食品分析實驗內(nèi)容

1、精品文檔實驗 一 儀器的認識、清點、洗滌、干燥和使用一、實驗目的1牢記和遵守化學實驗室規(guī)則、要求和安全守則。2認領、熟悉實驗常用儀器。3掌握常用玻璃儀器的洗滌和干燥方法。4. 掌握容量瓶和移液管等儀器的正確使用方法及溶液的配制方法。二、實驗步驟1認領儀器按學生 “實驗儀器配備清單”逐一認識并檢查、清點所領儀器，要求熟悉其名稱、規(guī)格、主要用途和使用注意事項。2儀器的洗滌和干燥（ 1）將一些常規(guī)儀器（試管、燒杯、錐形瓶、量筒等）先用自來水刷洗，然后用洗衣粉（去污粉）或肥皂液刷洗潔凈。用去污粉或洗衣粉刷洗儀器時， 應先用水將儀器內(nèi)外浸濕后倒出水， 再蘸取少量去污粉或洗衣粉直接刷洗， 再用水沖洗。 其

2、效果比用相應的水溶液刷 洗要好得多，容易達到清潔透明，不掛水珠的要求。（ 2）將洗凈的試管、燒杯、錐形瓶等在氣流烘干器上烘干。3儀器的正確使用及溶液的配制（ 1）用水反復練習估量液體體積的方法直到熟練掌握為止。取1 mL自來水，用小滴管滴入試管中，記錄滴數(shù)并計算一滴大約是多少毫升，記下1 mL在試管的大約位置。（2）用量筒從試劑瓶中取出5、10、20 mL溶液至50 mL燒杯中。反復練習，直至熟練。（3）粗配 0.02mol L-1 NaCl 溶液計算粗配500mL 0.02mol - L-1 NaCl溶液所需NaCl固體的質(zhì)量，粗稱所需質(zhì)量的 NaCl固體于250mL燒杯中，加入100mL水

3、，用玻璃棒攪拌使其溶解，將其轉(zhuǎn)入 500mL試劑 瓶中，再加入400mL水，搖勻即可。（ 4）將（2）配制溶液準確稀釋10 倍使用移液管移取25mL （2）配制的溶液于250mL容量瓶中，加水稀釋搖勻即可。反復練 習，直至熟練掌握容量瓶、移液管的使用。三、思考題1 常用玻璃儀器可采用哪些方法洗滌？選擇洗滌方法的原則是什么？怎樣判斷玻璃儀器是否已洗滌干凈？2 有哪些方法用于常用玻璃儀器的干燥？烤干試管時為什么要始終保持管口略向下傾斜？帶有刻度的計量儀器為什么不能用加熱的方法干燥？3取用固體和液體時，要注意什么？實驗二 分析天平稱量練習、實驗目的1 .學習分析天平的基本操作和常用稱量方法，為以后的

4、分析實驗打好基礎。2 .經(jīng)過稱量練習后，要求達到：固定質(zhì)量稱量法稱一個試樣的時間在8 min內(nèi)；遞減稱量法稱一個試樣的時間在12 min內(nèi)，傾樣次數(shù)不超過 3次，連續(xù)稱兩個試樣的時間不超過 15 min。3 .培養(yǎng)準確、整齊、簡明地記錄實驗原始數(shù)據(jù)的習慣，不可涂改數(shù)據(jù)，不可將測量數(shù) 據(jù)記錄在實驗記錄本以外的任何地方，注意有效數(shù)字。、實驗原理參見“實驗基本操作知識”部分。三、試劑與儀器1 .電子天平，臺秤，表面皿 (1個)，稱量瓶(1個)，燒杯(2個，50 mL),牛角匙。2 . NaSO (粉末)。四、實驗步驟1.遞減稱量法(差減法)稱取0.30.4 g Na 2SQ試樣兩份。(1)取兩個潔凈

5、、干燥的小燒杯，分別在分析天平上稱準至0.1 mg。記錄為m和m/。(2)取一個潔凈、干燥的稱量瓶，先在臺秤上粗稱其大致質(zhì)量然后加入約1.2 g試樣。在分析天平上準確稱量其質(zhì)量，記錄為m；估計一下樣品的體積， 轉(zhuǎn)移0.30.4 g試樣(約占試樣總體積的1/3)至第一個已知質(zhì)量的空的小燒杯中，稱量并記錄稱量瓶和剩余試樣的質(zhì)量m2。以同樣方法再轉(zhuǎn)移 0.30.4 g試樣至第二個小燒杯中，再次稱量稱量瓶的剩余量R3o(3)分別準確稱量兩個已有試樣的小燒杯，記錄其質(zhì)量為 m'和R2 o(4)參照表1的格式認真記錄實驗數(shù)據(jù)并計算實驗結(jié)果。(5)若稱量結(jié)果未達到要求，應尋找原因，再作稱量練習，并進

