細(xì)胞學(xué) 1-17 老師所給名詞解釋簡答論述 重點(diǎn)(江蘇師范大學(xué))

1、- 13 -第 - 13 - 頁 共 13 頁第三章 細(xì)胞生物學(xué)研究方法 名詞解釋：原位雜交、單克隆抗體、細(xì)胞株、流式細(xì)胞術(shù)、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、 細(xì)胞融合、細(xì)胞拆合、分辨率，細(xì)胞系. 名詞解釋：1.原位雜交在不破壞細(xì)胞或細(xì)胞器的情況下，用核酸探針檢測特定核苷酸序列在染色體上的精確位置的技術(shù)。染色體在高pH值條件下，DNA解鏈，帶標(biāo)記的核酸探針即刻與染色體一定部位雜交。既可檢測DNA序列，也可檢測RNA序列。2.單克隆抗體來自單個細(xì)胞克隆所分泌的抗體分子。通過克隆單個分泌抗體的B淋巴細(xì)胞，獲得的只針對某一抗原決定簇的抗體，具有專一性強(qiáng)、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。3.細(xì)胞株通過選擇從原代培養(yǎng)物或者細(xì)胞

2、系中獲得的具有特殊性質(zhì)或者標(biāo)志的細(xì)胞。細(xì)胞株：在體外一般可以順利地傳4050代，并且仍能保持原來二倍體數(shù)量及接觸抑制行為的傳代細(xì)胞。4.原代培養(yǎng)直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)。原代細(xì)胞培養(yǎng)：直接從有機(jī)體取出組織，通過組織塊長出單層細(xì)胞，或者用酶消化或機(jī)械方法將組織分散成單個細(xì)胞，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。5.傳代培養(yǎng)將培養(yǎng)細(xì)胞從培養(yǎng)器中取出，把一部分移至新的培養(yǎng)器中再進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)方式稱為傳代培養(yǎng)，亦稱為繼代培養(yǎng)或連續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞培養(yǎng)：原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細(xì)胞匯合以后，需要進(jìn)

3、行分離培養(yǎng)（即將細(xì)胞從一個培養(yǎng)器皿中以一定的比率移植至另一些培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)），否則細(xì)胞會因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭，將影響細(xì)胞的生長，這一分離培養(yǎng)稱為傳代細(xì)胞培養(yǎng)。 6.細(xì)胞融合真核細(xì)胞通過介導(dǎo)和培養(yǎng)，兩個或多個細(xì)胞合并成一個雙核或多核細(xì)胞的過程稱為細(xì)胞融合（cell fusion)或細(xì)胞雜交（cell hybridization)。細(xì)胞融合：兩個或多個細(xì)胞融合成一個雙核細(xì)胞或多核細(xì)胞的現(xiàn)象。一般通過滅活的病毒或化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo)，也可通過電刺激融合。 細(xì)胞融合 cell fussion兩個細(xì)胞通過質(zhì)膜的接觸并相互融合形成一個細(xì)胞的過程。融合后的細(xì)胞只有一個連續(xù)的細(xì)胞質(zhì)膜。7細(xì)胞

4、拆合把細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)分離開，再把不同來源的胞質(zhì)體和核體相互組合，形成核質(zhì)雜交細(xì)胞。物理方法：機(jī)械或短波光去核，微吸管移核化學(xué)方法：細(xì)胞松弛素B促細(xì)胞排核8分辨率能將物體相近兩點(diǎn)分辨清楚的距離極限(顯微鏡最重要的性能參數(shù))D= 0.61l / N.A.l代表光波波長；N.A.為鏡口率，也稱數(shù)值孔徑。N. A. =n · Sin （a /2） n：物鏡與標(biāo)本間介質(zhì)的折射率；（1或1.515） a：鏡口角（聚光焦點(diǎn)對物鏡鏡 口的張角，<180º）結(jié)論： 通過公式可知光學(xué)顯微鏡最大分辨率0.2um 減小分辨率需減小l 分辨率：區(qū)分開兩個質(zhì)點(diǎn)間的最小距離。9.細(xì)胞系：原代培養(yǎng)經(jīng)

5、首次傳代成功后即為細(xì)胞系。細(xì)胞系 cell line來源于動物或植物細(xì)胞，能夠在體外培養(yǎng)過程中無限增殖的細(xì)胞群體。細(xì)胞系：在體外培養(yǎng)的條件下，有的細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變，而且?guī)в邪┘?xì)胞特點(diǎn)，失去接觸抑制，有可能無限制地傳下去的傳代細(xì)胞。 10.流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)是對單個細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門技術(shù)，使用儀器為流式細(xì)胞儀。主要應(yīng)用：用于定量測定細(xì)胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量；測定細(xì)胞群體中不同時相細(xì)胞的數(shù)量；從細(xì)胞群體中分離某些特異染色的細(xì)胞。第四章 細(xì)胞質(zhì)膜名詞解釋：生物膜 單位膜 流動鑲嵌模型 脂質(zhì)體1.生物膜質(zhì)膜、細(xì)胞內(nèi)膜、線粒體、葉綠體的膜等統(tǒng)稱為生物膜細(xì)胞內(nèi)的膜系統(tǒng)與

