最新人絨毛膜促性腺激素定性檢測試劑膠體金法

1、精品文檔附件 12人絨毛膜促性腺激素定性檢測試劑 （膠體金法 ）注冊申報資料指導原則一、前言本指導原則旨在指導注冊申請人對人絨毛膜促性腺激素 （HCG ）定性 檢測試劑（膠體金法）注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部 門對注冊申報資料的技術審評提供參考。本指導原則是對人絨毛膜促性腺激素 （HCG ）定性檢測試劑 （膠體金 法）的一般要求，申請人應依據(jù)產品的具體特性確定其中內容是否適用， 若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據(jù)，并依據(jù)產品的具體特性對 注冊申報資料的內容進行充實和細化。本指導原則是對申請人和審查人員的指導性文件， 但不包括注冊審批 所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行

2、，如果有能夠滿足相關法規(guī)要 求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相 關人員應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定的， 隨 著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發(fā)展，本指導原則相關內 容也將適時進行調整。二、適用范圍精品文檔人絨毛膜促性腺激素（ human chorionic gonadotropin ， HCG ）定性 檢測試劑（膠體金法）運用雙抗體夾心免疫膠體金層析技術實現(xiàn)對尿液中 人絨毛膜促性腺激素進行體外定性檢測，不可用于滋養(yǎng)細胞腫瘤的檢測。本指導原則適用于進行首次注冊申報和相關許可事項變更的產品。三

3、、注冊申報資料要求（一）綜述資料 人絨毛膜促性腺激素（ HCG ），是由胎盤的滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖 蛋白，它是由a和B二聚體的糖蛋白組成。 其中a亞單位為垂體前葉激素 所共有；&亞單位是HCG所特異的。HCG的主要功能就是刺激黃體，有 利于雌激素和黃體酮持續(xù)分泌以促進子宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。 現(xiàn)代認為 HCG 是由滋養(yǎng)層過渡型細胞和合體細胞產生的。在妊娠的前 8 周增殖很快，以維持妊娠。在大約孕 8 周以后， HCG 逐漸下降，直到大 約 20 周達到相對穩(wěn)定。 利用 HCG 雙抗體檢測妊齡女性尿液中的 HCG 含 量，在妊娠早期可快速得知結果，是輔助診斷的有效手段。綜述資料

4、主要包括產品預期用途、 產品描述、有關生物安全性的說明、 研究結果的總結評價以及同類產品上市情況介紹等內容。應符合體外診 斷試劑注冊管理辦法（試行） （以下簡稱辦法 ）和體外診斷試劑注 冊申報資料基本要求 （國食藥監(jiān)械 2007 609 號）的相關要求。（二）產品說明書 說明書承載了產品預期用途、標本采集及處理、實驗方法、檢測結果 解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī) 生針對檢驗結果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)，因此，產品說明書是體外 診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產品說明書的格式應符合體外診 精品文檔斷試劑說明書編寫指導原則的要求，境外試劑的中文說明書除格式要求

5、外，其內容應盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準確且符合中文 表達習慣。 產品說明書的所有內容均應與申請人提交的注冊申報資料中的 相關研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規(guī)范格式對 此內容進行標注，并單獨注明文獻的相關信息。結合體外診斷試劑說明書編寫指導原則的要求，下面對人絨毛膜 促性腺激素（ HCG ）定性檢測試劑（膠體金法）說明書的重點內容進行詳 細說明，以指導注冊申報人員更合理地完成說明書編制。1. 【預期用途】應至少包括以下幾部分內容：（1）運用雙抗體夾心免疫膠體金層析技術實現(xiàn)對尿液中人絨毛膜促 性腺激素體外定性檢測的試劑。（2）與預期用途相關的臨床適應證背景情況，如