6、行計時，檢驗自己稱 量操作正確、熟練的程度。表1稱量練習記錄格式稱量編號Inm稱瓶+試樣/gm =m> =m> =ms =m稱出試樣/gm =詐=m空燒杯/grd =m)=m燒杯+試樣/gm '=m> =m燒杯中試樣/gm/=nk'=1 Bit 1 /mg2.固定質(zhì)量稱量法稱取0.5000g Na 2SQ試樣兩份。稱量方法如下：(1)將一潔凈干燥的表面皿放到天平秤盤上；(2)待天平示數(shù)穩(wěn)定后，按清零去皮重鍵，至天平示數(shù)為 0.0000g ;(3)用藥匙緩慢將藥品放到表面皿上，直至天平示數(shù)與需要質(zhì)量一致為止；(4)及時記錄數(shù)據(jù)。（ 5）另取一表面皿再重復上述操作

7、。五、思考題1 用分析天平稱量的方法有哪幾種？固定質(zhì)量稱量法和遞減稱量法各有何優(yōu)缺點？在什么情況下選用這兩種方法？2在實驗中記錄稱量數(shù)據(jù)應準至幾位？為什么？3使用稱量瓶時，如何操作才能保證試樣不致?lián)p失？實驗三 滴定操作練習一、實驗目的1學習并掌握滴定分析常用儀器的洗滌和正確使用方法。2通過練習滴定操作，初步掌握甲基橙、酚酞指示劑終點的確定。二、實驗原理0.1 mol L-1 HCl溶液（強酸）和 0.1 mol L1 NaOH （強堿）相互滴定時，化學計量點的 pH為7.0 ,滴定的pH突躍范圍為4.39.7 ,選取在突躍范圍內(nèi)變色的指示劑，可保證測定 有足夠的準確度。甲基橙（簡寫為MO白pH

8、變色范圍是3.1 （紅）4.4 （黃），酚酬：（簡寫為pp）的pH變色范圍是8.0 （無色）9.6 （紅）。在指示劑不變的情況下，一定濃度的HCl溶液和NaOH相互滴定時，所消耗的體積之比值VHCl/VNaO應是一定的，即使改變被滴定溶液的體積，該體積比也不變。借此，可以檢 驗滴定操作技術和判斷終點的能力。三、儀器與試劑1 .量筒（10 mL）,試劑瓶（500 mL 1000mD,燒杯（250 ml）,堿式滴定管（50 mL）, 酸式滴定管（50 mL） ，移液管（25 mL ） 。2. HCl溶液（6 mol L-1）,固體NaOH甲基橙溶液（1 g L-1）,酚酗:指示劑（2 g L-1

9、, 乙醇溶液） 。四、實驗步驟1溶液配制（1） 0.1 mol L-1 HCl溶液 用量筒量取約 8.5 mL 6 mol L-1 HCl溶液，倒入裝有約 490 mL水白1 L試劑瓶中，加水稀釋至500 mL,蓋上玻璃塞，搖勻。（2） 0.1 mol L-1 NaOHB液 稱取NaOH固體2 g于250 mL燒杯中，加入蒸儲水使之溶解，稍冷后轉(zhuǎn)入試劑瓶中，加水稀至500 mL ，用橡皮塞塞好瓶口，充分搖勻。2酸堿溶液的相互滴定（1）用0.1 mol L-1 NaOH容液潤洗堿式滴定管 23次，每次用510 mL溶液潤洗。 然后將NaOH倒入堿式滴定管中，排出堿管尖嘴的氣泡，將滴定管液面調(diào)節(jié)至

10、 0.00刻度。（2）用0.1 mol L-1鹽酸溶液潤洗酸式滴定管23次，每次用510 mL溶液，然后將鹽酸溶液倒入滴定管中，排出酸管尖嘴的氣泡，將液面調(diào)節(jié)到 0.00 刻度。（ 3）在 250 mL 錐瓶中加入約 20 mL NaOH 溶液， 2 滴甲基橙指示劑，用酸管中的 HCl 溶液進行滴定操作練習。練習過程中，可以不斷補充NaO書口 HCl溶液，反復進行，直至操作熟練后，再進行（4） 、 （ 5） 、 （ 6 ）的實驗步驟。3 歡迎下載 。精品文檔(4)從堿管放出體積在 2025 mL范圍內(nèi)的NaOH§液于錐形瓶中，控制放液速率為每 秒約34滴，加入2滴甲基橙指示劑，用0.

