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1、植物組織培養(yǎng)教學(xué)實習(xí)項目總結(jié) 植物組織培養(yǎng)教學(xué)實習(xí)項目總結(jié) 植物組織培養(yǎng)教學(xué)實習(xí)項目總結(jié) 作物生產(chǎn)技術(shù)101班姓名:馬一良 一:目的意義 植物的組織培養(yǎng)是依據(jù)植物細胞具有全能性這個理論,近幾十年來發(fā)展起來的一項無性繁殖的新技術(shù)。植物的組織培養(yǎng)廣義又叫離體培養(yǎng),指從植物體分開出符合需要的組織.器官或細胞,原生質(zhì)體等,通過無菌操作,在人工控制條件下進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。狹義是指組培指用植物各部分組織,如形成層.薄壁組織.葉肉組織.胚乳等進行培養(yǎng)獲得再生植株,也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng),愈傷組織再經(jīng)過再分化形成再生植物。 運用植物組織培養(yǎng)技

2、術(shù)的意義:1、快速繁殖合格種苗。2、無病毒苗的培養(yǎng)。3、在育種上的應(yīng)用4、工廠化育苗。5:保存種質(zhì)資源。6:基因工程的運用二:工作內(nèi)容 1:學(xué)習(xí)組培相關(guān)知識2:了解相關(guān)的實驗室及其設(shè)備3:試管苗快速繁衍技術(shù)4:植物脫毒技術(shù) 5:植物組織培養(yǎng)技術(shù)的一般培養(yǎng)方法6:種質(zhì)立體培養(yǎng)7:ms培養(yǎng)基的制備8:滅菌技術(shù)9:無菌操作技術(shù)10:試管苗的煉苗與移栽培養(yǎng)步驟 第一步,將采來的植物材料除去不用的部分,將需要的部分仔細洗干凈,如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾?。把材料切割成適當(dāng)大小,即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時,沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料,可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗

3、在污染嚴(yán)重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗,然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物,除去脂質(zhì)性的物質(zhì),便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然,最理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)吐溫。第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內(nèi)完成,準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸1030秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用,加之70%酒精穿透力強,也很易殺傷植物細胞,所以浸潤時間不能過長。有一些特別的材料,如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗,多層鱗片的休眠芽等等,以及主要取用內(nèi)部的材料,則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件

4、下,待酒精蒸發(fā)后再剝除外層,取用內(nèi)部材料。 第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多,可依據(jù)狀況選取12種使用見表。第四步是用無菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,視采納的消毒液種類,涮洗3-l0次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意:酒精滲透性強,幼嫩材料易在酒精中失綠,所以浸泡時間要短,防止酒精殺死植物細胞。老熟材料,特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些,如種子可以浸泡5分鐘。升汞的滲透力弱,一般浸泡10分鐘左右,對植物材料的殺傷力不大。漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠,所以關(guān)于幼嫩材料要慎用。在消毒液中加入濃度為0.080.12%的吐溫20或80一種濕潤劑,可以降低植物材

5、料表面張力,達到更好的消毒效 配制培養(yǎng)基 1愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基:ms培養(yǎng)基蔗糖含量為10g/l,2,4d含量為2mg/l,瓊脂10g/l。 2試驗培養(yǎng)基:在ms培養(yǎng)基中加入iaa和6ba。 吲哚乙酸iaa)先用少量0.1mol/lnaoh溶解,6-芐基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/lhcl溶解,然后用蒸餾水稀釋,再加入培養(yǎng)基中。儀器設(shè)備 培養(yǎng)室,高壓滅菌鍋,水浴鍋,解剖刀,三角燒瓶100ml,燒杯,量筒,組培瓶,組培蓋或封口膜,棉線,接種箱或超凈工作臺,分析天平,長鑷子,剪刀,容量瓶,移液管,牛皮紙培養(yǎng)基滅菌 將配好的培養(yǎng)基加入瓊脂加熱溶解,調(diào)至ph5.8,趁熱分裝于100ml組培瓶中,每瓶

6、約20ml。待培養(yǎng)基冷卻凝固后,蓋上組培蓋,或蓋上封口膜并用棉線扎牢,然后在高壓滅菌鍋中1211kg/cm2下滅菌20min。取出組培瓶放在臺子上,冷卻后備用。接種操作所需的一切用具如長鑷子、解剖刀、剪刀等及滅菌水,需同時滅菌。三:體會 植物組織培養(yǎng)的特點:1、占用空間小,不受地區(qū)、季節(jié)限制。2、培養(yǎng)脫毒作物。3、培養(yǎng)周期短。4、可用組培中的愈傷組織制取特別的生化制品。5、可短時間大量繁殖,用于拯救瀕危植物。6、可誘導(dǎo)之分化成需要的器官,如根和芽。7、解決有些植物產(chǎn)種子少或無的難題。8、不存在變異,可堅持原母本的一切遺傳特征。9、投資少,經(jīng)濟效益高。10、繁殖方式多,試用品種多11、培養(yǎng)條件可

7、以人為控制。 植物組織培養(yǎng)技術(shù)的前景與發(fā)展:世界上一些先進國家園藝植物組織培養(yǎng)技術(shù)的迅速發(fā)展從60年代就巳經(jīng)開始,并隨著生長、分化規(guī)律性探究逐步深入,到了70年代僅花卉業(yè)就已在蘭花、百合、矮牽牛等二十幾種花卉幼苗生產(chǎn)上建立起大規(guī)模試管苗商品化生產(chǎn),到1984年世界花卉幼苗產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)總值已達二十億美元,其中美國花卉幼苗市場總值為六億多美元。由于組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,加快了花卉新品種的推廣。以前靠常規(guī)方法推廣一個新品種要幾年甚至十多年,而現(xiàn)在快的只要l2年就可在世界范圍內(nèi)達到普及和應(yīng)用。 我國采納快速繁殖技術(shù),也使合格品種達到迅速的推廣和應(yīng)用。如廣東切花菊“黃秀風(fēng)的應(yīng)用,使菊花變大,長勢強化,花色鮮艷,抗病力加強,打開了進入香港市場的渠道,使三十多種觀葉植物的推廣很快遍及全國,豐富了人們的生活;并將自然界的幾百個野生金錢蓮品種繁種馴化,培養(yǎng)了一批園林垂直綠化的材料,促進了園林業(yè)的發(fā)展。 植物組織培養(yǎng)也存有一定的困難,首先是繁殖效率與商品需要量的矛盾,有些作物由于繁殖方法尚未解決,因而無法滿足生產(chǎn)的需要,其次是在培養(yǎng)過程中如何減少變異株的發(fā)生。更重要的是應(yīng)降低組培苗工廠化生產(chǎn)的成本,只有降低成本,才干更好的投產(chǎn)應(yīng)用??傊?,隨著組織培養(yǎng)這一技術(shù)的發(fā)展及各種培養(yǎng)方法的廣泛應(yīng)用,使這一技術(shù)在遺傳育

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