師說高中全程復(fù)習構(gòu)想高考生物一輪復(fù)習說基礎(chǔ)說考點說案列說實驗說習題現(xiàn)代生物科技主題31基

1、專題一基因工程 說考綱分析考情明考向 考 綱 展 示 1.基因工程的誕生 2基因工程的原理及技術(shù) 3基因工程的應(yīng)用 4蛋白質(zhì)工程 命 題 預(yù) 測 1.基因工程的實質(zhì) 2基因工程操作的四步曲及其操作實例 3基因工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥生產(chǎn)、疾病診斷和治療中的應(yīng)用 4蛋白質(zhì)工程的一般操作過程 基礎(chǔ)梳理 一、基因工程的概念及基本工具 1概念：又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造， 然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。 二、基因工程的步驟 三、基因工程的應(yīng)用 ?抗蟲轉(zhuǎn)基因植物減輕農(nóng)藥? 對環(huán)境的污染?(1)植物基因工程?抗病轉(zhuǎn)基因植

2、物?抗逆轉(zhuǎn)基因植物?改良植物品質(zhì) 提高動物生長速度?動物基?改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)?(2)因工程?用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物?用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體 ?把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因? 表達產(chǎn)物發(fā)揮作用(3)基因治療?體外基因治療?方法?體內(nèi)基因治療? 四、蛋白質(zhì)工程 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造， 或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。 (1)蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)：蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系。

3、(2)蛋白質(zhì)工程的改造對象：改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，本質(zhì)上是改造控制該蛋白質(zhì)合成的基因的結(jié)構(gòu)。 (3)蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物：產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。 知識整合 考點一 基因工程的基本操作工具 1.與DNA分子相關(guān)的酶 (1)幾種酶的比較 (2)限制酶與DNA連接酶的關(guān)系 限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾。 DNA連接酶起作用時不需要模板。 2載體 (1)作用 作為運載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞內(nèi)。 利用它在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行大量復(fù)制。 (2)具備的條件 能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。 有多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。 具有特殊的標記基因，

4、以便進行篩選。 (3)種類 質(zhì)粒：一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細菌擬核DNA之外，能夠自我復(fù)制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。 噬菌體的衍生物。 動植物病毒。 特別提醒 一般來說， 天然載體往往不能滿足人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要， 對某些天然的載體進行人工改造。 限制酶切割位點所處的位置必須是在所需的標記基因之外， 這樣才能保證標記基因的完整性，有利于對目的基因的檢測。 跟蹤訓(xùn)練1 限制酶Mun和限制酶EcoR的識別序列及切割位點分別是C AATTG 和G AATTC 。 如圖表示四種質(zhì)粒和目的基因，其中箭頭所指部位為酶的識別位點，質(zhì)粒的陰影部分表示標記基因。 適于作為圖示目的基

5、因運載體的質(zhì)粒是( ) 解析：由圖可知，質(zhì)粒B上無標記基因，不適合作為運載體；質(zhì)粒C和D的標記基因上都有限制性內(nèi)切酶的識別位點。質(zhì)粒A有標記基因且 Mun的切點不在標記基因上。 答案：A 考點二 基因工程的基本操作程序 1.目的基因的獲取 (1)從基因文庫中獲取目的基因： 如從基因組文庫或cDNA文庫中獲取。 (2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因：利用DNA復(fù)制的原理在體外特異性的復(fù)制某DNA片段以獲得呈指數(shù)方式增加的目的基因。 (3)人工合成法： 通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。 2基因表達載體的構(gòu)建 (1)基因表達載體組成 啟動子、終止子：是基因轉(zhuǎn)錄的起點和終點，在轉(zhuǎn)錄過程中起調(diào)控作用

