抗生素類藥物分析學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1抗生素類藥物分析抗生素類藥物分析(fnx)第一頁，共27頁。 化學(xué)純度較低活性組分易發(fā)生(fshng)變異穩(wěn)定性差 3. 來 源4. 抗生素的特點(diǎn)(tdin)化學(xué)合成半合成生物合成（發(fā)酵）生產(chǎn)工藝復(fù)雜發(fā)酵(f jio)過程不易控制，易受污染原因第1頁/共26頁第二頁，共27頁。鑒別：物理化學(xué)方法、微生物法檢查(jinch)：水分、異常毒性、熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素、降壓物質(zhì)等含量/效價測定： 微生物法 ： 與臨床療效吻合，靈敏度高，但操作復(fù)雜費(fèi)時； 理化方法： 準(zhǔn)確度與專屬性較高，且操作簡便，但與臨床療效有偏差5. 抗生素質(zhì)量(zhling)分析第2頁/共26頁第三頁，共27頁。 1. 化學(xué)(

2、huxu)結(jié)構(gòu)包括(boku)青霉素類和頭孢菌素類青霉素類：6-APA為母核 頭孢菌素(tu bo jn s)類：7-ACA為母核中 國 藥 科 大 學(xué) 藥 學(xué) 院 藥 分 教 研 室第3頁/共26頁第四頁，共27頁。酸性較強(qiáng)（pKa 2.5-2.8）臨床(ln chun)常用其堿金屬鹽（水溶性好）酸性(sun xn)(羧基)有多個(du )手性碳旋光性青霉素類：苯環(huán)取代基頭孢菌素類：母核有共軛結(jié)構(gòu)UV（共軛）干燥條件較穩(wěn)定，溶液不穩(wěn)定穩(wěn)定性(內(nèi)酰胺)2、主要理化性質(zhì)降解失效氧化劑、酸、堿酶、金屬離子、青霉素第4頁/共26頁第五頁，共27頁。NH2OHHClNaOHFe3+H+茚三酮 堿性(j

3、in xn)酒石酸銅呈色反應(yīng)3、鑒 別第5頁/共26頁第六頁，共27頁。4、檢 查聚合物有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體吸光度殘留(cnli)溶劑結(jié)晶性第6頁/共26頁第七頁，共27頁。 5、含量(hnling)測定 -碘量法（ChP2000）原理：青霉素與頭孢菌素本身不與碘反應(yīng)，但其堿性降解產(chǎn)物(chnw)可消耗碘青霉素族頭孢菌素(tu bo jn s)族NaOH水解4I2H +8I-I2+2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6定量過量剩 余第7頁/共26頁第八頁，共27頁。5、含量(hnling)測定 -碘量法（ChP2000）反應(yīng)(fnyng)分兩步進(jìn)行：水解反應(yīng) (按化學(xué)(huxu)計(jì)算量進(jìn)行

4、)氧化-還原反應(yīng) (無定量關(guān)系，受溫度、pH值和時間等因素影響， 應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定)第8頁/共26頁第九頁，共27頁。5、含量(hnling)測定 -碘量法（ChP2000）因樣品中雜質(zhì)(zzh)會消耗碘，故應(yīng)作空白試驗(yàn)。 加入(jir)樣品，不加堿； 其余試劑（醋酸鹽緩沖液，碘液，硫代硫酸鈉）都要加堿。空白試驗(yàn):空白試驗(yàn)與經(jīng)典空白試驗(yàn)不同：第9頁/共26頁第十頁，共27頁。5、含量(hnling)測定 -碘量法（ChP2000）含量(hnling) 對照品V樣空 - V樣 W對 V對空 - V對 W樣靈敏度高：樣品(yngpn) : 碘 = 1 : 8反應(yīng)條件、實(shí)驗(yàn)

5、操作要求高1份含量V對、V對空V樣、V樣空加試劑次序、反應(yīng)時間、滴定速度相同 特 點(diǎn)：第10頁/共26頁第十一頁，共27頁。5、含量(hnling)測定 -電位(din wi)配位滴定法（汞量法）原理：青霉素不與汞鹽反應(yīng)，其堿性降解(jin ji)產(chǎn)物可與Hg2+絡(luò)和。Hg2+OOHHRHHCNCCCSCONHCHCCOOHCH3CH3ROHHHCSCONHCCOOHCH3CH3HNCHg2+OHHCHCONHHOOCROCSCH3CH3CNHHg2+O方法說明： a、空白試驗(yàn)與碘量法類似，加樣品，不加NaOH b、與碘量法相比，汞量法不需對照試驗(yàn)第11頁/共26頁第十二頁，共27頁。5、含量

