臨床微生物檢驗標本的采集課件

1、臨床微生物檢驗標本的采集第第2 2章章 臨床微生物檢驗標本臨床微生物檢驗標本的采集的采集臨床微生物檢驗標本的采集第一節(jié)第一節(jié) 標本的采集和處理原則標本的采集和處理原則臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集的一般原則一、標本采集的一般原則1.早期采集早期采集2.無菌采集無菌采集3.根據目的菌的特性用不同的方法采集根據目的菌的特性用不同的方法采集4.采集適量標本采集適量標本5.安全采集安全采集臨床微生物檢驗標本的采集二、標本的處理二、標本的處理一些對環(huán)境敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血一些對環(huán)境敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應保溫并立即送檢桿菌等應保溫并立即送檢厭

2、氧性標本應放在專門的運送瓶或試管內運送，有時可直接用抽厭氧性標本應放在專門的運送瓶或試管內運送，有時可直接用抽取標本的注射器運送。取標本的注射器運送。其他所有的標本采集后最好在其他所有的標本采集后最好在2h之內送到實驗室。若不能及時送之內送到實驗室。若不能及時送檢，標本應置于一定環(huán)境中保存，如支氣管洗液、心包液、痰、檢，標本應置于一定環(huán)境中保存，如支氣管洗液、心包液、痰、尿等標本應保存在尿等標本應保存在4環(huán)境中，腦脊液等則要在環(huán)境中，腦脊液等則要在25保存。保存。 臨床微生物檢驗標本的采集臨床微生物檢驗標本的采集第二節(jié)第二節(jié) 血液血液臨床微生物檢驗標本的采集一、一、 標本采集標本采集1.皮膚消

3、毒程序皮膚消毒程序 嚴格執(zhí)行以下三步法嚴格執(zhí)行以下三步法: (1) 70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒以上。秒以上。 (2) 1%2%碘酊作用碘酊作用60秒或秒或10 %碘氟碘氟6090秒，秒， 從穿刺點向外畫圈消毒從穿刺點向外畫圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達至消毒區(qū)域直徑達3cm以上。以上。 (3) 70%酒精脫碘：對碘過敏的患者，用酒精脫碘：對碘過敏的患者，用70%酒精消酒精消 毒毒60秒，待酒精揮發(fā)干燥后采血。秒，待酒精揮發(fā)干燥后采血。臨床微生物檢驗標本的采集2.采血部位采血部位 通常采血部位為肘靜脈。通常采血部位為肘靜脈。 疑似細菌性心內膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為宜

4、。疑似細菌性心內膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為宜。 對疑為細菌性骨髓炎或傷寒患者，在病灶或者髂前（后）對疑為細菌性骨髓炎或傷寒患者，在病灶或者髂前（后）上棘處嚴格消毒后抽取骨髓上棘處嚴格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培養(yǎng)。作增菌培養(yǎng)。臨床微生物檢驗標本的采集3. 靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序 在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動，可戴乳膠手在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動，可戴乳膠手 套固定靜脈，不可接觸穿刺點。套固定靜脈，不可接觸穿刺點。(2) 用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭直接注入血培養(yǎng)用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭直接注入血培養(yǎng) 瓶，或嚴格按廠商推薦的方法采血。瓶，或

5、嚴格按廠商推薦的方法采血。(3) 血標本接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。血標本接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。 立即送檢，切勿冷藏。立即送檢，切勿冷藏。4.采血量采血量 自動化儀器要求成人采血量是自動化儀器要求成人采血量是810 ml/瓶，兒童瓶，兒童15 ml/瓶。瓶。臨床微生物檢驗標本的采集5.血培養(yǎng)次數和采血時間血培養(yǎng)次數和采血時間 只要懷疑血液細菌感染，應即刻采集。只要懷疑血液細菌感染，應即刻采集。 采血培養(yǎng)應該盡量在使用抗菌藥物之前進行，在采血培養(yǎng)應該盡量在使用抗菌藥物之前進行，在1h內采集內采集23次做血培養(yǎng)。次做血培養(yǎng)。 對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應在寒戰(zhàn)或體溫高峰到

6、來之前對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.51h 采采集血液，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后集血液，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h進行。進行。 入院前兩周內接受抗菌藥物治療的患者，連續(xù)入院前兩周內接受抗菌藥物治療的患者，連續(xù)3d，每天采，每天采2 份。份。6.標本運送標本運送 采血后應該立即送檢采血后應該立即送檢,如不能立即送檢，可室溫保存，切勿冷藏。如不能立即送檢，可室溫保存，切勿冷藏。 臨床微生物檢驗標本的采集二、血液中常見的病原體二、血液中常見的病原體 種種 類類病病 原原 菌菌革蘭陽性球菌革蘭陽性球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌

