香菇菌種生產(chǎn)的方法與步驟

1、香菇菌種生產(chǎn)的方法與步驟    (一)母種生產(chǎn)培養(yǎng)基的配方選擇一是馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂1623克，水1 000毫升。氫離子濃度1 00010000納摩升(pH56)，用于分離、培養(yǎng)菌種。   二是PDA改良培養(yǎng)基(甲)：馬鈴薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氫鉀(KH2PO4)2克，硫酸鎂(MgSO4)05克，維生素B110毫克，瓊脂20克，水1000毫升，滅菌后氫離子濃度316310000納摩升(pH5055)，用于培養(yǎng)、分離菌種。    三

2、是PDA改良培養(yǎng)基(乙)：馬鈴薯(去皮)200克，麩皮或米糠50克，硫酸鎂0.5克，維生素B110毫克，瓊脂20克，滅菌后氫離子濃度31633981納摩升(pH5455)。    四是PDA改良培養(yǎng)基(丙)：心材木200克，細(xì)米糠(或麩皮)100克，硫酸銨1克，麥芽糖(或葡萄糖)20克，瓊脂20克，水1 000毫升，滅菌后氫離子濃度316310000納摩升(pH5.05.5)，用于分離菌種。    五是麥芽浸膏、酵母浸膏、瓊脂培養(yǎng)基(MYD)：麥芽浸膏3克，葡萄糖10克，酵母浸膏3克，瓊脂20克，蛋白胨5克，水1 000毫升(用于菌種

3、培養(yǎng))。    六是麥芽浸膏、蛋白胨培養(yǎng)基(MPA)：麥芽浸膏2025克，蛋白胨10克，瓊脂20克，水1 000毫升(用于分離、培養(yǎng)、保存菌種)。    上述6個培養(yǎng)基配方中，馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂(PDA)配方應(yīng)用最普遍。在此著重介紹PDA培養(yǎng)基的配制方法與步驟：    1制備培養(yǎng)基的操作程序    選擇優(yōu)質(zhì)馬鈴薯，去皮或挖去發(fā)芽眼，削去發(fā)青皮，切成薄片，稱取200克，置于鋼精鍋，加水1 000毫升，煮沸后小火保持30分鐘，趁熱用8層紗布過濾后放人有1 000毫升刻度的量杯(

4、或量筒)中，補(bǔ)充水到1 000毫升，倒回鋼精鍋，加瓊脂繼續(xù)加熱，待瓊脂溶化后，再加葡萄糖，再補(bǔ)水至1000毫升，用玻璃棒攪均勻，趁熱分裝試管，或裝入三角瓶備用。    2分裝試管    將配制好的PDA培養(yǎng)基，趁熱(60)倒人事先準(zhǔn)備好的量杯或玻璃漏斗，分裝試管。每支試管裝培養(yǎng)基為管長的14，培養(yǎng)液不可貼附管口內(nèi)壁，如有沾附物必須揩拭干凈。    3做棉塞    取適量棉花做成較緊實(shí)的棉塞，塞入試管約2厘米左右，外留1厘米，緊貼試管內(nèi)壁，松緊度以用手指提起棉塞而不脫掉為宜，光

5、圓不起皺(如圖31)，爾后將試管放入鐵絲筐內(nèi)。    4滅  菌    將裝有培養(yǎng)基的試管放人滅菌鍋的鐵絲筐內(nèi)，上面蓋上牛皮紙或聚丙烯塑料薄膜，包扎好，以防棉塞受潮。加熱滅菌時，排盡鍋內(nèi)的冷氣，當(dāng)溫度升到121時，維持30分鐘后停止加熱。待指針回到零點(diǎn)，先打開鍋蓋的110開度，等到無直沖蒸氣時，再打開全部鍋蓋，取出試管。    5在斜面上擺放試管    將取出的試管冷卻到5060后，放到用木架或木條擺成一定角度的斜面上，小試管斜面長2厘米，大試管(18×2

