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1、會計學(xué)1實(shí)驗實(shí)驗(shyn)酶的特異性酶的特異性第一頁,共22頁?!緦?shí)驗原理】【實(shí)驗原理】 酶是生物催化劑,酶對所作用的底物有嚴(yán)格酶是生物催化劑,酶對所作用的底物有嚴(yán)格的選擇性,即酶的特異性。的選擇性,即酶的特異性。 淀粉和蔗糖淀粉和蔗糖(zhtng)都是非還原性糖,分都是非還原性糖,分別為唾液淀粉酶和蔗糖別為唾液淀粉酶和蔗糖(zhtng)酶的專一底物酶的專一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有還原性的麥芽。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有還原性的麥芽糖,蔗糖糖,蔗糖(zhtng)被蔗糖被蔗糖(zhtng)酶水解生成酶水解生成具有還原性的葡萄糖和果糖。具有還原性的葡萄糖和果糖。 Benedict試劑
2、(含有試劑(含有Cu 2+)常用于檢驗還)常用于檢驗還原糖的存在,其被還原后生成磚紅色的原糖的存在,其被還原后生成磚紅色的Cu2O沉沉淀。淀。第1頁/共21頁第二頁,共22頁。第2頁/共21頁第三頁,共22頁。【實(shí)驗【實(shí)驗(shyn)步驟】步驟】(一)淀粉酶的特異性(一)淀粉酶的特異性1.唾液淀粉酶溶液的制備:唾液淀粉酶溶液的制備: 先用蒸餾水漱口,然后用潔凈試管先用蒸餾水漱口,然后用潔凈試管(shgun)1支,支,取唾液(無泡沫)約取唾液(無泡沫)約2ml,蒸餾水,蒸餾水20倍稀釋,倍稀釋,備用。備用。第3頁/共21頁第四頁,共22頁。2.取試管取試管(shgun)5支,標(biāo)號,按下表所列的次
3、序操作支,標(biāo)號,按下表所列的次序操作:試劑試劑試管編號試管編號123451%淀粉溶液淀粉溶液(ml)1.01.02%蔗糖溶液蔗糖溶液(ml)1.01.0唾液淀粉酶唾液淀粉酶(ml)1.01.01.0蒸餾水(蒸餾水(ml)1.01.01.0第4頁/共21頁第五頁,共22頁。 3. 搖勻,置37恒溫(hngwn)水浴保溫10min,然后每管加入Benedict試劑2ml,再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化,并解釋實(shí)驗結(jié)果。 第5頁/共21頁第六頁,共22頁。1. 蔗糖酶溶液的制備:蔗糖酶溶液的制備: 取活性干酵母,置于研缽中,加少取活性干酵母,置于研缽中,加少量蒸餾水及石英砂研磨提取約量蒸餾水及
4、石英砂研磨提取約10min,再加蒸餾水至總體積約為再加蒸餾水至總體積約為20ml,過濾,過濾(gul)或離心,濾液或上清液備用?;螂x心,濾液或上清液備用。第6頁/共21頁第七頁,共22頁。2. 取試管取試管(shgun)5支,標(biāo)號,按下表所列的次序支,標(biāo)號,按下表所列的次序操作:操作:試劑試劑試管編號試管編號123451%淀粉溶液淀粉溶液(ml)1.01.02%蔗糖溶液蔗糖溶液(ml)1.01.0蔗糖酶(蔗糖酶(ml)1.01.01.0蒸餾水(蒸餾水(ml)1.01.01.0第7頁/共21頁第八頁,共22頁。3. 搖勻,搖勻, 置置37恒溫水浴保溫恒溫水浴保溫10min,然后每管加入,然后每管
5、加入Benedict試劑試劑2ml,再放沸水浴,再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化,并。觀察各管顏色變化,并解釋解釋(jish)實(shí)驗結(jié)果。實(shí)驗結(jié)果。第8頁/共21頁第九頁,共22頁。第9頁/共21頁第十頁,共22頁。移液槍的使用移液槍的使用(shyng)部分用具與試劑部分用具與試劑第10頁/共21頁第十一頁,共22頁。第11頁/共21頁第十二頁,共22頁。第12頁/共21頁第十三頁,共22頁。量程的調(diào)節(jié)量程的調(diào)節(jié)1.按照從大體積調(diào)為小體積的方法調(diào)節(jié)。按照從大體積調(diào)為小體積的方法調(diào)節(jié)。2.用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字。用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上的旋鈕,使數(shù)字窗
6、口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字。注意:千萬不要將旋鈕旋出最大量程,否則會卡住內(nèi)部機(jī)械裝置或者注意:千萬不要將旋鈕旋出最大量程,否則會卡住內(nèi)部機(jī)械裝置或者(huzh)彈簧彈出而損壞了移液槍。彈簧彈出而損壞了移液槍。第13頁/共21頁第十四頁,共22頁。第14頁/共21頁第十五頁,共22頁。槍頭(吸液嘴)的裝配槍頭(吸液嘴)的裝配(zhungpi)在將槍頭(在將槍頭(pipette tips)套上移液)套上移液槍時,正確的方法是將移液槍(器)槍時,正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。第15頁/共21頁第十六
7、頁,共22頁。移液的方法1.吸取液體時,用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn),移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下23毫米。2.然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)。3.接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體,稍停片刻(pin k)繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。最后松開按鈕。第16頁/共21頁第十七頁,共22頁。第17頁/共21頁第十八頁,共22頁。第18頁/共21頁第十九頁,共22頁。移液器的正確放置移液器的正確放置使用完畢使用完畢(wnb),可以將其豎直掛在移液槍架,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。第19頁/共21頁第二十頁,共22頁。維護(hù)維護(hù)(wih)保養(yǎng)時的注意事項保養(yǎng)時的注意事項如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。彈簧。第20頁/共21頁第二十一頁,共22頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會計學(xué)。淀粉和蔗糖都是非還原性糖,分別為唾液淀粉酶和蔗糖酶的專一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有還原性的麥芽糖,蔗糖被蔗糖酶水解生成具有還原性的葡萄糖和果糖。Benedict試劑(含有Cu 2+
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