7、、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌色鏈球菌、腸球菌革蘭陽性桿菌革蘭陽性桿菌結核分枝桿菌、產單核李斯特菌、陰道加特納菌結核分枝桿菌、產單核李斯特菌、陰道加特納菌革蘭陰性球菌革蘭陰性球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌革蘭陰性桿菌革蘭陰性桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌真菌真菌念球菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌念球菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌厭氧菌擬桿菌、產氣莢膜梭

8、菌擬桿菌、產氣莢膜梭菌重點重點臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 血液感染是一種危重的全身感染，對其進行病原菌的檢驗，血液感染是一種危重的全身感染，對其進行病原菌的檢驗，提供病原學的診斷極為重要。提供病原學的診斷極為重要。 當少量細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或很少繁殖，當少量細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或很少繁殖，不引起或僅引起輕微的炎癥反應者稱為菌血癥不引起或僅引起輕微的炎癥反應者稱為菌血癥,若有全身若有全身性炎癥反應的表現稱為膿毒癥。性炎癥反應的表現稱為膿毒癥。 血液標本的細菌培養(yǎng)是診斷菌血癥的基本而重要的方法，血液標本的細菌培養(yǎng)是診斷菌血癥的基本而重要的方法，若

9、從患者血液中檢出細菌，一般視為病原菌感染，提示有若從患者血液中檢出細菌，一般視為病原菌感染，提示有菌血癥。菌血癥。臨床微生物檢驗標本的采集常見的菌血癥或膿毒癥有：常見的菌血癥或膿毒癥有： 葡萄球菌菌血癥葡萄球菌菌血癥 由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）及凝）及凝固酶陰性葡萄球菌引起的菌血癥和膿毒癥逐年增多，固酶陰性葡萄球菌引起的菌血癥和膿毒癥逐年增多，占菌血癥的占菌血癥的10%15%，臨床表現明顯，發(fā)病急，中，臨床表現明顯，發(fā)病急，中毒癥狀重。毒癥狀重。臨床微生物檢驗標本的采集 腸球菌菌血癥腸球菌菌血癥 近年來明顯增多，約占菌血癥的近年來明顯增多，約占菌血癥的1

10、0%。常見泌。常見泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并發(fā)心內尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并發(fā)心內膜炎。此菌可對多種抗生素耐藥，病情較重。膜炎。此菌可對多種抗生素耐藥，病情較重。臨床微生物檢驗標本的采集 革蘭陰性桿菌菌血癥革蘭陰性桿菌菌血癥 主要侵犯危及機體免疫功能低下的患者。?？芍饕址肝＜皺C體免疫功能低下的患者。?？梢鹈谀蛏车?、胃腸道、膽道及呼吸道感染。引起泌尿生殖道、胃腸道、膽道及呼吸道感染。臨床微生物檢驗標本的采集 厭氧菌菌血癥厭氧菌菌血癥 厭氧菌常寄居于口腔、腸道和泌尿生殖道，厭氧菌常寄居于口腔、腸道和泌尿生殖道，并引起相應部位的感染。并引起相應部位的感染。 真菌血癥真

11、菌血癥 常由條件致病性真菌引起，有假絲酵母菌、常由條件致病性真菌引起，有假絲酵母菌、曲霉菌和毛霉菌等，以白假絲酵母菌最多見，多曲霉菌和毛霉菌等，以白假絲酵母菌最多見，多數伴有細菌感染。數伴有細菌感染。臨床微生物檢驗標本的采集第三節(jié)第三節(jié) 腦脊液腦脊液臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集一、標本采集 采集腦脊液一般用腰椎穿剌術獲得，特殊情況可采用小采集腦脊液一般用腰椎穿剌術獲得，特殊情況可采用小腦延髓池或腦室穿刺術。腦延髓池或腦室穿刺術。 標本采集后要立即送檢、化驗，一般不能超過標本采集后要立即送檢、化驗，一般不能超過1小時。小時。 腰穿法無菌取腦脊液腰穿法無菌取腦脊液35ml，置無菌管內立即送

12、檢。培，置無菌管內立即送檢。培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時，應將標本養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時，應將標本置于置于35條件下保溫送檢，不可置冰箱保存。但做病毒條件下保溫送檢，不可置冰箱保存。但做病毒檢查的腦脊液標本應放置冰塊，可在檢查的腦脊液標本應放置冰塊，可在4保存保存72h。臨床微生物檢驗標本的采集二、腦脊液中常見病原體二、腦脊液中常見病原體 革蘭陽性菌革蘭陽性菌革蘭陰性菌革蘭陰性菌病毒病毒真菌及其他真菌及其他肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌腦膜炎奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌乙型腦炎病毒乙型腦炎病毒新生隱球菌新生隱球菌B群鏈球菌群鏈球菌大腸埃希菌大腸埃希菌柯薩奇病毒柯薩奇病毒A白假絲酵母菌白

