英文文獻(xiàn)翻譯

1、TIMCFigure 1+ Typical chrotnatQran.中等分辨率制備分離的快速色譜技術(shù)W. Clark Still,* Michael K a h n , and Abhijit MitraDepartm（7 nt 0/ Chemistry, ColumbiaUn iuersity,1Veu York, Neu; York 10027ReceiLied Jan uary 26, 1978我們希望找到一種簡(jiǎn)單的吸附色譜技術(shù)用 于有機(jī)化合物的常規(guī)凈化。這種技術(shù)是適于傳 統(tǒng)的有機(jī)物大規(guī)模制備分離，該技術(shù)需使用長(zhǎng) 柱色譜法。盡管這種技術(shù)得到的效果非常好， 但是其需要消耗大量的時(shí)間，并且

2、由于頻帶拖 尾經(jīng)常出現(xiàn)低復(fù)原率。當(dāng)分離的樣本劑量大于1或者2g時(shí)，這些問(wèn)題顯得更加突出。近年來(lái)， 幾種制備系統(tǒng)已經(jīng)進(jìn)行了改進(jìn)，能將分離時(shí)間 減少到1-3h,并允許各成分的分辨率厶R（使用薄層色譜分析進(jìn)行分析）。在這些方法中，在 我們的實(shí)驗(yàn)室中，媒介壓力色譜法1和短柱色譜2法 是最成功的。最近，我們發(fā)現(xiàn)一種可以將分 離速度大幅度提升的技術(shù)，可用于反應(yīng)產(chǎn)物的 常規(guī)提純，我們將這種技術(shù)稱為急驟色譜法。雖然這種技術(shù)的分辨率只是中等（R），而且構(gòu)建這個(gè)系統(tǒng)花費(fèi)非常低，并且能在 10-15min內(nèi)分離重量在的樣本。 4急驟色譜法是以空氣壓力驅(qū)動(dòng)的混合介質(zhì)壓力以及短柱色譜法為基礎(chǔ)，專門針對(duì)快速分 離，介質(zhì)壓

3、力以及短柱色譜已經(jīng)進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化實(shí)驗(yàn)是在一組標(biāo)準(zhǔn)條件5下進(jìn)行的，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)使用苯甲醇作為樣本，放在一個(gè)20mm*5i n.的硅膠柱60內(nèi)，使用Tracor 970紫外檢測(cè)器 監(jiān)測(cè)圓柱的輸出。分辨率通過(guò)持續(xù)時(shí)間（r ）和峰寬（w,w/2 ）的比率進(jìn)行測(cè)定的（Figure 1）, 結(jié)果如圖2-4所示，圖2-4分別放映分辨率隨 著硅膠顆粒大小、洗脫液流速和樣本大小的變 化。J. Si'lira gF-l particle 對(duì)疋前I: - > r/u- IO) r/(l /29 i.a4 &F'lgure1 3. K'lUitit fiaw rate l.n rm

4、in).Flow Ccintroll*r從這些數(shù)據(jù)中間，我們可以得出許多有趣的事實(shí)。首先，我們發(fā)現(xiàn)最常使用的硅膠60的大小 70-230區(qū)間（63-200卩m）在標(biāo)準(zhǔn)條件 下產(chǎn)生的分辨率在所有被研究的數(shù)據(jù)中是最低 的。第二，在我們使用的包裝方法下，顆粒的 大小小于40卩m并不能提高分辨率。7柱效能對(duì) 洗脫率的變化是相當(dāng)敏感的，并且最好是用相 對(duì)較高的洗脫液流速。在乙酸乙酯/石油醚的混合物中（30-60 C），吸附床上的溶劑的頭應(yīng)該 以土 ./min的速度落下，這樣才能得到最佳的分 辨率。*最后，從峰值的寬度可以看出，隨著樣 本的減少，分辨率呈現(xiàn)出預(yù)期的增加。樣本的 回收率95%這項(xiàng)技術(shù)所需要的

