[0805]《園藝植物生物技術(shù)》在線作業(yè)及參考答案

1、0805園藝植物生物技術(shù)第一批作業(yè)論述題名詞解釋1、CDNA文庫參考答案：指將某生物某一發(fā)冇時(shí)期所轉(zhuǎn)錄的mRA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的DNA片段與某種載體連接 而形成的克隆的集合。論述題名詞解釋3、鑒別寄主參考答案：植物病毒具有有一定的寄主范乩 并在某些寄主植物卜我現(xiàn)特定的癥狀這種能鑒別某種病痔 的植物稱為鑒別寄主C論述題名詞解釋4、抗體參考答案：抬在抗麼物質(zhì)刺激下.免疫動(dòng)物機(jī)休內(nèi)所產(chǎn)生的可與該抗原物質(zhì)發(fā)生特井件結(jié)合反應(yīng)的免疫球 蛋白。論述題名詞解釋5、愈傷組織參考答案:在人1：培養(yǎng)基上由外植體匕形成的一團(tuán)無序生長狀態(tài)的薄壁細(xì)胞原生質(zhì)體：指采用機(jī)械或酶解法去掉了細(xì)胞壁的裸露的且具有活力的細(xì)胞。論述題名詞

2、解釋6、原生質(zhì)體融合參考答案：也稱體細(xì)胞雜交是抬不同種類的廉生質(zhì)體不經(jīng)過有性階段，在一定條件下融合創(chuàng)造朵種的過 程。論述題名詞解釋7、植物組織培養(yǎng)參考答案:指通過無菌操作把植物體的器官、組織.細(xì)胞甚至原生質(zhì)體接種于人工配制的培養(yǎng)基上, 在人匸控制的環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng).使之生長.繁殖或長出完整植株的技術(shù)和方法。填空題3、DNA在生物體內(nèi)的復(fù)制方式是參考答案：半保留復(fù)制填空題7、Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒上存在一個(gè)特泄的被稱為區(qū)段，它能共價(jià)的插入并整合到植物染色體組中。參考答案：T-DNA填空題10、常見用于分子連鎖遺傳圖譜構(gòu)建的作圖群體有臨時(shí)群體和永久群體，其中的DH群體屬于 。永久群體填空題11、常用

3、于瓊脂糖凝膠電泳DM顯色的物質(zhì)是O參考答案：淑化乙呢填空題4、PCR技術(shù)中常用的DNA聚合酶是o參考答案：Taq DNA聚合酶填空題1、1953年，美國分子生物學(xué)家沃森(WatSOn)和英國分子生物學(xué)家克里克(CriCk)根據(jù)X射線衍射分析提岀了著名的，參考答案：DNA雙螺旋學(xué)說填空題2、DNA測序有兩種經(jīng)典手工測序方法，一是Sanger的酶學(xué)法(雙脫氧法)，另一種是 GiIbert 和 MaXam 的。參考答案：化,學(xué)丫去填空題5、RNA提取過程中的關(guān)鍵是抑制的活性。參考答案：RXAM填空題6、SSR標(biāo)記是 (顯性/共顯性)標(biāo)記。參考答案:共顯性填空題8、X噬菌體載體有兩種類型，即和置換型。

4、參考答案：插入型填空題9、病毒抗血清是用純化的注射免疫動(dòng)物獲得的。參考答案:病毒填空題12、常用于植物基因組DM克隆的兩種載體是細(xì)菌人工染色體和。參考答案：酵母人工染色體填空題13、從生物技術(shù)角度看，園藝作物種苗的生產(chǎn)中利用最為廣泛的技術(shù) 是O離體快繁填空題15、徳國植物生理學(xué)家Haberlandt (哈布蘭特)提出了學(xué)說。< . ifc細(xì)胞全能填空題14、從原生質(zhì)體和酶的活性兩方面考慮，原生質(zhì)體分離的酶解溫度一般設(shè)定為OCO參考答案：24-26*C o填空題16、對(duì)培養(yǎng)基的火菌一般采用濕熱高溫高壓滅菌法，火菌的溫度為 o參考答案：121°C填空題17、對(duì)維生素、蛋白質(zhì)、多肽、

