實(shí)驗(yàn)三食用油脂的衛(wèi)生檢驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)三食用油脂的衛(wèi)生檢驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜び椭男l(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，掌握反映油脂酸敗的指標(biāo)。2.實(shí)驗(yàn)原理通過查詢文獻(xiàn)，制定食品油脂的衛(wèi)生檢驗(yàn)測(cè)定方案。3.主要實(shí)驗(yàn)儀器及材料燒杯、恒溫水浴鍋、試管、載玻片、壓舌板。4.掌握要點(diǎn)注意檢驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)。5.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1）酸價(jià)（SN/T 0801.19-1999 進(jìn)出口動(dòng)植物油脂 游離脂肪酸和酸價(jià)檢驗(yàn)方法）(1) 原理：植物油中的游離脂肪酸用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，每克植物油消耗氫氧化鉀的毫升數(shù)，稱為酸價(jià)。(2) 試劑：乙醚乙醇混合液：按乙醚乙醇(2+1)混合。用氫氧化鉀溶液(3gL)中和至酚酞指示劑呈中性。氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(KOH)0.05mol/L。酚酞指示劑

2、：10g/L乙醇溶液。(3) 分析步驟：準(zhǔn)確稱取3.005.00g樣本，置于錐形瓶中，加入50ml中性乙醚乙醇混合液，振搖使油溶解，必要時(shí)可量熱水中，溫?zé)岽倨淙芙?。冷至室溫，加入酚酞指示?3滴，以氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.05mol/L)，滴定至初現(xiàn)微紅色，且0.5min內(nèi)不褪色為終點(diǎn)。(4)計(jì)算： X1=式中 X1：樣品的酸價(jià)； V1：樣品消耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，m1； C1：氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定的實(shí)際濃度，mol/L； m1：樣品質(zhì)量，g ； 56.11：與1.0m1氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(KOH)1.000mo1/L相當(dāng)?shù)臍溲趸浐量藬?shù)。2）過氧化值(1) 原理：油脂氧化過程中產(chǎn)生過

3、氧化物，與碘化鉀作用，生成游離碘，以硫代硫酸鈉溶液滴定，計(jì)算含量。(2) 試劑：飽和碘化鉀溶液：稱取14g碘化鉀，加10ml水溶解，必要時(shí)微熱使其溶解，冷卻后貯于棕色瓶中。 三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40m1三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混勻。硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(Na2S2O3)0.002mo1/L。淀粉指示劑(10g/L)：稱取可溶性淀粉0.5g，加少許水，調(diào)成糊狀，倒入50ml沸水中調(diào)勻，煮沸。臨用時(shí)現(xiàn)配。(3) 分析步驟：稱取2.003.00g混勻(必要時(shí)過濾)的樣品。置于250m1碘瓶中，加入30ml三氯甲烷冰乙酸混合液，使樣品完全溶解。加入1.00ml飽和碘化鉀溶液，緊密塞好瓶蓋

4、，并輕輕振搖0.5min，然后在暗處放置3min。取出加100ml水，搖勻，立即用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.002mol/L)滴定，至淡黃色時(shí)，加1m1淀粉指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失為終點(diǎn)，取相同量三氯甲烷冰乙酸混合液、碘化鉀溶液、水，按同一方法，作試劑空白實(shí)驗(yàn)。(4) 計(jì)算： X2= X3= X2×78.8式中 X2：樣品的過氧化值，g100g；X3：樣品的過氧化值，meq/kg； V2：樣品消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，m1； V3：試劑空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，m1； C2：硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；m2：樣品質(zhì)量，g； 0.1269：與1.00m

5、1硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(Na2S2O3)1.000mol/L相當(dāng)?shù)牡獾馁|(zhì)量，g； 78.8：換算因子。GB/T 5538-2005 動(dòng)植物油脂 過氧化值的測(cè)定所用單位為m mol/kg(meq/kg).其中m mol/kg是我國(guó)法定計(jì)量單位，meq/kg是原國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)單位。換算關(guān)系：1m mol/kg=2meq/kg;meq/kgg/100g×78.8 ;1m mol/kg=2meq/kg=2(g/100g×78.8).3）丙二醛(1) 原理：豬油受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA (硫代巴比妥酸)

6、作用生成粉紅色化合物，在538nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出豬油酸敗的程度。(2) 試劑TBA(硫代巴比妥酸) 水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA(瑞士產(chǎn)品)0.288g溶于水中，并稀釋至100ml (如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml)，相當(dāng)于0.02mol/L。三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸 (分析純) 7.5g及0.1g EDTA (乙二胺四乙酸二鈉，分析純) 用水溶解，稀釋至100ml。丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：精確稱取1,1,3,3-四乙氧基丙烷 (EMesck 97) 0.315g，溶解后稀釋至1000mI (每毫升相當(dāng)于丙二醛含量為100

7、81;g)，置冰箱保存。丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用液：精確移取上述儲(chǔ)備液10ml稀釋至100m1 (每毫升相當(dāng)于丙二醛含量為10µg)，置冰箱備用。 氯仿(分析純)(3) 儀器恒溫水浴箱離心機(jī)2000rmin 72型分光光度計(jì)100ml有蓋三角瓶25ml納氏比色管100mm×13mm試管定性濾紙(4) 操作方法 樣品處理：準(zhǔn)確稱取在70水浴上融化均勻的豬油液10g，置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入50ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)(保持豬油融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖)用雙層濾紙過濾，除去油脂、濾液，重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。 準(zhǔn)確稱取上述濾液5ml置于25ml納氏比色管內(nèi)，加入5mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管內(nèi)，加入5ml氯仿，搖勻，靜止，分層，吸出上清液于538nm波長(zhǎng)處比色(同時(shí)作空白試驗(yàn))。 (5) 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：用標(biāo)準(zhǔn)丙二醛濃度分別為lµg