6、00)斜面長6厘米左右。待完全凝固后，收取備用。    6滅菌效果檢查    隨機(jī)取3管斜面，放在28下進(jìn)行空白培養(yǎng)57天后，檢查斜面上有無細(xì)菌和霉菌菌落。如果發(fā)現(xiàn)有雜菌，說明滅菌不徹底，要重新滅菌。    (二)接種與培養(yǎng)    1接  種    在無菌室(接種室)或接種箱內(nèi)，酒精燈火焰旁進(jìn)行無菌操作。具體程序如下：左手拿菌種管和待接種的斜面試管，右手拿接種耙，在火焰上來回?zé)t，拔去菌種管的棉塞，將管口在火焰上燒一下，再把接種耙燒一下

7、，迅速插入種管，稍加冷卻，切取米粒大小菌絲塊(一定要帶培養(yǎng)基)，迅速放入待接種管斜面中心位置(為爭取時間，在斜面接兩點(diǎn)以上為宜)，拿出接種耙后，再把管口烘烤一下，燒一下棉塞，迅速塞好棉塞，灼燒一下接種耙。到此即完成了一個接種程序，以下依此類推。    2培  養(yǎng)    將接種后的試管，放入培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室進(jìn)行恒溫培養(yǎng)(25±1)，或利用適宜的自然氣溫培養(yǎng)。要保證培養(yǎng)室空氣新鮮，環(huán)境干凈，無光或弱光。為此，必須保持空氣相對濕度70左右，在試管上蓋上紗布，或蓋上薄棉毯，拉上窗簾，形成無光培養(yǎng)。因試管斜面長短不同，一般需經(jīng)

8、814天培養(yǎng)，才能長滿試管斜面。    (三)母種質(zhì)量檢查及提高純度對策    1斜面優(yōu)質(zhì)菌絲形態(tài)    在馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂(PDA)培養(yǎng)基斜面上，菌絲生長潔白，呈棉絨狀，密度一致，前沿菌絲(先端)整齊，粗壯。有的棉絨狀菌絲發(fā)達(dá)，如蘇香1號，Cr-02；有的棉絨狀菌絲不發(fā)達(dá)，如271A，271B，早生一號。后者比前者菌絲生長快，但菌齡較長。    2斜面菌絲不純現(xiàn)象    在斜面上菌絲灰白，棉毛菌絲不平坦不整齊，前沿菌絲不齊、有缺口，這說明有

9、雜菌污染。如斜面上有異色，可能是鐮刀菌污染。如斜面上特別是菌絲邊緣出現(xiàn)粘稠狀物即蠟狀、油狀，可能是細(xì)菌污染。如斜面上呈黃、綠、黑等顏色，則可肯定是霉菌污染。若斜面產(chǎn)生色素，也表明有雜菌污染。將斜面對著光看背面，如有小黑點(diǎn)遮光，說明雜菌菌落被香菇菌絲覆蓋了。    3提高香菇母種純度的措施    必須使培養(yǎng)基徹底滅菌，嚴(yán)格無菌操作，保持培養(yǎng)環(huán)境干燥、清潔、恒溫、無光、空氣流暢，從而保證菌絲健壯生長。如發(fā)現(xiàn)母種有異?，F(xiàn)象，應(yīng)予剔除。    二、原種生產(chǎn)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及保證對策   

10、原種和栽培種的培養(yǎng)料配方制作技術(shù)基本相同，只是裝料容器大小不同。因此，本節(jié)只介紹原種生產(chǎn)技術(shù)，栽培種生產(chǎn)技術(shù)在相關(guān)章節(jié)中介紹。    (一)培養(yǎng)料配方選擇    共有7個配方可供選擇，前3個為常用配方，后4個為參考配方。木屑78，麩皮(或米糠)20，蔗糖1，石膏1。木屑63，棉籽殼20，麩皮15，蔗糖1，石膏1。木屑60，蔗渣18 %，麩皮20，蔗糖1，石膏1。稻草(麥草)58 %，礱糠30，木屑10%，糖1，石膏1。發(fā)酵松樹、杉樹木屑50，木屑28，麩皮20，糖1，石膏1。棉籽殼40，木屑40，麩皮18 %，糖1，石膏1。花生殼80

