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文檔簡介
1、 為什么要學(xué)習(xí)為什么要學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)? 細(xì)胞細(xì)胞和你我有什么關(guān)系?和你我有什么關(guān)系?Introduction aux cellulesIntroduction a la biologie moleculaire de la cellule大千世界大千世界生生不息生生不息你、我來自哪里?存在于胎兒體內(nèi)的幾種已分化細(xì)胞存在于胎兒體內(nèi)的幾種已分化細(xì)胞 生物體由細(xì)胞組成生物體由細(xì)胞組成(人體:200多種類型、總數(shù)1014細(xì)胞)Les cellulesUn organism生命源于一個細(xì)胞生命源于一個細(xì)胞(受精卵)電影Une celluleUn organism細(xì)胞與組織和系統(tǒng)的關(guān)系細(xì)
2、胞與組織和系統(tǒng)的關(guān)系系統(tǒng):呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)器官:支氣管支氣管組織:上皮組織上皮組織細(xì)胞:柱狀細(xì)胞柱狀細(xì)胞杯狀細(xì)胞杯狀細(xì)胞Cellule Tissue Organe System細(xì)胞細(xì)胞生物體結(jié)構(gòu)和功能生物體結(jié)構(gòu)和功能 的基本單位的基本單位生命活動的基本單位生命活動的基本單位CellulesLunite structurale et fonctionnele 第一章第一章 細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞和細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞和細(xì)胞生物學(xué)第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)胞的進(jìn)化細(xì)胞的進(jìn)化第三節(jié)第三節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞和細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞和細(xì)胞生物學(xué) 細(xì)胞細(xì)胞 細(xì)
3、胞學(xué)說、細(xì)胞學(xué)和分子細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞學(xué)說、細(xì)胞學(xué)和分子細(xì)胞生物學(xué) 醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞(dcouverte de la cellule):Hook用顯微鏡發(fā)現(xiàn)植物細(xì)胞(用顯微鏡發(fā)現(xiàn)植物細(xì)胞(1665年)年)Leeuwenhoek用顯微鏡觀察人精子用顯微鏡觀察人精子(1677年年)手持顯微鏡的手持顯微鏡的Leeuwenhoek Hooke創(chuàng)制的顯微鏡創(chuàng)制的顯微鏡Hooke所見的軟木結(jié)所見的軟木結(jié)構(gòu)被命名為構(gòu)被命名為“ cell”Leeuwnhoek所見的所見的畸形精子畸形精子(17世紀(jì))世紀(jì))細(xì)胞學(xué)說細(xì)胞學(xué)說 (thorie cellulaire):一切植物、動物都是由細(xì)胞
4、組成的一切植物、動物都是由細(xì)胞組成的(19世紀(jì)中葉,世紀(jì)中葉,Schleiden&Schwann)1919世紀(jì)自然科學(xué)三大發(fā)現(xiàn)世紀(jì)自然科學(xué)三大發(fā)現(xiàn)細(xì)胞學(xué)說、能量守恒定律和進(jìn)化論細(xì)胞學(xué)說、能量守恒定律和進(jìn)化論“ 怪物湯怪物湯”用顯微鏡觀察自然在十九世紀(jì)英國倫敦引起轟動用顯微鏡觀察自然在十九世紀(jì)英國倫敦引起轟動細(xì)胞學(xué)細(xì)胞學(xué) (cytologie): 對細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)觀察和化學(xué)成分分析對細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)觀察和化學(xué)成分分析(直至直至20世紀(jì)中葉世紀(jì)中葉)細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué) (biologie cellulaire): 從細(xì)胞、細(xì)胞器和分子水平研究從細(xì)胞、細(xì)胞器和分子水平研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和活動以及