6、臨床適應證的發(fā)生 率、易感人群等，相關的臨床或實驗室診斷方法等。2. 【主要組成成分】（1）說明試劑包含組成、數(shù)量等信息。（2）建議對所包被抗體的相關信息進行簡單介紹。3. 【儲存條件及有效期】對試劑盒的效期穩(wěn)定性、 開封穩(wěn)定性、 運輸穩(wěn)定性等信息做詳細介紹。 并對開封后未使用產品允許暴露于空氣中的溫度、 濕度及期限等條件予以 明確。4. 【樣本要求】 重點明確以下內容：（1）樣本是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。（2）建議采用新鮮晨尿。（3）如不能采用新鮮樣本應注明樣本保存條件及期限。5. 【檢驗方法】 詳細說明試驗操作的各個步驟（1）實驗環(huán)境：溫、濕度條件要求。（2）試劑使用方法、注意

7、事項，試劑條（卡）開封后注意事項等。（3）明確樣本加樣時間及觀察時間。6. 【檢驗結果的解釋】可結合圖示方法說明陰性、陽性及無效結果的判讀示例。7. 【檢驗方法局限性】至少應包括以下內容（1）本試劑的檢測結果僅供參考，不得作為臨床診治的唯一依據(jù)， 對患者的臨床管理應結合其癥狀 /體征、病史、 其他實驗室檢查及治療反應 等情況綜合考慮。（2）受檢測試劑方法學的限制，實驗人員應對陰性結果給予更多的 關注，需結合其他檢測結果綜合判斷，建議對有疑問的陰性結果可采用其 他方法進行復核。（3）有關假陰性結果的可能性分析。8. 【產品性能指標】 詳述以下性能指標：（1）對相應國家參考品檢測的符合情況。（ 2

8、 ）最低檢測限（分析靈敏度） ：說明試劑的最低檢出濃度并簡單介 紹最低檢測限的確定方法。（3）重復性：對同一批次的檢測試劑進行重復檢測的檢測結果。（4）批間差：對三個批次的檢測試劑進行重復檢測的檢測結果。（ 5 ） 分析特異性 交叉反應：易產生交叉反應物質的情況。精品文檔精品文檔 干擾物質：樣本中常見干擾物質對檢測結果的影響，如乳糜尿、血 尿、膽紅素陽性、渾濁的尿液。 藥物影響：使用相關藥物對人絨毛膜促性腺激素檢測結果的影響， 如未進行相關研究也應提供相關警示說明。（6）鉤狀（ HOOK ）效應：出現(xiàn)鉤狀效應時的抗原最低濃度或經驗 證的未出現(xiàn)鉤狀效應的最高濃度值。9. 【注意事項】應至少包括以

9、下內容：（1）子宮腫瘤、葡萄胎或更年期病人，因尿中 HCG 含量較高，可 能會出現(xiàn)陽性結果。（2）如使用冰箱中冷藏保存的檢測試劑建議檢測前應從冰箱內取出， 放置到室溫再打開使用，否則會影響檢測結果。（ 3 ）有關實驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。（三）擬定產品標準及編制說明 擬定產品標準應符合體外診斷試劑注冊管理辦法 、體外診斷試劑 注冊申報資料基本要求以及 YY/T1164-2009 人絨毛膜促性腺激素 （HCG ）檢測試紙（膠體金免疫層析法） 的相關規(guī)定。并將擬申報產品 的主要原材料、生產工藝及半成品檢定等內容作為附錄附于標準正文后， 并在正文的“產品分類”項中引出該附錄內容。人絨毛

10、膜促性腺激素（HCG）定性檢測試紙的注冊檢測應主要包括以 下性能指標：外觀、寬度、移行速度、最低檢測限（分析靈敏度） 、特異 性、重復性、批間差、穩(wěn)定性等。（四）注冊檢測根據(jù)辦法要求，首次申請注冊應該在國家食品藥品監(jiān)督管理部門 認可的、 具有相應承檢范圍的醫(yī)療器械檢測機構進行三個生產批次樣品的 注冊檢測。并在注冊檢測時應采用相應的國家參考品進行。（五）主要原材料研究資料1試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細試驗資料。如 抗體為申請人自制，則應詳述抗體的名稱及生物學來源，申請人對該抗體 技術指標的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等） ，確定該抗體作為 主要原材料的依據(jù)；如抗體為申請人外