6、細(xì)胞質(zhì)膜統(tǒng)稱為生物膜。（細(xì)胞質(zhì)膜曾稱細(xì)胞膜，是指圍繞在細(xì)胞最外層，由脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類組成的生物膜。）2.單位膜 JD. Robertson 1957用超薄切片技術(shù)電鏡觀察,提出單位膜模型，所有的生物膜都是由蛋白質(zhì)脂質(zhì)蛋白質(zhì)的單位膜構(gòu)成。暗明暗三條帶。厚約7.5nm。3.流動鑲嵌模型 Singer 和Nicolson 1972 根據(jù)免疫熒光、冰凍蝕刻的研究結(jié)果，提出了“流動鑲嵌模型”1. 脂類分子構(gòu)成膜的基質(zhì)；2. 蛋白有兩種，插入膜中（整合蛋白），或附著于細(xì)胞表面（周邊蛋白），表現(xiàn)出分布的不對稱性；3. 膜是流動的，膜分子在膜平面內(nèi)可行各種運(yùn)動4.脂質(zhì)體脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定

7、的脂雙層膜的趨勢而制備的人工膜(artificial membrane)。單層脂分子鋪展在水面上時，其極性端插入水相而非極性尾部面向空氣界面，攪動后形成乳濁液，即形成極性端向外而非極性端在內(nèi)部的脂分子團(tuán)或形成雙層脂分子的球形脂質(zhì)體。第五章 物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸名詞解釋：主動運(yùn)輸 通道蛋白 載體蛋白 膜泡運(yùn)輸 籠形蛋白 跨細(xì)胞運(yùn)輸 轉(zhuǎn)胞吞作用1.主動運(yùn)輸 在膜運(yùn)輸?shù)鞍椎膸椭?，使被運(yùn)送物質(zhì)逆濃度梯度或電化學(xué)梯度消耗能量跨越膜的運(yùn)輸方式，介導(dǎo)此運(yùn)輸方式的蛋白全為載體蛋白。主動運(yùn)輸：一種需要消耗能量的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸過程。被運(yùn)輸?shù)孜锱c跨膜載體蛋白結(jié)合，通過載體蛋白構(gòu)象改變，從而將底物逆著電化學(xué)梯度轉(zhuǎn)運(yùn)到膜的另

8、一側(cè)。主動運(yùn)輸：物質(zhì)逆濃度梯度或電化學(xué)梯度，由低濃度向高濃度一側(cè)進(jìn)行跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的方式，需要細(xì)胞提供能量，需要載體蛋白的參與。2.通道蛋白：能形成貫穿膜脂雙分子層的充水的通道，使某些物質(zhì)通過而運(yùn)輸?shù)侥さ牧硪粋?cè)。通道蛋白只介導(dǎo)被動運(yùn)輸。一般認(rèn)為它是橫跨質(zhì)膜形成的親水的通道，能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過。通道蛋白：由幾個蛋白亞基在膜上形成的孔道，能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過簡單的自由擴(kuò)散運(yùn)動從膜的一側(cè)到另一側(cè)。3.載體蛋白 能與特異性分子結(jié)合，通過構(gòu)象改變將物質(zhì)運(yùn)輸?shù)侥さ牧硪粋?cè)。介導(dǎo)被動運(yùn)輸和主動運(yùn)輸。載體蛋白：是一類膜內(nèi)在蛋白，幾乎所有類型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白質(zhì)分子。通過與

9、特定溶質(zhì)分子的結(jié)合，引起一系列構(gòu)象改變以介導(dǎo)溶質(zhì)分子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。4.膜泡運(yùn)輸 真核細(xì)胞通過內(nèi)吞作用（胞吞作用）和外排作用（胞吐作用）完成大分子與顆粒性物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸。因貨物包被在囊泡中，又稱膜泡運(yùn)輸。 5.籠形蛋白 （網(wǎng)格蛋白）又稱籠形蛋白，是一類包被蛋白，由3條重鏈和3條輕鏈成，組裝形成多面體籠形結(jié)構(gòu)，介導(dǎo)高爾基體到溶酶體以及胞吞泡形成等過程。（由3個二聚體組成，可重復(fù)利用）6.跨細(xì)胞運(yùn)輸 【跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)】穿胞運(yùn)輸在細(xì)的一側(cè)形成胞飲小泡穿越細(xì)胞質(zhì)，另一側(cè)使小泡中的物質(zhì)釋放出去。如：母鼠血液中的抗體經(jīng)穿胞運(yùn)輸進(jìn)入乳汁。在具有極性的上皮細(xì)胞中，這是一種將胞吞作用和胞吐作用結(jié)合的物質(zhì)跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)方式，