11、，雜木屑19，石膏1。    上述7個配方都要求含水量在60左右，氫離子濃度(pH值)隨自然情況。配方中各原料一般在3個月前備好。    (二)培養(yǎng)料配制的方法和步驟    1時間安排    春、秋、冬季節(jié)皆可，晴天或陰天配料裝瓶最為理想。夏天宜在每天早、晚配料裝瓶，應(yīng)在4小時內(nèi)裝好瓶。    2生產(chǎn)組織    使用一臺機(jī)器，由6人操作。其中1人向斗內(nèi)鏟料，1人裝瓶，1人洗瓶，2人做棉塞，1人運(yùn)輸。 

12、60;  3配料前的木屑處理首先過篩(23目)，用竹篩或鐵篩皆可，篩除掉有棱角的木塊、木條、木片等硬物。然后，按照生產(chǎn)計(jì)劃和配方成分(百分率)，稱好主料、輔料和添加劑。接著，將各種原料混合拌勻，有機(jī)器用機(jī)器拌，無機(jī)器用人工來回拌34次。最后，再加入適量的水，繼續(xù)用機(jī)器拌3分鐘或用人工拌34次。對出現(xiàn)的團(tuán)塊一定要拍散，或用鐵篩過篩。   在配料過程中，需靈活掌握以下3點(diǎn)：    (1)靈活掌握含水量：對干料、細(xì)料、質(zhì)松料，加水宜多一些；對粒硬、吸水差的料，加水宜少一些。在晴天、高溫、秋千天氣而水蒸發(fā)量較大時，加水宜多些；在陰雨

13、、空氣偏濕而水不易蒸發(fā)時，則加水宜少一些。在水泥場地拌料，加水可少一些；在干泥滲水場地拌料，加水宜多一些。在高海拔地區(qū)，加水宜多一些    (2)拌料要均勻：要做到主料、輔料、添加劑均勻，干濕均勻，酸堿度均勻，不結(jié)塊。    (3)操作要敏捷快速：在氣溫28，如拌料滅菌時間過長，則料易變酸，接種后輕則發(fā)菌慢，重則不發(fā)菌，而且易使雜菌病毒發(fā)生。因此，必須根據(jù)機(jī)械化水平和勞動者的技術(shù)熟練程度，安排好每日的生產(chǎn)量，保證適時快速裝袋(瓶)，及時滅菌。在高溫期間從拌料到滅菌，不能超過4小時；在低溫期間從拌料到滅菌，要求不過夜。(4)搞好環(huán)境衛(wèi)生

14、：選用的原材料要無霉變，配料前要曝曬，拌料裝瓶環(huán)境要清潔，盡量減少空氣中的雜菌孢子率。   (三)裝瓶(袋)    使用機(jī)器裝瓶，平均每人每日可裝720多瓶。具體操作程序如下：裝料至瓶頸，清潔瓶口，用小木棒或試管將料壓實(shí)，并呈凹式，將瓶口內(nèi)外壁洗凈。    (四)做好棉塞    取一塊完整而略大于掌心的棉絮，其大小厚薄正好適合瓶口的大小長短，平攤在左掌心，右手捏住棉絮邊緣往內(nèi)卷成圓形，爾后用右手的拇指和中指相對捏住棉絮，接著用左手的拇指和食指也相對捏住棉絮，再用右手趁勢捏成棉

