檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程

1、 檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)范目 錄第一節(jié) 全自動血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程 第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程 第十三節(jié) 交叉配血試驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié) 全自動血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備1.1開機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進(jìn)行檢查:1.1.1檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無

2、過期; 試劑管路是否彎折，連接是否可靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開機(jī)1.2.1 打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈亮，屏幕上顯示“Initializing”.1.2.2 分析儀進(jìn)行初始化，整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。1.2.3 初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自動進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。1.3 動物類型選擇1.3.1 按菜單鍵，移動光標(biāo)，選擇“動物”，按確認(rèn)進(jìn)入“動物”界面。1.3.2 操作者根據(jù)測量的動物類型，選擇需要分析的動物類型。2.1.1 按菜單鍵，選擇

3、“計(jì)數(shù)”，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為“全血”模式。2.1.2 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血”。2.1.3 將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.1.4 按計(jì)數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。2.1.5 采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.1.6 分析完成后，按F4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。2

4、.1.7 按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。2.1.8 按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。2.2 預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單鍵，選擇“計(jì)數(shù)”，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個干凈的樣本杯放在采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。2.2.2 加完稀釋液后，按確認(rèn)鍵，“加稀釋液”對話框關(guān)閉，分析儀自動清洗采樣針。2.2.3 采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預(yù)稀釋”。2.2.5

5、將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.2.6 按計(jì)數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。2.2.7 采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.2.8分析完成后，按F4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。2.2.9按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。2.2.10按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關(guān)機(jī)”。3.

6、2界面彈出“關(guān)機(jī)”對話框，點(diǎn)擊“確認(rèn)”進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。3.3 將E-Z清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將E-Z清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界面提示“請關(guān)閉電源”是，關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項(xiàng)精密儀器，為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，

7、再打開分析儀；儀器啟動，風(fēng)扇轉(zhuǎn)動，推進(jìn)器移動，屏幕顯示 “系統(tǒng)正在測試”，此時系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試2. 點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件；3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；5. 儀器檢測到試紙存在后，推進(jìn)器將試紙推到測試區(qū)進(jìn)行測試；6. 當(dāng)推進(jìn)器退回原位，放下一條試紙，這樣實(shí)現(xiàn)連續(xù)測試；7. 當(dāng)工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結(jié)果輸出結(jié)束后，按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置，將電源開關(guān)撥到 “ 斷（）”

8、位置，關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭儀器；3. 不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭工作臺；4. 不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn)，如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞，請與供應(yīng)商聯(lián)系；5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6. 用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；7. 為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測試結(jié)果，必須定期從儀器中取下推進(jìn)器、工作臺、步進(jìn)板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項(xiàng)1. 測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度；2.

9、請?jiān)跍y試前核對尿液分析試紙型號，避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯誤；3. 請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙；4. 尿樣本中血的濃度高時，可影響測試的準(zhǔn)確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出 “結(jié)果無效”的提示；5. 必須在推進(jìn)器動作前，將待測試紙條放好；6. 在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁；7. 如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。關(guān)掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機(jī)自檢后，對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開電源開關(guān)前的檢查。 檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸餾水

10、或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。 管道連接 檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié)，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處理的所有樣本結(jié)果。 補(bǔ)充反應(yīng)杯 丟棄用過的反應(yīng)杯，加入適量的干凈的反應(yīng)杯。 1.2打開電源 開機(jī)順序：打印機(jī) 壓力單元電源單元和主單元（右側(cè)）。 打開電源后，儀器自動進(jìn)入自檢。 將病人樣本，質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒，進(jìn)入分析過程： 試劑準(zhǔn)備 Set Reagent 輸入確認(rèn)試劑體積 補(bǔ)充反應(yīng)杯 安放樣本架 1.3樣本分析: Work List ID No.Entry 輸入樣本號 ENTER 選擇所需檢測的項(xiàng)目(變?yōu)?,確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)

11、束后 ENTER 按屏幕右上方“Start”鍵,執(zhí)行分析。 分析完畢,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。 1.4關(guān)機(jī)前的工作 每日清潔所有樣本針和試劑針： 在主菜單屏上按下【Rinse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。 1.5關(guān)機(jī) 關(guān)閉電源。 2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針，主要是預(yù)防堵針，執(zhí)行Rinse ProbeExcute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶Trap Chamber有無水，防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周