13、假絲酵母菌A群鏈球菌群鏈球菌銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌柯薩奇病毒柯薩奇病毒B鉤端螺旋體鉤端螺旋體消化鏈球菌消化鏈球菌卡他布蘭漢菌卡他布蘭漢菌脊髓灰質炎病毒脊髓灰質炎病毒結核分枝桿菌結核分枝桿菌擬桿菌擬桿菌新腸道病毒新腸道病毒6871產單核細胞李斯特菌產單核細胞李斯特菌不動桿菌不動桿菌狂犬病毒狂犬病毒炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌葡萄球菌葡萄球菌肺炎克雷白桿菌肺炎克雷白桿菌流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌重點重點臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 細菌性腦膜炎：是中樞神經系統(tǒng)感染的常見類型，細菌性腦膜炎：是中樞神經系統(tǒng)感染的常見類型，其中以流行性腦脊髓膜炎為常見，有的呈暴發(fā)型，其中以流行性腦脊髓膜

14、炎為常見，有的呈暴發(fā)型，病情嚴重，病死率較高；多發(fā)年齡在病情嚴重，病死率較高；多發(fā)年齡在529歲，歲，冬春季多發(fā)，可用青霉素類、磺胺類、頭孢霉素冬春季多發(fā)，可用青霉素類、磺胺類、頭孢霉素類抗生素治療。類抗生素治療。 結核性腦膜炎最常見，近幾年呈回升趨勢，為防結核性腦膜炎最常見，近幾年呈回升趨勢，為防治重點。治重點。 臨床微生物檢驗標本的采集 真菌性腦膜炎：最常見于隱球菌腦膜炎，其他的真菌性腦膜炎：最常見于隱球菌腦膜炎，其他的真菌性腦膜炎如白假絲酵母菌、球孢子性腦膜炎真菌性腦膜炎如白假絲酵母菌、球孢子性腦膜炎日漸增多，特別是免疫功能低下和惡性疾病患者日漸增多，特別是免疫功能低下和惡性疾病患者易并

15、發(fā)，如易并發(fā)，如AIDS、惡性腫瘤，嚴重糖尿病、惡性腫瘤，嚴重糖尿病、SLE等患者易發(fā)生。等患者易發(fā)生。臨床微生物檢驗標本的采集 流行性乙型腦炎：是一種人獸共患的自然疫源性流行性乙型腦炎：是一種人獸共患的自然疫源性疾病。傳染源為患者和家禽、家畜及野生動物，疾病。傳染源為患者和家禽、家畜及野生動物，蚊蟲為傳播媒介，經蚊蟲叮咬、吸血而傳播，人蚊蟲為傳播媒介，經蚊蟲叮咬、吸血而傳播，人群對本病普遍易感，感染后多數人無癥狀而成為群對本病普遍易感，感染后多數人無癥狀而成為隱性感染。但可獲得持久免疫力，再次發(fā)病者極隱性感染。但可獲得持久免疫力，再次發(fā)病者極少見。少數患者病情嚴重，病死率高，可留有后少見。少

16、數患者病情嚴重，病死率高，可留有后遺癥。遺癥。臨床微生物檢驗標本的采集 腸道病毒對中樞神經系統(tǒng)的危害性已逐漸引起人腸道病毒對中樞神經系統(tǒng)的危害性已逐漸引起人們的關注和重視。們的關注和重視。 除原有脊髓灰質炎常見外，還可見多種病毒引起除原有脊髓灰質炎常見外，還可見多種病毒引起腦膜炎或腦炎，還不斷發(fā)現新的腸道病毒（新腸腦膜炎或腦炎，還不斷發(fā)現新的腸道病毒（新腸道病毒道病毒6871型）引起的腦膜炎及腦炎。型）引起的腦膜炎及腦炎。臨床微生物檢驗標本的采集第四節(jié)第四節(jié) 膿膿 液液臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集一、標本采集 無菌無菌N.SN.S先清洗，再采集。先清洗，再采集。 膿性標本是用針和注射器

17、抽吸采集，如果沒有得到抽吸膿性標本是用針和注射器抽吸采集，如果沒有得到抽吸物，也可以用拭子在傷口深部采集滲出物。物，也可以用拭子在傷口深部采集滲出物。 膿腫標本以無菌注射器抽取為好，也可由排液法取得。膿腫標本以無菌注射器抽取為好，也可由排液法取得。 厭氧菌感染的膿液常有腐臭應予注意。厭氧菌感染的膿液常有腐臭應予注意。 特別要注意避免正常菌群所污染以及由采集至接種前盡特別要注意避免正常菌群所污染以及由采集至接種前盡量避免接觸空氣。量避免接觸空氣。臨床微生物檢驗標本的采集二、膿液中常見病原體二、膿液中常見病原體 細菌種類細菌種類 革蘭陽性菌革蘭陽性菌 革蘭陰性菌革蘭陰性菌 球菌球菌 金黃色葡萄球菌