5、生長因子等無法用高溫高壓滅菌的物質(zhì)，一般用過濾的方式滅菌，過濾器所使用濾膜的孔徑為的濾膜可以除去細(xì)菌和霉菌。參考答案：0. 22 m填空題18、發(fā)根農(nóng)桿菌侵染植物后，會(huì)誘使植物細(xì)胞產(chǎn)生許多o參考答案:發(fā)狀根填空題19、基因文庫主要包括基因組文庫和兩種。參考答案：CDNA文庫填空題20、基因芯片按用途可分為和DNA測序芯片參考答案：表達(dá)譜芯片填空題21、經(jīng)濟(jì)發(fā)展合作組織(OECD) 1993年提出了食品安全性評(píng)價(jià)的原則。參考答案：實(shí)質(zhì)等同性填空題22、莖尖培養(yǎng)脫病毒的原理是病毒在植物體內(nèi)分布不均勻，在頂端生長點(diǎn)的病毒濃度低，大部分細(xì)胞不帶病毒參考答案：分生組織論述題名詞解釋2、基因組文庫參考答案

6、：扌呂將某生物的全部基因組DNA切割成一定長度的DNA片段克隆到某種載體上形成的文庫C第二批作業(yè)填空題16、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化主要使用來源于和發(fā)根農(nóng)桿菌的工程載體。參考答案：根癌農(nóng)桿菌填空題23、原生質(zhì)體主要的培養(yǎng)方法有三種：液體淺層培養(yǎng)法、固體培養(yǎng)法和參考答案：固液雙層培養(yǎng)法填空題8、配子-體細(xì)胞融合可以獲得無籽的植株。參考答案：三倍體填空題24、與pBR322等環(huán)狀質(zhì)粒不同，入噬菌體為雙鏈DNA分子。參考答案：線狀填空題26、植物原生質(zhì)體是指不含的植物細(xì)胞。參考答案：細(xì)胞壁填空題25、原生質(zhì)體誘發(fā)融合包括a03法、高PH-高鈣法、PEG法、及微融合。參考答案：電擊法填空題27、最早記

7、載的植物病毒是o參考答案：郁金香雜色病填空題1、凈化工作臺(tái)無菌風(fēng)送風(fēng)方式主要有垂直送風(fēng)和O參考答案：水平送風(fēng)填空題2、離體培養(yǎng)的植物材料常用的碳源是oA填空題3、連鎖圖譜構(gòu)建的理論基礎(chǔ)是o參考答案：染色體的交換與重組填空題4、U前植物離體培養(yǎng)中最常用和使用范圍最廣的一種培養(yǎng)基是o參考答案：MS論述題名詞解釋1、轉(zhuǎn)基因生物安全參考答案：是描防范山轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用對(duì)人類、動(dòng)植物、微生物以及生態(tài)環(huán)境構(gòu)成的危險(xiǎn)或 潛在風(fēng)險(xiǎn)論述題名詞解釋2、轉(zhuǎn)基因植物參考答案：指通過慕因轉(zhuǎn)移技術(shù).將有益基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞內(nèi)改變其遺傳組成，使Z獲得有益的生物 特征而培育出來的祐產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、多抗的植物新品種。論述題

8、名詞解釋3、核心種質(zhì)參考答案：川定的方法選擇整個(gè)種質(zhì)資源的一部分，以鍛小的資源數(shù)處名詞解釋和遺傳iLJi限度地代表整個(gè)遺傳資源的多樣性°論述題名詞解釋4、基因芯片參考答案：把大w探針或基因片段按特定的排列方咒固定在硅片、玻璃.型料或尼龍膜等載休上.形 成致密、有序的DXA分子點(diǎn)陣，并可利川核酸朵交原理來檢測未知分子。論述題名詞解釋5、分子標(biāo)記參考答案：直接反映DxA核仔酸序列弟態(tài)件的標(biāo)記屬于遺傳標(biāo)記的一種。論述題名詞解釋6、繼代培養(yǎng):對(duì)來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物（包括細(xì)胞.組織或其切段）通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切削或 分離.進(jìn)行連續(xù)多代的培養(yǎng)就稱為繼代培養(yǎng)。填空題】5、年，世界首例轉(zhuǎn)

