丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭抑制作用實用教案

1、一、實驗一、實驗(shyn)目的目的 學(xué)習(xí)掌握酶競爭性抑制的概念和特學(xué)習(xí)掌握酶競爭性抑制的概念和特點點 學(xué)習(xí)丙二酸對琥珀酸脫氫酶競爭性學(xué)習(xí)丙二酸對琥珀酸脫氫酶競爭性抑制抑制 實驗的設(shè)計實驗的設(shè)計(shj)思路和方法思路和方法第1頁/共10頁第一頁，共11頁。二、實驗二、實驗(shyn)原理原理 抑制劑和底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物競爭結(jié)合(jih)酶的活性中心，阻礙酶-底物復(fù)合物形成抑制程度(chngd)(chngd)取決于抑制劑與酶的相對親和力，以及抑制劑與底物濃度的相對比例（I/SI/S）第2頁/共10頁第二頁，共11頁。HOOCCH=CHCOOHFADFADH2甲烯白MBH2MBH2 （無色(

2、w (w s)s)）甲烯藍(lán)MB （藍(lán)色）在無氧條件下以甲烯藍(lán)褪色時間在無氧條件下以甲烯藍(lán)褪色時間(shjin)判判斷琥珀酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制斷琥珀酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制作用作用 丙二酸丙二酸HOOCHOOCCHCH2 2COOHCOOH琥珀酸脫氫酶琥珀酸脫氫酶第3頁/共10頁第三頁，共11頁。三、實驗三、實驗(shyn)步驟步驟. . 酶促反應(yīng)及競爭性抑制作用 取試管6 6支，按表所列步驟操作。 加液體石蠟以隔絕空氣3737水浴保溫 隨時觀察(gunch)(gunch)并記錄各管褪色時間！第4頁/共10頁第四頁，共11頁。3. 3. 實驗記錄和結(jié)果(ji gu)(ji g

3、u)分析 酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？各管的褪色(tu s)(tu s)情況有何區(qū)別？為什么？丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型及其特點是什么？本實驗中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第5頁/共10頁第五頁，共11頁。四、結(jié)果(ji (ji gu)gu)分析1 1、酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？2 2、各管的褪色情況有何區(qū)別？為什么？3 3、丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型 及其特點(tdin)(tdin)是什么？如何證明的？4 4、本實驗中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第6頁/共10頁第六頁，共11頁。五、注意事項五、注意事項加試劑時看清底物與抑制劑的濃度。加試劑時看清

4、底物與抑制劑的濃度。注意隨時觀察記錄各管褪色時間。注意隨時觀察記錄各管褪色時間。3737水浴保溫過程中，不能振搖試管，避免水浴保溫過程中，不能振搖試管，避免甲烯白重新甲烯白重新(chngxn)(chngxn)氧化變藍(lán)。氧化變藍(lán)。實驗結(jié)束后一定洗凈試管內(nèi)的液體石蠟。實驗結(jié)束后一定洗凈試管內(nèi)的液體石蠟。第7頁/共10頁第七頁，共11頁。第8頁/共10頁第八頁，共11頁。開始(kish)！第9頁/共10頁第九頁，共11頁。感謝您的觀看(gunkn)！第10頁/共10頁第十頁，共11頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)一、實驗(shyn)目的。第1頁/共10頁。抑制劑和底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物競爭結(jié)合酶的活性中心，阻礙酶-底物復(fù)合物形成。HOOCCH2CH2COOH。HOOCCH=CHCOOH。HOOCCH2COOH。I/S。1:1。本實驗(shyn)中5號、6號試管的作用是什么。4、本實驗(shyn)中5號、6號試管的作