12、保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行Special Operate Rinse&Prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌(X軸、Y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不到位，向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1.開機(jī)之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好;連接打印機(jī)電源線，接通打印機(jī)電源開關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機(jī)背部電源開關(guān)。2.開機(jī)自檢后鍵入Enter，確定已設(shè)定測試參數(shù)鍵入Enter，進(jìn)入編制工作表在設(shè)置欄，開啟聯(lián)機(jī)打印儀器預(yù)熱20分鐘后，

13、調(diào)用已設(shè)定測試項(xiàng)目進(jìn)行樣品測定打印結(jié)果清洗儀器關(guān)機(jī)。3.吸液口由不銹鋼保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成，應(yīng)注意保護(hù)，不要碰彎。4.切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護(hù)】1.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿，每天工作結(jié)束后，要用蒸餾水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳動吸液開關(guān)，反復(fù)沖洗流動比色皿，直到蒸餾水的吸光度值正常為止。2.每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿，清洗時，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后注入蒸餾水。3.不使用儀器時，流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4.更換打印機(jī)色帶時，嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊，避免不規(guī)范操作

14、。5.光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。6.更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致，如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【 標(biāo) 本 】 抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）。 【 方 法 】 血液細(xì)胞自動分析儀測定法。 【 試 劑 】 血液細(xì)胞自動分析儀配套試劑。 【 操 作 】 詳見血液細(xì)胞自動分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積、血小板計(jì)數(shù)等項(xiàng)目。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 半自動及全自動血液細(xì)胞分析儀從

15、設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點(diǎn)為： （1）靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況，重復(fù)性好； （2）利于延長儀器的使用壽命； （3）解決了采血盤的交叉感染問題等。 3. 血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用EDTA·K2：為抗凝劑（EDTA·K2·2 H2O 1.52.2mg可抗凝1ml血）。 4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h；如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。 5. 測定前必須將EDTA·K2抗凝血充分混勻。 6. 血細(xì)胞分析儀測定最適溫度為1822，低于15或高于30，均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能

16、當(dāng)作一種過篩手段，當(dāng)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低；白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果（中間細(xì)胞群百分率8.0%）；紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【 標(biāo) 本 】 新鮮尿液。 【 方 法 】 化學(xué)試帶法。 【 試 劑 】 各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶。 【 操 作 】 詳見尿液化學(xué)分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行810項(xiàng)檢測（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞）。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 必須

17、了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。 3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差異，必要時用手工法復(fù)查。 4. 尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段，當(dāng)?shù)鞍住㈦[血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果（如尿蛋白“”或以上）時，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報(bào)告。第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素（TBIL）和結(jié)合膽紅素（DBIL）測定 改良JG法 【 試 劑 】 參照書刊文獻(xiàn)（如全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版）自配，配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn)，純膽紅素的氯仿溶液在25當(dāng)光徑1.000±0.001Cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在60700±160

18、0范圍內(nèi)，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380±866范圍內(nèi)，配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高。 【 操 作 】 按試劑盒說明書或相應(yīng)書刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作，比色測定，波長600nm.制作準(zhǔn)曲線。血樣測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報(bào)告。 也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動生化分析儀測定。 【 標(biāo) 本 】 血清，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測定，暫不能測定的標(biāo)本應(yīng)避光保存，室溫可穩(wěn)定8h，28

19、可保存48h。 含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。 膽紅素氧化酶（BOD）法 【 試 劑 】 市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后28可保存一周。 【 操 作 】 按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm。 【 標(biāo) 本 】 血清要求與改良J一G法相似。 二甲亞楓（DMSO）法 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm。 【 標(biāo) 本 】 血清、輕度脂血，溶血標(biāo)本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行較正。血氨測定 【 方 法 】 酶兩點(diǎn)法。 【 試 劑

20、 】 市售成套試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm。 【 標(biāo) 本 】 EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置24保存，在23h內(nèi)分析，-20可穩(wěn)定24h。溶血標(biāo)本忌用。第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。2.標(biāo)本要求：2.1病人準(zhǔn)備：空腹12小時。2.2標(biāo)本類型：血清、肝素化的血漿或24小時尿。3.設(shè)備和試劑：3.1儀

21、器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀3.2試劑材料：試劑3.3試劑的貯存：3.3.1 28密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。3.3.2開蓋上機(jī)28避光穩(wěn)定30天。3.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時，不能繼續(xù)使用。3.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5試劑準(zhǔn)備：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。4.操作步驟：見生化分析儀操作流程。5.質(zhì)量控制：5.1質(zhì)控物：RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施：