15、球，塞人管口或瓶口23處。    (五)滅菌    常用的高壓滅菌鍋分為立式或臥式兩種。在高度密封的高壓鍋內(nèi)，通入高壓蒸氣，達(dá)到徹底滅菌的方法，稱為高壓蒸氣滅菌，又叫濕熱滅菌。原種和栽培種的培養(yǎng)料，由于不易被蒸氣穿透，滅菌時必須在150千帕即15千克厘米2。條件下滅菌2.02.5小時。在滅菌的全過程中，要嚴(yán)格操作規(guī)程，并注意掌握3點(diǎn)：料瓶和料袋排放密度要適當(dāng)，使蒸氣流暢，無死角。通蒸氣前，檢查安全閥是否靈活，有無故障。通蒸氣后，打開排氣閥，驅(qū)散鍋內(nèi)冷空氣(自身發(fā)生蒸氣的高壓鍋應(yīng)加足水)，或關(guān)上排氣閥，接通蒸氣。待壓力升至0.5千克厘米

16、。時，開閥放氣。待指針回到0位時，保持5分鐘，再關(guān)上排氣閥。等壓力升到1.5千克厘米。時，滅菌2.02.5小時。然后讓其自然冷卻，當(dāng)壓力指針回到0位時，打開鍋蓋或門的14開度，繼續(xù)讓熱烘烤棉塞，防止驟冷。接著趁熱取出料瓶(袋)，送入清潔消毒過的冷卻室。    也可以用常壓滅菌法，常用的是滅菌灶或滅菌箱。以低壓蒸氣進(jìn)行滅菌的方法，稱為常壓蒸氣滅菌法。這種滅菌法投資省，可自行建造，取材容易，成本低廉，適用于農(nóng)村。缺點(diǎn)是滅菌時間長，能耗大。常壓滅菌法的具體操作程序是：當(dāng)點(diǎn)火發(fā)生蒸氣時，打開放氣閥排出冷空氣，直至見到放出的直沖蒸氣后，再排氣5分鐘，接著關(guān)上閥門，待氣溫升到

17、100102時，開始計(jì)時，連續(xù)保持8小時以上。料瓶疊放，瓶頸朝內(nèi)，瓶底朝外。料袋按品字形疊放，以求壓力平衡。行間要留有間隙。點(diǎn)火前，將鐵鍋內(nèi)加足水。在滅菌的全過程中要注意鐵鍋內(nèi)的水位，保持通水流暢，且水溫較高。在滅菌的全過程中，火力應(yīng)按猛攻恒溫徐降的程序掌握。即開始升溫火力宜猛，盡快達(dá)到100，防止升溫緩慢，時間過長，引起原料變酸。當(dāng)溫度升到100時，要保持溫度不變，不能時高時低，以免影響滅菌效果。當(dāng)?shù)竭_(dá)滅菌時間后，讓倉(膛)內(nèi)溫度緩緩降低，直降至60，方可開門取物。(六)冷卻接種  接種前必須使料瓶(袋)冷卻到適宜溫度，防止高溫接種熱死種菌。接種前半小時，將原種瓶、接種工具及用品放

18、入接種箱(或接種室)，然后用5 %石炭酸液向上下周壁噴霧消毒，并開啟紫外線燈照射滅菌半小時。啟用久停不用的接種箱(室)，事先必須用高錳酸鉀和甲醛薰蒸處理。接種時，操作人員進(jìn)入接種室前，先用肥皂洗手，換工作服，戴上口罩和工作帽，穿上工作鞋，手在12來蘇兒液或0.25新潔爾滅液中浸泡2分鐘。爾后，用5石炭酸液，對接種室上下及四壁、工作臺、凳等噴霧消毒，邊噴邊后退到緩沖室，關(guān)上接種室的門。待5分鐘后，將菌種帶入室內(nèi)進(jìn)行接種操作。接種前1分鐘，用75酒精擦手，嚴(yán)格無菌操作(同母種無菌操作法)，要求有序不亂，操作敏捷快速，減少室內(nèi)空氣流動。接種時，將種管用脫脂棉蘸上75酒精，進(jìn)行種管外壁消毒。接著，拔取