18、、凝固酶金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、化膿鏈球陰性葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、腸球菌、菌、肺炎鏈球菌、腸球菌、消化鏈球菌、四聯球菌消化鏈球菌、四聯球菌 肺炎克雷白桿菌、變形肺炎克雷白桿菌、變形桿菌、桿菌、 腦膜炎奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌菌 桿菌桿菌 結核分枝桿菌、非結核分結核分枝桿菌、非結核分枝桿菌、枝桿菌、 破傷風桿菌、破傷風桿菌、產氣莢膜梭菌、炭疽芽胞產氣莢膜梭菌、炭疽芽胞桿菌桿菌 大腸埃希菌、銅綠假單胞大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、擬桿菌、流感嗜血桿菌、擬桿菌、菌、 梭桿菌梭桿菌 其他其他 放線菌（衣氏放線菌、諾放線菌（衣

19、氏放線菌、諾卡菌）卡菌） 重點重點臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 由創(chuàng)傷、手術、侵入性器械操作等外科治療引起的感染最由創(chuàng)傷、手術、侵入性器械操作等外科治療引起的感染最為常見。細菌造成傷口感染一般認為需每克組織內細菌數為常見。細菌造成傷口感染一般認為需每克組織內細菌數量在量在105 106個以上。個以上。 外傷性創(chuàng)傷感染以葡萄球菌和鏈球菌多見，且易發(fā)生混合外傷性創(chuàng)傷感染以葡萄球菌和鏈球菌多見，且易發(fā)生混合感染。感染。 燒傷創(chuàng)面最常見革蘭陰性桿菌感染，如銅綠假單胞菌等，燒傷創(chuàng)面最常見革蘭陰性桿菌感染，如銅綠假單胞菌等，次為革蘭陽性球菌感染，可單獨也可混合細菌感染。次為革蘭陽性球菌

20、感染，可單獨也可混合細菌感染。臨床微生物檢驗標本的采集 急性化膿性骨關節(jié)炎常由金黃色葡萄球菌、溶血急性化膿性骨關節(jié)炎常由金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、淋病奈瑟菌、肺炎鏈球菌感染所致。性鏈球菌、淋病奈瑟菌、肺炎鏈球菌感染所致。 慢性骨髓炎常由結核分枝桿菌感染所致，葡萄球慢性骨髓炎常由結核分枝桿菌感染所致，葡萄球菌、鏈球菌也常見。菌、鏈球菌也常見。 放線菌感染可發(fā)生在免疫功能下降時或由于拔牙、放線菌感染可發(fā)生在免疫功能下降時或由于拔牙、口腔黏膜損傷時?？谇火つp傷時。臨床微生物檢驗標本的采集第五節(jié)第五節(jié) 痰液痰液臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集一、標本采集 自然咳痰法自然咳痰法 以晨痰為佳，盡

21、可能在用抗菌藥物之前采集標以晨痰為佳，盡可能在用抗菌藥物之前采集標本。用力咳出呼吸道深部的痰，將痰液直接吐入無本。用力咳出呼吸道深部的痰，將痰液直接吐入無菌、清潔、干燥、不滲漏、不吸水的廣口帶蓋的容菌、清潔、干燥、不滲漏、不吸水的廣口帶蓋的容器中，標本量應器中，標本量應1ml。要求：要求：Squamous cell10個個/低倍視野，低倍視野，WBC25/低倍視野低倍視野臨床微生物檢驗標本的采集 支氣管鏡采集法、防污染毛刷采集法、環(huán)甲膜穿刺支氣管鏡采集法、防污染毛刷采集法、環(huán)甲膜穿刺經氣管吸引法、經胸壁針穿刺吸引法和支氣管肺泡經氣管吸引法、經胸壁針穿刺吸引法和支氣管肺泡灌洗法均由臨床醫(yī)生按相應

22、操作規(guī)程采集，但必須灌洗法均由臨床醫(yī)生按相應操作規(guī)程采集，但必須注意采集標本時盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。注意采集標本時盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。臨床微生物檢驗標本的采集 小兒取痰法小兒取痰法 用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經壓用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經壓舌刺激咳痰時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送舌刺激咳痰時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。 注意：對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ缱⒁猓簩梢闪倚院粑纻魅静。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗標本時

