分子生物學(xué)室安全常識(shí)室安全考試系統(tǒng)

1、整理ppt分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全及常用儀器介紹及常用儀器介紹 授課：方旅平聯(lián)系方式：（O）；內(nèi)容介紹 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)1.1 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的基本要求1.2 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火1.3 化學(xué)試劑的安全使用1.4 微生物的危害及處理1.5 放射性物質(zhì)的安全使用1.6 紫外線輻射的危害及防護(hù)1.7 廢棄物的處理1. 分子生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)室使用注意事項(xiàng)分子生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)室使用注意事項(xiàng)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.1 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的基本要求分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的基本要求遵守公共平臺(tái)管理辦法遵守公共平臺(tái)通行證管理辦法遵守公共平臺(tái)安全管理制度遵守公共平臺(tái)有償使用

2、管理辦法遵守公共平臺(tái)檢查制度及違規(guī)處罰條例分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.2 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火 連線：儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護(hù)套線，不可使用普通的塑連線：儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護(hù)套線，不可使用普通的塑料絞線。電話線可用普通的塑料絞線。料絞線。電話線可用普通的塑料絞線。嚴(yán)禁私拉亂扯。嚴(yán)禁私拉亂扯。接地：儀器應(yīng)有良好的接地，提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。接地：儀器應(yīng)有良好的接地，提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。 維修：儀器出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)切斷電源，立即向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。維修儀維修：儀器出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)切斷電源，立即向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。維修儀器時(shí)必須切斷電源，方可

3、拆機(jī)修理。器時(shí)必須切斷電源，方可拆機(jī)修理。墻電：不得私自對(duì)墻電進(jìn)行維修、改造，該工作由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人進(jìn)行計(jì)劃，墻電：不得私自對(duì)墻電進(jìn)行維修、改造，該工作由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人進(jìn)行計(jì)劃，由相關(guān)專業(yè)人員進(jìn)行維修、改造。由相關(guān)專業(yè)人員進(jìn)行維修、改造。檢查：如遇線路老化或損壞應(yīng)及時(shí)地更換。檢查：如遇線路老化或損壞應(yīng)及時(shí)地更換。觸電：斷電或觸電：斷電或絕緣脫離絕緣脫離 急救急救電燈：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，有需要時(shí)打開電源開關(guān)、排氣扇；離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)若無(wú)電燈：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，有需要時(shí)打開電源開關(guān)、排氣扇；離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)若無(wú)人請(qǐng)關(guān)閉電燈及排氣扇。人請(qǐng)關(guān)閉電燈及排氣扇?？照{(diào)：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，有需要時(shí)可打開空調(diào)，溫度不得低于空調(diào)：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，

4、有需要時(shí)可打開空調(diào)，溫度不得低于27；每天下班；每天下班時(shí)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人將關(guān)閉空調(diào)。若在非上班時(shí)間內(nèi)打開空調(diào)，離開時(shí)請(qǐng)關(guān)閉！時(shí)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人將關(guān)閉空調(diào)。若在非上班時(shí)間內(nèi)打開空調(diào)，離開時(shí)請(qǐng)關(guān)閉！電！電！危危險(xiǎn)險(xiǎn)節(jié)節(jié)約約分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.2 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火氣！氣！搬運(yùn)搬運(yùn)：搬運(yùn)或轉(zhuǎn)動(dòng)鋼瓶時(shí)，不得用手執(zhí)著開關(guān)閥移動(dòng)。：搬運(yùn)或轉(zhuǎn)動(dòng)鋼瓶時(shí)，不得用手執(zhí)著開關(guān)閥移動(dòng)。使用使用：按氣瓶的類別選用減壓器，安裝時(shí)螺扣應(yīng)擰緊，并檢漏。：按氣瓶的類別選用減壓器，安裝時(shí)螺扣應(yīng)擰緊，并檢漏。 開啟鋼瓶：逆時(shí)針方向?yàn)殚_；先開總閥，后開減壓閥。開啟鋼瓶：逆時(shí)針方向?yàn)殚_；先開總閥，后開減壓閥。