11、1 mol L-1 HCl溶液滴定至溶液由黃色變?yōu)槌壬?記下讀數(shù)。平行滴定三份。數(shù)據(jù)按下列表格記錄。計算體積比Vhci /VNaoH要求相對偏差在±0.3 %以內(nèi)。(5)用移液管吸取 25.00 mL濃度為0.1 mol L-1的HCl溶液于250 mL錐瓶中，力口 23 滴酚配指示劑，用 0.1 mol L-1 NaOH滴定至溶液呈微紅色，靜置30s不褪色即為終點。平行測定三份，要求三次之間所消耗NaOHm夜的體積的最大差值不超過± 0.04 mL。3.數(shù)據(jù)記錄與處理(1) HCl溶液?定NaOHm (指示劑：甲基橙)滴定序號記錄項目InmVlaOH / mLVhci

12、/ mLVdCl / V NaOH平均值 Vhci / V NaOH相對偏差/%相對平均偏差/%(2) NaOHm定HCl溶液(指示劑：酚的滴定序號記錄項目InmVhci / mLVlaOH / mLn次間VNaOH最大絕又差值/mL五、思考題1.配制NaOH§液時，應選用何種天平稱取試劑？為什么？2.能否采用直接法配制準確濃度的HCl和NaOH§液？為什么？3.在滴定分析實驗中，為何要用滴定劑潤洗滴定管、用待移取的溶液潤洗移液管？錐形瓶是否也要用 滴定劑潤洗？為什么？4. HCl與NaOHS應生成NaCl和水，為什么用 HCl滴定NaOH寸以甲基橙作為指示劑，而用 NaO

13、HW定 HCl溶液時使用酚酗(或其它適當?shù)闹甘緞?？實驗四容量儀器的校準一、實驗目的1. 了解容量儀器校準的意義和方法。2.初步掌握稱量法和相對校準法分別校準滴定管、容量瓶和移液管。二、實驗原理_ 。4歡迎下載精品文檔滴定管、移液管和容量瓶是實驗中常用的玻璃量器，它們的準確度是實驗測定結(jié)果準確程度的前提，國家對這些量器作了A、B級標準規(guī)定（參考§4.8）。對準確度要求較高的分析測試，應使用經(jīng)過校準的儀器。校準的方法有稱量法和相對校準法。稱量法的原理是，用分析天平稱量被校量器中量入或量出的純水的質(zhì)量，再根據(jù)測定溫度下純水的密度，計算出被校量器的實際容量。由于玻璃的熱脹冷縮，在不同溫度下

14、，各量器的容積也不同。各種量器上標出的刻度和 容量，是在標準溫度20c時量器的標稱容量。但是，在實際校準工作中，容器中水的質(zhì)量是在室溫下和空氣中稱量的。因此必須考慮以下因素的影響：（1）空氣浮力對質(zhì)量的影響；（2）水的密度受溫度的影響；（3）玻璃容器的容積受溫度的影響。為了方便計算，綜合考慮了上述的影響，可得出 20c容量為1L的的玻璃容器，在不同 溫度時所盛水的質(zhì)量（見表5-14-1 ）。例如：某支25 mL移液管在18c放出的純水質(zhì)量為 24.921 g ;密度為0.99751 g mL1, 計算該移液管在18c時的實際容積。、，24.921g,V18 =1 =24.98mL0.99751

15、g mL則這支移液管的校正值為 24.98 mL-25.00 mL =-0.02 mL 。表5-14-1 不同溫度下1L水的質(zhì)量（在空氣中用黃銅祛碼稱量）t / m /gt / m /gt / m /g10998.3919997.3428995.4411998.3320997.1829995.1812998.2421997.0030994.9113998.1522996.8031994.6414998.0423996.6032994.3415997.9224996.3833994.0616997.7825996.1734993.7517997.6426995.9335993.4518997.5

16、127995.69需要特別指出的是：校準不當和使用不當都是產(chǎn)生容量誤差的主要原因，其誤差甚至可能超過允差或量器本身的誤差。因而在校準時務必正確、仔細地進行操作，盡量減小校準誤差。凡是使用校準值的，其校準次數(shù)不應少于兩次，且兩次校準數(shù)據(jù)的偏差應不超過該量器 容量允許的1/4 ,并取其平均值作為校準值。有時，在實驗中只要求兩種容器之間有一定的比例關系，而無需知道它們各自的準確容積，這時可用相對校準法進行校正。例如，用 25 mL移液管移取蒸儲水，注入干凈且倒立晾 干的100 mL容量瓶中，轉(zhuǎn)移4次后，觀察容量瓶瓶頸處水的彎月面下緣是否剛好與刻線相 切。若不相切，應作一記號為標線，以后此移液管和容量