9、基因植物培冇成功。彳" “1983填空題：9、熱處理脫毒的原理是利用病毒類病原與植物的不同。 I鬧執(zhí)卜t-v± :才.J. Illlvl d 八* I fW J C-I K、 IfiJ 八“ I填空題10、人工培養(yǎng)基上由外植體上形成的一團(tuán)無序生長狀態(tài)的薄壁細(xì)胞稱為O參考答案：愈傷組織填空題11、人生物體外進(jìn)行DA的復(fù)制采用的方法是O參考答案:PCR填空題12、世界上第一例通過植物花藥培養(yǎng)獲得單倍體植株是Ill印度科學(xué)家培養(yǎng)植物花藥得以實(shí)現(xiàn)。4、* IX A ir I I用：曼佗羅填空題13、世界上首例轉(zhuǎn)座子是在玉米中發(fā)現(xiàn)的O參考答案：AC/DS填空題14、世界上轉(zhuǎn)基因植物種

10、植面積最大的國家是。參考答案:英國填空題13、體細(xì)胞雜種中葉綠體的遺傳行為主要有三種：單親傳遞、共存及重組，其中較為常見的遺傳方式是O參考答案：爪親傳遞填空題16、通過花粉培養(yǎng)可以獲得植株，在植物育種中具有重要價(jià)值。參考答案：單倍體填空題17、圖位克隆法需要對(duì)目的基因進(jìn)行立位，怎位的主要途徑是通過技術(shù)。參考答案：分子標(biāo)id填空題18、我國頒布的第一部與轉(zhuǎn)基因植物有關(guān)的條例是。參考答案：基因工程安全管理辦法埴空題19、我國首例商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因園藝植物是。參考答案：番茄百日鮮填空題20.血淸學(xué)檢測病毒的原理是。參考答案：抗原抗體反應(yīng)填空題21、用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物時(shí)，需要在植物再生培養(yǎng)基中添加，防止

11、細(xì)菌過度生長 而產(chǎn)生污染。參考答案：抑菌性抗生素填空題22、由免疫動(dòng)物的單細(xì)胞系所產(chǎn)生的抗體稱為參考答案：單克隆抗體填空題7、農(nóng)桿菌用于植物遺傳轉(zhuǎn)化時(shí)，適合用于類型的植物的轉(zhuǎn)化。參考答案:雙子葉第三批作業(yè)填空題判斷題19：隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)標(biāo)記采用兩條引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。., AAe <A CjL * U少 J I I 4 Tl I <z<填空題判斷題22：原生質(zhì)體的分離目前主要采用"一步法”酶處理獲得。參考答案：正確填空題判斷題21：熒光素雙醋酸酯(FDA)檢測原生質(zhì)體活性時(shí)，具有活力的原生質(zhì)體在紫 外線照射下發(fā)出綠色熒光。參考答案：正確填空題判斷題

12、2： PUC質(zhì)粒載體可以容忍插入比噬菌體載體更長的外源DNA片段。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題3： RAPD標(biāo)記是指簡單重復(fù)序列標(biāo)記，主要檢測真核生物的基因組中普遍 存在著二核昔酸、三核昔酸或四核昔酸的簡單串聯(lián)重復(fù)序列尤其是(CA)重復(fù)序列。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題11：基因組文庫和CDNA文庫的概念是等同的。鄉(xiāng)虧"徐：tn阪填空題判斷題12：將病毒注射到動(dòng)物體內(nèi)后會(huì)刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)物質(zhì)，該產(chǎn)生的 物質(zhì)稱為抗原。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題16：生物安全概念實(shí)際上就是指的轉(zhuǎn)基因生物安全。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題18：雙子葉植物的基因轉(zhuǎn)化一般用含Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn) 行。參

