總砷含量測定的方法驗證作業(yè)指導(dǎo)書

1、作業(yè)指導(dǎo)書文件編號： YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修訂總種含量測定的方法驗證頁 數(shù)：共5頁第1頁頒布日期：2017-1-6編寫許振國審核工藝霖批準(zhǔn)鐘煉一、方法驗證依據(jù)參照GB 5009.112014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總種及無機種的測定，制定總種含 量測定方法驗證的作業(yè)指導(dǎo)書。二、方法驗證條件2.1 儀器及配套設(shè)備1.1 PF6-3原子熒光光度計，配種（As）空心陰極燈。1.2 電子天平：感量為 0.1mg1.3 馬弗爐1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液：種（As）標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度1.0mg/mL=2.2 試劑及配制硝酸：優(yōu)級純硼氫化鉀：分析純氫氧化鉀：分析純鹽酸：優(yōu)級純硫酸：優(yōu)級純硝

2、酸鎂：分析純氧化鎂：分析純抗壞血酸硫月尿+抗壞血酸溶液：稱取10.0g硫月尿，加約80ml水，加熱溶解，待冷卻后加入 10.0g 抗壞血酸，稀釋至100mL現(xiàn)用現(xiàn)配。硝酸鎂溶液（150g/L）:稱取15.0g硝酸鎂，溶于水并稀釋至100mL鹽酸溶液（1+1）：量取100ml鹽酸，緩緩倒入100ml水中，混勻。硫酸溶液（1+9）:量取100ml硫酸，緩緩倒入900ml水中，混勻。硝酸溶液（5+95）:量取5ml,緩緩倒入95ml水中，混勻。硼氨化鉀溶液（15g/L）:稱取15.0g硼氫化鉀，溶于5.0g/L的氫氧化鉀溶液中，并稀釋 至1000ml,混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YZJC/Z

3、CJS-05-001版本修改：第I版第0次修訂總種含量測定的方法驗證頁 數(shù)：共5頁第2頁頒布日期：2017-1-62.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制準(zhǔn)確吸取1.00mL種標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL)于100mL容量瓶中，用硝酸溶液(2+98)稀釋 定容至刻度，即為10mg/L標(biāo)準(zhǔn)使用液；按照稀釋辦法，依次獲得 100(ig/L、10g/L的標(biāo)準(zhǔn) 使用液。2.環(huán)境條件(1)環(huán)境溫度：(10-35 ) C。(2)相對濕度： 85%(3)電源：電壓為(220± 22) V,頻率(50± 1) Hz,并具有良好的接地。(4)儀器應(yīng)置于水平無振動的工作臺上，操作時不得有搖動現(xiàn)象。(5)場所應(yīng)通風(fēng)良

4、好，不得有強光直射，儀器周圍無強磁場，電場或振動源干擾，無強氣流干擾。三、方法驗證項目檢測要求，方法驗證內(nèi)容為：1.基線穩(wěn)定性；2,測量重復(fù)性；3.加標(biāo)回收率四、分析步驟4.1 試樣的預(yù)處理4.1.1 在采樣和制備過程中，應(yīng)注意不使試樣污染。4.1.2 糧食、豆類等樣品去雜物后粉碎均勻，裝入潔凈聚乙烯瓶中，密封保存?zhèn)溆谩?.1.3 蔬菜、水果、魚類、肉類及蛋類等新鮮樣品，洗凈晾干，取可食用部分勻漿，裝入潔凈聚乙烯瓶中，密封，于 4c冰箱冷藏備用4.2 試樣的消解4.2.1 干法灰化稱取樣品1.0g左右，置于50ml培竭中，同時做兩份空白。加150g/L硝酸鎂10mL混勻，低熱蒸干，將1g氧化鎂

5、覆蓋在干渣上，于電爐上炭化至無黑煙，移入550c馬弗爐灰化4h,作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修訂總種含量測定的方法驗證頁 數(shù)：共5頁第3頁頒布日期：2017-1-6取出放冷，小心加入鹽酸溶液（1+1） 10ml,以中和氧化鎂并溶解灰分，轉(zhuǎn)入 25ml容量瓶或比 色管中加入硫月尿+抗壞血酸溶液2ml,另用硫酸溶液（1+9）分次洗滌地竭合并洗滌液至 25ml, 刻度，混勻，放置30min,待測。同時做空白試驗。4.3 儀器條件負(fù)高壓：280v;神空心陰極燈電流：50mA載氣流速：300mL/min；屏蔽氣流速：300mL/min；測量方式：熒光強度；讀數(shù)

6、方式：峰面積。4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作使用原子熒光光度計自動配置標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)系列使用液濃度，配置成濃度1.0囚/L、2.0 ©L、4.0皿L、8.0閨/L、10.0 aL ;測定好儀器的最佳條件，連續(xù)用2%勺硝酸溶液進(jìn)樣，待讀數(shù)穩(wěn)定以后，轉(zhuǎn)入標(biāo)準(zhǔn)系列測量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4.5 試樣溶液的測定相同條件下，將樣品溶液分別引入儀器進(jìn)行測定。根據(jù)回歸方程計算出樣品中種元素的濃度。計算方法參照公式（1）4.6 加標(biāo)回收率在試樣中根據(jù)試樣種含量的1-2倍加入神標(biāo)樣，進(jìn)行試樣處理，處理后的試樣溶液按照上述最佳條件進(jìn)行測量，測量結(jié)果計算加標(biāo)樣的回收率，計算方法參照公式（2）04.7 方法檢出限將儀器

7、各參數(shù)調(diào)整至正常狀態(tài)，分別對種標(biāo)準(zhǔn)溶液的每一個濃度點分別進(jìn)行三次重復(fù)測定，取平均值后，按線性回歸法求出工作曲線斜率（b）,即為儀器的靈敏度。在相同的條件下，對空白溶液（或濃度三倍于檢出限的溶液）進(jìn)行11次吸光度測量，并 求出其標(biāo)準(zhǔn)偏差（sA）。式中：？?- 單次測量值卷-測量平均值作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修訂總種含量測定的方法驗證頁 數(shù)：共5頁第4頁頒布日期：2017-1-6n測量次數(shù)按下式計算儀器測種的方法檢出限Q:QL（K=3） = 3S/S（ p g/ml）五、結(jié)果分析1 .試樣中總種含量按下式計算:公式（1）(C-?0) XVX 1000

8、?= 0mx 1000 x 1000式中:X -試樣中種的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）;C -試樣被測液中種的測定濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）C0 一試樣空白消化液中的神的測定濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）V -試樣消化液總體積，單位為毫升（mD ；M -試樣質(zhì)量，單位為克（g）或毫升（mD； 計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。2 .加標(biāo)回收率按下式計算：”? X 0.025-? 1 X ? / ,? = 1 X100% 公式（2）1 ?0式中：Xi -加標(biāo)樣品的回收率，單位為（%。C -加標(biāo)樣品被測液中種的 測定濃度，單位為納克每毫升（ng/mL.）X -試樣中種的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）;m -加標(biāo)試驗的稱樣質(zhì)量，單位為克（g）m -加標(biāo)量，單位為（n g）六、方法驗證結(jié)果的判定1.1 基線穩(wěn)定性基線的相關(guān)系數(shù)0.991.2 測定總種的重復(fù)性（RSD）測量重復(fù)性0 3%作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修訂總種含量測定的方法驗證頁 數(shù)：共5頁第5頁頒布日期：2017-1-66.3 加標(biāo)回收