17、瓶配套使用時就用校準的標線。為了更全面、詳細了解容量儀器的校準，可參考JJG196-920常用玻璃量器檢定規(guī)程三、儀器與試劑1 .分析天平，滴定管（50 mL）,容量瓶（50 mL）,移液管（10 mL）,錐形瓶（50 mL, 帶磨口玻璃塞）。2 .蒸儲水。四、實驗步驟1 .滴定管的校準（稱量法）取一只洗凈并且外表干燥的帶磨口玻璃塞的錐形瓶，放在分析天平上稱量，得空瓶質(zhì)量m瓶，t己錄至0.001 g 。再向一洗凈的滴定管中裝滿純水，將液面調(diào)至0.00 mL刻度處，從滴定管向錐形瓶中放出一定體積（記為 V。）如5.00 mL的純水，蓋緊塞子，稱出瓶+水”的質(zhì)量m并£+水，m井£

18、;+水與m瓶之差即為放出水的質(zhì)量 mm用上述方法稱量表 5-14-3中所列的刻度間的 m水，并測量水 溫，查表5-14-1得該溫度下水的密度，即可計算滴定管各部分的實際容量*0。重復校準一次，兩次相應區(qū)間的水質(zhì)量相差應小于0.02 g ,求出平均值，并計算校準值 V （V20-V。）。以V）為橫坐標，4V為縱坐標，繪制滴定管校準曲線?，F(xiàn)將一支50 mL滴定管在水溫21c校準的部分實驗數(shù)據(jù)列于表1。表1 50 mL 滴定管校正表（水溫 21 C, p = 0.99700g mL1）V0/mLm 并K+Mgm并Jgm水/gVzo/mL V校正值/mL0.00 5.0034.14829.2074.9

19、414.96-0.040.00 10.0039.31729.31510.00210.03+0.030.00 15.0044.30429.35014.95415.000.000.00 20.0049.39529.43419.96120.02+0.020.00 25.0054.28629.38324.90324.98-0.02移液管和容量瓶也可用稱量法進行校準。校準容量瓶時，只需稱準至0.01 g即可。表2 50mL滴定管校正表（水溫 C, p= gmL1）M/mLm#Jgm并s+水/gm*/gm水（平均）/gV20/mL V校正值/mL0.00 10.000.00 20.000.00 30.00

20、0.00 40.000.00 50.002 .移液管和容量瓶的相對校準取一只洗凈且晾干的 50 mL容量瓶，用潔凈的10 mL移液管移取10mL純水5次于容量 瓶中，觀察液面的彎月面下緣是否恰好與刻線上邊緣相切，若不相切且間距超過1mm則用膠布在瓶頸上另作標記，以后實驗中，此移液管和容量瓶配套使用時，應以新標記為準。五、思考題1 .容量瓶校準時為什么需要晾干？在用容量瓶配制標準溶液時是否要晾干？2 .在實際分析工作中如何應用滴定管的校準值？3 .分段校準滴定管時，為什么每次都要從0.00 mL開始？7歡迎下載精品文檔4試寫出以稱量法對移液管（單刻線吸量管）進行校準的簡要步驟。實驗五 食品中總酸

21、的測定（見課本）一、酸堿摘定法1. 目的與要求了解食品酸度測定的實驗原理及意義。根據(jù)實驗結(jié)果的分析，簡述影響實驗準確性的因素。2. 實驗原理食品中的酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、草酸、醋酸等有機酸，其電離常數(shù)Ka均大于10-8 ，可以用強堿標準溶液直接滴定試樣中的酸，以酚酞為指示劑確定滴定終點。按堿液的消耗量計算食品中的總酸含量。測定結(jié)果包括了未離解的酸的濃度和已離解的酸的濃度。3. 儀器與試劑（ 1）儀器酸堿滴定裝置；分析天平，感量分別為 0. 000lg 及 0.00lg ；組 織搗碎機；研缽。（ 2）實驗用水實驗用水應符合GB/T 6682 規(guī)定的二級水規(guī)格或蒸餾水，使用前應經(jīng)煮沸，冷卻。（