10、即物質(zhì)通過胞吞作用從上皮細(xì)胞的一側(cè)被攝入細(xì)胞，再通過胞吐作用從細(xì)胞的另一側(cè)釋放出去?？缂?xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)以胞吞作用從細(xì)胞的一側(cè)攝取物質(zhì)，形成膜泡在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸，并以胞吐作用從細(xì)胞的另一側(cè)釋放出去的膜泡轉(zhuǎn)運(yùn)方式。7.轉(zhuǎn)胞吞作用轉(zhuǎn)胞吞作用 （transcytosis）受體被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)膜的不同區(qū)域 第六章 葉綠體及線粒體n 電子傳遞與氧化磷酸化n 半自主性細(xì)胞器1.呼吸鏈按一定順序排列在線粒體內(nèi)膜上的遞氫和遞電子的酶體系稱電子傳遞鏈。由于電子傳遞鏈以氧作電子接受體，與細(xì)胞攝取氧有關(guān)，又稱呼吸鏈。2.電子傳遞與氧化磷酸化電子傳遞鏈（electron transport chain） ： 按一定順序排列在線粒體內(nèi)

11、膜上的遞氫和遞電子的酶體系稱電子傳遞鏈。 由于電子傳遞鏈以氧作電子接受體，與細(xì)胞攝取氧有關(guān)，又稱呼吸鏈。電子傳遞鏈 electron transport chain 膜上一系列由電子載體組成的電子傳遞途徑。這些電子載體接受高能電子，并在傳遞過程中逐步降低電子的能量，最終將釋放的能量用于合成ATP或以其他能量形式儲存。氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）：經(jīng)糖酵解和三羧酸循環(huán)產(chǎn)生的還原性電子載體（NADH、FADH2）所攜帶的電子在呼吸鏈電子傳遞過程中釋放能量，在FoF1ATP合酶催化下使ADP磷酸化生成ATP，這種伴隨電子傳遞鏈的氧化過程所發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換和ATP的形

12、成稱為氧化磷酸化。氧化磷酸化底物在氧化過程中產(chǎn)生高能電子，通過線粒體內(nèi)膜電子傳遞鏈，將高能電子的能量釋放出來轉(zhuǎn)換成質(zhì)子動力勢進(jìn)而合成ATP的過程。氧化磷酸化與電子傳遞分別進(jìn)行實(shí)驗證據(jù)：線粒體內(nèi)膜重組實(shí)驗“亞線粒體小泡”（超聲破碎后，內(nèi)膜自然形成的小膜泡）完整：具氧化磷酸化與電子傳遞作用去掉基粒：只能電子傳遞，不能合成ATP結(jié)論：電子傳遞鏈內(nèi)膜上；氧化磷酸化基粒3.半自主性細(xì)胞器半自主性細(xì)胞器：線粒體和葉綠體的生長和增殖是受核基因組及其自身的基因組兩套遺傳系統(tǒng)的控制，所以稱為半自主性細(xì)胞器。 第七章 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)與內(nèi)膜系統(tǒng)概念：內(nèi)膜系統(tǒng)、分子伴侶、蛋白酶體、微粒體、信號斑概念：1.內(nèi)膜系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)膜

13、系統(tǒng)是指在結(jié)構(gòu)、功能或發(fā)生上相關(guān)的、由膜圍繞的細(xì)胞器或細(xì)胞結(jié)構(gòu)。主要包括：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、胞內(nèi)體、分泌胞以及植物細(xì)胞的液泡。內(nèi)膜系統(tǒng)：細(xì)胞內(nèi)在結(jié)構(gòu)、功能乃至發(fā)生上相關(guān)的、由膜圍繞的細(xì)胞器或細(xì)胞結(jié)構(gòu)的統(tǒng)稱，主要包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、胞內(nèi)體、分泌泡等。 為什么要將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等稱為“細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)”? 為什么線粒體等不屬于“細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)”生物發(fā)生 結(jié)構(gòu)上：相互流動 功能上：蛋白質(zhì)分選途徑2.分子伴侶分子伴侶 chaperone，molecular chaperon一種與其他多肽或蛋白質(zhì)結(jié)合的蛋白質(zhì)，以防止蛋白質(zhì)錯誤折疊、變性或聚集沉淀，對蛋白質(zhì)的正確折疊、組裝以及跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)有意義。分子伴侶

14、：又稱分子“伴娘”，細(xì)胞中，這類蛋白能識別正在合成的多肽或部分折疊的多肽，并與多肽的一定部位相結(jié)合，幫助這些多肽的轉(zhuǎn)移、折疊或組裝，但其本身并不參與最終產(chǎn)物的形成?？缒み\(yùn)送的蛋白質(zhì)在解折疊與重折疊的過程中都需要某些被稱為“分子伴侶”的分子參與。分子伴侶具有解折疊酶的功能，并能識別蛋白質(zhì)解折疊后暴露出來的疏水面并與之結(jié)合，防止互相作用產(chǎn)生凝聚或錯誤折疊，同時還參與蛋白質(zhì)跨膜運(yùn)送后分子的重折疊以及裝配過程。（P237）3.蛋白酶體 P115蛋白酶體 在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中降解被泛素標(biāo)記蛋白質(zhì)的大分子蛋白復(fù)合體。細(xì)胞中降解大分子復(fù)合體，富含依賴的蛋白酶活性，其功能然若細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)破碎機(jī)。4.微粒體微粒體（m