6、。 標記基因： 作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因， 從而將含有目的基因的細胞篩選出來， 如抗生素抗性基因。 目的基因：能控制特定性狀的外源基因。 (2)基因表達載體的構(gòu)建步驟 3將目的基因?qū)胧荏w細胞 生物植物 動物 微生物 種類 常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射技術(shù) 感受態(tài)細胞法 方法 受體體細胞 受精卵 原核細胞 細胞 將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T- DNA上農(nóng)轉(zhuǎn)化桿菌導(dǎo)入植過程 物細胞整合到受體細胞的DNA上表達 將含有目的基因的表達載體提純?nèi)÷?受精卵)顯微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動物 Ca 處理細胞感受態(tài)細胞重組表達載體DNA分子與感受態(tài)細胞混合感受態(tài)細胞吸收DNA分子 24

7、.目的基因的檢測與鑒定 特別提醒 目的基因的插入位點不是隨意的： 基因表達需要啟動子與終止子的調(diào)控， 所以目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間的部位?；蚬こ滩僮鬟^程中只有第三步(將目的基因?qū)胧荏w細胞)沒有堿基互補配對現(xiàn)象，第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得DNA，第二步存在黏性末端連接現(xiàn)象，第四步檢測存在分子水平雜交方法。 跟蹤訓(xùn)練2 浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)， 一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。 用油菜素內(nèi)酯處理后， 許多參與農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)表達和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至

8、無毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題組進一步進行了如下的實驗操作，請回答： (1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_。步驟用PCR技術(shù) 擴增 基因時 用到 的耐高溫 酶通常 是指_；步驟用到的酶有_。 (2)圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是_，在導(dǎo)入之前應(yīng)用一定濃度的_處理受體細菌。 (3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用_制成探針，檢測是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細胞篩選出來。 (4)請你為該課題命名：_。 解析：進行基因工程操作時，首先要獲取目的基因，其方法有多種：從cDNA文庫中獲取，從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或PCR合成等。在構(gòu)建基因表達

9、載體的過程中，用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。圖中的受體細胞是細胞，故用轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入基因表達載體，導(dǎo)入后，需檢驗和篩選。從圖中可以看出，最終是通過對照實驗來檢驗轉(zhuǎn)基因細菌對土壤中殘留農(nóng)藥的分解能力。 答案：(1)從cDNA文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或PCR合成(任選其中兩項即可) TaqDNA聚合酶 限制酶和DNA連接酶 (2)轉(zhuǎn)化法 氯化鈣溶液 (3)紅霉素抗性基因 紅霉素 (4)探究油菜素內(nèi)酯能否促進土壤中農(nóng)藥的分解 考點三 基因工程的應(yīng)用和蛋白質(zhì)工程 1.乳腺生物反應(yīng)器與工程菌生產(chǎn)藥物的比較 (1)概念 乳腺生物反應(yīng)器是指將外源基因在哺乳動物的乳腺中特異表達，利用

10、動物的乳腺組織生產(chǎn)藥物蛋白。 工程菌是指用基因工程的方法， 使外源基因得到高效表達的菌類細胞株系。 (2)兩者的區(qū)別 比較項目 乳腺生物反應(yīng)器 動物基因的結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu) 與人類基因的結(jié)構(gòu)基本相同 合成的藥物蛋白基因表達 與天然蛋白質(zhì)相同 受體細胞 動物的受精卵 工程菌 細菌或酵母菌等生物基因的結(jié)構(gòu)與人類基因的結(jié)構(gòu)有較大差異 細菌細胞內(nèi)沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器，產(chǎn)生的藥物蛋白可能沒有活性 微生物細胞 導(dǎo)入目的基因的方式 顯微注射法 感受態(tài)細胞法 不需嚴格滅菌， 需嚴格滅菌，嚴格控制工生產(chǎn)條件 溫度等外界條件 程菌所需的溫度、pH、營對其影響不大 養(yǎng)物質(zhì)濃度等外界條件 從動物乳汁中提藥物提取 從