5、生命現(xiàn)象細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和活動以及生命現(xiàn)象及其規(guī)律及其規(guī)律(分子細(xì)胞生物學(xué)分子細(xì)胞生物學(xué)biologie cellulaire molculaire)細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)電子顯微鏡:電子顯微鏡:使我們看到使我們看到細(xì)胞器細(xì)胞器細(xì)胞模式圖: 基于對細(xì)胞器的認(rèn)識分子生物學(xué):分子生物學(xué):把我們對細(xì)胞的認(rèn)識引入把我們對細(xì)胞的認(rèn)識引入新境界新境界Watson 和和Crick 與他與他們揭示的們揭示的DNA雙螺旋雙螺旋結(jié)構(gòu)模型結(jié)構(gòu)模型(1953年)年)Flanklin從從DNA的的X衍射圖像衍射圖像得出平行螺旋結(jié)構(gòu)的最早證據(jù)得出平行螺旋結(jié)構(gòu)的最早證據(jù)大分子、細(xì)胞器和細(xì)胞關(guān)系模式圖:基于對細(xì)胞器化
6、學(xué)成分和結(jié)構(gòu)的認(rèn)識小腸絨毛:從從細(xì)細(xì)胞胞到到分分子子對機(jī)體組織的再認(rèn)識對機(jī)體組織的再認(rèn)識細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)Biologie Cellulaire現(xiàn)代生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科現(xiàn)代生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)Biologie cellulaire mdicale與醫(yī)學(xué)密切相關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)密切相關(guān)的細(xì)胞生物學(xué) 以人體為主要研究對象,關(guān)注與生理以人體為主要研究對象,關(guān)注與生理 和病理現(xiàn)象相關(guān)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和和病理現(xiàn)象相關(guān)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和 細(xì)胞活動細(xì)胞活動細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能、膜受體和離子通道細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能、膜受體和離子通道細(xì)胞器和細(xì)胞骨架系統(tǒng)結(jié)
7、構(gòu)與功能細(xì)胞器和細(xì)胞骨架系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能細(xì)胞核、染色體及其基因表達(dá)與調(diào)控細(xì)胞核、染色體及其基因表達(dá)與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、衰老、死亡及其調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、衰老、死亡及其調(diào)控細(xì)胞信號傳導(dǎo)細(xì)胞信號傳導(dǎo)細(xì)胞識別和通訊細(xì)胞識別和通訊醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué) 研究范圍:研究范圍:第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)胞的進(jìn)化細(xì)胞的進(jìn)化 LLvolution de la cellule一、從分子到原始細(xì)胞一、從分子到原始細(xì)胞二、從原核細(xì)胞到真核細(xì)胞二、從原核細(xì)胞到真核細(xì)胞三、從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體三、從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體從分子到原始細(xì)胞從分子到原始細(xì)胞:化學(xué)的進(jìn)化化學(xué)的進(jìn)化(遠(yuǎn)古)(遠(yuǎn)古):元素 C, H, O, N,
8、 S, P 簡單化合物 CH4, CO2, H2O, H2S, H3PO4, NH3四大類有機(jī)物 氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸多聚物 多肽、多核苷酸、多糖、脂類遺傳信息的形成、傳遞和選擇遺傳信息的形成、傳遞和選擇(40億年前億年前) :RNA自身復(fù)制、形成其他RNA、形成對應(yīng)于氨基酸的RNA從分子到原始細(xì)胞從分子到原始細(xì)胞:Les molecules la cellule primaire原始細(xì)胞的誕生:膜的出現(xiàn)為標(biāo)志原始細(xì)胞的誕生:膜的出現(xiàn)為標(biāo)志膜包圍有復(fù)制能力的RNA及其指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)原始細(xì)胞進(jìn)化的里程碑:原始細(xì)胞進(jìn)化的里程碑:DNA的出現(xiàn)的出現(xiàn)DNA成為遺傳物質(zhì)的儲存形式RNA成為DNA