11、購，則應詳述抗體的名稱及生物學 來源，外購方名稱，提交外購方出具的抗體性能指標及檢驗證書，詳述申 請人對該抗體技術指標的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材料的 依據(jù)。2其他主要原輔料的選擇及驗證資料，如硝酸纖維素膜、膠體金、 反應緩沖液等， 申請人應詳述每一原輔料技術指標的要求以及確定該原輔 料作為主要原輔料的依據(jù)。若為外購，應詳述每一原輔料的外購方名稱并 提交外購方出具的每一原輔料性能指標及檢驗證書。3企業(yè)內部參考品的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料。（六）主要生產工藝及反應體系的研究資料1. 主要生產工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產工 藝的確定依據(jù)。2. 產品基本反應原

12、理介紹。3. 抗體包被工藝研究，申請人應考慮如包被液量、濃度、時間等指標 對產品性能的影響，通過試驗確定上述指標的最佳組合。精品文檔精品文檔4. 實驗體系反應條件確定：申請人應考慮反應時間、反應溫度、膜孔 徑大?。ɑ蛞菩兴俣龋┑葪l件對產品性能的影響，通過試驗確定上述條件 的最佳組合。5. 體系中反應時間的確定：申請人應考慮樣本加樣后觀察時間對產品 檢測結果的影響，通過實驗確定最佳的觀察時間。（七）分析性能評估資料 企業(yè)應提交原廠在產品研制階段對試劑進行的所有性能驗證的研究 資料，包括具體研究方法、內控標準、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細資料。 對于人絨毛膜促性腺激素 （HCG ）定性檢測試劑， 建議

13、著重對以下分析性 能進行研究。1. 最低檢測限（分析靈敏度）（1）最低檢測限的確定用 HCG 標準品進行檢測，應不高于 25mIU/mL 。2. 分析特異性（1）交叉反應用于人絨毛膜促性腺激素 （HCG ）定性檢測試劑交叉反應驗證的激素 種類主要考慮以下幾種：人促黃體生成素（hLH ）、人卵泡刺激素（hFSH ）和人促甲狀腺素 （hTSH）。（ 2 ）干擾物質 潛在的干擾物質主要包括：乳糜尿、血尿、膽紅素陽性、渾濁的尿液 以及相關藥物。3. 陽性/陰性參考品精品文檔企業(yè)內部陽性 /陰性參考品應參考國家參考品的項目設置。 在不低于國 家參考品要求的前提下，申請人可以結合實際情況設置合理的內部陽性

14、 / 陰性參考品。4. 鉤狀（ HOOK ）效應目前，人絨毛膜促性腺激素（ HCG ）定性檢測試劑大多采用夾心法的 原理檢測樣本，考慮到方法學的缺陷，有必要對鉤狀（ HOOK ）效應進行 考慮。建議采用高濃度的人絨毛膜促性腺激素抗原參考品進行梯度稀釋后 由低濃度至高濃度開始檢測，每個梯度的抗原稀釋液重復 3-5 份，將顯色 深度隨濃度升高反而變淺時的濃度作為出現(xiàn)鉤狀效應時人絨毛膜促性腺 激素抗原的最低濃度， 建議產品說明書上明示包被的抗體濃度和出現(xiàn)鉤狀 效應時人絨毛膜促性腺激素抗原的最低濃度。5. 重復性 檢測重復性指標時建議采用臨界值附近的樣品進行多次檢測，然后計 算同一份樣品多次檢測的結果

15、或其精確性。在分析試劑重復性時，不應使 用強陽性樣品或明顯陰性的樣品，否則無法客觀地評價其檢測效果。6. 批間差取三個批號的 HCG 試紙，每個批號抽取相同數(shù)量，按照說明書步驟 操作，對重復性進行檢測，三個批號測試條的結果應一致，顯色度均一。（八）穩(wěn)定性研究資料 穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本 的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實時穩(wěn)定性、高溫加速破壞穩(wěn)定性、運輸穩(wěn) 定性及開瓶穩(wěn)定性（如涉及）等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的 穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實 精品文檔施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結論。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少三 批