5、關(guān)閉鋼瓶：順時(shí)針方向?yàn)殛P(guān)；先關(guān)總閥，后關(guān)減壓閥。關(guān)閉鋼瓶：順時(shí)針方向?yàn)殛P(guān)；先關(guān)總閥，后關(guān)減壓閥。 氣嘴保護(hù)：用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。氣嘴保護(hù)：用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。安全安全：氣瓶?jī)?nèi)的氣體不可用盡。：氣瓶?jī)?nèi)的氣體不可用盡。 惰性氣體：應(yīng)剩余惰性氣體：應(yīng)剩余0.05MPa以上壓力的氣體。以上壓力的氣體。 可燃?xì)怏w：應(yīng)剩余可燃?xì)怏w：應(yīng)剩余0.2Mpa以上壓力的氣體。以上壓力的氣體。 氫氫 氣：應(yīng)剩余氣：應(yīng)剩余2.0MPa以上壓力的氣體。以上壓力的氣體。存放存放：分類分處存放：分類分處存放 直立放置時(shí)要穩(wěn)妥；氣瓶要遠(yuǎn)離熱源；避免曝曬和強(qiáng)烈振動(dòng)；直立放置時(shí)要穩(wěn)妥；氣瓶要遠(yuǎn)離熱源；避免曝曬和強(qiáng)烈

6、振動(dòng)； 一般實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存放氣瓶量不得超過(guò)兩瓶。一般實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存放氣瓶量不得超過(guò)兩瓶。 氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.2 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火水！水！上上 水：水龍頭或水管漏水時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)維水：水龍頭或水管漏水時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)維修。修。下下 水：水：水池內(nèi)不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質(zhì)；清洗廢液缸時(shí)請(qǐng)水池內(nèi)不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質(zhì)；清洗廢液缸時(shí)請(qǐng)注意將其中的固體物質(zhì)倒入到垃圾桶后才能沖洗，特別是注意將其中的固體物質(zhì)倒入到垃圾桶后才能沖洗，特別是tip和和eppend

7、orf管。管。下水道排水不暢時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)疏通。下水道排水不暢時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)疏通。 冷卻水：輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上水管與水龍頭的冷卻水：輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊；下水連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊；下水管必須插入水池的下水管中。管必須插入水池的下水管中。純凈水：應(yīng)按照純凈水：應(yīng)按照“操作規(guī)程操作規(guī)程”進(jìn)行操作；取水時(shí)應(yīng)注意及時(shí)地關(guān)閉取水開進(jìn)行操作；取水時(shí)應(yīng)注意及時(shí)地關(guān)閉取水開關(guān)，防止溢流。關(guān)，防止溢流。分子生物學(xué)實(shí)

8、驗(yàn)安全常識(shí)v1.2 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火火火報(bào)警：報(bào)警：119（說(shuō)明火源、火情、單位名稱、地理位置，或明顯標(biāo)志）（說(shuō)明火源、火情、單位名稱、地理位置，或明顯標(biāo)志） 措施：早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報(bào)告措施：早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報(bào)告 滅火：滅火： 學(xué)會(huì)使用滅火器（一拔、二握、三瞄、四掃）學(xué)會(huì)使用滅火器（一拔、二握、三瞄、四掃） 沉著、冷靜沉著、冷靜 易燃固體、易燃?xì)怏w、易燃液體和帶電物體著火時(shí)，可用易燃固體、易燃?xì)怏w、易燃液體和帶電物體著火時(shí)，可用 干粉滅火器滅火干粉滅火器滅火 ； 導(dǎo)線或電器著火時(shí)，應(yīng)先斷電，再用導(dǎo)線或電器著火時(shí)，應(yīng)先斷電，再用干粉干粉滅火器滅火。滅火器滅火。 切不可

9、用泡沫滅火器，此滅火器導(dǎo)電。切不可用泡沫滅火器，此滅火器導(dǎo)電。 衣服著火時(shí)，應(yīng)盡快地脫掉衣服，并用水滅火。或就地滾動(dòng)，衣服著火時(shí)，應(yīng)盡快地脫掉衣服，并用水滅火?；蚓偷貪L動(dòng)， 切忌外跑。切忌外跑。 防火：火災(zāi)不能預(yù)期、不能杜絕、只能預(yù)防防火：火災(zāi)不能預(yù)期、不能杜絕、只能預(yù)防 消除消除火災(zāi)火災(zāi)隱患（電、火、氣、試劑）隱患（電、火、氣、試劑） 備逃生四件寶（滅火器、繩、手電筒、防毒面具）備逃生四件寶（滅火器、繩、手電筒、防毒面具）分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用 標(biāo)標(biāo) 識(shí)：自配試劑應(yīng)貼標(biāo)簽，并注明化合物名稱、濃識(shí)：自配試劑應(yīng)貼標(biāo)簽，并注明化合物名稱、濃 度、配制日

