根堿和白屈菜赤堿,得出微波萃取比浸漬、超聲輔助提取等更為有效。相對(duì)于傳統(tǒng)方法,微波萃取質(zhì)量穩(wěn)定、產(chǎn)量大,選擇性高、節(jié)省時(shí)間且溶劑用量少、能耗較低。但微波萃取受萃取溶劑、萃取時(shí)問(wèn)、萃取溫度和壓力的影響,選擇不同的參數(shù)條件,往往得到不同的提取效果。1.4.2.3超臨界流體萃取超臨界流體萃取(Supercriticalfluidsextraetion,SCFE)是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型提取技術(shù),利用超臨界流體(SupercritiCalfluids,SCF)為萃取劑,從液體或固

20、體中萃取目標(biāo)組分。SCF特有的理化性質(zhì)s0l“使其具有比液體溶解能力大、比氣體易于擴(kuò)散和運(yùn)動(dòng)且傳質(zhì)速率遠(yuǎn)高于液相過(guò)程的特點(diǎn),目前普遍采用的SCF為C02。超臨界流體萃取具有以下優(yōu)勢(shì):(1)萃取率高;(2)選擇性高,分離徹底;(3)工藝簡(jiǎn)單,操作費(fèi)用低;(4)操作溫度低,適于熱敏性物質(zhì)提取;(5)COZ無(wú)毒、不易燃,安全性高且價(jià)格低廉。目前利用超臨界流體萃取技術(shù)提取天然成分已成為研究熱點(diǎn)。張立偉等sz利用超臨界coZ流體萃取苦參中的總生物堿,提取率為常規(guī)方法的2.4倍,耗時(shí)為常規(guī)方法的1/3。LiuB等1831從防己科植物青藤中用超臨界coZ流體提取漢防己堿,在萃取過(guò)程中是否加入甲醇改性劑的提取

21、率差別巨大,分別為7.47mg/g和0.17mg/g。1.5生物堿的純化方法概述經(jīng)過(guò)溶劑提取后的生物堿溶液除生物堿及鹽類之外還存在大量其它脂溶性或水溶性雜質(zhì),需要進(jìn)一步純化處理,將生物堿成分從中分離出來(lái)。通常使用的是有機(jī)溶劑萃取、色譜和樹脂吸附,隨著新技術(shù)如分子印跡、膜分離技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,大大簡(jiǎn)化了過(guò)程、提高了純化效率。1.5.1有機(jī)溶劑萃取有機(jī)溶劑萃取(organieSolventextraetion)是利用提取物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)不同達(dá)到分離的方法,萃取時(shí)組分在兩相溶劑中的分配系數(shù)越大分離效率越高,分離效果越好。對(duì)于親脂性生物堿,利用非極性和低極性有機(jī)溶劑如苯、乙醚、

22、氯仿等與水進(jìn)行液液萃取;對(duì)于水溶性生物堿,利用極性較大的有機(jī)溶劑如乙酸乙酷、丁醇等與水溶液萃取。有時(shí)可用多種溶劑配制成兩相互不相溶的溶劑進(jìn)行萃取s'。有機(jī)溶劑萃取是生物堿純化的經(jīng)典技術(shù),應(yīng)用廣泛,具有操作簡(jiǎn)單、容易放大的優(yōu)點(diǎn),但分離效率和純度較低,使用大量有機(jī)溶劑,操作安全性不佳。1.5.2色譜分離色譜法(chrolnatography)也稱層析法,是一種物理分離方法,可以用于分離純化和鑒定中藥有效成分。色譜法包括紙色譜、薄層色譜和柱色譜,其中常用吸附柱色譜純化生物堿成分,一般使用吸附劑為硅膠和氧化鋁。1.5.2.1硅膠柱色譜利用5102·xH20作為吸附劑,約90%以上的分

23、離純化工作均可使用此法。硅膠是中性無(wú)色顆粒,性能穩(wěn)定,分離效率與其粒度、孔徑及表面積等因素1.4.1.1煎煮煎煮法(dec0Ction)是中藥最早、最常用的制劑方法之一,適用于有效成分能溶于水,且對(duì)加熱不敏感的藥材,能夠提取出相對(duì)較多的有效成分。黃際薇等腳采用酸水煎煮,以苦參堿和氧化苦參堿的提取率為指標(biāo),用正交試驗(yàn)法優(yōu)選了山豆根的提取工藝。M.G.ortega等!0sl考察了使用煎煮法從石松屬藥材植物HuperziaSaururus中提取生物堿,取809干燥粉碎后的藥材,用600ml沸水煎煮2次,每次時(shí)間為lh,合并提取液后堿化,然后用氯仿萃山東大學(xué)碩士學(xué)位論文有關(guān)1851。硅膠柱色譜使用范圍