23、必須注意生物安全防護。肺鼠疫等）患者采集檢驗標本時必須注意生物安全防護。臨床微生物檢驗標本的采集二、痰標本中常見病原體二、痰標本中常見病原體細菌細菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、A群鏈球菌、腸球菌卡他莫拉菌、腦膜炎奈瑟菌、白喉棒群鏈球菌、腸球菌卡他莫拉菌、腦膜炎奈瑟菌、白喉棒狀桿菌、類白喉棒狀桿菌、結核分枝桿菌、炭疽芽胞桿狀桿菌、類白喉棒狀桿菌、結核分枝桿菌、炭疽芽胞桿菌、流感嗜血桿菌、克雷伯桿菌、銅綠假單胞菌、大腸菌、流感嗜血桿菌、克雷伯桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、百日咳桿菌、軍團菌、支原體和衣原體等埃希菌、百日咳桿菌、軍

24、團菌、支原體和衣原體等 真菌真菌 白假絲酵母菌、隱球菌、曲霉菌和毛霉菌等白假絲酵母菌、隱球菌、曲霉菌和毛霉菌等 病毒病毒 腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨細胞病毒、單純皰疹病毒、冠狀病毒和麻疹病毒等。細胞病毒、單純皰疹病毒、冠狀病毒和麻疹病毒等。臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 下呼吸道感染是最常見的呼吸道感染癥，主要指下呼吸道感染是最常見的呼吸道感染癥，主要指肺實質性炎癥的肺炎和支氣管黏膜炎癥的支氣管肺實質性炎癥的肺炎和支氣管黏膜炎癥的支氣管炎，是我國常見病和病死率高的感染性疾病。炎，是我國常見病和病死率高的感染

25、性疾病。 痰標本的細菌學檢查對呼吸道感染的診斷有重要痰標本的細菌學檢查對呼吸道感染的診斷有重要意義。意義。 臨床微生物檢驗標本的采集病毒性肺炎病毒性肺炎真菌性肺炎真菌性肺炎支原體肺炎支原體肺炎細菌性肺炎細菌性肺炎臨床微生物檢驗標本的采集第六節(jié)第六節(jié) 糞便糞便臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集一、標本采集 用藥前自然排便，采集膿血、黏液部分用藥前自然排便，采集膿血、黏液部分23g。 外觀無異常的糞便應從糞便的表面不同部位取材。外觀無異常的糞便應從糞便的表面不同部位取材。 液體便取絮狀物液體便取絮狀物12ml,置無菌容器內送檢。置無菌容器內送檢。 如排便困難或嬰幼兒患者，可用直腸拭子法采集如排便

26、困難或嬰幼兒患者，可用直腸拭子法采集標本。標本。臨床微生物檢驗標本的采集 糞便標本送檢糞便標本送檢 對住院的腹瀉成人患者，應采集住院對住院的腹瀉成人患者，應采集住院3日內日內糞便標本送檢，標本采集后應盡快送檢，有條件糞便標本送檢，標本采集后應盡快送檢，有條件的提倡使用運送培養(yǎng)基。的提倡使用運送培養(yǎng)基。臨床微生物檢驗標本的采集 消化道潰瘍、幽門螺桿菌標本可取胃竇和胃體等消化道潰瘍、幽門螺桿菌標本可取胃竇和胃體等部位各一塊胃黏膜活檢標本，置入無菌生理鹽水部位各一塊胃黏膜活檢標本，置入無菌生理鹽水中立即送檢，或將標本放于運送培養(yǎng)基，于中立即送檢，或將標本放于運送培養(yǎng)基，于4保保存，存，24h內送檢。

27、內送檢。臨床微生物檢驗標本的采集二、糞便中常見的病原體二、糞便中常見的病原體腸毒素為主的病原菌腸毒素為主的病原菌侵襲性為主的病原侵襲性為主的病原菌菌病毒病毒 霍亂弧菌、志賀菌霍亂弧菌、志賀菌（福氏、宋內）、大腸（福氏、宋內）、大腸埃希菌（埃希菌（ETECETEC、EHECEHEC、EAECEAEC）、金黃色葡萄球）、金黃色葡萄球菌、難辨梭菌、產氣莢菌、難辨梭菌、產氣莢膜梭菌膜梭菌 沙門菌、大腸沙門菌、大腸埃希菌（埃希菌（EPECEPEC、EIECEIEC）、志賀菌）、志賀菌（鮑氏、志賀）、（鮑氏、志賀）、彎曲菌、副溶血弧彎曲菌、副溶血弧菌、小腸結腸炎耶菌、小腸結腸炎耶爾森菌、結核分枝爾森菌、結

28、核分枝桿菌、白假絲酵母桿菌、白假絲酵母菌菌 輪狀病毒、輪狀病毒、?？刹《尽？刹《尽orwolkNorwolk病毒、病毒、甲型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、腺病毒腺病毒臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 細菌性痢疾細菌性痢疾 （bacillary dysentery） 簡稱菌痢，主要是指簡稱菌痢，主要是指由志賀菌引起的腸道傳染由志賀菌引起的腸道傳染病，是腸道感染性腹瀉最病，是腸道感染性腹瀉最常見的病種。常見的病種。 細菌、真菌、病毒引起的胃細菌、真菌、病毒引起的胃腸炎腸炎 此癥最為常見，由多種此癥最為常見，由多種病原體感染所致，臨床常表病原體感染所致，臨床