15、icrosome）：應(yīng)用蔗糖密度梯度離心法從組織勻漿中分離出的由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜等膜性碎片斷裂形成的封閉小泡，有糙面微粒體和滑面微粒體。微粒體：為了研究ER的功能，常需要分離ER膜，用離心分離的方法將組織或細(xì)胞勻漿，經(jīng)低速離心去除核及線粒體后，再經(jīng)超速離心，破碎ER的片段又封合為許多小囊泡（直徑約為100nm），這就是微粒體5.信號斑信號斑(signal patch) ：是由幾段信號肽形成的一個三維結(jié)構(gòu)的表面, 這幾段信號肽聚集在一起形成一個斑點(diǎn)被磷酸轉(zhuǎn)移酶識別。信號斑是溶酶體酶的特征性信號。信號斑：在蛋白質(zhì)折疊起來時其表面的一些原子特異的三維排列構(gòu)成信號斑，構(gòu)成信號斑的氨基酸殘基在線性氨基酸序列中彼

16、此相距較遠(yuǎn)，它們一般是保留在已完成的蛋白中，折疊在一起構(gòu)成蛋白質(zhì)分選的信號。第八章 膜泡運(yùn)輸概念：信號肽、信號識別顆粒信號肽位于蛋白質(zhì)端，包括疏水核心區(qū)，信號肽的端和端，原原核生物某些分泌蛋白的端也有信號序列，目前研究表明信號肽似乎沒有嚴(yán)格的專一性。信號肽：分泌蛋白的N端序列，指導(dǎo)分泌性蛋白到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上合成，在蛋白合成結(jié)束前信號肽被切除。分泌蛋白在N端含有一信號序列，稱信號肽，由它指導(dǎo)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜信號肽酶 signal peptidase蛋白水解酶，負(fù)責(zé)切除在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的新生多肽的N端信號肽序列。 信號序列 signal sequence蛋白質(zhì)中由特定氨基

17、酸組成的連續(xù)序列，決定蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的最終定位。信號識別顆粒信號識別顆粒（SRP）是一種核糖核蛋白復(fù)合體，位于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，可以與信號肽及核糖體大亞基結(jié)合，同時又可以與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的SRP受體結(jié)合。信號識別顆粒 signal recognition particle，SRP由6條不同多肽和一個小RNA分子構(gòu)成的RNP顆粒。識別并結(jié)合從核糖體中合成出來的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)信號序列，指導(dǎo)新生多肽及核糖體和mRNA附著到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。第九章 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)G蛋白、第二信使、分子開關(guān)、PKA（蛋白激酶A）、PKC、MAPKKK細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)、 微粒體 、分子開關(guān)蛋白 、信號識別顆粒 G蛋白G蛋白三體GTP結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白G蛋白

18、：由GTP控制活性的蛋白，當(dāng)與GTP結(jié)合時具有活性，當(dāng)與GDP結(jié)合時沒有活性。既有單體形式（ras蛋白），也有三聚體形式（Gs蛋白）。在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起著分子開關(guān)的作用。第二信使第二信使（secondary messenger）主要有：cAMP、cGMP、IP3、DG、Ca2+。作用：信號轉(zhuǎn)換、信號放大。第二信使：在胞內(nèi)產(chǎn)生的非蛋白類小分子，通過其濃度變化（增加或減少）應(yīng)答胞外信號與細(xì)胞表面受體的結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)酶和非酶蛋白的活性，從而在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中行使攜帶和放大信號的功能。目前公認(rèn)的第二信使有cAMP、DAG、IP3、Ca2+和cGMP第二信使 second messenger第一信使分子

19、（激素或其他配體）與細(xì)胞表面受體結(jié)合后，在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生或釋放到細(xì)胞內(nèi)的小分子物質(zhì)，如cAMP, IP3, Ca2+等，有助于信號向胞內(nèi)進(jìn)行傳遞。第二信使學(xué)說：胞外信號（第一信使）不能進(jìn)入細(xì)胞，作用于表面受體，產(chǎn)生胞內(nèi)信號（第二信使），從而引發(fā)靶細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng)。分子開關(guān) p161分子開關(guān) molecular switch細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中，通過結(jié)合GTP與水解GTP，或者通過蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化而開啟或關(guān)閉蛋白質(zhì)的活性。分子開關(guān)機(jī)制：通過蛋白激酶使靶蛋白磷酸化，通過蛋白水解酶使靶蛋白去磷酸化從而調(diào)節(jié)靶蛋白活性。蛋白質(zhì)磷酸化和去磷酸化作為一種生物學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制，可以改變蛋白質(zhì)電荷和構(gòu)象變化，從而導(dǎo)致