9、與蛋白質(zhì)之間的聯(lián)系紐帶從原核細(xì)胞到真核細(xì)胞從原核細(xì)胞到真核細(xì)胞: 3535億年前,原核細(xì)胞出現(xiàn)億年前,原核細(xì)胞出現(xiàn) 1515億年前,真核細(xì)胞出現(xiàn)億年前,真核細(xì)胞出現(xiàn) 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的主要區(qū)別:原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的主要區(qū)別: 原核細(xì)胞原核細(xì)胞 真核細(xì)胞真核細(xì)胞 大小大小 110m 10100m 細(xì)胞核細(xì)胞核 無 有 細(xì)胞器細(xì)胞器 無或極少 有 細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂 出芽或無絲分裂 有絲分裂、減數(shù)分裂 分布分布 細(xì)菌、支原體、 立克次氏體 原蟲、真菌、植物、動物(人類) procaryoteseucaryotes根本區(qū)別:根本區(qū)別:區(qū)室化區(qū)室化 compartimentage原核細(xì)胞原核細(xì)胞 pr
10、ocaryotes真核細(xì)胞真核細(xì)胞 eucaryotes從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體:單細(xì)胞生物:35億年前多細(xì)胞生物:10億年前多細(xì)胞生物基本特點(diǎn):多細(xì)胞生物基本特點(diǎn):1、細(xì)胞的特化與分工2、依靠細(xì)胞之間通訊互相協(xié)調(diào)從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體從單細(xì)胞生物到多細(xì)胞機(jī)體:細(xì)胞的特化與分工:細(xì)胞的特化與分工:成為下一代機(jī)體起源: 生殖細(xì)胞(cellules germinales)其他: 體細(xì)胞(cellules somatiques)多種細(xì)胞一起組成組織和系統(tǒng):多種細(xì)胞一起組成組織和系統(tǒng):(tissue et systme)如上皮組織、內(nèi)分泌系統(tǒng)精細(xì)胞卵細(xì)胞各種體細(xì)胞: 如上皮細(xì)
11、胞、內(nèi)分泌細(xì)胞第三節(jié)第三節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一、一、細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在發(fā)展歷史上有細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在發(fā)展歷史上有 著密切的關(guān)聯(lián)著密切的關(guān)聯(lián)二、二、 從細(xì)胞的變化中尋找疾病原因從細(xì)胞的變化中尋找疾病原因三、三、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和 醫(yī)療實(shí)踐醫(yī)療實(shí)踐細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展關(guān)系密切細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展關(guān)系密切:1. 細(xì)胞生物學(xué)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要理論基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要理論基礎(chǔ) 19世紀(jì),細(xì)胞病理學(xué)與細(xì)胞學(xué)一同誕生, 成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要理論基礎(chǔ) 20世紀(jì),分子細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展直接促進(jìn) 醫(yī)學(xué)的發(fā)展 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨
12、床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué) 21世紀(jì) !細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展關(guān)系密切細(xì)胞生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展關(guān)系密切:2. 醫(yī)學(xué)對細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展起著推動作用醫(yī)學(xué)對細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展起著推動作用 醫(yī)學(xué)對細(xì)胞生物學(xué)研究提出了無窮的問題, 同時為細(xì)胞生物學(xué)研究提供了無數(shù)的材料 例:1) 細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選理論細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選理論/ 遺傳性遺傳性M-6-P受體缺陷癥受體缺陷癥2) 受體介導(dǎo)胞吞理論受體介導(dǎo)胞吞理論/ 遺傳性高膽固醇血癥遺傳性高膽固醇血癥高爾基體功能之一:高爾基體功能之一:分選分選溶酶體溶酶體分泌小泡分泌小泡蛋白質(zhì)怎樣被正確地定向運(yùn)輸呢?M-6-P受體保證受體保證溶酶體溶酶體酶蛋白的正確定向運(yùn)輸酶蛋白的正確定向運(yùn)輸
13、溶酶體酶溶酶體酶M-6-P受體受體 I-I-型細(xì)胞病型細(xì)胞病 是一種特殊的遺傳性溶酶體病是一種特殊的遺傳性溶酶體病 病人的成纖維細(xì)胞中幾乎所有的溶酶體酶病人的成纖維細(xì)胞中幾乎所有的溶酶體酶都不存在,這些酶卻出現(xiàn)在血液中都不存在,這些酶卻出現(xiàn)在血液中 由于病人先天性缺乏由于病人先天性缺乏N-N-乙酰氨基葡萄糖磷乙酰氨基葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移酶酸轉(zhuǎn)移酶,使溶酶體酶到達(dá)高爾基體后不能被使溶酶體酶到達(dá)高爾基體后不能被加上分選信號加上分選信號M-6-PM-6-P,結(jié)果溶酶體酶不能被受,結(jié)果溶酶體酶不能被受體識別而分選進(jìn)入溶酶體,體識別而分選進(jìn)入溶酶體,而被錯誤地分泌到而被錯誤地分泌到細(xì)胞外進(jìn)入血液。細(xì)胞外進(jìn)入血
14、液。受體介導(dǎo)的胞吞受體介導(dǎo)的胞吞(LDLLDL)有被小泡有被小泡細(xì)胞怎樣專一攝取細(xì)胞外大分子呢?正常人正常人遺傳性遺傳性高膽固醇血癥高膽固醇血癥從細(xì)胞的變化中尋找疾病原因從細(xì)胞的變化中尋找疾病原因: 例: 糖尿病 鐮刀型紅細(xì)胞性貧血 遺傳性高膽固醇血癥 腫瘤 分子分子細(xì)胞細(xì)胞整體整體一個氨基酸差別一個氨基酸差別形態(tài)顯著異常形態(tài)顯著異常盤狀盤狀-鐮刀狀鐮刀狀貧血貧血遺傳性疾病的分子和細(xì)胞改變遺傳性疾病的分子和細(xì)胞改變back腫瘤腫瘤 腫瘤的本質(zhì):腫瘤的本質(zhì):生長失控的細(xì)胞群 腫瘤的特征:腫瘤的特征:細(xì)胞增殖過度、分化不全、 衰老及凋亡減少 癌基因和抑癌基因癌基因和抑癌基因與腫瘤的關(guān)系 誘導(dǎo)分化誘
15、導(dǎo)分化在臨床治療腫瘤中的應(yīng)用: 維甲酸治療白血病to細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和醫(yī)療實(shí)踐醫(yī)療實(shí)踐( (診斷和治療診斷和治療):):例:細(xì)胞移植 干細(xì)胞技術(shù) 治療性克隆組織工程學(xué) 組織工程制備的膀胱和耳朵組織工程制備的膀胱和耳朵細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系與醫(yī)學(xué)的關(guān)系操作細(xì)胞 治療疾病左左: 正常人腦產(chǎn)生多巴胺的細(xì)胞正常人腦產(chǎn)生多巴胺的細(xì)胞 數(shù)目較多數(shù)目較多右右: 巴金森氏癥患者產(chǎn)生多巴胺巴金森氏癥患者產(chǎn)生多巴胺 的細(xì)胞數(shù)目減少的細(xì)胞數(shù)目減少, 胎兒的該胎兒的該 種細(xì)胞被移植后在患者腦內(nèi)種細(xì)胞被移植后在患者腦內(nèi) 長期存活長期存活克隆羊克隆羊Dolly1
16、996Dolly1996年在年在“ “ 爸爸爸爸”WilmutWilmut手中誕生,手中誕生,20032003年患進(jìn)行性肺病被施與年患進(jìn)行性肺病被施與“ “ 安樂死安樂死”,享年,享年6 6歲歲(或(或12 12 歲歲 ?)。?)。細(xì)胞工程技術(shù)給人類帶來前所未有的希望、挑戰(zhàn)和困惑細(xì)胞工程技術(shù)給人類帶來前所未有的希望、挑戰(zhàn)和困惑治療性克隆治療性克隆細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系操作細(xì)胞 治療疾病思考題1. 原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的主要區(qū)別。2. 試尋找你生活經(jīng)歷中和周圍環(huán)境中的例子,來說明學(xué)習(xí)細(xì)胞生物學(xué)對于一個21世紀(jì)醫(yī)學(xué)生的必要性。3. 如何學(xué)習(xí)本課程。你能回答本課開頭的問題了嗎?再