22、5.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。5.2.2室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6.干擾因素：總膽紅素40mg/dL，血紅蛋白450mg/dL，抗壞血酸400mg/dL對本法無干擾。7.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：7.1參考范圍：血清/血漿 2.868.20mmol/L24小時尿 1535g/24h7.2可報(bào)范圍：0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健

23、康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標(biāo)本要求：3.1病人準(zhǔn)備：空腹12小時。3.2標(biāo)本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。4.設(shè)備和試劑：4.1儀器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀4.2試劑材料：試劑4.3試劑的貯存：4.3.1 28密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2開蓋上機(jī)28避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排

24、水管。4.5試劑準(zhǔn)備：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。5.操作步驟：見半自動生化分析儀操作流程。6.質(zhì)量控制：6.1質(zhì)控物：RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施：6.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。6.2.2室間質(zhì)控：參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。7.干擾因素：直接膽紅素257mol/L，血紅蛋白0.5g/L，抗壞血酸3mmol/L,甘油三酯15.0mmol/L,肝素50KU/L，枸櫞酸鈉10g/L對本法無干擾。8.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0123.0mol/L (男性)44.0106.0mol/L (女性)首次晨尿 153015320mol/L24小時尿 6.615.0

25、mmol/24h8.2可報(bào)范圍：0.08840.0mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9.危急值及處理方法：>177mol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。10.實(shí)驗(yàn)室解釋：增高：嚴(yán)重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理 1受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。 2

26、空腹抽血，TG，脂蛋白，載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時（僅作膽固醇測定不必強(qiáng)求空腹）24小時內(nèi)不作劇烈運(yùn)動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。 3標(biāo)本用血清，也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。 4血標(biāo)本室溫放置不得超過3h，放置3045分鐘后應(yīng)即時分離出血清（漿）蓋封於4冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應(yīng)於-70中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（TC）測定 酶法（CHODPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序，輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定（速率法）終點(diǎn)

27、法可手工操作，用普通分光光度計(jì)比色測定。波長500nm或520nm。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理。 【 附 注 】 本法為中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)學(xué)會推薦的TC測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1995、18：185）。 膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。Chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。 主要技術(shù)指標(biāo)：終點(diǎn)法批內(nèi)CV1.5%、批間CV2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時，TC5.2mmo1/L(200mg/dl)時的吸光度（A 500nm）約0.300.35，故A 500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測定范圍：當(dāng)血

28、清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L(500ng/dL)。血清甘油三酯（TG）測定 酶法（GPOPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。有兩種。 一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。 標(biāo)準(zhǔn)液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù)，用自動或半自動生化分析儀測定，終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作，比色測定。波長500nm。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理。 【 附 注 】 本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會的推薦方法（中華醫(yī)學(xué)檢

29、驗(yàn)雜志1995、18：249）。現(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實(shí)驗(yàn)室報(bào)告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。 主要枝術(shù)指標(biāo)：酶試劑用緩沖液配制后，2025應(yīng)穩(wěn)定1天，4可穩(wěn)定37天，試劑空白為A500nm0.05；顯色后穩(wěn)定30min：測定上界11.3mmo1/L(100mg/dL)；精密度：批內(nèi)CV3%，批間CV5%：靈敏度：2mmo1/L TG A 500nm0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測定 磷鎢酸鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測定）。 【 操 作 】 按試劑盒說明書操作。 1沉淀含apo

30、B的脂蛋白。 2測定上清液（只含HDL）的膽固醇含量（方法同酶法TC測定）。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）。 硫酸葡聚糖一鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3試劑，酶試劑（同TC試劑）。 【 操 作 】 按試劑說明書操作： 1沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試劑）； 2沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3試劑）； 3測定總HDLC及HDL3C（同酶法TC測定），并計(jì)算出HDL2C量。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時測定，原則應(yīng)低溫保存。 直接HDLC測定法 【 試 劑 】 市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同TC測定。（如日本第一化學(xué)藥品株

31、式會社的產(chǎn)品）。 【 操 作 】 按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序，輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出HDL步驟。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定 1Friedwald工式計(jì)算法： （1）LDL-C=TCHDL-CTG/5（以mg/dl為單位計(jì)）； （2）LDL-C=TCHDL-CTG/2.2 (以mmo1/L為單位計(jì))； （3）只有當(dāng)血TG4.52mmo/L結(jié)果才較準(zhǔn)確； （4）只有TC、TG、HDL-C三項(xiàng)測定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時，才可計(jì)算出LDL-C的近似值。 2聚乙烯硫酸沉淀法 【 試 劑 】 沉淀劑市售，酶試劑同