20、蛋白質(zhì)活性的增強(qiáng)或降低。分子開關(guān)：在細(xì)胞內(nèi)一系列信號傳遞的級聯(lián)反應(yīng)中，必須有正、負(fù)兩種相輔相成的反饋機(jī)制精確調(diào)控，也即對每一步反應(yīng)既要求有激活機(jī)制，又必然要求有相應(yīng)的失活機(jī)制，使細(xì)胞內(nèi)一系列信號傳遞的級聯(lián)反應(yīng)能在正、負(fù)反饋兩個方面得到精確控制的蛋白質(zhì)分子稱為分子開關(guān)。3.5分子開關(guān)蛋白信號傳遞中的開關(guān)蛋白：指細(xì)胞內(nèi)信號傳遞時作為分子開關(guān)的蛋白質(zhì)，含有正、負(fù)兩種相輔相成的反饋機(jī)制，可分兩類：開關(guān)蛋白的活性，由蛋白激酶使之磷酸化而開啟，由蛋白磷酸E使之去磷酸化而關(guān)閉，許多開關(guān)蛋白即為蛋白激酶本身。開關(guān)蛋白由GTP結(jié)合蛋白組成，結(jié)合GTP活化，結(jié)合GTP而失活。第二信使和分子開關(guān)第二信使學(xué)說：胞外信

21、號（第一信使）不能進(jìn)入細(xì)胞，作用于表面受體，產(chǎn)生胞內(nèi)信號（第二信使），從而引發(fā)靶細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng)。第二信使：在胞內(nèi)產(chǎn)生的非蛋白類小分子，通過其濃度變化（增加或減少）應(yīng)答胞外信號與細(xì)胞表面受體的結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)酶和非酶蛋白的活性，從而在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中行使攜帶和放大信號的功能。目前公認(rèn)的第二信使有cAMP、DAG、IP3、Ca2+和cGMPPKC蛋白激酶C protein kinase C一類多功能的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族，可磷酸化多種不同的蛋白質(zhì)底物。有兩個功能區(qū)，一個是親水的催化活性中心，一個是疏水的膜結(jié)合區(qū)。是鈣離子和磷脂酰絲氨酸依賴的絲氨酸蘇氨酸蛋白酶，具有廣泛的作用底物，參與眾多的生

22、理過程，同時的活化可以增強(qiáng)特殊基因的轉(zhuǎn)錄。PKA protein kinase蛋白激酶：將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到其他蛋白質(zhì)上的酶，通常對其他蛋白質(zhì)的活性具有調(diào)節(jié)作用。蛋白激酶A：稱為依賴于cAMP的蛋白激酶A，是由四個亞基組成的復(fù)合物，其中兩個是調(diào)節(jié)亞基，兩個是催化亞基；PKA的功能是將ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸殘基上，使蛋白質(zhì)被磷酸化，被磷酸化的蛋白質(zhì)可以調(diào)節(jié)下游靶蛋白的活性。MAPKKK P178Raf 是蘇氨酸/絲氨酸（Ser /Thr）蛋白激酶(又稱MAPKKK)，它使靶蛋白上的蘇氨酸/絲氨酸殘基磷酸化，可延長Ras-GTP信號事件的壽命自身活化后可結(jié)合并磷酸化MAPK

23、K(一種蛋白激酶)，引起級聯(lián)反應(yīng)。第十章 細(xì)胞骨架微管組織中心、驅(qū)動蛋白、胞質(zhì)動力蛋白1.微管組織中心 microtubule organizing centers，MTOC微管組織中心在細(xì)胞中微管起始組裝的地方，如中心體、基體等部位。-微管蛋白對微管的起始組裝有重要作用。微管組織中心（MTOC）：微管在生理狀態(tài)及實(shí)驗處理解聚后重新裝配的發(fā)生處稱為微管組織中心。動物細(xì)胞的MTOC為中心體。MTOC決定了細(xì)胞中微管的極性，微管的（-）極指向MTOC，（+）極背向MTOC。微管組織中心（Microtubule Orgnanizing Center, MTOC）正常生理條件下的體內(nèi)組裝： 微管的裝配

24、總是先由一定區(qū)域開始的，該區(qū)域為MTOC。微管的負(fù)端附在微管組織中心-TuRC上受到保護(hù)，微管的延長和縮短變化發(fā)生在正端。所有動物細(xì)胞中，中心體（centrosome)是主要的微管組織中心。真正起MTOC作用的可能是位于中心粒周圍的一些蛋白質(zhì)成分。2.驅(qū)動蛋白 kinesin驅(qū)動蛋白能利用ATP水解所釋放的能量驅(qū)動自身及所攜帶的貨物分子沿微管運(yùn)動的一類馬達(dá)蛋白，與細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸相關(guān)。驅(qū)動蛋白kinesin80nm的桿狀結(jié)構(gòu)，一端為兩個馬達(dá)結(jié)構(gòu)域（含ATP結(jié)合位點(diǎn)和微管結(jié)合位點(diǎn)），另一端為重鏈和輕鏈組成的扇形尾端。3.胞質(zhì)動力蛋白 cytoplasmic dynein胞質(zhì)動力蛋白由多條肽鏈組成的

25、巨型馬達(dá)蛋白，利用ATP水解釋放的能量將膜泡或膜性細(xì)胞器等沿微管朝負(fù)極轉(zhuǎn)運(yùn)。在細(xì)胞內(nèi)參與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)鸟R達(dá)蛋白有3類：沿微絲運(yùn)動的肌球蛋白沿微管運(yùn)動的驅(qū)動蛋白和動力蛋白第十一章 細(xì)胞核與染色質(zhì)常染色質(zhì)、異染色質(zhì)、著絲粒、燈刷染色體、多線染色體、核仁組織區(qū)、核纖層概念1.常染色質(zhì) p241 euchromatin常染色質(zhì)間期核中處于分散狀態(tài)、壓縮程度相對較低、著色較淺的染色質(zhì)。是指間期細(xì)胞和內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低，相對處于伸展?fàn)顟B(tài)，用堿性染料染色時著色較淺的那些染色質(zhì)2.異染色質(zhì) constitutive heterchromatin是指間期細(xì)胞核中染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高，處于聚縮狀態(tài)，用堿性