6、(hnling)測定 -其他(qt)常用方法酸堿滴定法：應(yīng)用(yngyng)廣泛 硫醇汞鹽法HPLC法：應(yīng)用廣泛咪唑HgCl2（max 324345nm）青霉素 青霉烯酸硫醇汞鹽第12頁/共26頁第十三頁，共27頁。 1. 化學(xué)(huxu)結(jié)構(gòu)都是以氨基(nj)環(huán)醇與氨基(nj)糖縮合而成的苷；分子結(jié)構(gòu)中都含有多羥基；均為堿性抗生素；鏈霉素第13頁/共26頁第十四頁，共27頁。臨床(ln chun)應(yīng)用其硫酸鹽堿性(jin xn)(氨基)（糖）：有多個(du )手性碳旋光性(糖)水 溶 性溶解度(氨基、羥基)強(qiáng)酸、堿條件均可水解穩(wěn)定性(苷)2、主要理化性質(zhì)第14頁/共26頁第十五頁，共27頁。

7、3、鑒 別茚三酮反應(yīng)：具羥基(qingj)胺類，-氨基酸性質(zhì)鏈霉素 + 水和茚三酮 藍(lán)紫色鏈霉素 N-甲基葡萄糖胺 N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反應(yīng)(fnyng)：紅 色水解對二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮OH-NCHONCH3CH3+CH3CH3NCNHCH3CH3HNNCH+H+第15頁/共26頁第十六頁，共27頁。OH-重排Fe3+Fe/3OOCH3OOOCH3OH8-羥基(qingj)喹啉 NaOBrOH-水解坂口（Sakaguchi）反應(yīng)(fnyng)：(鏈霉胍特有）鏈霉素 鏈霉胍 橙紅硫酸鹽反應(yīng)或-萘酚第16頁/共26頁第十七頁，共27頁。4、檢 查- 來 源：發(fā)酵(f j

8、io)中產(chǎn)生BP:薄層(bo cn)色譜法（雜質(zhì)對照品法）要求：NC2 2000，C2a峰和C2峰的分離(fnl)度應(yīng)符合要求，重復(fù)進(jìn)樣RSD2.0%鏈霉素中鏈霉素B的檢查慶大霉素C 組分測定（系統(tǒng)適用性試驗(yàn)）色譜柱：ODS流動相： H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸鈉溶液(0.2M)，必要時調(diào)節(jié)甲醇的含量。檢測波長： 330nm（鄰苯二甲醛柱前衍生）第17頁/共26頁第十八頁，共27頁。4、含 量 檢 測氨基(nj)糖苷類 含量檢測微生物法、HPLC法等第18頁/共26頁第十九頁，共27頁。 1. 化學(xué)(huxu)結(jié)構(gòu)第19頁/共26頁第二十頁，共27頁。-OH：酸性N(CH3)2：堿性

9、(jin xn)與酸、堿均可成鹽臨床多用鹽酸鹽兩 性旋光性易發(fā)生異構(gòu)化，降解等反應(yīng)(fnyng)，性質(zhì)不穩(wěn)定穩(wěn)定性酚羥基(qingj)、烯醇基與Ca2+、Mg2+絡(luò)合顯色與金屬離子絡(luò)合2、主要理化性質(zhì)UV和熒光第20頁/共26頁第二十一頁，共27頁。 2. 主要理化(lhu)性質(zhì)堿 性 C環(huán)開環(huán)，形成(xngchng)內(nèi)酯 異四環(huán)素弱酸性（pH2-6） A環(huán)C-4異構(gòu)化 差向四環(huán)素酸性(sun xn)（pH 2） C環(huán)脫水 脫水四環(huán)素第21頁/共26頁第二十二頁，共27頁。OOHCONH2(CH3)2NOHHOOHCONH2N(CH3)2HOHAApH2.06.0差向異構(gòu)體ROHCH3OHOO

10、HHRCH3OHOOHRCH3OHOHOH2ODDDCBBCBC脫水四環(huán)素類第22頁/共26頁第二十三頁，共27頁。ROHCH3OHROOHOOHCONH2NHOHCH3CH3CH3CH3ROHROOOHCONH2NHOHOCH3O異四環(huán)素OH-第23頁/共26頁第二十四頁，共27頁。 3. 鑒 別1）濃硫酸反應(yīng)2）FeCl3反應(yīng)： （酚羥基(qingj)） 顯紅色褐色3） TLC、HPLC4）熒光：（含共軛雙鍵）紫外燈照射下產(chǎn)生不同顏色熒光HPLC法 4. 檢 查TLC、HPLC法雜質(zhì)(zzh)吸收度（降解產(chǎn)物顏色較深）殘留溶劑 5. 含 量第24頁/共26頁第二十五頁，共27頁。內(nèi)源性：藥物自身(zshn)聚合物 來源于生產(chǎn)過程、貯存過程、使用不當(dāng)外源性：蛋白、多肽、多糖及其與藥物的結(jié)合物 來源于發(fā)酵過程臨床應(yīng)用其硫酸鹽高分子雜質(zhì)(zzh)凝膠色譜法：葡聚糖凝膠 Sephadex G-10雜質(zhì)控制方法第25頁/共26頁第二十六頁，共27頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會計(jì)學(xué)。與臨床療效吻合，靈敏度高，但操作復(fù)雜費(fèi)時。包括青霉素類和頭孢菌素類。干燥條件較穩(wěn)定，溶液不穩(wěn)定。