32、TC測定。 【 操 作 】 1TC測定。 2選擇性沉淀血清中LDL，測定上清液之HDLC與VLDLC之和的量，（同TC測定）。 3計(jì)算出LDLC的含量。 【 標(biāo) 本 】血清。血清載脂蛋白A1（apoA1）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑盒，試劑28保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於16。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計(jì)手工操作測定。 【 標(biāo) 本 】 血清。血清載脂蛋白B（apoB）測定 免疫透射比濁法。波長34

33、0nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑，28保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於1：128。 【 操 作 】 參看apoA1測定。 【 標(biāo) 本 】 血清。 第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標(biāo)本要求：3.1病人準(zhǔn)備：空腹12小時。3.2標(biāo)本類型：血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細(xì)胞利用而降低。4.設(shè)備和試劑：4.1儀器設(shè)備：奧林巴斯AU600生化分析儀4.2試劑材料：四川邁克公司試劑參

34、與反應(yīng)成份：R1：酚（12.0mmol/L）R2：GOD（35KU/L）、POD（5KU/L）、4-AAP（1.20mmol/L）4.3試劑的貯存：4.3.1 28密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2開蓋上機(jī)28避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。5 質(zhì)量控制：5.1質(zhì)控

35、物：RANDOX多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施：5.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。5.2.2室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：6.1參考范圍：空腹3.896.11mmol/L餐后1小時7.788.89mmol/L餐后2小時3.897.78mmol/L6.2可報(bào)范圍：0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7.危急值及處理方法：<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程全血凝固時間檢驗(yàn)（CT） 【 標(biāo) 本 】 靜脈取血3ml。 【 方法與操

36、作 】 試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果?；罨糠帜蠲笗r間測定（APTT） 【 標(biāo) 本 】 自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 方法與操作】 按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進(jìn)行。 【 附 注 】 1. 標(biāo)本應(yīng)及時檢測，最遲不超過2h。 2. 分離血漿應(yīng)在3000r/min，離心10min。 3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子：C25輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT，一期法） 【 標(biāo)

37、 本 】 靜脈血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. 0.025mol/L CaCl2液； 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱4保存,不應(yīng)超過4h，-20下可放置2周，-70可放置6個月。 2. 水溫箱控制在37±1，過高過低均影響結(jié)果。簡易凝血活酶生成試驗(yàn)（STGT） 【 標(biāo) 本 】 取全血0.04ml加5ml蒸餾水，混勻，即成溶血液，備用。 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）第十二節(jié) AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程1

38、.檢測目的用于檢測患者血型，實(shí)施輸血治療和組織器官移植等。2.檢測原理（正定型法）根據(jù)IgM類特異性血型抗體與紅細(xì)胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知IgM類特異性標(biāo)準(zhǔn)抗血清與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下反應(yīng)，若被檢紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，表明被檢紅細(xì)胞上有與血型抗體對應(yīng)的抗原。3.標(biāo)本要求新鮮全血。4.試劑標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清。5.操作步驟（玻片法）5.1 標(biāo)記：取一載玻片，用蠟筆畫上直徑2cm左右的兩個圓圈，分別標(biāo)記抗A、抗B。5.2 抗血清：在玻片蠟筆圈內(nèi)按標(biāo)記所示分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各一滴。5.3 紅細(xì)胞：在抗A、抗B圈內(nèi)加被檢者全血各一滴。用玻棒將紅細(xì)胞與抗體充分混勻，室溫下

39、放置1830min（為防止天氣干燥造成玻片干涸，可把試驗(yàn)玻片放在有濕紗布的蓋盤中）。5.4 血型判讀：搖動玻片，肉眼觀察玻片蠟筆圈內(nèi)有無顆粒狀凝集及凝集程度，判定陰性、陽性和陽性程度。陰性指視野中紅細(xì)胞程均勻散布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在，無聚集靠攏現(xiàn)象。陽性時紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集。 6.質(zhì)量控制6.1 分型血清質(zhì)量性能符合要求，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。6.2 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。6.3 按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以6為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，36可反應(yīng)減弱。6.4 觀察時應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性