17、問問你:1、我們過去和現(xiàn)在怎樣了解細(xì)胞?2、怎樣探索細(xì)胞的更多奧秘?第二章第二章 細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)Technologie 對細(xì)胞及其大分子進(jìn)行對細(xì)胞及其大分子進(jìn)行 觀察觀察 分析分析 操作操作一一. .顯微鏡技術(shù)顯微鏡技術(shù) microscopie 觀察細(xì)胞和細(xì)胞器的技術(shù)觀察細(xì)胞和細(xì)胞器的技術(shù) 1.1.光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡 microscope photonique 普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡、普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡、 相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡2.2.電子顯微鏡電子顯微鏡 microscope lectroniq
18、ue 透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡3.3.掃描探針顯微鏡掃描探針顯微鏡普通光學(xué)顯微鏡普通光學(xué)顯微鏡倒置光學(xué)顯微鏡倒置光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上的顯微操作儀基礎(chǔ)上的顯微操作儀這是什么?不同顯微鏡觀察到的細(xì)菌形態(tài)不同顯微鏡觀察到的細(xì)菌形態(tài)這是什么?細(xì)胞核內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞骨架這是什么?激光掃描共聚焦顯微鏡顯示同一細(xì)胞中的多種結(jié)構(gòu)成分激光掃描共聚焦顯微鏡顯示同一細(xì)胞中的多種結(jié)構(gòu)成分細(xì)胞核內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞骨架透射電鏡(20世紀(jì)80年代初和90年代末)這是什么?透射電鏡:顯示細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)透射電鏡:顯示細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)掃描電鏡(20世紀(jì)80年代初和90年代末)掃描電鏡:掃描電鏡:顯示細(xì)胞表面結(jié)
19、構(gòu),顯示細(xì)胞表面結(jié)構(gòu),圖像富于立體感圖像富于立體感這是什么?二二. .細(xì)胞化學(xué)技術(shù)細(xì)胞化學(xué)技術(shù) cytochimie 觀察大分子的技術(shù)觀察大分子的技術(shù)1.1.酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù) cytochimie enzymatique 是用組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)的方法證明酶的是用組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)的方法證明酶的 存在和位置的技術(shù)。存在和位置的技術(shù)。2.2.免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù) immunocytochimie 利用抗原與抗體能特異結(jié)合這一特點(diǎn),利用抗原與抗體能特異結(jié)合這一特點(diǎn), 通過特異的免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)來顯示通過特異的免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)來顯示 細(xì)胞中的特異分子。細(xì)胞中的特異分子。*酶細(xì)胞
20、化學(xué)技術(shù):定位細(xì)胞中的酶酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù):定位細(xì)胞中的酶G-6-P酶酶, 位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)CMP酶,位于溶酶體酶,位于溶酶體back免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù):定位細(xì)胞中大分子免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù):定位細(xì)胞中大分子大腸腺癌細(xì)胞呈大腸腺癌細(xì)胞呈Ki-67陽性陽性免疫熒光三標(biāo)記顯示細(xì)胞骨架成分免疫熒光三標(biāo)記顯示細(xì)胞骨架成分(綠熒光)與其他結(jié)構(gòu)的位置關(guān)系(綠熒光)與其他結(jié)構(gòu)的位置關(guān)系3.3.放射自顯影技術(shù)放射自顯影技術(shù) autoradiographie 對研究細(xì)胞器功能和蛋白質(zhì)合成加工過程對研究細(xì)胞器功能和蛋白質(zhì)合成加工過程 的超微結(jié)構(gòu)的超微結(jié)構(gòu)定位定位起到特有的作用。起到特有的作用。4.4.原位雜交技術(shù)原位雜