11、微生物細胞中提取 取 畜牧業(yè)生產(chǎn)，加生產(chǎn)設(shè)備 工業(yè)生產(chǎn)，設(shè)備精良 提取設(shè)備 2.基因治療與基因診斷 特別提醒 并非所有個體都可作為乳腺生物反應(yīng)器： 操作成功的應(yīng)該是雌性個體，個體本身的繁殖速度較高，泌乳量、蛋白含量等都是應(yīng)該考慮的因素?；蛑委熀螅毕莼驔]有改變，基因治療是把正常基因?qū)胧荏w細胞中， 以表達正常產(chǎn)物從而治療疾病，對原來細胞中存在缺陷的基因沒有清除或改變。 3基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較 項目 蛋白質(zhì)工程 基因工程 預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計獲取目的基因構(gòu)建基預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推過因表達載體將目的基測應(yīng)有的氨基酸序列程 因?qū)胧荏w細胞目的找到對應(yīng)的脫氧核苷酸基因的檢測與鑒定 序列 區(qū)別 定

12、向改造生物的遺傳特實 定向改造或生產(chǎn)人類所性，以獲得人類所需的質(zhì) 需新型蛋白質(zhì) 生物類型或生物產(chǎn)品 結(jié) 生產(chǎn)自然界沒有的蛋白 一般是生產(chǎn)自然界已有果 質(zhì) 的蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的聯(lián)系 第二代基因工程。對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，必須通過基因修飾或基因合成實現(xiàn) 跟蹤訓(xùn)練3 胰島素可以用于治療糖尿病， 但是胰島素被注射入人體后，會堆積在皮下，要經(jīng)過較長的時間才能進入血液， 而進入血液的胰島素又容易分解，因此治療效果受到影響。下圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計的速效胰島素的生產(chǎn)過程， 請據(jù)圖回答有關(guān)問題。 (1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵，圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要

13、依據(jù)是_。 (2)圖解中從新的胰島素模型到新的胰島素基因的基本思路是什么？ (3)新的胰島素基因與運載體(質(zhì)粒)結(jié)合過程中需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶。已知限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是G GATCC。請畫出質(zhì)粒被限制性內(nèi)切酶I切割后所形成的黏性末端_。DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？_。 (4)若將含有新的胰島素基因的表達載體導(dǎo)入植物細胞中，最常用的有效做法是_。 (5)若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素，需用到的生物工程有_、_和發(fā)酵工程。 解析：(1)構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能。(2)根據(jù)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能，推測新的胰島素中氨基酸的序列， 進而

14、推斷基因中的脫氧核苷酸序列來合成新的胰島素基因。(3)限制酶識別特定的核苷酸序列，產(chǎn)生特定的黏性末端，而DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列卻沒有專一性要求。(4)植物基因工程最常用的轉(zhuǎn)化方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(5)生產(chǎn)自然界本來沒有的蛋白質(zhì)需要用到蛋白質(zhì)工程、基因工程等技術(shù)。 答案：(1)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能 (2)根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列，推測出其基因中的脫氧核苷酸序列，然后利用DNA合成儀來合成新的胰島素基因 GGATCC (3) 否 CCTAG G(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 (5)蛋白質(zhì)工程 基因工程 考向一 限制性核酸內(nèi)切酶的作用原理及應(yīng)用 限制性核酸內(nèi)切酶能將外來的DNA切斷， 對自己的

15、DNA卻無損傷。它作用的部位在DNA分子內(nèi)部特定的部位進行，切割的是雙鏈DNA分子的脫氧核苷酸鏈上的兩個磷酸二酯鍵，這些都是限制酶獨特的識別和切割特性。 例1下面是5種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖(表示剪切點，切出的斷面為黏性末端)： 限制酶1：GATC 限制酶2：CATG 限制酶3：GGATCC 限制酶4：CCGCGG 限制酶5：CCAGG 請指出下列哪項表述正確( ) A限制酶2和4識別的序列都包含4個堿基對 B限制酶3和5識別的序列都包含5個堿基對 C限制酶1和3剪出的黏性末端相同 D限制酶1和2剪出的黏性末端相同 解析 本題考查基因工程的工具限制性核酸內(nèi)切酶及學(xué)生