24、廣,可作為極性和非極性生物堿的純化,成本低、操作方便。張?zhí)m蘭等186研究了鉤吻總生物堿中鉤吻素子的提取與分離,經(jīng)過(guò)溶劑回流提取后,用堿性硅膠柱層析分離鉤吻素子取得了很好的效果。1.5.2.3氧化鋁柱色譜以A12仇作為吸附劑的層析分離法,根據(jù)氧化鋁制備和處理方法差異,分為堿性、中性和酸性3種,其中堿性和中性的氧化鋁適用于分離酸性較大、活化溫度較高的生物堿類成分。有文獻(xiàn)報(bào)道粉防己生物堿經(jīng)粗提后用A12仇層析方法正向分離非酚性粉防己堿與粉防己諾林堿有較好的效果187。需要注意的是A1203的粒度對(duì)分離效率有顯著影響,一般粒度范圍在100160目,低于100目則分離效果差,高于160目則溶液流速太慢。

25、1.5.3樹脂吸附樹脂吸附包括離子交換樹脂(ion一exchangeresin)和大孔樹脂(macro一porousresin)。樹脂吸附擺脫了傳統(tǒng)純化法得到的制劑大、黑、粗,使用不方便且溶劑用量大的缺點(diǎn),因其具有的諸多優(yōu)勢(shì)而成為應(yīng)用日益廣泛的純化技術(shù)。1.5.3.1離子交換樹脂離子交換樹脂主要通過(guò)靜電引力和范德華力選擇吸附,根據(jù)本身特性分為多種類型。針對(duì)生物堿的性質(zhì)選用強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹脂,將酸化的生物堿提取液通過(guò)樹脂,使生物堿鹽的陽(yáng)離子交換到樹脂上而與其它成分和雜質(zhì)分離。經(jīng)過(guò)離子交換后的樹脂用氨水堿化得到游離態(tài)生物堿,等樹脂晾干后根據(jù)生物堿的親脂或親水性質(zhì)用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行提取得到總生物堿。

26、王洪新等lss分別用動(dòng)態(tài)法和靜態(tài)法篩選離子交換樹脂用于純化苦豆子中的生物堿,考察了pH值、助溶劑等因素對(duì)純化效果的影響,對(duì)苦參生物堿生產(chǎn)具有指導(dǎo)意義。1.5.3.2大孔樹脂大孔樹脂是在離子交換樹脂基礎(chǔ)上,自20世紀(jì)60年代初開發(fā)出的一類新型高聚物吸附劑,其純化機(jī)理是利用特殊吸附劑一一大孔樹脂的吸附性和分子篩結(jié)合的原理,選擇性吸附中藥提取液中有效成分,去除雜質(zhì)。樹脂經(jīng)過(guò)洗脫、浸泡、沖洗等過(guò)程處理后再生可重復(fù)使用。目前多數(shù)生物堿成分的純化都可采用此技術(shù),相對(duì)于鹽析、沉淀等傳統(tǒng)技術(shù),大孔樹脂吸附具有以下山東大學(xué)碩士學(xué)位論文3個(gè)優(yōu)點(diǎn):(l)溶劑用量少;(2)產(chǎn)品質(zhì)量高,穩(wěn)定性好;(3)生產(chǎn)周期短、設(shè)備

27、簡(jiǎn)單。這些優(yōu)良的性能使大孔樹脂吸附在近年來(lái)受到越來(lái)越多的關(guān)注1501。聶其霞等100比較了醇沉、大孔樹脂吸附和吸附澄清3種方法對(duì)黃連解毒湯中小巢堿含量的影響,發(fā)現(xiàn)大孔樹脂法為最佳的純化方法。1.5.4分子印跡分子印跡技術(shù)(moleeularimprintingteehnology,MIT)是20世紀(jì)末出現(xiàn)的一種高選擇性分離技術(shù),通過(guò)印跡、聚合、去除印跡分子3步制備分子印跡聚合物(MIPs),以其特定的分離機(jī)理而具有極高的選擇性,可以作為高度專一的固相萃取材料0ll。黃曉冬等脾】制備了辛可寧(cinchonine)分子印跡聚合物手性整體柱,可在Zmin內(nèi)實(shí)現(xiàn)非對(duì)映異構(gòu)體辛可寧和辛可尼丁(cinchonidine)分離。目前MIT分離生物堿的技術(shù)尚屬研究階段,需要在熱力學(xué)及動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、MIPS制備、降低成本等方面作進(jìn)一步探索。1.5.5膜分離膜分離技術(shù)(membraneseparationtechnology,MST)是一項(xiàng)新興的高效分離技術(shù),分離過(guò)程以選擇透過(guò)性膜作為分離介質(zhì),通過(guò)在膜兩側(cè)施加某種推動(dòng)力(如壓力差、化學(xué)位差、電位差等),使原料液中組分選擇性通過(guò)膜。以壓力差為推動(dòng)力的膜分離過(guò)程包括微濾、超濾、納濾、反滲透,根據(jù)篩分原理使