21、交技術(shù) hybridation in situ 此技術(shù)將分子生物學(xué)與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)結(jié)合此技術(shù)將分子生物學(xué)與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)結(jié)合 起來起來, ,以標(biāo)記好的核酸分子為探針以標(biāo)記好的核酸分子為探針, ,在組織在組織 細(xì)胞細(xì)胞原位檢測原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。特異核酸分子的技術(shù)。 DNA DNA RNADNA DNA RNADNA DNA 、 RNARNA、 RNARNA*放射自顯影技術(shù):放射自顯影技術(shù):顯示大分子代謝過程或定位顯示大分子代謝過程或定位電鏡放射自顯影:電鏡放射自顯影:巖藻糖在高爾基體的分布巖藻糖在高爾基體的分布back原位雜交:顯示核酸分子定位原位雜交:顯示核酸分子定位鼠肺纖維化模型:鼠肺
22、纖維化模型:TGF-beta 的的mRNA表達(dá)增多,表達(dá)增多,主要位于支氣管上皮細(xì)胞主要位于支氣管上皮細(xì)胞三三. .分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)(即定量細(xì)胞學(xué)技術(shù))分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)(即定量細(xì)胞學(xué)技術(shù)) - - 分析細(xì)胞及其大分子的技術(shù)分析細(xì)胞及其大分子的技術(shù) cytologie analytique 定量分析細(xì)胞各種形態(tài)參數(shù)、生物學(xué)定量分析細(xì)胞各種形態(tài)參數(shù)、生物學(xué)特征、細(xì)胞化學(xué)成分的組成和含量,以及特征、細(xì)胞化學(xué)成分的組成和含量,以及細(xì)胞的各種功能的技術(shù)。細(xì)胞的各種功能的技術(shù)。分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)可分為二個領(lǐng)域分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)可分為二個領(lǐng)域 1 1、固定式細(xì)胞分析、固定式細(xì)胞分析 2 2、流動式細(xì)胞分析、流動式細(xì)胞分
23、析1.1.固定式細(xì)胞分析固定式細(xì)胞分析( (看見形態(tài)圖像看見形態(tài)圖像) ) 常用儀器包括:常用儀器包括:顯微分光光度計(jì)顯微分光光度計(jì)圖像分析儀圖像分析儀激光共聚焦顯微鏡激光共聚焦顯微鏡 對組織細(xì)胞甚至活細(xì)胞進(jìn)行結(jié)構(gòu)和成分的對組織細(xì)胞甚至活細(xì)胞進(jìn)行結(jié)構(gòu)和成分的定定位和定量分析位和定量分析。2.2.流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù) cytomtrie en flux ( (看不見形態(tài)圖像看不見形態(tài)圖像) ) 高速度地自動分析單個細(xì)胞的多個生物學(xué)特高速度地自動分析單個細(xì)胞的多個生物學(xué)特征或多種細(xì)胞生化成分的含量,一般在征或多種細(xì)胞生化成分的含量,一般在1-21-2分鐘內(nèi)分鐘內(nèi)就能完成對細(xì)胞大群體的就能完成對細(xì)胞大群體的定量分析定量分析測定。測定。流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀四四. . 細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分的離心分離技術(shù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分的離心分離技術(shù) - - 操作并分析細(xì)胞和細(xì)胞器的技術(shù)操作并分析細(xì)胞和細(xì)胞器的技術(shù) centrifuge 破碎細(xì)胞(勻漿)破碎細(xì)胞(勻漿) 分散細(xì)胞器和顆粒成分分散細(xì)胞器和顆粒成分離心分離離心分離(差速分離、移動區(qū)帶離心、等密度離心)(差速分離、移動區(qū)帶離心、等密度離心)1.1.細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)2.2.細(xì)胞工程(細(xì)胞細(xì)胞工程(細(xì)胞融合融合、轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因、 干細(xì)胞技術(shù)等)干細(xì)胞技術(shù)等)五五
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