40、凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。7.干擾因素7.1 分型血清效價太低、親和力不強(qiáng)；7.2 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過少或抗原性減弱；7.3 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗-A/抗-B抗體；7.4 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集。部分溶血時，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體；7.5 由細(xì)菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因；7.6 血清中有意外抗體，如自身抗-I，常引起干擾；7.7 老年人血清中抗體水平大幅度下降；7.8 更換新批號抗血清或?qū)υ噭┙Y(jié)果有懷疑時，可設(shè)定陽性、陰性和自身對照；7.9 為避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用；7.10 嬰幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體

41、弱者抗原性較弱；7.11 有些疾病可能使紅細(xì)胞定性出現(xiàn)困難，如：嚴(yán)重的腸道細(xì)菌感染；嚴(yán)重的細(xì)菌感染；血清中存在病理性冷凝集素與紅細(xì)胞上抗原結(jié)合；部分高球蛋白和異常高球蛋白血癥患者；7.12 輸入異型血或做過與受者血型不同的異體骨髓器官移植的病人在血型堅(jiān)定時可能出現(xiàn)混合外觀。第十三節(jié) 交叉配血操作規(guī)程交叉配血試驗(yàn) （凝聚胺法）原理凝聚胺試驗(yàn)是利用低離子溶液促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清（漿）中的抗體反應(yīng)，再利用凝聚胺引起紅細(xì)胞間非免疫性的凝集，讓已有抗體（IgG）反應(yīng)的紅細(xì)胞間的距離縮短。距離縮短后更能引起已反應(yīng)的抗體和別的紅細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細(xì)胞凝集反應(yīng)可被后來加

42、入的復(fù)懸液所中和而散開，如有免疫反應(yīng)，凝集就不會散開，為陽性反應(yīng)。如沒有免疫反應(yīng)，凝集就會散開，為陰性反應(yīng)。交叉配血試驗(yàn)是在鹽水介質(zhì)的基礎(chǔ)上加入凝聚胺，檢測供患之間是否相合，患者血清（漿）中是否含有具臨床意義的紅細(xì)胞異體抗體。試劑組成1 潔凈試管，離心機(jī)，顯微鏡。2 0.85% 氯化鈉溶液：準(zhǔn)確稱取氯化鈉（AR）8.5 g，用蒸餾水溶解并定容至 1000 ml。  試劑啟用后，有效期為：二周。3 聚胺試劑（1）質(zhì)溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2鈉及穩(wěn)定劑。（2） 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化鈉及穩(wěn)定劑。（3）復(fù)懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩(wěn)定劑。（4）陽性對照血清：含抗D血清，

43、氯化鈉及穩(wěn)定劑。4  抗人IgG 血清。試劑保存和穩(wěn)定性1凝聚胺試劑須保存在2-25。2有效期內(nèi)可使用。3抗人IgG血清低溫冰箱保存。復(fù)溶后放24冰箱保存。標(biāo)本收集和準(zhǔn)備1抽取受血者靜脈血3-4ml（操作中小心防止紅細(xì)胞破損），放入一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細(xì)胞生理鹽水懸液，放入另一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為紅細(xì)胞懸液管。以上標(biāo)本有效期為三天；若受血者抽取標(biāo)本后，輸用過血液或血液制品，且輸用時間超過12 小時的，必須重新采集標(biāo)本。22% 紅細(xì)胞懸液：用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次。根據(jù)下表進(jìn)行紅細(xì)胞懸液的配制。懸

44、液濃度（%）          壓積紅細(xì)胞（滴）          鹽水（滴）-      2                        1               

45、60;     2ml(40)      5                        1                     0.8ml(16)-操作步驟1 取出3支試管分別標(biāo)記主，次及對照測試：主測管：加入病人血清（漿）2滴，再加入供血者3-5%紅細(xì)胞懸液1滴，次測管：加入供血者血清（漿）2滴，再加入病人3-5%紅細(xì)胞懸液1滴，對照管：加入2滴*4陽性對照血清，再加入供血者3-5%紅細(xì)胞懸液1滴。2各加入*1低離子介質(zhì)溶液0.6ml，輕輕混勻，于室溫下靜置1分鐘。3 再滴入2滴*2凝聚胺溶液，輕輕混勻，于室溫下靜置15秒。4 3400rpm離心1分鐘，然后把上清液倒掉，管底保留大約0.1ml的液體。5 目測紅細(xì)胞有無變成凝塊，如果沒有凝塊，則必須重做，（請看注意事項(xiàng)6）。重做后仍然沒有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能