26、染料染色時著色深的那些染色質(zhì)。異染色質(zhì)在細(xì)胞間期保持高度凝聚狀態(tài)、染色較深、不具有轉(zhuǎn)錄活性的染色質(zhì)。異染色質(zhì)的特點(diǎn)：凝縮狀態(tài)，無轉(zhuǎn)錄活性、是遺傳惰性區(qū)。在細(xì)胞周期中表現(xiàn)為晚復(fù)制、早凝縮。分為兩類：結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)、兼性異染色質(zhì)常染色質(zhì)：伸展開的呈電子透亮狀態(tài)異染色質(zhì)：卷曲凝縮。（Giemsa染，常淺異深）3.著絲粒（centromere）著絲粒 位于每條染色體的兩條姊妹染色單體相連處主縊痕的中心部位，由高度重復(fù)序列的DNA組成,將染色體分為兩臂。著絲粒 將姐妹染色單體連接在一起形成有絲分裂染色體的主縊痕部位，著絲粒也是動粒形成及微管與動粒結(jié)合的區(qū)域。4.燈刷染色體 lampbrush chromo

27、some普遍存在于動物界的卵母細(xì)胞中。是卵母細(xì)胞進(jìn)行第一次減數(shù)分裂時停留在雙線期的染色體。它是一個二價體, 含4條染色單體, 由軸和側(cè)絲組成, 形似燈刷燈刷染色體較普遍存在于魚類、兩棲類等動物的卵母細(xì)胞減數(shù)分裂雙線期，由具有轉(zhuǎn)錄活性的染色質(zhì)環(huán)形成類似燈刷的特殊巨大染色體。5.多線染色體polytene chromosome多線染色體染色體DNA經(jīng)多次復(fù)制而不分開、呈規(guī)則并排的巨大染色體，昆蟲中的巨大染色體形態(tài)特征最為典型。特點(diǎn)：體積巨大，染色體多次復(fù)制而不分離。 多線性 ，每條多線染色體由500-4000條解旋的染色體合并在一起形成。 體細(xì)胞中同源染色體緊密配對。 橫帶紋，染色后呈現(xiàn)出明暗相間

28、的帶紋 。 脹泡和環(huán)，在幼蟲發(fā)育的某個階段，多線染色體的某些帶區(qū)疏松膨大，形成脹泡（puff）或巴氏環(huán)（Balbiani ring）。6.核仁組織區(qū)核仁組織區(qū)（nucleolar organizing region， NORs ） 核仁組織區(qū)位于染色體的次縊痕區(qū)，但并非所有的次縊痕都是NORs。 是rRNA基因所在的區(qū)域，其精細(xì)結(jié)構(gòu)呈燈刷狀，可伸出DNA環(huán)（核糖體DNA）。能夠合成核糖體的28S、18S和5.8S rRNA。核仁組織區(qū)：位于染色體的次縊痕部位，是rRNA基因所在部位，與間期細(xì)胞核仁形成有關(guān)。但并非所有的次縊痕都是NOR。7.核纖層 nuclear lamina緊貼內(nèi)核膜內(nèi)側(cè)厚度

29、10-20nm的由核纖層蛋白構(gòu)成的纖維網(wǎng)。在核內(nèi)與核骨架相連，在核外與中間纖維連接，形成貫穿細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)。核纖層 位于核膜內(nèi)側(cè)，由核纖層蛋白組成的纖維狀網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。核纖層：是位于細(xì)胞核內(nèi)膜與染色質(zhì)之間的纖維蛋白片層或纖維網(wǎng)絡(luò)，與核內(nèi)膜緊密結(jié)合。它普遍存在于高等真核細(xì)胞間期細(xì)胞核中。 核纖層功能：（1）維持核孔位置和核被膜的形態(tài)；（2）為間期染色質(zhì)提供附著位點(diǎn)；（3）有絲分裂中，與核被膜的解體和重建有關(guān)。第十二章 核糖體 polyribosome, polysome1.多聚核糖體核糖體常幾個或幾十個串聯(lián)在一條mRNA分子上高效地進(jìn)行肽鏈合成，形成多聚核糖體。核糖體的數(shù)目與mRNA的長度正