19、棉塞，用火焰燒一下管口(或瓶口)，把燒過的接種耙迅速插入種管內(nèi)冷卻。爾后將斜面前端1厘米長的菌絲塊挖去，剩余斜面分成46段，分別取出接人原種瓶的穴位中心。一管母種可接46瓶原種。    (七)接種結(jié)束后的工作    接種完成后，立即將臺面收拾干凈，將各種剩余物，如種管、灑落的培養(yǎng)基、消毒用過的棉花等均拿出室外，照前述方法進(jìn)行第二輪接種前處理。    (八)培養(yǎng)管理    第一，對培養(yǎng)室必須進(jìn)行清洗、消毒處理后，方可使用。    第二，將接種后的原

20、種瓶(袋)搬人培養(yǎng)室，保持溫度在24±1，調(diào)節(jié)空氣濕度在70左右。垂吊黑色窗簾，進(jìn)行無光培養(yǎng)。待菌絲吃料15后，加強(qiáng)通風(fēng)換氣，保持室內(nèi)空氣新鮮。一般培養(yǎng)4050天，菌絲即可長滿種瓶(250毫升瓶裝)。    第三，培養(yǎng)期間可能出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象：一是在原種瓶內(nèi)的不同部位滋生雜菌。二是菌種塊不萌發(fā)。三是菌絲不吃料。    第四，異常現(xiàn)象發(fā)生原因及防治對策：    一是由于棉花塞受潮，易滋生粉紅鏈孢霉菌。瓶周壁發(fā)生分散雜菌落，可能是瓶子破裂，也可能是滅菌有死角。若到處有雜菌發(fā)生，肯定是滅菌不徹底，應(yīng)重新

21、滅菌。少數(shù)原種瓶發(fā)生雜菌，應(yīng)及時清除。接種塊四周發(fā)生雜菌，是接種工具消毒滅菌不嚴(yán)或空氣污染造成的。種塊滋生雜菌，可能是母種塊帶雜菌，或接種工具燒灼滅菌不嚴(yán)。發(fā)現(xiàn)上述雜菌危害后，必須密切注視，及早清除，以防蔓延。大批發(fā)生雜菌感染，應(yīng)及早重新徹底滅菌，重新接種，不可延誤。    二是種塊不萌發(fā)的原因很多，主要有以下幾種情況：接種工具燒灼后未冷卻就挖取菌絲塊，菌絲被燙死；菌絲被火焰燒死；母種干涸老化，失去萌發(fā)力；消毒熏蒸過頭，使菌絲受毒害；培養(yǎng)溫度不適宜。針對上述情況，可采取如下防治對策：加強(qiáng)計(jì)劃性，培養(yǎng)適齡母種，不用老化母種，以提高萌發(fā)力；熏蒸消毒要適量，避免過量，防

22、止將菌絲殺死；接種工具燒灼后，冷透后方可取種菌絲；菌絲離火焰稍遠(yuǎn)一些，以防燒死菌絲。    三是菌絲種塊雖能萌發(fā)，但不吃料，其原因主要是：接種塊與培養(yǎng)料結(jié)合不緊密；培養(yǎng)料含水偏少；培養(yǎng)料中有抑制菌物存在，使菌絲不能生長；培養(yǎng)室控溫失靈，高溫?zé)崴谰z。針對上述情況，可采取如下防治對策：接入種塊時，應(yīng)將種塊向料內(nèi)撳一下，使其與培養(yǎng)料緊密結(jié)合；堅(jiān)持隨拌料，隨裝瓶，及時滅菌，防止培養(yǎng)料變酸；購買木屑要嚴(yán)格選擇，不要購買有抑制菌絲生長的木屑；時常檢查溫控是否失靈，發(fā)現(xiàn)問題及時修理，以防高溫?zé)谰z；配料時不要隨意添加或過量添加有害物質(zhì)，以防菌絲生長受到抑制。 &#