16、樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。（九）臨床試驗資料1. 研究方法 一般選擇與已上市的同類產品進行臨床研究。對比產品應選擇境內已 批準上市、臨床普遍認為質量較好的同類產品，證明本品與已上市產品等 效或優(yōu)于已上市產品。研究對象應包括兩組，一組是用對比試劑確定為陽 性的異常組，另一組是用對比試劑確定為陰性的對照組。2. 臨床研究單位的選擇（1）第二類產品申請人應當選定不少于 2 家（含 2 家）省級衛(wèi)生醫(yī) 療機構開展臨床試驗。（2）臨床機構的檢驗實驗室（簡稱實驗室）應符合醫(yī)療機構臨床 實驗室管理辦法要求；應優(yōu)先考慮經 CNAS-CL02 醫(yī)學實驗室能力認 可準則 （ISO 1518

17、9:2007） 認可或 GB17025 標準認可的實驗室。實驗室 的該項目檢測人員應具有相應資質 （項目負責人至少具有中級以上技術職 稱），對選擇對照系統(tǒng)的項目檢測具有一定經驗。（3）不同的臨床單位應使用同一批試劑進行臨床試驗，以便對數(shù)據(jù) 進行科學客觀的統(tǒng)計分析。（4）在整個實驗中，考核試劑、對比試劑、確認試驗方法都應處于 有效的質量控制下，同時按照試劑說明書的要求，定期對試驗所涉及的儀 器進行校準，以最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準確性及可重復性。（5）臨床單位應有能力提供臨床評價所需的各類樣本。3. 臨床試驗方案精品文檔精品文檔臨床試驗實施前，研究人員應從流行病學、統(tǒng)計學、臨床醫(yī)學、檢驗 醫(yī)學等多

18、方面考慮，設計科學合理的臨床研究方案。臨床研究方案應符合 倫理學的相關要求。 試驗方案中應確定嚴格的病例納入 /排除標準， 任何已 經入選的病例再被排除出臨床研究都應記錄在案并明確說明原因。 在試驗 操作過程中和判定試驗結果時應采用盲法以保證試驗結果的客觀性。 各研 究單位選用的參比試劑應完全一致，以便進行合理的統(tǒng)計學分析。另外， 考核試劑的樣本類型不應超越參比試劑對樣本類型的檢測要求， 如果選擇 了參比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應采用其他方式進行驗證。各臨床研究機構的方案設置應一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵 循預定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應在臨床研究機構的實 驗室內并由

19、本實驗室的技術人員操作完成， 申報單位的技術人員除進行必 要的技術指導外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。4. 病例選擇及樣本類型（ 1 ）臨床試驗樣本量的確定：注冊申請人（簡稱申請人）或/臨床研究者應根據(jù)產品臨床使用目的， 與該產品相關疾病的臨床發(fā)生率確定臨床 研究的樣本量。在符合指導原則有關最低樣本量要求的前提下，還應符合 統(tǒng)計學要求。 臨床研究的總樣本數(shù)至少為 200 例。 應考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應符合統(tǒng)計學及相關指導原則 的要求。 陽性樣本不少于總樣本的 30% 。包含陽性、陰性樣本，樣本數(shù)目應 盡可能原分布，盡可能收集 /獲取臨界值的樣本，并考慮弱陽性樣本。（2）

20、應明確臨床樣本的采集要求。 盡可能釆用新鮮樣品，避免貯存。 對檢測結果有明顯干擾作用的樣本 ,如乳糜尿、 血尿、 膽紅素陽性或 渾濁的尿液樣本盡量避免使用。（ 3 ）試驗方案中應確定嚴格的病例或樣本納入 /排除標準，任何已經 入選的病例或樣本再被排除出臨床研究都應記錄在案并明確說明原因。（4）統(tǒng)計學分析應分析考核試劑的敏感性、特異性、陽性預期值、陰性預期值、陽性 符合率、陰性符合率、總體符合率、考核試劑和對比試劑的一致性（如 kappa 值）。（5）結果差異樣本的驗證在數(shù)據(jù)收集過程中， 對兩種試劑檢測結果不一致的樣本， 應采用“金標 準”方法或臨床上普遍認為質量較好的第三種同類試劑進行復核，同