29、常表現為腹瀉、嘔吐、高熱等癥現為腹瀉、嘔吐、高熱等癥狀。胃腸炎的病毒感染常見狀。胃腸炎的病毒感染常見于輪狀病毒等，常引起幼兒于輪狀病毒等，常引起幼兒腹瀉。腹瀉。臨床微生物檢驗標本的采集 細菌性食物中毒細菌性食物中毒 ?？晌＜吧?，常見于沙門菌、副溶血?？晌＜吧Ｒ娪谏抽T菌、副溶血弧菌、致病性大腸埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭弧菌、致病性大腸埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭菌、臘樣芽胞桿菌食物中毒。多發(fā)生在夏秋季，菌、臘樣芽胞桿菌食物中毒。多發(fā)生在夏秋季，以暴發(fā)和集體發(fā)病為特征，是一種嚴重的病癥。以暴發(fā)和集體發(fā)病為特征，是一種嚴重的病癥。臨床微生物檢驗標本的采集 致病性大腸埃希菌的腸道感染致病性大腸埃希菌

30、的腸道感染 可分為可分為5類，詳見類，詳見第八章。第八章。 消化性潰瘍幽門螺桿菌感染主要部位是胃及十二消化性潰瘍幽門螺桿菌感染主要部位是胃及十二指腸球部，大量研究及臨床證明胃炎、消化性潰指腸球部，大量研究及臨床證明胃炎、消化性潰瘍主要是瘍主要是HP所引起，因此消化性潰瘍經抗感染所引起，因此消化性潰瘍經抗感染治療取得很好的療效。治療取得很好的療效。 臨床微生物檢驗標本的采集第七節(jié)第七節(jié) 尿液尿液臨床微生物檢驗標本的采集一、標本采集一、標本采集 采集方法采集方法 采集清潔中段尿。采集清潔中段尿。 必要時導尿或膀胱穿刺留尿標本，但要注意導必要時導尿或膀胱穿刺留尿標本，但要注意導尿容易引起逆行性感染。

31、尿容易引起逆行性感染。臨床微生物檢驗標本的采集 采集容器的要求：潔凈、無菌、加蓋、封閉、防采集容器的要求：潔凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏、廣口、容積應滲漏、廣口、容積應 50 ml、盒蓋易于開啟，不、盒蓋易于開啟，不含防腐劑和抑菌劑。含防腐劑和抑菌劑。 標本采集后應及時送檢、及時接種，室溫下保存標本采集后應及時送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過時間不得超過2小時（夏季保存時間應適當縮短小時（夏季保存時間應適當縮短或冷藏保存），或冷藏保存），4冷藏保存時間不得超過冷藏保存時間不得超過8小時。小時。但應注意淋病奈瑟菌培養(yǎng)時標本不能冷藏保存。但應注意淋病奈瑟菌培養(yǎng)時標本不能冷藏保存。臨床微生物檢

32、驗標本的采集二、常見病原體二、常見病原體 尿液中常見病原體：尿液中常見病原體： 80%為革蘭陰性桿菌，其中以大腸埃希菌最為常見。為革蘭陰性桿菌，其中以大腸埃希菌最為常見。 20%為革蘭陽性菌，其中以腸球菌為多見。為革蘭陽性菌，其中以腸球菌為多見。臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 尿路感染尿路感染 urinary tract infection 是指大量微生物在尿路中生長繁殖而引起的尿路是指大量微生物在尿路中生長繁殖而引起的尿路炎癥。炎癥。 可分為上尿路感染（主要有腎盂腎炎）和下尿路可分為上尿路感染（主要有腎盂腎炎）和下尿路感染（主要有膀胱炎和尿道炎）。感染（主要有膀胱炎和尿道炎

33、）。 為最常見的感染性疾病，發(fā)病率約占人口的為最常見的感染性疾病，發(fā)病率約占人口的2%。多見于成年女性。多見于成年女性。臨床微生物檢驗標本的采集 尿路感染主要經尿道口上行感染所致，極少數為血行尿路感染主要經尿道口上行感染所致，極少數為血行感染。感染。 尿路感染常見腎盂腎炎（急性和慢性）、膀胱炎（急尿路感染常見腎盂腎炎（急性和慢性）、膀胱炎（急性為主）、尿道炎（細菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、性為主）、尿道炎（細菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎）、前列腺炎（慢性常見）等。非淋菌性尿道炎）、前列腺炎（慢性常見）等。 尿路感染需要明確部位和急性與慢性，主要依病原菌尿路感染需要明確部位和急性與慢性