30、相關(guān)。多聚核糖體由多個甚至幾十個核糖體串聯(lián)在一條mRNA分子上進(jìn)行肽鏈合成的核糖體與mRNA的聚合體。第十三章 細(xì)胞周期與細(xì)胞分裂 概念：細(xì)胞周期、有絲分裂器、聯(lián)會復(fù)合體、G0期細(xì)胞、細(xì)胞同步化、1.細(xì)胞周期 cell cycle，cell division cycle 我們將從一次細(xì)胞分裂結(jié)束開始，經(jīng)過物質(zhì)準(zhǔn)備，知道下一次細(xì)胞分裂結(jié)束為止，稱為一個細(xì)胞周期。細(xì)胞周期 一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂完成之間的有序過程。細(xì)胞周期：連續(xù)分裂的細(xì)胞，從上一次有絲分裂結(jié)束開始到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個過程。在這個過程中，細(xì)胞遺傳物質(zhì)復(fù)制，各組分加倍，平均分配到兩個子細(xì)胞中。2.有絲分裂器有絲分裂器

31、：有絲分裂器是一種微管組織，其主要構(gòu)成成分為紡錘體、中心體和星體，這一結(jié)構(gòu)系統(tǒng)與姊妹染色單體精確定位到2個子細(xì)胞中有關(guān)。有絲分裂器：有絲分裂時，由微管及其結(jié)合蛋白所組成的紡錘體和中心復(fù)合體。3.聯(lián)會復(fù)合體 （synaptonemal complex,SC）同源染色體配對聯(lián)會，形成聯(lián)會復(fù)合體(synaptonemal complex，SC)由兩條同源染色體沿縱軸形成，包括邊側(cè)成分、中央?yún)^(qū)、中央成分和橫絲組成。SC形成于偶線期，成熟于粗線期，消失于雙線期。聯(lián)會復(fù)合體-同源染色體配對聯(lián)會形成的一種梯狀結(jié)構(gòu)，在電鏡下可見其由三個平行的部分組成 。 聯(lián)會復(fù)合體  synaptonemal co

32、mplex，SC減數(shù)分裂前期染色體配對時，同源染色體之間形成的一種復(fù)合結(jié)構(gòu)，既有利于同源染色體間的基因重組，也有利于同源染色體的分離。4.細(xì)胞同步化：在自然過程中發(fā)生的或因研究工作的需要，為得到具有分裂能力且細(xì)胞時相一致的細(xì)胞群體的方法。5.G0期細(xì)胞: 細(xì)胞被R點(diǎn)限制，暫時退出細(xì)胞周期而處于拘留狀態(tài)的細(xì)胞稱為G0期細(xì)胞。當(dāng)受到合適刺激后又能進(jìn)入細(xì)胞周期，分裂增殖。如肝細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞。也稱靜止期細(xì)胞，這類細(xì)胞會暫時脫離細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，G0期細(xì)胞只是暫時脫離細(xì)胞周期，一旦得到信號指使，會很快返回細(xì)胞周期增值分裂。靜止期細(xì)胞：又稱G0期細(xì)胞或靜止期細(xì)胞，是指暫時脫離細(xì)胞周期不進(jìn)

33、行增殖，但在適當(dāng)?shù)拇碳は拢芍匦逻M(jìn)入細(xì)胞周期的細(xì)胞。6.中心體 centrosome由一對相互垂直的柱狀中心粒及周圍無定形的電子致密的基質(zhì)組成，是微管組織中心。第十四章 細(xì)胞增殖調(diào)控及癌細(xì)胞概念：染色體超前凝集、細(xì)胞周期蛋白、檢驗點(diǎn)、原癌基因、抑癌基因、接觸抑制1.染色體超前凝集將處于分裂期的細(xì)胞（M期）與處于細(xì)胞周期其他時期（G1期、S期、G2期）的細(xì)胞融合, M期的細(xì)胞質(zhì)總是能夠誘導(dǎo)非有絲分裂的細(xì)胞中的染色質(zhì)凝集, 將這種現(xiàn)象稱為染色體超前凝集 ，凝聚的染色體稱為超前凝聚染色體。染色體的早期凝集：將細(xì)胞同步化在細(xì)胞周期的不同時期，通過細(xì)胞融合，將M期細(xì)胞與其他間期細(xì)胞融合后培養(yǎng)一段時間，與

34、M期細(xì)胞融合的間期細(xì)胞發(fā)生了形態(tài)各異的染色體凝集現(xiàn)象。2.細(xì)胞周期蛋白細(xì)胞周期蛋白(Cyclin)：在真核細(xì)胞分裂周期中濃度有規(guī)律地升高和降低的蛋白，可激活周期蛋白依賴激酶，啟動細(xì)胞周期的進(jìn)程。不同的周期蛋白在細(xì)胞周期中表達(dá)的時期不同，并與不同的CDK 結(jié)合，調(diào)節(jié)不同的CDK細(xì)胞周期蛋白：與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)的、其含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程變化而變化的特殊蛋白質(zhì)。最初在海膽卵中發(fā)現(xiàn)，一般在細(xì)胞間期內(nèi)積累，在細(xì)胞分裂期內(nèi)消失，在下一個細(xì)胞周期又重復(fù)這一消長現(xiàn)象，即在每一輪間期合成，G2/M時達(dá)到高峰，M期結(jié)束時被水解，下一輪周期又重新合成積累。已經(jīng)證明周期蛋白廣泛存在于各種真核生物中，是誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入M期必