16、的推理能力、綜合運用知識分析解決問題的能力。限制酶2、3、4、5所識別的堿基對分別是4個、6個、6個和5個，因此A、B表達錯誤；限制酶1剪出的黏性末端是GATC CTAGCTAG ，限制酶2剪出的黏性末端是，限制酶3剪GATC G出的黏性末端是GATCC CCTAG G，其中限制酶1和3剪出的黏性末端相同，而限制酶1和2剪出的黏性末端不同，故C正確，D錯誤。 答案 C 考向二 解答基因操作程序的有關(guān)問題 一要分辨限制酶的種類及識別序列和切割位點： 在切割目的基因和載體時，一般用同一種限制酶切割，也可用不同的限制酶切割， 但兩種限制酶切割后產(chǎn)生的黏性末端中堿基要互補配對。 二要找出標記基因、目的

17、基因及其插入位點：一般來說，質(zhì)粒中至少有一個標記基因，如抗生素抗性基因。明確目的基因的插入位點是在標記基因內(nèi)部還是標記基因之外。 三要分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標記基因： 如果質(zhì)粒中有一個標記基因，插入后一般不破壞標記基因；如果質(zhì)粒中有兩個標記基因，則需看標記基因中是否有插入位點，如果某一標記基因中有插入位點， 則目的基因插入質(zhì)粒后該標記基因被破壞。 四要理清判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細胞的方法： 一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌。如果有兩種抗生素基因，還需判斷用哪一種抗生素來判斷。 例2科學(xué)家從預(yù)期人的生長激素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了雙鏈DNA片段，獲得雙

18、鏈DNA?？茖W(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組， 并成功地在大腸桿菌中得以表達。已知限制酶 的識別序列和切點是G GATCC ，限制酶的識別序列和切點是 GATC 。據(jù)圖回答： (1)構(gòu)建基因表達載體時，必須有_、目的基因、終止子以及_。 (2)為了精確地獲取圖中的目的基因，應(yīng)用_切割質(zhì)粒，用_切割目的基因。 (3)將基因表達載體導(dǎo)入細菌B之前，要將細菌B放入一定濃度的_溶液中處理，使之成為感受態(tài)的細菌。人的基因之所以能與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組并發(fā)揮其功能，是因為二者的空間結(jié)構(gòu)都是_。 (4)人體的生長激素基因能在細菌體內(nèi)成功表達是因為_。 (5)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨

19、芐青霉素的培養(yǎng)基上， 能夠生長的，說明已導(dǎo)入了_，反之則沒有導(dǎo)入。 解析 (1)構(gòu)建基因表達載體時，必須有啟動子、目的基因、終止子以及標記基因。 (2)根據(jù)圖示分析可知目的基因插在了質(zhì)粒中含抗四環(huán)素基因的部位，而該位置有限制酶和的識別位點，但限制酶會同時在Gene 和處切開，因此在構(gòu)建基因表達載體過程中， 應(yīng)用限制酶切割質(zhì)粒； 而目的基因的兩側(cè)均含有能被限制酶識別的堿基序列，所以用限制酶切割目的基因，能夠露出兩端的黏性末端。因此， 為了精確地獲取圖中的目的基因，應(yīng)分別用限制酶和限制酶切割質(zhì)粒和目的基因。 (3)將基因表達載體導(dǎo)入細菌B之前，要將細菌B放入一定濃度的CaCl2溶液中處理，使之成為

20、感受態(tài)的細菌。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組，是因為人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同。 (4)人體的生長激素基因能在細菌體內(nèi)成功表達是因為人和細菌共用一套(遺傳)密碼子。 (5)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，因為普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒中都含抗氨芐青霉素基因。 答案 (1)啟動子 標記基因 (2)限制酶 限制酶 (3)CaCl2 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu) (4)共用一套(遺傳)密碼子 (5)質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒 考點三 關(guān)注科技發(fā)展方向，解答基因工程相關(guān)綜合題 例3利用動物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動物乳腺生物反應(yīng)器技術(shù)。