22、3）試劑Na0hB準滴定溶液0. lmol/L 1%酚酞溶液稱取 1g 酚酞，溶于60mL 95%乙醇中，用水稀釋至100mL。4. 實驗步驟（ 1）樣品預處理固體樣品。取有代表性的固體樣品至少200g,用搗碎機搗碎至均勻，置于密閉玻璃容器內(nèi)。固、液樣品。取按比例組成的固、液樣品至少200g,用研缽或用組織搗碎機搗碎，混勻后置于密閉的玻璃容器內(nèi)。含二氧化碳的液體樣品。至少取200g樣品至500m設杯中，置于電爐上， 邊攪拌邊加熱至微沸騰，保持 2min,冷卻，稱量，用煮沸過的水補至煮沸前的 質(zhì)量，置于密閉玻璃容器中。不含二氧化碳的液體樣品。充分混合均勻，置于密閉玻璃容器內(nèi)。（ 2）測定試液的制

23、備液體樣品。若總酸含量小于或等于 4g/kg,將試樣用快速濾紙過濾。收集。 濾液，用于測定。若總酸含量大于 4g/kg,稱取1050g樣品，用煮沸過的水定 容至250mL過濾。收集濾液，用于測定。固體、半固體樣品。稱取均勻樣品1050g,精確至0.00lg ,置于燒杯中。 用約80c煮沸過的水150mL將燒杯中的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到250mL容量瓶中，置于沸 水浴中煮沸30min (搖動23次，使試樣中的有機酸全部溶解于溶液中)，取出， 冷卻至室溫，用煮沸過的水定容至 250mL用快速濾紙過濾，收集濾液，用于測(3)樣品測定準確吸取試樣濾液2550mL使之含0.0350.07g酸，置于250mL錐形

24、瓶中，加水4060mL及0.2mL 1%勺酚吹指示劑，用0. lmol/L NaOH 標準溶液 滴定至微紅色且30s不褪色。記錄消耗0. lmol/L NaOHfe準滴定溶液的體積(Vi)。 同一被測樣品須測定兩次。用水代替樣品做空白試驗，操作相同。記錄消耗NaOHfe準滴定溶液的體積(V2)。(4)實驗數(shù)據(jù)記錄見表6-5。表6-5 數(shù)據(jù)記錄表項目第一次第二次第三次平均值滴定時取樣體積/mL滴定樣品消耗NaOH§液的體積V1 / mL空白試樣消耗NaOH§液的體積V2 / mL5 .結(jié)果計算c(V1 -V2) KFr62X 二 c() 1000(6-2)m式中，X為樣品中總

25、酸的含量，g/kg (或g/L)； c為NaOHS準滴定溶液的 濃度，mol/L; V1為滴定樣品時消耗NaOHS準滴定溶7的體積，mL; V2為空白 試樣消耗NaOHS準滴定溶7的體積，mL m為樣品質(zhì)量或體積，g(或mD ; F 為試樣的稀釋倍數(shù)；K為酸的換算系數(shù)：蘋果酸0.067、乙酸0.060、灑石酸0.075、 檸檬酸0.064、檸檬酸(含一分子結(jié)晶水)0.070,乳酸0. 090、草酸0.045、 鹽酸0. 036、磷酸0. 049 。計算結(jié)果精確到小數(shù)點后兩位。6 .注意事項此方法適用于果蔬制品、飲料、乳制品、飲料酒、蜂產(chǎn)品、淀粉制品、谷 物制品和調(diào)味品等食品中總酸的測定，但不適

26、用于有顏色或渾濁不透明的試樣， 建議它們改用pH電位法測定。對于酸度值較低的食品，測定時可使用 0.05mo1/L NaOH標準滴定溶液或0.0lmol/L NaOFW準滴定溶液（用時當天稀釋配制）。一般要求滴定時消耗的氫 氧化鈉標準滴定液不少于 5mL最女?在1015mL一樣品，兩次測定結(jié)果之差，不得超過兩次測定平均值的2%般情況下，柑橘、檸檬及柚子其總酸以檸檬酸計；葡萄（汁）以灑石酸計； 仁果、蘋果、桃、李等以蘋果酸計；鹽漬發(fā)酵的制品、肉、魚、家禽及乳品 以乳酸計；醋漬及以醋酸發(fā)酵制品，以醋酸計；果汁型固體飲料以結(jié)晶水檸 檬酸計；菠菜以草酸計。實驗六鄰二氮菲吸光光度法測定鐵（條件試驗和試樣