34、，主要依病原菌檢測，還要緊密結合臨床綜合考慮做出診斷。檢測，還要緊密結合臨床綜合考慮做出診斷。臨床微生物檢驗標本的采集第八節(jié)第八節(jié) 生殖道標本生殖道標本臨床微生物檢驗標本的采集 一、標本采集一、標本采集 采集前清潔、消毒尿道口及外陰，尿道分泌物可將無菌采集前清潔、消毒尿道口及外陰，尿道分泌物可將無菌棉拭子伸入尿道棉拭子伸入尿道34cm捻轉拭子采集。捻轉拭子采集。 陰道分泌物采集時可用無菌棉拭子自陰道深部或陰道穹陰道分泌物采集時可用無菌棉拭子自陰道深部或陰道穹隆后部，宮頸隆后部，宮頸23cm處，轉動并停留處，轉動并停留1030s取分泌取分泌物。物。 淋球菌培養(yǎng)需保溫及時送檢，衣原體、支原體等培養(yǎng)

35、淋球菌培養(yǎng)需保溫及時送檢，衣原體、支原體等培養(yǎng)無法及時送檢時應無法及時送檢時應4保存。保存。臨床微生物檢驗標本的采集二、常見的病原體二、常見的病原體 生殖道標本主要用以檢查引起性傳播疾病生殖道標本主要用以檢查引起性傳播疾病（sexually transmitted disease,STD）的病原）的病原體。性傳播疾病是指以性行為為主要傳播途徑的體。性傳播疾病是指以性行為為主要傳播途徑的一組傳染病。一組傳染病。 STD有二十幾種，有二十幾種，1991年年8月我國衛(wèi)生部確認月我國衛(wèi)生部確認8種種STD為重要防治與監(jiān)測的病種為重要防治與監(jiān)測的病種臨床微生物檢驗標本的采集 8種種STD分別是：艾滋病、

36、淋病、梅毒、軟下疳、分別是：艾滋病、淋病、梅毒、軟下疳、性病淋巴肉芽腫、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、性病淋巴肉芽腫、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、生殖器皰疹。生殖器皰疹。 其病原體分別為：人類免疫缺陷病毒、淋病奈其病原體分別為：人類免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋體、杜克雷嗜血桿菌、沙眼衣瑟菌、梅毒螺旋體、杜克雷嗜血桿菌、沙眼衣原體原體L1、L2、L3血清型、支原體和衣原體、人血清型、支原體和衣原體、人類乳頭狀病毒、人類單純皰疹病毒類乳頭狀病毒、人類單純皰疹病毒2。臨床微生物檢驗標本的采集第九節(jié)第九節(jié) 厭氧培養(yǎng)標本的采集厭氧培養(yǎng)標本的采集臨床微生物檢驗標本的采集一、一、 標本采集與運送標本采集與運

37、送 標本的采集與運送是否適當，對厭氧菌培養(yǎng)能標本的采集與運送是否適當，對厭氧菌培養(yǎng)能否成功至關重要。否成功至關重要。 注意：注意： 標本不能被正常菌群所污染。標本不能被正常菌群所污染。 應盡量避免接觸空氣。應盡量避免接觸空氣。臨床微生物檢驗標本的采集 標本的采集方法標本的采集方法 一般情況下，應從無正常菌群寄居的部位采取一般情況下，應從無正常菌群寄居的部位采取標本。標本。臨床微生物檢驗標本的采集 不宜做厭氧菌培養(yǎng)不宜做厭氧菌培養(yǎng) 鼻咽拭子；齒齦拭子；痰和氣管抽取物；鼻咽拭子；齒齦拭子；痰和氣管抽取物；胃和腸道內容物、肛拭；接近皮膚和黏膜的胃和腸道內容物、肛拭；接近皮膚和黏膜的分泌物；褥瘡潰瘍及

38、黏膜層表面；排出的尿分泌物；褥瘡潰瘍及黏膜層表面；排出的尿或導尿；陰道或子宮拭子；前列腺分泌物?；驅颍魂幍阑蜃訉m拭子；前列腺分泌物。臨床微生物檢驗標本的采集 經皮膚黏膜組織采集標本時，皮膚表面需要經皮膚黏膜組織采集標本時，皮膚表面需要2%碘碘酒消毒，以防正常菌群的污染。酒消毒，以防正常菌群的污染。 采取標本時應盡量避免接觸空氣，多使用針筒抽采取標本時應盡量避免接觸空氣，多使用針筒抽取，減少標本與空氣接觸的機會。取，減少標本與空氣接觸的機會。 臨床微生物檢驗標本的采集二、臨床常見的厭氧菌二、臨床常見的厭氧菌 厭氧菌（厭氧菌（anaerobic bacteria） 是指一大群在有氧條件下不能生長