21、 青島“嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制”項目生產(chǎn)的藥用蛋白具有表達效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點，可產(chǎn)生乙肝表面抗原及抗凝血酶等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類。據(jù)圖回答下列問題： (1)在基因工程中，A表示_，如果直接從蘇云金芽孢桿菌中獲得抗蟲基因， 過程使用的酶區(qū)別于其他酶的特點是_，B表示_。 (2)在研究過程中，研究人員首先從相關(guān)基因組中獲取了目的基因，并采用_技術(shù)對目的基因進行擴增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體。 在重組載體的構(gòu)建過程中需要的工具酶有_。 (3)將目的基因?qū)胧荏w細胞的過程中，在 過程中一般采用_， 在過程中一般采用_， 受體細胞一般是_。 (4)由于

22、轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中，檢測其體內(nèi)是否出現(xiàn)藥用蛋白，在分子水平上的檢測方法及結(jié)果是什么？_。 (5)要確定目的基因(抗蟲基因)導(dǎo)入棉花細胞后， 是否能穩(wěn)定遺傳并表達， 需進行檢測和鑒定，請寫出在個體水平上的鑒定過程：_。 解析 本題主要考查基因工程的工具、步驟和應(yīng)用。熟悉各個步驟是正確解答本題的關(guān)鍵?；蚬こ痰墓ぞ呙赣邢拗泼浮NA連接酶。其中限制酶具有專一性：一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列， 并在特定的位點切割DNA分子。目的基因的檢測與鑒定有四種方法：采用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因；檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；檢測目的基因是否

23、翻譯成了蛋白質(zhì)，進行個體水平的鑒定(進行抗蟲或抗病的接種實驗)。 答案 (1)目的基因 一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的位點切割DNA分子 重組DNA (2)PCR 限制酶、DNA連接酶 (3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 受精卵 (4)從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原一抗體雜交。如果出現(xiàn)雜交帶，表明乳汁中出現(xiàn)了藥用蛋白；如果不出現(xiàn)雜交帶，表明乳汁中未出現(xiàn)藥用蛋白 (5)讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子，觀察害蟲的存活情況，以確定其是否具有抗蟲性狀 課堂鞏固 浙江理綜?天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色1.?2012素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在

24、序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰。下列操作正確的是( ) A提取矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA，再擴增基因B B利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因B C利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞 D將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞 解析：可以利用mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因后再進一步擴增，A項正確。因為開藍色花的矮牽?；駼的序列是已知的， 所以該目的基因宜采用化學(xué)方法合成或用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)擴增，而不是從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取，B項錯誤目的基因必須與運載體結(jié)合后才能導(dǎo)入受體細胞，且需要DNA連接酶縫合，

25、C、D項錯誤。 答案：A 浙江理綜?將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒2.?2011pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是( ) A每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒 B每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點 C每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada D每個插入的ada至少表達一個腺苷酶脫氨酶分子 解析：將ada通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達每個大腸桿菌細胞中至少含有一個重組質(zhì)粒，且每個質(zhì)粒(重組質(zhì)粒)至少含有一個限制酶識別位點，但每個限制酶識別位點只能插入一個ada，插入的ada成功表達，說明每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子

26、。故C錯誤。 答案：C 浙江理綜?在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)3.?2011基因煙草過程中，下列操作錯誤的是( ) A用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸 B用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體 C將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體 D用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞 解析：限制性核酸內(nèi)切酶用于提取目的基因和切割載體，煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，不能用限制性核酸內(nèi)切酶切割，A項錯誤；DNA連接酶可以連接具有相同黏性末端的目的基因和載體，B項正確； 受體細胞可以是受精卵和體細胞，也可以是去除細胞壁的原生質(zhì)體，C項正確；目的基因為抗除草劑基因， 所以未成功導(dǎo)入目的基因的細胞不具有抗除草劑的能力， 篩選時應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因細胞，D項正確。 答案：A 4下列敘述符合基因工程概念的是( ) AB淋巴細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有B淋巴細胞中的抗體基因 B將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株 C用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