13、考答案：正確論述題簡答題2:簡述影響原生質(zhì)體培養(yǎng)及植株再生的因素。參考答案：答：(1)原生質(zhì)體來源。分離原生質(zhì)體所用外植體的生理狀態(tài)與原生質(zhì)體的質(zhì)屋 對(duì)其后的分裂頻率之間有著密切的關(guān)系。(2)基因型。同一植物不同基因型的原生質(zhì)體脫分 化與再分化所要求的條件不一樣，逍成不同品種在相同條件卜的再生能力也會(huì)不同C (3)培 養(yǎng)基。來源于同一種基因型的原生質(zhì)體，在不同培養(yǎng)基中的再生能力也不一樣。(4)培養(yǎng)基 附加成分。包括培養(yǎng)基中的內(nèi)源、外源激素以及其他添加成分也會(huì)對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)生影響。(5)培 養(yǎng)條件和垸養(yǎng)方法。主要是培養(yǎng)環(huán)境的光質(zhì)會(huì)影響到原生質(zhì)體細(xì)胞壁再生。（6）滲透壓調(diào)節(jié) 劑。（7）外界微電流處理。論

14、述題簡答題3：簡述原生質(zhì)體分離酶液的組成及作用。參考答案：答：（1）、纖維素酶。從綠色木需中提取的一種復(fù)合酶制劑，主要含有纖維素 酶Cl,作用于天然的和結(jié)晶的纖維素，具有分解天然纖維素的作用，還含纖維 素酶CX,作用于定形的纖維素，可分解短鏈纖維素。（2）、半纖維素酶。可以 降解半纖維素為單糖或單糖衍生物。（3）果膠酶。降解聯(lián)結(jié)細(xì)胞的中膠層，使 細(xì)胞從組織中分開，以及細(xì)胞與細(xì)胞分開。（4）、離析酶。離析形成單細(xì)胞。論述題簡答題彳：理想的遺傳標(biāo)記應(yīng)具備的特點(diǎn)？參考答案：答：（1）、多態(tài)性高，標(biāo)記數(shù)目多，提供的信息量大。（2）、共顯性遺傳能區(qū) 分純合基因型B雜合基因型。（3）、呈現(xiàn)中性，不影響目標(biāo)

15、性狀表達(dá)，不良性狀無必然連 鎖。（4）、表現(xiàn)穩(wěn)定，不受植株內(nèi)外環(huán)境的影響。（5）、經(jīng)濟(jì)方便，易于觀察記載。論述題簡答題1：簡述AFLP標(biāo)記優(yōu)缺點(diǎn)？參考答案：答：（1） AFLP標(biāo)記優(yōu)點(diǎn)：A、具有RFLP技術(shù)的可靠性與PCR技術(shù)的高效性。B、 與RFLP相比，AFLP不需要SOUthern轉(zhuǎn)移、分子朵交等步驟，故只需少量DNA, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠，信息量大。（2） AFLP主要的缺點(diǎn)：A、對(duì)基因組DNA和限 制酶的質(zhì)量要求高，酶切不完全可能會(huì)出現(xiàn)假陽性。B、操作步驟較多，對(duì)實(shí)驗(yàn) 技能要求高，成本也較高。C、大多數(shù)為顯性標(biāo)記，難于鑒別等位基因。D、該技 術(shù)已申請(qǐng)專利，只能用于非盈利性的科學(xué)研究。填

16、空題判斷題23：原生質(zhì)體分離所使用的各種酶液配好后應(yīng)進(jìn)行髙溫髙壓火菌處理參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題24：植物病毒都可通過嫁接傳染。參考答案：正確填空題判斷題25：植物細(xì)胞全能性是組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。參考答案：正確填空題判斷題26：植物組織培養(yǎng)中的培養(yǎng)基可用淸潔的自來水配制。.匕 A, Zl 左I； < L*虧合殺：TH VK填空題判斷題27：質(zhì)粒是寄生于細(xì)菌內(nèi)、獨(dú)立于染色體外并能自我復(fù)制的小環(huán)狀DNA分子, 在細(xì)菌細(xì)胞分裂時(shí)能穩(wěn)泄傳遞給予代的遺傳因子。¼ V Il ： II. 填空題判斷題1： ”細(xì)胞學(xué)說”是由徳國植物生理學(xué)家Haberlandt （哈布蘭特）于1902年提 出

