一輪復習基因工程(必修+選修)

1、目的基因體外分子基因重組遠緣雜交不親和性狀基因拼接技術一 、基因工程的概念基因工程的概念1、下列敘述符合基因工程概念的是（ ）A、 B淋巴細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有B 淋巴細胞中的抗體基因B、 將人的干擾素基因重組到質粒后導入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C、 用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D、 自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上 1 1、“分子手術刀分子手術刀”限制性內切酶限制性內切酶( (限制酶限制酶) )限制酶分布：主要在微生物中作用、特點：識別、切割作用部位： 磷酸二酯鍵結果：產(chǎn)生黏性末端或平末端舉例：大腸

2、桿菌的一種限制酶能識別GAATTC序列并在G和A之間切開二、基因工程的基本工具基因工程的基本工具特異性GCTTAAGCTTAACTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 練習使用限制酶 剪切目的基因GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因目的基因黏性末端黏性末端CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 作用：結果： 形成重組DNA2、“分子縫合針”DNA連接酶恢復被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵分類： EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶只能連接黏性末端只能連接

3、黏性末端能連接黏性末端（主要）和平末端2 2、依右圖有關基因工程的工具酶功能的敘、依右圖有關基因工程的工具酶功能的敘述，不正確的是述，不正確的是 （ ）A A、切斷、切斷a a處的酶為限制核酸性內切酶處的酶為限制核酸性內切酶 B B、連接、連接a a處的酶為處的酶為DNADNA連接酶連接酶C C、切斷、切斷b b處的酶為解旋酶處的酶為解旋酶 D D、切斷、切斷b b處的為限制性內切酶處的為限制性內切酶3、以下是幾種不同限制性核酸內切酶切割DNA分子后形成的部分片段。完成下列問題：CTGCA G TG G CTTAA AC G GC CTGCA CG (1)以上DNA片段是由 種限制性核酸內切酶

4、切割后產(chǎn)生的。(2)若要把相應片段連接起來，應選用 (填“DNA聚合酶”或“DNA連接酶”)。(3)找出能連接的對應片段并寫出連接后形成的DNA分子： 4DNA連接酶CTGCAGGACGTC、“分子運輸車”運載體將目的基因送到宿主細胞中去。利用它在宿主細胞中對目的基因進行大量的復制 在宿主細胞內復制并穩(wěn)定地保存在宿主細胞內復制并穩(wěn)定地保存質粒質粒、噬菌體和動植物病毒、噬菌體和動植物病毒。3)種類：種類：2)具備的條件具備的條件1)作用：作用：具有多個限制酶切點具有多個限制酶切點小型環(huán)狀的小型環(huán)狀的DNA分子分子三、基因工程操作的基本步驟基因工程操作的基本步驟第一步：目的基因的獲取1、目的基因是

5、指： 。2、獲取目的基因的方法1) 從基因文庫中獲?。B槍法）2) 人工合成 3) 利用PCR技術獲取和擴增目的基因概念？分類？構建方法？編碼蛋白質的基因（1 1）PCRPCR：（2 2）目的：）目的：（3 3）原理：）原理：（4 4）過程：）過程：第一步：加熱至第一步：加熱至90909595DNADNA解鏈為單鏈解鏈為單鏈；第二步：冷卻到第二步：冷卻到55556060，引物與兩條單鏈引物與兩條單鏈DNADNA結合結合；第三步：加熱至第三步：加熱至70707575，熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶從引物起始聚合酶從引物起始進行互進行互補鏈的合成補鏈的合成。（6 6）條件：）條件：（5 5）特點：

6、）特點：指數(shù)形式擴增指數(shù)形式擴增PCR技術多聚酶鏈式反應獲取大量的目的基因DNA雙鏈復制目的基因目的基因 引物引物四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸耐高溫的耐高溫的DNADNA聚合酶等聚合酶等第二步：基因表達運載體的構建質粒黏性末端同一種限制酶目的基因質粒黏性末端DNA連接酶重組DNA切 割切 割目的基因啟動子終止子標記基因（復制原點）基因表達載體的組成4、下列關于基因表達載體的敘述不正確的是（ ）A啟動子是與RNA聚合酶識別和結合的部位，是起始密碼B啟動子和終止子都是特殊結構的DNA短片段，對mRNA的轉錄起調控作用C標記基因是為了鑒別受體細胞中是否有目的基因從而便于篩選D基因表達載體的構建視受體

7、細胞及導入方式不同而有所差別A第三步：將目的基因導入受體細胞方法將目的基因導入植物細胞將目的基因導入動物細胞將目的基因導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法顯微注射法感受態(tài)細胞法（此方法的受體細胞多是受精卵）（用氯化鈣處理）轉化：（雙子葉植物和裸子植物）（單子葉植物）翻譯參與代謝DNA分子雜交技術分子雜交技術抗原抗體雜交分子水平檢測個體生物學水平鑒定第四步：目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定三、基因工程的應用基因工程的應用（1 1）植物基因工程：）植物基因工程：（2 2）動物基因工程：）動物基因工程：（3 3）基因工程藥物：基因工程藥物：（4）基因治療：）基因治療：（5）基因診斷

8、：）基因診斷：P23如診斷人是否感染了乙肝病毒方法：DNA分子雜交技術1.應用基因工程技術診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達到探測疾病的目的?；蛱结樖侵福?）A用于檢測疾病的醫(yī)療器械 B用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子C合成球蛋白的DNA D合成苯丙羥化酶DNA片段。 B四、蛋白質工程蛋白質工程1、蛋白質工程崛起的緣由（1）基因工程的不足：在原則上只能產(chǎn)生自然界已存在的蛋白質(2)某些天然蛋白質的不一定符合生產(chǎn)要求2、蛋白質工程的基本原理基因DNAmRNA氨基酸序列多肽鏈蛋白質三維結構預期功能生物功能轉錄翻譯折疊分子設計DNA合成3、蛋白質工程的應用4、【生物現(xiàn)代生物技術專題】

9、為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。（1）獲得耐鹽基因后，構建重組DNA分子所用的限制性內切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處。（填“a”或“b”）（2） 將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉化法和 法。（3）由導入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用 技術。該技術的核心是 。 （4）為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的 作探針進行分子雜交檢測，又要用 方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性?；驑專ɑǚ酃芡ǖ溃┲参锝M織培養(yǎng)去分化和再分化耐鹽基因一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）名名 稱稱作作 用用參與的生理過程參與的生理過程及應用及應用DNADNA連接酶連接酶 限制性核酸內限制性核酸內切酶切酶DNADNA聚合酶聚合酶RNARNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶逆轉錄酶逆轉