35、需的，說明周期蛋白是細(xì)胞周期的調(diào)控者，可能參與了MPF功能的調(diào)節(jié)，是MPF的一部分。 3.檢驗點(diǎn) checkpoint細(xì)胞內(nèi)存在一系列監(jiān)控機(jī)制，這些特異的監(jiān)控機(jī)制可以鑒別細(xì)胞周期進(jìn)程中的錯誤，并誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的抑制因子，阻止細(xì)胞周期進(jìn)一步運(yùn)行，這些監(jiān)控機(jī)制稱為檢驗點(diǎn)。檢驗點(diǎn)細(xì)胞周期的調(diào)控點(diǎn)，檢驗細(xì)胞從一個周期時相進(jìn)入下一個時相的條件是否適合。細(xì)胞周期檢驗點(diǎn)：在細(xì)胞內(nèi)存在一系列的監(jiān)控機(jī)制，可以鑒別細(xì)胞周期進(jìn)程中的錯誤，并誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的抑制因子，阻止細(xì)胞周期的進(jìn)行，這些監(jiān)控機(jī)制稱為檢驗點(diǎn)。不僅存在于G1期，也存在于細(xì)胞周期的其他時期。4.原癌基因 proto oncogene 細(xì)胞基因組中控制細(xì)胞生

36、長和分裂的正常基因，與病毒癌基因同源性很高，該基因一旦發(fā)生突變，可使細(xì)胞轉(zhuǎn)化為異常增殖狀態(tài)，引起正常細(xì)胞癌變，故在突變前稱作原癌基因，突變后成為癌基因（oncogenes）。原癌基因 可促進(jìn)細(xì)胞增殖的正?；?，其功能獲得性突變形式為癌基因，具有促使細(xì)胞發(fā)生癌變的能力。5.抑癌基因 （suppressor gene） 是正常細(xì)胞增殖過程中的負(fù)調(diào)控因子，其產(chǎn)物可以抑制細(xì)胞的生長和分裂，當(dāng)基因發(fā)生變異或丟失，解除了對細(xì)胞增殖的抑制作用，導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而過度增殖抑癌基因：是正常細(xì)胞增殖過程中的負(fù)調(diào)控因子。抑癌基因編碼的蛋白抑制細(xì)胞增殖，使細(xì)胞停留于檢驗點(diǎn)上阻止周期進(jìn)程。6.接觸抑制接觸抑制：培養(yǎng)中的

37、正常細(xì)胞表現(xiàn)有單層生長的屬性，當(dāng)分散生長的分裂細(xì)胞達(dá)到相互融合接觸后，即停止分裂和生長。接觸抑制：正常細(xì)胞在體外培養(yǎng)時表現(xiàn)為貼壁生長和匯合成單層后停止生長的特點(diǎn)，即接觸抑制現(xiàn)象。MPF（細(xì)胞促分裂因子）：又稱促成熟因子或M期促進(jìn)因子，是指存在于成熟卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，可以誘導(dǎo)卵細(xì)胞成熟的一種活性物質(zhì)。已經(jīng)證明，MPF是一種蛋白激酶，包括兩個亞基即Cdc2蛋白和周期蛋白，當(dāng)二者結(jié)合后表現(xiàn)出蛋白激酶活性，可以使多種蛋白質(zhì)底物磷酸化；MPF是一種普遍存在的、進(jìn)化上較保守的G2/M轉(zhuǎn)換調(diào)控者。第十五章 細(xì)胞分化與胚胎發(fā)育第 十六章 細(xì)胞死亡與衰老概念：細(xì)胞分化、持家基因、奢侈基因、細(xì)胞全能性、誘導(dǎo)多能干

38、細(xì)胞、胚胎誘導(dǎo)、細(xì)胞凋亡 、黏著帶、細(xì)胞質(zhì)決定子、胚胎干細(xì)胞 、多能干細(xì)胞、Hayflick界限 。1.細(xì)胞分化 cell differentiation細(xì)胞分化細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上產(chǎn)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化（cell differentiation） 在個體發(fā)育中，由一種相同的細(xì)胞類型經(jīng)細(xì)胞分裂后，逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定差異，產(chǎn)生不同的細(xì)胞類群的過程。2.奢侈基因 （P415）組織特異性基因（奢侈基因）：指不同的細(xì)胞類型進(jìn)行特異性表達(dá)的基因，其產(chǎn)物賦予各種類型細(xì)胞特異的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與特異的功能。組織專一性基因（tissue-specific gene）(luxury gene奢侈基因)：在各種細(xì)胞中專一選擇表達(dá)的基因。細(xì)胞分化的本質(zhì)是細(xì)胞選擇性表達(dá)了奢侈基因3.持家基因 （house-keeping gene） 指在所有細(xì)胞中均表達(dá)的一類基因，其產(chǎn)物是維系生命活動所必須的。管家基因：所有細(xì)胞中均要表達(dá)的一類基因，其產(chǎn)物是對維持細(xì)胞基本生命活動所必需的。持家基因：維持細(xì)胞生存所必需的，在各種細(xì)胞中都處于活動狀態(tài)。4.細(xì)胞全能性 (totipotency)：單個細(xì)胞在一定條件下分化發(fā)育成為完整個體的能力