10、期，以及配制人姓名。度、配制日期，以及配制人姓名?？傇瓌t：總原則：藥品狀態(tài)定口徑，瓶塞取決酸堿性；藥品狀態(tài)定口徑，瓶塞取決酸堿性；受熱見光易分解，存放低溫棕色瓶；受熱見光易分解，存放低溫棕色瓶；特殊試劑特殊放，互不反應(yīng)要記清。特殊試劑特殊放，互不反應(yīng)要記清。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用易燃易爆易燃易爆 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：一般將閃點(diǎn)在25以下的化學(xué)試劑列入易燃化學(xué)試劑，它們多是極易揮發(fā)的液體，遇明火即可燃燒。有毒有毒 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：以較小劑量進(jìn)入人體而導(dǎo)致疾病或死亡的才被劃為有毒物質(zhì)。腐蝕性腐蝕性 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：化學(xué)試劑碰到皮膚、粘膜、眼、呼吸器官

11、都有及時(shí)清洗，如各種酸和堿、溴、苯酚等。強(qiáng)氧化性強(qiáng)氧化性 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：包括過(guò)氧化物和含有強(qiáng)氧化能力的含氧酸及其鹽，如硝酸銨、高氯酸及其鹽、重鉻酸及其鹽等。放射性放射性 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：同位素示蹤技術(shù)的發(fā)展，廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)與分子生物學(xué)。由于由于其特殊性，該種試劑不得帶入公共實(shí)驗(yàn)室，在各自實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行專項(xiàng)管理或者由學(xué)院進(jìn)行其特殊性，該種試劑不得帶入公共實(shí)驗(yàn)室，在各自實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行專項(xiàng)管理或者由學(xué)院進(jìn)行統(tǒng)一管理。統(tǒng)一管理。不相容不相容 化學(xué)試劑化學(xué)試劑：一些化學(xué)試劑在儲(chǔ)存和操作過(guò)程中不能與其他物質(zhì)接觸，否則就發(fā)生爆炸，這些化學(xué)試劑稱為不相容化學(xué)試劑。如：疊氮化物通常用作溶液中的抗菌劑，由于輕微

12、碰撞就可能造成疊氮化銅的爆炸，因此不能與銅接觸（如污水管及管道設(shè)施）。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用EB EB是一種強(qiáng)誘變劑（可能造成遺傳性危害），直接接觸有中是一種強(qiáng)誘變劑（可能造成遺傳性危害），直接接觸有中等毒性。等毒性。EB可以通過(guò)皮膚吸收，因此應(yīng)當(dāng)避免一切與EB的直接接觸。EB對(duì)皮膚，眼睛，口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應(yīng)將EB安全密封，并密閉存放于干燥避光處。 提取組織和細(xì)胞RNA的一種重要試劑，在提取RNA時(shí)一定要在通風(fēng)櫥進(jìn)行。如皮膚接觸Trizol，請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗，廢液埋入地下。Trizol分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試

13、劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用 RNA酶的強(qiáng)抑制劑，一種潛在的致癌物質(zhì)。操作時(shí)戴口罩，在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。沾到手上立即沖洗，廢液通過(guò)廢液道排泄。DEPC(Diethylprocarbonate)(二乙基焦碳酸酯二乙基焦碳酸酯) 常用于DNA和RNA提取，對(duì)皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有強(qiáng)烈的刺激作用和腐蝕性，易損害肝和腎。操作時(shí)戴手套在通風(fēng)櫥里進(jìn)行操作時(shí)戴手套在通風(fēng)櫥里進(jìn)行，廢液收集后埋入地下。CHCl3（Chloroform，氯仿），氯仿）Acrylamide（丙烯酰胺）（丙烯酰胺） DNA測(cè)序、SSR及蛋白質(zhì)分離等技術(shù)中作電泳支持物，具神經(jīng)毒性，聚合后毒性消失。操作時(shí)戴手套在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，聚合后的