23、160;  (九)原種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)    1優(yōu)良原種的主要標(biāo)準(zhǔn)    從外觀看，菌絲濃白呈棉絨狀，木屑培養(yǎng)料變?yōu)榈S色，菌絲粗壯，雙核有鎖狀聯(lián)合，菌絲長滿瓶后10天左右表面分泌褐色水珠，有少量菌絲扭結(jié)或有原基出現(xiàn)，或菌絲將培養(yǎng)料包成塊狀(結(jié)合相當(dāng)牢)。這種原種應(yīng)視為良種，無疑可用于生產(chǎn)。    2劣勢原種的主要表現(xiàn)菌絲表面出現(xiàn)拮抗線，菌絲纖細(xì)，生長速度緩慢，單核無鎖狀聯(lián)合，菌絲脫壁、萎縮、發(fā)黃、老化，這種原種不能用于生產(chǎn)，更不能用于轉(zhuǎn)接生產(chǎn)種(或再生原種)。受熱害后，恢復(fù)生長原種，可以用于生產(chǎn)。香

24、菇菌種質(zhì)量退化現(xiàn)象及預(yù)防  一、菌種質(zhì)量檢驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)  菌種質(zhì)量的優(yōu)劣，直接關(guān)系到栽培的成敗及香菇的品質(zhì)。菌種質(zhì)量檢查主要包括兩個方面：一是菌株純度識別；二是菌種質(zhì)量優(yōu)劣識別。    (一)菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)    一個好的菌種，應(yīng)具備自身的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括標(biāo)名、菌絲形態(tài)、菌絲長勢、菌絲純度、特種香味等主要指標(biāo)。    1標(biāo)  名    相當(dāng)于商品的標(biāo)牌。菌種生產(chǎn)單位應(yīng)在種管(瓶)上標(biāo)明名稱、編號、溫型、接種日期，購買者亦應(yīng)檢查有無標(biāo)名。 

25、60;  2純  度    一是指菌株菌絲的純度；二是指雜菌污染程度。菌株的純度通過培養(yǎng)菌絲形態(tài)特征來識別。在多級(一、二級)菌種培養(yǎng)基中，凡是發(fā)現(xiàn)有其他生物體存在，都可認(rèn)為是菌種不純，這種菌種不可使用。反之，在多級菌種培養(yǎng)基中，只有香菇菌株生長，無其他生物體存在，則認(rèn)為是高純，可以用于生產(chǎn)。    3香味       當(dāng)打開棉塞(或其他包扎物)聞到有獨(dú)特的芳香味，而無異味，應(yīng)認(rèn)為是優(yōu)良菌種。反之，當(dāng)打開棉塞聞到霉味，這是霉菌滋生感染；如有惡心味，并在培養(yǎng)

26、基邊緣和管壁交界處出現(xiàn)淡黃色或乳白色糊狀物，這是細(xì)菌感染，均應(yīng)淘汰。    4長勢    是指菌絲形態(tài)正常，生長旺盛，而無抑制線、無吐水、無萎縮現(xiàn)象。優(yōu)良菌絲生長形態(tài)呈絨毛狀，濃密，粗壯，均勻齊整，生長速度快，分解培養(yǎng)料能力強(qiáng)，出菇快，出菇適時，出菇多，轉(zhuǎn)潮快，產(chǎn)量高。反之，生活力差的菌株，菌絲生長緩慢，分解培養(yǎng)料能力弱，出菇遲，產(chǎn)量低。    5活力    從原種瓶(袋)中隨機(jī)挖取一塊菌種，感覺到有韌性，不松散，培養(yǎng)料呈淡黃色。將樣塊置于新的培養(yǎng)基上，在29±1下

27、培養(yǎng)，觀察菌種塊四周新菌絲萌發(fā)快慢。萌發(fā)快者可使用，恢復(fù)活力差者不宜采用。    (二)菌種質(zhì)量檢驗(yàn)方法    在生產(chǎn)中通過直接觀察和出菇試驗(yàn)，判斷菌種優(yōu)劣，確定其能否使用。    1直接觀察    不管是自己選育還是引進(jìn)的菌株，都必須仔細(xì)觀察菌株的性狀，如色澤、味道、長勢，活力恢復(fù)，生長速度及均勻度等，并確認(rèn)有無其他生物體存在。    2顯徽鏡檢查    選取小量菌絲制片，觀察菌絲有無分枝、有無細(xì)胞橫隔、有無鎖狀聯(lián)