27、中鐵合量的測定）一、實驗目的1 .學習如何選擇吸光光度分析的最佳實驗條件。2 .掌握鄰二氮菲吸光光度法測定鐵的原理及方法。3 .學會繪制吸收曲線和標準工作曲線的方法。4 .掌握分光光度計的結(jié)構和使用方法。二、實驗原理如果固定比色皿厚度，測定有色溶液吸光光度法測定鐵的理論依據(jù)是朗伯一比耳定律。的吸光度，則溶液的吸光度與濃度之間有簡單的線性關系，可用標準曲線法進行定量分析。采用吸光光度法測定物質(zhì)的含量時，通常要經(jīng)過取樣、顯色及測量等步驟。顯色反應受多種因素的影響，為了使被測離子全部轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔?，應當通過條件試驗確定顯色劑用量、顯色時間、顯色溫度、溶液酸度及加入試劑的順序等。本實驗在測定試樣中鐵

28、含量之前， 先做部分條件試驗，以便初學者掌握確定實驗條件的方法。條件試驗的簡單方法是：變動某實驗條件，固定其余條件，測得一系列吸光度值，繪 制吸光度一某實驗條件的曲線，根據(jù)曲線確定某實驗條件的適宜值或適宜范圍。吸光光度法測定鐵的含量所用的顯色劑較多，有鄰二氮菲（又稱鄰菲啰咻，菲繞林）及其衍生物、磺基水楊酸、硫氧酸鹽、5-Br-PADAP等。其中鄰二氮菲分光光度法的靈敏度高,穩(wěn)定性好，干擾容易消除，是目前普遍采用的一種方法。在pH為2 9的溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲（Phen）生成穩(wěn)定的橘紅色絡合物Fe（Phen） 32+：（橘紅色）上述反應的lgK穩(wěn)=21.3 ,摩爾吸光系數(shù)知8= 1,1 X

29、104 L mol-1 cm1。鐵含量在0.16聞mL1符合比爾定律。而Fe3+與鄰二氮菲作用形成藍色絡合物，穩(wěn)定性較差，因此在實際應用中常加入還原劑使Fe3+還原為Fe2+,常用的還原劑是鹽酸羥胺：11歡迎下載精品文檔2Fe3+ + 2NH 20HHCl = 2Fe2+ + N 2 T+ 4H+ + 2H 2O + 2Cl -測定時，酸度高，反應進行較慢；酸度太低，則Fe2+ 易水解，因此本文采用pH 5.06.0的HAc-NaAc緩沖溶液，可使顯色反應進行完全。Bi3+, Ccf+, Hg2+, Zn2+及Ag+等離子與鄰二氮菲作用生成沉淀，干擾測定。實驗證實，相 當于鐵質(zhì)量40 倍的Sn

30、2+，Al 3+，Ca2+，Mg2+，Zn2+ ，Si032- ，20 倍的Cr3+，Mn2+，V03-，P043- ，5倍的Co2+, Ni2+, CiT等離子不干擾測定。本法測定鐵的選擇性雖然較高，但選擇試樣時仍應 注意上述離子的影響。三、儀器與試劑1分光光度計， 50 mL 容量瓶 8 個（或比色管8 支） 。2 .鐵標準溶液：100聞mL1,準確稱取 0.8634g 分析純NHFe（SO） 2 12Ho置于200 mL 燒杯中，加入 20 mL 6 mol L-1 HCl溶液和少量水，用玻璃棒攪拌使其溶解，然后定量轉(zhuǎn)移 至 1 L 容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。3 .鐵標準溶液：

31、10閔mL1,用移液管吸取10 mLl00閔mL1鐵標準溶液于100 mL容量 瓶中，加入2 mL 6 mol L-1 HCl溶液，用蒸儲水稀釋至刻度，搖勻。4 .鄰二氮菲（1.5 g L-1）,鹽酸羥胺（100 g L-1,用時配制），NaAc （1 mol L-1）, NaOH （l mol L-1）, HCl （6 mol L-1）。四、實驗步驟1條件實驗試驗（ 1 ）吸收曲線的繪制取兩個50 mL容量瓶（或比色管），用吸量管分別加入 0.0 mL和1.0 mL 100聞mL1鐵 標準溶液， 1 mL 鹽酸羥胺溶液，搖勻。再加入 2 mL 鄰二氮菲（Phen） ， 5 mL NaAc 溶

32、液，用水稀釋至刻度，搖勻。放置 10min后，用1 cm比色皿，以試劑空白（即 0.0 mL鐵標準溶 液）為參比溶液，在440560 nm 之間，每隔10 nm 測一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測量一次吸光度。在坐標紙上，以波長入為橫坐標，吸光度 A為縱坐標，繪制 A-入吸收曲線。從吸收曲線上選擇測定Fe的適宜波長，一般選用最大吸收波長無ax。（ 2 ）顯色劑用量的選擇1取7個50 mL容量瓶（或比色管），用吸量管準確吸取1.0 mL 100 g mL鐵標準溶液加入各容量瓶中，然后加入l mL鹽酸羥胺溶液，搖勻。再分別加入0.1 mL, 0.3 mL, 0.5 mL, 0.8 mL