14、聚丙烯酰胺凝膠沒有毒性，可隨普通垃圾一起扔掉，千萬(wàn)不要倒入下水道.。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用DMSO（二甲亞砜）（二甲亞砜） 是一種既溶于水又溶于有機(jī)溶劑的非質(zhì)子極性溶劑，常用作細(xì)胞的凍存液和配制AS。皮膚沾上之后用大量的水洗及1%5%稀氨水洗滌。 有毒，易損害眼睛。質(zhì)粒提取時(shí)作裂解液破壞細(xì)胞膜和Southern雜交時(shí)的洗膜液中的去垢劑。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡，不要吸入其粉末。十二烷基硫酸鈉十二烷基硫酸鈉(SDS)強(qiáng)神經(jīng)毒性，防止誤吸，操作時(shí)快速，存放時(shí)密封。 TEMED分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用 很強(qiáng)的還

15、原劑，散發(fā)難聞的氣味?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而危害健康。當(dāng)使用固體或高濃度儲(chǔ)存液時(shí)，戴手套和護(hù)目鏡，在通風(fēng)櫥中操作。 DTT 二硫蘇糖醇二硫蘇糖醇 一種高強(qiáng)度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對(duì)呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性。可因吸入、咽下或皮膚吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡，始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里使用。在接觸到的情況下，要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚，已污染的工作服作為有害廢物處理。 PMSF 苯甲基磺酰氟苯甲基磺酰氟 引起嚴(yán)重的眼睛刺激和灼傷。可因吸入、咽下或皮膚吸收而受害。戴合適的手套和護(hù)目鏡。 Triton X-100分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.3 化學(xué)試劑的安全使用化學(xué)試劑的安全使用

16、 對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時(shí)戴合適的手套、安全眼鏡和防護(hù)服。始終在通風(fēng)櫥里操作，操作完后徹底洗手。 過(guò)硫酸銨過(guò)硫酸銨 (NH4)2S2O8 毒性非常大。它阻斷細(xì)胞色素電子運(yùn)送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標(biāo)記清楚?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡，操作時(shí)要格外小心。疊氮鈉（疊氮鈉（NaN3） 染料咽下可致命或引起眼睛失明，通過(guò)吸入和皮膚吸收是有毒的。其可能的危險(xiǎn)是不可逆的效應(yīng)。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡。在化學(xué)通風(fēng)櫥里操作，不要吸入其粉末。 吉姆薩（吉姆薩（Giemsa）分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處

17、理生物安全生物安全重點(diǎn)任務(wù)：實(shí)驗(yàn)室感染的控制、實(shí)驗(yàn)室對(duì)周圍環(huán)境影響的控制以及實(shí)驗(yàn)室和感染性實(shí)驗(yàn)材料的管理控制。世界大多國(guó)家都是以致病微生物的危害程度進(jìn)行分類，形成不同的實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)等級(jí)。我國(guó)一般以BSL-1 、BSL-2 、BSL-3 、BSL-4 表示實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平;以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4 表示動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平。 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例中華人民共和國(guó)傳染病防治法中華人民共和國(guó)傳染病防治法實(shí)施辦法中華人民共和國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫法中華人民共和國(guó)進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則

18、實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求動(dòng)物病原微生物菌（毒）種保藏管理辦法高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理審批辦法 我國(guó)實(shí)驗(yàn)室生物安全法規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理動(dòng)物病原微生物分類名錄（動(dòng)物病原微生物分類名錄（2005年農(nóng)業(yè)部令第年農(nóng)業(yè)部令第53 號(hào)）號(hào)） 第三類：第三類：多種動(dòng)物共患病病原微生物多種動(dòng)物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、破傷風(fēng)梭菌、氣腫疽梭菌、結(jié)核分支桿菌、副結(jié)核分支桿菌、致病性大腸桿菌致病性大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、致病性鏈球菌、李氏桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、嗜水氣單胞菌嗜水氣單胞菌、肉毒梭狀芽孢桿菌、腐敗梭菌和其他致病性梭