28、合及其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征，這些均與出菇多少有關(guān)。    3菌絲生長速度測量在一般情況下，用斜面或平板培養(yǎng)菌株，測量菌絲生長速度，要求菌絲表面平坦，擴(kuò)殖均勻，菌絲前沿整齊。   4耐高溫試驗(yàn)    菌株經(jīng)斜面培養(yǎng)l周后，分出1組試管置于3033下培養(yǎng)24小時，再放回適溫下培養(yǎng)，觀察菌株的生活力和適應(yīng)環(huán)境變化的能力。    5吃料能力觀察    將菌株接人最佳原種培養(yǎng)料中，適溫培養(yǎng)1周后，觀察接種塊菌絲萌發(fā)和吃料的情況。這種方法也是選擇培養(yǎng)料配方的一種手

29、段。  6出菇試驗(yàn)    這是選擇優(yōu)良菌株最基本的方法，即菌株用于生產(chǎn)前，必須作出菇試驗(yàn)?？刹捎闷?袋)栽培的方法作出菇試驗(yàn)，以當(dāng)家菌株為對照，每個菌株栽培的瓶(袋)不少于10個，最好50個。在試驗(yàn)過程中，觀察記載某菌株的出菇期、出菇數(shù)量、菇形大小、肉質(zhì)厚薄、菌柄長短及菌蓋顏色等，最后進(jìn)行產(chǎn)量和質(zhì)量分析。    (三)母種原種質(zhì)量標(biāo)志    1母  種采用馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂(PDA)培養(yǎng)基，在斜面25培養(yǎng)1014天后進(jìn)行觀察。優(yōu)良母種的質(zhì)量標(biāo)志是：菌絲長滿斜面，略有爬壁現(xiàn)象，菌絲潔白

30、，有光澤，粗壯，分枝多，生長濃密，呈絨毛狀，平坦，緊貼管壁；培養(yǎng)基含水量適宜，不干縮，不黃化；轉(zhuǎn)接到新培養(yǎng)基上，萌發(fā)吃料快，長勢又快又旺。早熟菌株存放時間長會形成原基，因此必須掌握適齡使用，避免原基形成。   2原  種優(yōu)良原種的質(zhì)量標(biāo)志是：菌絲長滿瓶后，菌絲潔白，粗壯濃密，生長均勻，有光澤，香味濃郁；培養(yǎng)3545天后，表面菌絲(即絨毛菌絲)生長旺盛，菌絲分泌棕褐色水珠，培養(yǎng)料變?yōu)榈S色，且不松散，有一定彈性，菌絲聚集成白色小棉球，在此以前使用最好。如果菌絲與瓶壁脫離、萎縮，產(chǎn)生較厚的褐色菌膜，說明菌種已老化，要盡快使用，并去掉老化膜，取用中間菌種塊。如

31、木屑培養(yǎng)料未變黃，說明培養(yǎng)時間短，可繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，爾后再使用。   二、菌種退化現(xiàn)象及預(yù)防    (一)菌株退化現(xiàn)象    在生物的進(jìn)化過程中，遺傳性變異是絕對的，而穩(wěn)定性卻是相對的；退化性變異是大量的，而進(jìn)化性變異卻是個別的。因此，優(yōu)良菌株種性不是永恒的，而是變化的。    1現(xiàn)  象    在菌株用于生產(chǎn)及保藏過程中，常常出現(xiàn)菌株漸漸喪失原來的生活力和豐產(chǎn)性狀，如長勢差了、出菇遲了、產(chǎn)量低了、質(zhì)量劣了等現(xiàn)象，這通?？梢哉J(rèn)為是菌株退化了。具體地說，菌株退化的主要表現(xiàn)是：菌絲生長速度慢，在培養(yǎng)基上出現(xiàn)白色濃