33、, 1.0 mL , 2.0 mL , 4.0 mL Phen和5 mL NaAc溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。放置 10 min。用1cm比色皿，以蒸儲水為參比溶液，在選擇的波長（及ax）下測定各溶液的吸光度。以所取Phen溶液體積V為橫坐標，吸光度 A為縱坐標，繪制 A-V曲線。得出測定鐵時 顯色劑的最適宜用量。（ 3）顯色時間的選擇1取一個50 mL谷重瓶（或比色官），用吸重官準確加入 l.0 mL 100 聞mL鐵標準溶椒， 1 mL 鹽酸羥胺溶液，搖勻。再加入 2 mL Phen ， 5 mL NaAc 溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。 立刻用1 cm比色皿，以蒸儲水為參比溶液，在選定的波

34、長（加x）下測量吸光度。然后依次測量放置 5 min ， 10 min ， 30 min ， 60 min ， 90 min ， 120 min 后的吸光度。以時間 t 為橫 坐標， 吸光度 A 為縱坐標， 繪制 A-t 曲線。 得出鐵與鄰二氮菲顯色反應完全所需要的適宜時 間。2鐵含量的測定（ 1）標準曲線的繪制取6個50 mL容量瓶（或比色管），用吸量管分別加入 0.0 mL, 2.0 mL 4.0 mL, 6.0 mL, 8.0 mL , 10.0 mL 10 聞mL1鐵標準溶液，l mL鹽酸羥胺溶液，寸§勻。再加入 2 mL Phen ,5 mL NaAc 溶液，搖勻。用水稀釋

35、至刻度，搖勻后放置 10 min 。用 1 cm 比色皿，以試劑空白為參比溶液 （該顯色體系的試劑空白為無色溶液， 在條件試驗中用蒸餾水作參比溶液， 操作較為簡單。），在所選擇的波長（Max）下，測量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫坐標，吸光度 A 為縱坐標，繪制 A-Fe 含量標準曲線。在繪制的標準曲線上， 查出某一鐵濃度適中的標準溶液所對應的吸光度， 計算Fe2+-Phen絡合物的摩爾吸光系數(shù)So（ 2）試樣中鐵含量的測定準確吸取 1.0 mL 試液于 50 mL 容量瓶（或比色管）中，按上述標準曲線相同條件和步驟，測量其吸光度。 從標準曲線上查出其相應的鐵含量， 然后計算出試液中鐵的含量（單

36、位為聞mL1）。五、思考題1從實驗測得的吸光度求鐵含量的依據(jù)是什么？如何求得？2試擬出一簡單步驟，用吸光光度法測定水祥中的全鐵（總鐵）和亞鐵的含量。3吸光光度法進行測量時，為何使用參比溶液，參比溶液選用的原則是什么？實驗七 亞硝酸鹽含量的測定（見課本）一、目的與要求1. 學習肉制品中食品添加劑亞硝酸鹽的檢測方法。2. 掌握鹽酸萘乙二胺法的基本操作技術。二、實驗原理樣品經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、 除去脂肪后， 在弱酸性條件下， 亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后， 再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紫紅色化合物， 顏色的深淺與亞硝酸鹽含量成正比，其最大吸收波長為538nm可測定吸光度并與標準比較定量。三、儀器與試劑1.

37、儀器721 型分光光度計；比色管、各種移液管及常用玻璃儀器；小型絞肉機。2. 試劑（1）飽和硼砂溶液溶解5g硼酸鈉（NazBO 10HO）于100mL熱水中，冷卻后備用。（2）硫酸鋅溶液溶解30g硫酸鋅（ZnSQ - 7HO）于100mLzK中。（3）對氨基苯磺酸溶液（0.4%） 溶解 0. 4g 對氨基苯磺酸于 100mL 20%鹽酸中，避光保存。（4）鹽酸蔡乙二胺溶液（0.2%） 溶解0. 2g鹽酸蔡乙二胺于100mLTK中， 避光保存。13 歡迎下載。精品文檔(5)亞硝酸鈉標準溶液 精確稱取0.1000g亞硝酸鈉(硅膠干燥劑中干燥 24h),加水溶解，移入500mL容量瓶，并稀釋至刻度，