39、，必須在是指一大群在有氧條件下不能生長，必須在無氧條件下才能生長的細菌。無氧條件下才能生長的細菌。臨床微生物檢驗標本的采集 厭氧菌分為兩大類：一類是有芽胞的革蘭陽性梭厭氧菌分為兩大類：一類是有芽胞的革蘭陽性梭菌，另一類是無芽胞的革蘭陽性及革蘭陰性的桿菌，另一類是無芽胞的革蘭陽性及革蘭陰性的桿菌與球菌。菌與球菌。 根據革蘭染色性、形態(tài)、鞭毛、芽胞、莢膜和代根據革蘭染色性、形態(tài)、鞭毛、芽胞、莢膜和代謝產物等可將無芽胞厭氧菌分成謝產物等可將無芽胞厭氧菌分成40多個菌屬，多個菌屬，300多個菌種和亞種；有芽胞厭氧菌只有一個菌多個菌種和亞種；有芽胞厭氧菌只有一個菌屬，即梭菌屬，共屬，即梭菌屬，共130個

40、種。個種。臨床微生物檢驗標本的采集 重要的厭氧菌種類及其在正常人體內的分布 菌 名皮膚上呼吸道口腔腸道尿道陰道芽胞菌 革蘭陽性桿菌 梭狀芽胞桿菌屬00+無芽胞菌 革蘭陽性桿菌 丙酸桿菌屬 雙歧桿菌屬 乳桿菌屬 優(yōu)桿菌屬 放線菌屬 革蘭陰性桿菌 類桿菌屬 普雷沃菌屬 紫單胞菌屬 梭桿菌屬 革蘭陽性球菌 消化球菌屬 消化鏈球菌屬 革蘭陰性球菌 韋榮菌屬+000OO00+0+00+000+0+注. 0：無或很少； +：常有； +： 大量； ：不規(guī)則； 臨床微生物檢驗標本的采集 厭氧菌廣泛分布于自然界和人體中。除梭狀芽胞厭氧菌廣泛分布于自然界和人體中。除梭狀芽胞桿菌能以芽胞的形式在自然界中長期存活外，

41、其桿菌能以芽胞的形式在自然界中長期存活外，其他絕大多數無芽胞厭氧菌均存在于人和動物體內。他絕大多數無芽胞厭氧菌均存在于人和動物體內。 在人體正常菌群中，厭氧菌占有絕對優(yōu)勢。在人體正常菌群中，厭氧菌占有絕對優(yōu)勢。臨床微生物檢驗標本的采集三、臨床意義三、臨床意義 正常情況下，厭氧菌同需氧菌及兼性厭氧菌之間保正常情況下，厭氧菌同需氧菌及兼性厭氧菌之間保持著微生態(tài)的動態(tài)平衡。持著微生態(tài)的動態(tài)平衡。 厭氧菌代謝產生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌生長，厭氧菌代謝產生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌生長，需氧菌及兼性厭氧菌的存在為厭氧菌的生長創(chuàng)造了需氧菌及兼性厭氧菌的存在為厭氧菌的生長創(chuàng)造了條件。條件。 如長期使用廣

42、譜抗生素、激素、免疫抑制劑等，在如長期使用廣譜抗生素、激素、免疫抑制劑等，在發(fā)生菌群失調、機體免疫力下降或細菌進入非正常發(fā)生菌群失調、機體免疫力下降或細菌進入非正常寄居部位時，這些厭氧菌即可作為條件致病菌導致寄居部位時，這些厭氧菌即可作為條件致病菌導致內源性感染。內源性感染。臨床微生物檢驗標本的采集 厭氧菌分布十分廣泛，是體內正常菌群的組成成厭氧菌分布十分廣泛，是體內正常菌群的組成成員，多為條件致病菌；員，多為條件致病菌； 厭氧菌的感染遍及臨床各科，且多為混合感染；厭氧菌的感染遍及臨床各科，且多為混合感染；厭氧菌對常用的氨基糖甙類抗生素耐藥，而對甲厭氧菌對常用的氨基糖甙類抗生素耐藥，而對甲硝唑普遍敏感。硝唑普遍敏感。 臨床微生物檢驗標本的采集（一）（一） 厭氧菌感染的條件厭氧菌感染的條件 在正常情況下，人體組織的氧化還原電勢（在正常情況下，人體組織的氧化還原電勢（Eh）可阻止厭氧菌的繁殖。組織缺氧或氧化還原電勢可阻止厭氧菌的繁殖。組織缺氧或氧化還原電勢降低均可造成厭氧菌生長繁殖的適宜環(huán)境，易于降低均可造成厭氧菌生長繁殖的適宜環(huán)境，易于遭受厭氧菌感染。遭受厭氧菌感染。臨床微生物檢驗標本的采集 機體免疫功能下降，易并發(fā)厭氧菌感染。如接受機體免疫功能下降，易并發(fā)厭氧菌感染。如接受免疫抑制劑、抗代謝藥物、放射治療