19、菌、鸚鵡熱衣原體、放線菌、鉤端螺旋體。水生動(dòng)物病病原微生物：水生動(dòng)物病病原微生物：流行性造血器官壞死病毒、傳染性造血器官壞死病毒、馬蘇大麻哈魚病毒、病毒性出血性敗血癥病毒、錦鯉皰疹病毒、斑點(diǎn)叉尾鮰病毒、病毒性腦病和視網(wǎng)膜病毒、傳染性胰臟壞死病毒、真鯛虹彩病毒、白鱘虹彩病毒、中腸腺壞死桿狀病毒、傳染性皮下和造血器官壞死病毒、核多角體桿狀病毒、蝦產(chǎn)卵死亡綜合癥病毒、鱉鰓腺炎病毒、Taura綜合癥病毒、對(duì)蝦白斑綜合癥病毒、黃頭病病毒、草魚出血病毒、鯉春病毒血癥病毒、鮑球形病毒、鮭魚傳染性貧血病毒。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理 高致病性動(dòng)物病原微生物高致病性動(dòng)物

20、病原微生物是指來(lái)源于動(dòng)物的、動(dòng)物病原微生物分類名錄中規(guī)定的第一類、第二類第一類、第二類病原微生物。 第三類病原微生物是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 v采用遺傳工程技術(shù)人為設(shè)計(jì)出更多帶有新型遺傳物質(zhì)的生物帶有新型遺傳物質(zhì)的生物，既涉及到有生命活性的載體自身對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的生物安全，還存在大量投放于環(huán)境后的生物污染問題此類問題造成的影響更是深遠(yuǎn)而不易覺察更是深遠(yuǎn)而不易覺察。v 當(dāng)考慮要構(gòu)建或使用遺傳修飾生物時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的危害度評(píng)估可能比從事遺傳當(dāng)考慮要構(gòu)建或使用遺傳修飾生

21、物時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的危害度評(píng)估可能比從事遺傳學(xué)正常生物（未修飾）工作的危害度評(píng)估更為重要，不能僅憑經(jīng)驗(yàn)或未經(jīng)驗(yàn)證的文獻(xiàn)學(xué)正常生物（未修飾）工作的危害度評(píng)估更為重要，不能僅憑經(jīng)驗(yàn)或未經(jīng)驗(yàn)證的文獻(xiàn)來(lái)評(píng)估此類生物的潛在危害。來(lái)評(píng)估此類生物的潛在危害。 例如：例如：構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，重組將外源基因轉(zhuǎn)入體內(nèi)的同時(shí)，伴隨有致病性增強(qiáng)的過(guò)程。 必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證明確所必需的生物安全級(jí)別驗(yàn)證明確所必需的生物安全級(jí)別，并對(duì)供體生物的特性、將要轉(zhuǎn)移的核酸序列的性質(zhì)、受體生物的特性以及環(huán)境特性做一綜合評(píng)估，才能確定遺傳修飾生物體所要求的生物安全水平，并做到安全操作目標(biāo)基因。v1.4 微生物的危害及處理微

22、生物的危害及處理分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v重組核酸技術(shù)和生物安全重組核酸技術(shù)和生物安全v 生物表達(dá)系統(tǒng)：生物表達(dá)系統(tǒng)：由符合一系列標(biāo)準(zhǔn)并可安全使用的載體和宿主細(xì)胞組成可安全使用的載體和宿主細(xì)胞組成。如果所要插入的外源基因序列不要求更高級(jí)別的生物安全水平，大部分常規(guī)遺傳工程實(shí)驗(yàn)可以按BSL-1安全安全操作大腸桿菌工程菌。用于基因治療和有效轉(zhuǎn)移基因到組織培養(yǎng)細(xì)胞的病毒載體，大多是復(fù)制缺陷型的，但操作時(shí)應(yīng)采用與構(gòu)建這些載體時(shí)的親本病毒相同的生物安全水平。攜帶外源性遺傳信息的動(dòng)物（轉(zhuǎn)基因動(dòng)物）應(yīng)當(dāng)在靶基因編碼產(chǎn)物特性的防護(hù)水平下進(jìn)行操作，定點(diǎn)缺失特性基因的動(dòng)物（基因敲除動(dòng)物）一般不表現(xiàn)特殊的生物危害。v

23、 基因產(chǎn)物是否具有潛在的藥理學(xué)活性基因產(chǎn)物是否具有潛在的藥理學(xué)活性是必須考慮的一項(xiàng)重要因素。比如，克隆、表達(dá)編碼毒素的基因就需要較高的生物安全水平，因?yàn)楫?dāng)采用病毒載體過(guò)量表達(dá)這些毒素蛋白時(shí)有可能產(chǎn)生難以預(yù)料的后果。v 危害度評(píng)估：危害度評(píng)估：一種動(dòng)態(tài)過(guò)程，必須密切跟蹤該生物因子研究的最新進(jìn)展，一旦獲得載體/宿主的新信息時(shí)，需要隨時(shí)將相關(guān)工作歸入更高或更低的生物安全水平。v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v重組核酸技術(shù)和生物安全重組核酸技術(shù)和生物安全 放射性藥品使用后殘留和剩余部分被稱為放射性廢物。放射性廢物處理不當(dāng)會(huì)造放射性藥品使用后殘留和剩余部分被稱為放射性