5、設(shè)備包括一組色譜柱和 閥門流量控制器（上圖）。該色譜柱是一個(gè)擁有 一個(gè)18in.的扁平底部，配有一個(gè)聚四氟乙烯活 塞以及一個(gè) 24/40玻璃接頭的玻璃管。比起標(biāo) 準(zhǔn)的多孔圓底，沒(méi)有多孔玻璃床支持的色譜柱 通常更受歡迎，因?yàn)樗鼈冿@著地減少了死腔。 流量控制器閥是一個(gè)能精確調(diào)節(jié)洗脫率的簡(jiǎn)單 可變的液體排放裝置，由一個(gè)玻璃/聚四氟乙烯針閥（Ace Glass Co. No. 8193-04 或相同性 能的替代物）和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的24/40接頭組成。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程將在會(huì)在實(shí)驗(yàn)部分陳述。實(shí)驗(yàn)過(guò)程簡(jiǎn)單介紹如下：（1）溶劑應(yīng)該能夠提供良好的分離，并且能將所需成分提高到R=（薄.9層色譜分析，E. Merck N

6、o. 5765）。（2）需要合適參數(shù)（見(jiàn) Table I）的色譜柱，色譜柱中裝有5-6in.的40-63卩m的干燥硅膠（）。10 （3） 色譜柱內(nèi)裝滿了溶劑，內(nèi)部的壓力能迅速將硅膠中所有的空氣排空。（4）加入樣本，再用溶 劑將色譜柱注滿，在 2 in./min的流速下洗脫。洗脫色譜柱所需成分的時(shí)間一般非?？欤?-10min ）,因此我們已經(jīng)拋棄了自動(dòng)餾分收集器，取而代之的是放在架子上的40支20*150分別為和，放入5%的乙酸乙酯/石油醚中。1cola mndiameter,mm102030抽貫L0203O5U試管。小的部分通常只在洗脫早期早期進(jìn)行收 集，較大部分會(huì)從色譜分析的早期一直收集到

7、最后。通過(guò)沿著7cm*薄層色譜板的長(zhǎng)邊以5卩L 為單位進(jìn)行定點(diǎn)測(cè)量，之后再沿著側(cè)板測(cè)量， 可以方便的檢測(cè)分離組件。小樣本或者高度保 持的組件可能需要用到重定位。Figure6顯示了一個(gè)典型的分離。Tabkitypical vol ofsampleftaelricsneluant,*typi 血（皿 jmLEa£>0AmL« Typical voluni pf 號(hào)lu弟】b required for packing arid tJiiitjan.在過(guò)去的一年里，我們已經(jīng)嘗試了數(shù)以百 計(jì)的色譜柱。在任何情況下，我們已經(jīng)能夠做 到將完全分離 Rf的混合物在 15min內(nèi)完全

8、 分離，許多情況 Rf 也是可以的。在給定的色 譜柱中使用的樣本數(shù)量與它的橫截面積成正 比，Table I能作為色譜柱選擇的指南。如果分辨率要求不咼，樣本量可以大幅度增加；我們使用一個(gè) 50-mm的色譜柱來(lái)對(duì)重量 大于10g、 Rf的混合物進(jìn)行純化。甚至在直 徑大的色譜柱中，分辨率也能維持在一個(gè)能接 受的標(biāo)準(zhǔn)。比如差向異構(gòu)體的乙醇1和2的Rf 和2的混合物（4 Rf=）在直徑為40-mm的色譜 柱中能在 7min內(nèi)與65-mg混合部分（500mL 5% 的乙酸乙酯/石油醚）輕松的被分開(kāi)。如果被分離的組件在薄層色譜法中Rf小于，使用更長(zhǎng)（例如，10in.）的硅膠色譜柱或 者使用極性較小的溶劑能提

9、高分辨率?？梢允?用在薄層色譜法中 Rf=溶劑去移動(dòng)所需成分，這 樣不會(huì)大幅度提高洗脫時(shí)間。不論哪種情況， 色譜柱應(yīng)該只能輕輕地裝滿樣品，并且應(yīng)該將 流速維持在 2 in ./min 。很明顯，在乙酸乙酯/ 石油醚混合物中，低流速會(huì)造成分辨率降低?？傊斌E層析為只需要中等分辨率的混 合物制備分離提供了一個(gè)快速且便宜的常規(guī)方 法。甚至在需要高分辨率時(shí)，使用快速技術(shù)作 為初步凈化能簡(jiǎn)化高分辨率的分離，從而避免 了昂貴的高效液相色譜柱的污染。最后，我們 想要強(qiáng)調(diào)這樣一個(gè)事實(shí)，在這個(gè)方法中，使用 40-63卩m的硅膠和使用壓力（而不是真空）驅(qū) 使流率達(dá)./min對(duì)于成功分離是至關(guān)重要的。實(shí)驗(yàn)部分將色