38、混勻，臨用前吸取5. 00mL 于200mL容量瓶中，加水至刻度，混勻，此溶液每毫升相當5國亞硝酸鈉。(6)材料午餐肉或臘腸。四、測定步驟1 .樣品中亞硝酸鈉的提取稱取2.50g經(jīng)絞碎混勻的樣品于50mL燒杯中，加硼砂飽和溶液6.3mL,攪 拌均勻。以70c左右的熱水約150mL將樣品全部洗入250mL容量瓶中，置沸水浴 加熱15min。取出冷卻至室溫，一面轉(zhuǎn)動，一面滴加 1.3mL硫酸鋅溶液以沉淀蛋白質(zhì), 加水至刻度，混勻，放置30min。除去上層脂肪，用濾紙過濾，棄去最初20mL,濾液備用。2 .樣品測定取6支25mL比色管，編號，按表6-11順序加入各試劑及操作。加水至25.00mL,混

39、勻，靜置15min,用2cm比色皿，以零號管調(diào)節(jié)零點， 于波長538nm處測吸光度，記錄。繪制標準曲線。以亞硝酸鈉量(ug)為橫坐標，與其對應的吸光度為縱坐標 繪制標準曲線。表6-11加入試劑順序及結(jié)果記錄0.4%對氨基苯磺酸溶液體積/mL混勻35min0.2%鹽酸茶乙二月$溶液體積/mL 0.50用樣品提取濾液的吸光度，在以上亞硝酸鈉標準曲線上查出亞硝酸鈉的量0.500.500.500.500.50吸光度A 100020m 1000五、結(jié)果計算X=(6-13)250式中，X為樣品中亞硝酸鹽的含量，mg/kg;； A為測定用濾液中亞硝酸鈉的含量，閨；m為樣品的質(zhì)量，g; 20/250為測定用樣

40、液體積(mL)/試樣處理液總 體積(mL)。六、注意事項1 .本法適用于肉制品中硝酸鹽的測定。 具方法是把沉淀蛋白質(zhì)、除脂肪的溶 液通過鎘柱，使其中的硝酸根離子還原成亞硝酸根離子， 按此法測得總量B減去 試樣中亞硝酸鹽含量C,即得試樣中硝酸鹽(以硝酸鈉計)含量。硝酸鹽(以硝酸鈉計)含量(g/kg)=(B-C) X 1.232(6-14)式中，1.232為亞硝酸鈉換算為硝酸鈉的系數(shù)。2 .樣品提取時，也可用亞鐵氟化鉀溶液2.5mL和乙酸鋅溶液 2.5mL代替1.3mL硫酸鋅溶液，以沉淀蛋白質(zhì)，配法如下。(1)亞鐵氟化鉀溶液稱取106g亞鐵氟化鉀K4Fe(CN)6 3H2O,溶于水并稀 釋至100

41、0mL(2)乙酸鋅溶液稱取 220g乙酸鋅Zn(CH3COO2r 2HO,力口 30mL冰醋酸溶 于水，并稀釋至1000mL3 .本法與國標方法大同小異，只是用實驗室現(xiàn)有的25mL比色管，所有試劑相應減少。4 .當亞硝酸鹽含量高時，過量的亞硝酸鹽可以將偶氮化合物氧化變成黃色， 而使紅色消失，這時可以采取先加入試劑，然后滴加樣液，從而避免亞硝酸鹽過 量。七、思考題1 .本實驗中參比溶液的作用？2 .為什么要對食物中亞硝酸鹽的含量進行測定 ？實驗八食品中水分活度值的測定一一擴散法(見課本)1 .目的與要求學習水分活度值測定的意 義及實驗原理。掌握康威擴散法測定水分 活度值的操作方法。圖6-2康威擴散皿13刷下載A內(nèi)室；B外室；C玻璃蓋;D一鋁皿或玻璃皿2 .實驗原理樣品在康威微量擴散皿的密封和恒溫條件下，分別在Aw較高和較低的標準飽和溶液中擴散平衡后，根據(jù)樣品質(zhì)量的增加（在較高Aw標準溶液中平衡）和減少（在Aw較低標準溶液中平衡），以樣品質(zhì)量增減為縱坐標，各種標準飽和溶 液Aw值為橫坐標，繪出樣品質(zhì)量隨溶液 Av值變化的曲線，從而計算樣品的水分 活度值。3 .儀器與試劑（1）儀器康威微量擴散皿。構造如圖6-2所示。圓形小鋁皿或玻璃皿。盛放樣品用，直徑為 2528mm深度為夕mm分析天平。感量0.0001g。（2）標準試劑溶液配制標準試劑飽和溶液， 具在25c時的A值如表6-2所