24、廢物。放射性廢物處理不當(dāng)會(huì)造成環(huán)境的放射性污染成環(huán)境的放射性污染,影響工作人員和周圍居民的健康。影響工作人員和周圍居民的健康。 v固體廢物的處理固體廢物的處理 主要采用放置法，被放射性藥物污染的固體廢物應(yīng)存在固定的指定地點(diǎn)并采用適主要采用放置法，被放射性藥物污染的固體廢物應(yīng)存在固定的指定地點(diǎn)并采用適當(dāng)?shù)钠帘挝锛右苑雷o(hù)當(dāng)?shù)钠帘挝锛右苑雷o(hù),待其自然衰變后待其自然衰變后,當(dāng)作非放射性廢物處理即可。如為過(guò)期的發(fā)生當(dāng)作非放射性廢物處理即可。如為過(guò)期的發(fā)生器吸附柱應(yīng)標(biāo)明日期并用塑料袋包裝后置于貯源室器吸附柱應(yīng)標(biāo)明日期并用塑料袋包裝后置于貯源室,待其自然衰變后再處理。待其自然衰變后再處理。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安

25、全常識(shí)v1.5 放射性物質(zhì)的安全使用放射性物質(zhì)的安全使用 使用同位素，防護(hù)先行！使用同位素，防護(hù)先行！基本任務(wù)和目的：按照輻射防護(hù)的三項(xiàng)基本原則，即輻射事業(yè)的正當(dāng)化輻射事業(yè)的正當(dāng)化、防護(hù)水平的最優(yōu)化和個(gè)人劑量的限額化防護(hù)水平的最優(yōu)化和個(gè)人劑量的限額化。 v液體廢物的處理液體廢物的處理 應(yīng)根據(jù)放射性物質(zhì)的最大容許濃度、化學(xué)性質(zhì)、放射性強(qiáng)度、廢液的容積以及下水道的排水設(shè)應(yīng)根據(jù)放射性物質(zhì)的最大容許濃度、化學(xué)性質(zhì)、放射性強(qiáng)度、廢液的容積以及下水道的排水設(shè)備等情況進(jìn)行不同的處理。一般采用放置法備等情況進(jìn)行不同的處理。一般采用放置法,半衰期短的也可用稀釋法達(dá)到容許排放水平。放射性半衰期短的也可用稀釋法達(dá)到

26、容許排放水平。放射性強(qiáng)度低的廢水也可直接排入下水道強(qiáng)度低的廢水也可直接排入下水道,但其放射性濃度不得超過(guò)露天水源中限制嘗試的但其放射性濃度不得超過(guò)露天水源中限制嘗試的100倍。不能倍。不能直接排入下水道的放射性廢液直接排入下水道的放射性廢液,可采用衰變池貯存十個(gè)半衰后排入下水道。可采用衰變池貯存十個(gè)半衰后排入下水道。注意注意： 未經(jīng)固化處理的放射性廢液和濃縮物以及尚未選定最終處置方案的固化體等放射性廢物，都未經(jīng)固化處理的放射性廢液和濃縮物以及尚未選定最終處置方案的固化體等放射性廢物，都應(yīng)在應(yīng)在固定地點(diǎn)貯存在專用的容器固定地點(diǎn)貯存在專用的容器中，貯存過(guò)程中注意安全，不能使反射性廢物泄漏。不同的比