10、譜柱和流量控制器閥進(jìn)行組裝，組裝 方式如前所述。硅膠材料選用40-63卩m（400-230 mesh）硅膠 60 （E. Merck No. 9385）。10溶劑在使用之前需要被蒸餾。薄層色譜會(huì)在玻璃支持的硅膠 60 板上進(jìn)行（厚， F-254 ）（ No. 5765）。急驟層析技術(shù)的一般過(guò)程 。首先應(yīng)該找到 一個(gè)低粘度溶劑系統(tǒng)（例如，乙酸乙酯 /30-60 C石油醚）8,這個(gè)系統(tǒng)能分離混合物并且能移 動(dòng)所需成分，使得所需成分在薄層色譜分析上 的 Rf 為。如果幾種在薄層色譜分析上非常相近 的化合物需要分開(kāi)，調(diào)整溶劑，在Rf =時(shí)使得中間點(diǎn)在所有混合物之間。如果這些化合物是廣 泛分散的，將活動(dòng)

11、較小成分的Rf 調(diào)整到。在選好合適的溶劑之后，需要挑選合適直徑的色譜 柱（在文中，Table I ）,并將一個(gè)玻璃棉制 成的小塞子放置在試管中，用于連接活塞和色 譜柱的體部（上面圖中的 A）。兩個(gè)可伸縮的玻 璃管（ 6 和 8 mm . ）使得玻璃棉塞子的位置易 于調(diào)整。接下來(lái)，一個(gè)由 50-100 mesh 沙組成 的 1/8 in. 的光滑層覆蓋在色譜柱的底部，將 40-63卩m的干硅膠倒入色譜柱單獨(dú)的部分內(nèi)， 深度為 . 隨著活塞打開(kāi)，將色譜柱輕輕地垂直于 桌面拔出，直至包裹凝膠。之后將一個(gè) 1/8 in. 的沙層干凝膠床的平面頂部，夾緊色譜柱以便 加壓填充和包裹。將之前選擇的溶劑在從沙

12、的 上面小心的倒入并完全填充色譜柱。流量控制 器的調(diào)流調(diào)壓閥（B） 直是打開(kāi)的，流量控制 器是緊密安裝在色譜柱的頂部，并由強(qiáng)大的橡 皮筋加固?？刂屏髁靠刂破鞯闹饕諝饩€閥是輕微打開(kāi)的，一個(gè)手指必須嚴(yán)格地放置在泄放孔（C）。硅膠的頂部必須持續(xù)保持濕潤(rùn)。接下 來(lái)用移液管將樣品（在洗脫液中為 20-25%的溶 液）從吸附床的頂部加入，流控制器暫時(shí)地放 在色譜柱的頂部，以便驅(qū)動(dòng)所有的樣品進(jìn)入硅 膠。 11通常用包裹色譜柱的溶劑來(lái)洗滌色譜柱。 色譜柱壁用幾毫升新鮮洗滌液進(jìn)行沖洗，沖洗 之后的液體像之前一樣被推入凝膠中，色譜柱 內(nèi)完全被填滿了洗滌液以便不能擾亂吸附床。 流量控制器最終被固定在色譜柱上，調(diào)整色譜 柱中溶劑的表面以 in./min 的速度下滑。顆粒 直徑在40-63卩m時(shí)，對(duì)于大多數(shù)低粘度的溶劑 這似乎是流速的最佳值。所有的溶劑用完之 前，部分一直在被收集（溶劑的量和分?jǐn)?shù)的大 小參考Table I）。最好保持色譜柱濕潤(rùn)，因?yàn)?進(jìn)一步的洗滌偶爾是有必要的。純化組件和之 前描述一樣。如果嚴(yán)格遵守之前的介紹的操作 流程，幾乎不可能分離失敗。雖然我們一般為每次分離包裝新鮮色譜 柱，但是大規(guī)模分離的花費(fèi)使得它有利于重用 大直徑色譜柱。色譜柱的重復(fù)使用受第一次沖 洗的影響（速率 =2in./min ），第一次沖洗首先 用大