21、時結 合患者的臨床病情對差異原因及可能結果進行分析。（6）臨床試驗總結報告撰寫根據(jù)體外診斷試劑臨床研究技術指導原則的要求，臨床試驗報告 應該對試驗的整體設計及各個關鍵點給予清晰、完整的闡述，應該對整個 臨床試驗實施過程、結果分析、結論等進行條理分明的描述，并應包括必 要的基礎數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。 建議在臨床總結報告中對以下內容進行詳 述。臨床試驗總體設計及方案描述a. 臨床試驗的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹。b. 病例納入 /排除標準、不同年齡段人群的預期選擇例數(shù)及標準。c. 樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。d. 統(tǒng)計學方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結果的標

22、準。 具體的臨床試驗情況a. 申報試劑和參比試劑的名稱、批號、有效期等信息。b. 對各研究單位的病例數(shù)、年齡分布情況進行總合，建議以列表或圖 示方式給出具體例數(shù)及百分比。c. 質量控制，試驗人員培訓、質控品檢測情況，對檢測質控品測量值 的抽查結果評估。d. 具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存、結果不一致 樣本的校驗等。 統(tǒng)計學分析a. 數(shù)據(jù)預處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測或第三方驗證以及是否納入最終 數(shù)據(jù)統(tǒng)計、 對異常值或缺失值的處理、 研究過程中是否涉及對方案的修改。b. 定性結果的一致性分析 陽性符合率、陰性符合率、總體符合率，以交叉表的形式總結兩種試劑的定性檢測結果， 對定性結果進

23、行四格表卡方或 kappa 檢驗以驗證兩種 試劑定性結果的一致性。 討論和結論 對總體結果進行總結性描述并簡要分析試驗結果，對本次臨床研究有 無特別說明，最后得出臨床試驗結論。精品文檔精品文檔四、參考文獻：1 體外診斷試劑注冊管理辦法（試行） ，（國食藥監(jiān)械 2007229 號）， 2007 年 4 月 19 日2 體外診斷試劑臨床研究技術指導原則 ，（國食藥監(jiān)械 2007240 號）， 2007 年 4 月 28 日3 體外診斷試劑說明書編寫指導原則 ，（國食藥監(jiān)械 2007240 號）， 2007 年 4 月 28 日4 YY/T 1164-2009, 人絨毛膜促性腺激素（ HCG ）檢測

24、試紙（膠體金免 疫層析法） s. 北京 :中國標準出版社， 2011.5 彭文偉 . 傳染病學 M. 北京:人民衛(wèi)生出版社 . 2001.6 劉艷芳,張勇建 ,蘇明. 臨床病毒學檢驗 M. 北京:軍事醫(yī)學科學出版社 . 2009.7 陳敬賢 . 診斷病毒學 M. 北京:人民衛(wèi)生出版社 . 2008.8 馮仁豐 . 臨床檢驗質量管理技術基礎 M. 上海:上?？茖W技術文獻出版 社. 2007.9 中國生物制品規(guī)程 M. 北京:化學工業(yè)出版社 . 2000.10 Establishing the Performance Characteristics of In Vitro DiagnosticDe

25、vices for the Detection or Detection and Differentiation of Influenza Viruses, CDRH, FDA, USA, February 15, 200811 In Vitro Diagnostic Devices to Detect Influenza A Viruses: Labeling and Regulatory Path, CDRH FDA, USA May 1, 2007.五、起草單位天津市醫(yī)療器械技術審評中心精品文檔精品文檔精品文檔人絨毛膜促性腺激素定性檢測試劑（ 膠體金法 ）注冊申報資料指導原則編制說明一、指導原則編寫