27、活度中，貯存過(guò)程中注意安全，不能使反射性廢物泄漏。不同的比活度的廢物要求使用不同的貯罐。的廢物要求使用不同的貯罐。v放射性廢物的轉(zhuǎn)運(yùn)：放射性廢物的轉(zhuǎn)運(yùn)： 放射性廢物轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵是廢物的包裝容器，事先要做好安全檢驗(yàn)，對(duì)容器的強(qiáng)度、屏蔽防護(hù)、放射性廢物轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵是廢物的包裝容器，事先要做好安全檢驗(yàn)，對(duì)容器的強(qiáng)度、屏蔽防護(hù)、密封系統(tǒng)、包裝的標(biāo)志等都有嚴(yán)格的規(guī)定。要求做到安全運(yùn)輸，防止發(fā)生火災(zāi)、容器顛覆及包裝破密封系統(tǒng)、包裝的標(biāo)志等都有嚴(yán)格的規(guī)定。要求做到安全運(yùn)輸，防止發(fā)生火災(zāi)、容器顛覆及包裝破損而使放射性廢物泄漏，污染環(huán)境。損而使放射性廢物泄漏，污染環(huán)境。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.5 放射性物質(zhì)的安

28、全使用放射性物質(zhì)的安全使用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí) v1.6 紫外線輻射的危害和防護(hù)紫外線輻射的危害和防護(hù) 紫外輻射是指波長(zhǎng)范圍在100nm400nm的光輻射，一般把100nm280nm稱作UVC，把280nm315nm稱作UVB，把315nm400nm稱作UVA。其中我們觀察膠體觀察膠體用的最多的就是280nm315nm280nm315nm的紫外線的紫外線。 紫外線的有害效應(yīng)主要是由于紫外線對(duì)脫氧核糖核酸（DNA）的作用造成的。最有害有害的效應(yīng)是細(xì)胞致死，其它的效應(yīng)則包括致突、致癌、干擾致突、致癌、干擾DNADNA、核糖核酸（、核糖核酸（RNARNA）和蛋白質(zhì)的合成、細(xì)胞分裂的延遲、以及在通透

29、性和能動(dòng)性上的變化）和蛋白質(zhì)的合成、細(xì)胞分裂的延遲、以及在通透性和能動(dòng)性上的變化等。1.紫外光對(duì)眼睛的損傷紫外光對(duì)眼睛的損傷 白內(nèi)障白內(nèi)障被認(rèn)為過(guò)量紫外光輻射的主要原因，經(jīng)紫外光照射后，射線大部分被角膜上皮細(xì)胞核蛋白吸收，導(dǎo)致細(xì)胞核膨脹，碎裂和細(xì)胞死亡，以至損傷眼角膜和晶狀體，導(dǎo)致渾濁。總的說(shuō)來(lái)，紫外光輻射增加，人類的白內(nèi)障患者增加。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí) v1.6 紫外線輻射的危害和防護(hù)紫外線輻射的危害和防護(hù)2、紫外光對(duì)人皮膚的損傷紫外光對(duì)人皮膚的損傷 紫外光的影響有積累作用，它的主要機(jī)理：蛋白質(zhì)受紫外光照射后，形成光解產(chǎn)物，此外，其溶解度和粘度，對(duì)熱變性的敏感性及熒光等物理化學(xué)和光學(xué)性質(zhì)均

30、有顯著的改變。紫外光對(duì)皮膚的作用分為急性作用和慢性作用急性作用和慢性作用。急性作用表現(xiàn)為紅斑效應(yīng)紅斑效應(yīng)其癥狀為水腫脫皮水腫脫皮，全身癥狀有寒戰(zhàn)，發(fā)燒，惡心，罕見循環(huán)衰竭。慢性作用如致皮膚老化，色素沉著，加速老化，甚至引起腫瘤皮膚老化，色素沉著，加速老化，甚至引起腫瘤。輕者皮膚出現(xiàn)水腫性紅斑，重者會(huì)出現(xiàn)水皰或大皰，還可伴有休克，發(fā)熱，畏寒，惡心，心悸和頭昏等癥狀。3、紫外光對(duì)其他部位的損傷紫外光對(duì)其他部位的損傷 紫外光輻射對(duì)免疫系統(tǒng)的影響，免疫系統(tǒng)的一些成分存在于皮膚中，皮膚暴露在紫外光下，使得免疫系統(tǒng)受紫外光輻射，使其功能受到干擾。研究表明，紫外光輻射的免疫抑制作用可導(dǎo)致皮膚癌免疫抑制作用可

31、導(dǎo)致皮膚癌，同時(shí)引起一些傳染病和其他一些疾病。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.6 紫外線輻射的危害和防護(hù)紫外線輻射的危害和防護(hù) 在實(shí)驗(yàn)室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)。只能通過(guò)吸收有害波長(zhǎng)的濾片或安全玻璃片才能觀察。在紫外光下操作時(shí)要戴合適的預(yù)防性手套。應(yīng)佩戴具有紫外線防護(hù)功能的護(hù)目鏡和/或防護(hù)面罩，并遮蔽暴露的皮膚。 建議：使用熒光染料，切膠在使用熒光染料，切膠在Dark reader上操作。上操作。 Dark Reader 熒光透射儀(Transilluminators)的特點(diǎn): 1.Dark Reader使用新的無(wú)毒DNA染料

32、: SYBR Green, SYBR Gold等, 避免了Ethidium Bromide (EB) 染料對(duì)人體的傷害。 2.Dark Reader使用可見光 （400-500 nm）,沒有UV（紫外線），將其對(duì)人體的傷害降低 至零。同時(shí)，大大降低了對(duì)DNA樣本的損傷，克隆DNA的效率將成百倍的提高。 3.靈敏度高，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于UV檢測(cè)儀。 4.適用染料范圍廣；熒光素 （fluorescein）, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等都可使用。對(duì)于Rhodamines, Ethidium B

33、romide(EB)等激發(fā)光大于500 nm的染料亦可適用；可以廣泛用于DNA、RNA 以及蛋白質(zhì)的檢測(cè)。 5.Dark Reader同時(shí)提供琥珀色鏡片的觀察眼鏡（AG16），供切割凝膠時(shí)使用。 紫外照射消毒后由于空氣中臭氧富集，不宜立即開始工作，應(yīng)在停止紫外照射30 min后開始工作，有條件的實(shí)驗(yàn)室，可安裝無(wú)臭氧紫外燈。 超凈工作臺(tái)中進(jìn)行紫外照射消毒超凈工作臺(tái)中進(jìn)行紫外照射消毒后，也應(yīng)用強(qiáng)風(fēng)進(jìn)行吹掃后再進(jìn)行工作，以免臭氧危害身體健康。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.7 廢棄物的處理廢棄物的處理含有含有EB的廢棄物！的廢棄物！廢液描述廢棄處理方法緩沖液濃度較低（ 0.5mg/L）在排入下水道之前，

34、緩沖液請(qǐng)先用過(guò)濾器或“茶包”處理。確定緩沖液中在紫外燈下無(wú)熒光方可下排。儲(chǔ)備溶液，氯化銫溶液濃度較高（ 1-10mg/mL）濃度之高，使得處理EB的過(guò)濾和吸收方法都無(wú)法適用。將這些儲(chǔ)液交由相關(guān)部門專業(yè)人員處理。處理用過(guò)的過(guò)濾器和“茶包”在（過(guò)濾/吸收過(guò)程）污染將已用的過(guò)濾器和茶包明確標(biāo)記。用過(guò)的過(guò)濾器和茶包交由相關(guān)部門處理。凝膠濃度低（ 3-5mg/L）先將凝膠晾干，裝入指定的袋子中做好標(biāo)記后，再交由相關(guān)部門處理。污染的物件手套，清理灑落EB用過(guò)的材料，以及實(shí)驗(yàn)室中污染的物品破碎的玻璃和銳器必須放入堅(jiān)固的容器，其他材料可擺放整齊后裝入袋中做好標(biāo)記，交由相關(guān)部門處理。晶體及粉末含有較純或濃縮過(guò)的

35、EB交由相關(guān)部門處理。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.7 廢棄物的處理廢棄物的處理Sigma公司：公司：Ethidium bromide/SYBR green replacement cartridges5 replacement cartridges for decontamination of solutions containing Ethidium bromide or SYBR Green; binding capacity for above mentioned fluorescent stains: 50 mg price： 約700RMBQbiogene 公司：EtBr Green

36、Bag Disposal The EtBr GreenBag Kit allows rapid and trouble-free concentration of ethidium bromide from large volumes of solutions into a small tea bag which is then conveniently disposed along with other solid hazardous wastes. One kit has the capacity to remove 500 mg of ethidium bromide from solutions (10 mg EtBr/bag).Price：約1608 RMB含有含有EB的廢棄物！的廢棄物！分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)v1.7 廢棄物的處理廢棄物的處理含有微生物的廢棄物！含有微生物的廢棄物！ 大腸桿菌大腸桿菌(Escherichia coli, E.coli)是人和許多動(dòng)物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細(xì)菌，