17、的。參考答案：錯(cuò)填空題判斷題4： RFLP分子標(biāo)記多態(tài)性出現(xiàn)只能由限制性酶切位點(diǎn)的改變所導(dǎo)致。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題5： WeStern雜交是針對(duì)轉(zhuǎn)基因生物外源Ll的基因RNA轉(zhuǎn)錄水平的檢測。參考答案錯(cuò)誤填空題判斷題6： White首先建立了世界上第一例人工合成培養(yǎng)基。夢(mèng)考答案:It填空題判斷題7：胞質(zhì)雜種屬于非對(duì)稱雜種的一種形式。參考答案：正確填空題判斷題8：分子標(biāo)記是遺傳標(biāo)記的一種形式。參考答案：iE確填空題判斷題9：花粉培養(yǎng)可以獲得單倍體植株。參考答案：正確填空趣判斷題10：基因槍介導(dǎo)的基因遺傳轉(zhuǎn)化屬于物理轉(zhuǎn)化。參考答案：正確填空題判斷題13：將酶解的原生質(zhì)體與蔗糖溶液（23%-25

18、%）混合離心純化原生質(zhì)體的方 法稱為下沉法純化。4 *處左;孕填空題判斷題14：抗體與抗原的結(jié)合是特異性的，一種抗體分子只能與其對(duì)應(yīng)的抗原結(jié) 合。參考答案：錯(cuò)誤填空題判斷題17：世界上轉(zhuǎn)基因植物種植而積最大的國家是阿根廷。參考答案：卡昔決填空題判斷題20：我國首例商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因園藝植物是耐貯藏的番茄-華番一號(hào)“。參考答案：iE確第四批作業(yè)論述題】簡答題1.用于構(gòu)建文庫的CDNA載體應(yīng)具有哪些共同的特性？參考答案：答：（1）能在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行獨(dú)立和穩(wěn)定的DNA門我復(fù)慎（2）易十從宿上細(xì) 胞中分離，并進(jìn)行純化。（3）在其DNA序列中，具有適、耳的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)。 這些位點(diǎn)位于DA復(fù)制的非必需

19、區(qū)內(nèi)，可在這些位點(diǎn)上插入外源DNA,但不影響 載體自身DA的復(fù)制。（4）具有能夠觀察的表型特征，在插入外源DA后，這 些表型特征可以作為重組DNA的選擇標(biāo)志。論述題簡答題2.園藝植物組織培養(yǎng)的作用體現(xiàn)在哪些方面？參考答案：答：（1）、快速繁殖。離體培養(yǎng)方法已成為一些恫藝植物良種繁疔的一種有力手段, 可產(chǎn)生了明顯的經(jīng)濟(jì)效益。（2）、脫毒種苗培養(yǎng)。（3）、提髙育種效率，改良品種。A、培育 單倍體:B、胚與胚乳培養(yǎng):C、與常規(guī)育種技術(shù)相結(jié)合,提高育種成效。、種質(zhì)資源保 存。（5）、進(jìn)行生理生化，細(xì)胞學(xué)，遺傳學(xué)等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究。論述題簡答題6轉(zhuǎn)基因食品評(píng)價(jià)的內(nèi)容包括哪些方而？；考答案:答：、仃U物質(zhì)咽

20、食比H他同種仃史多的毒素，必須 確保轉(zhuǎn)入外源基因或基因產(chǎn)物對(duì)人畜無毒C （2）、過敏源C主要分析基因的來源、目標(biāo)蛋白 與已知過敏源的序列同源性、目標(biāo)蛋白與已知過敏患者血淸中IgE能否發(fā)生免疫反應(yīng)，另外 還要考虔營養(yǎng)物質(zhì)和抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量等。3）營養(yǎng)問題。外源基因可能對(duì)食品的營養(yǎng)價(jià)值 產(chǎn)生無法預(yù)期的改變，其中有些營養(yǎng)降低而另些營養(yǎng)增加。（4）對(duì)抗生素的抵抗作用°遺 傳工程體中引入的抗生素抗性基因是否有町能轉(zhuǎn)移到肖腸道的微生物或上皮細(xì)胞中，并成功 地結(jié)合和表達(dá)，從而對(duì)抗生素產(chǎn)生抗性，影響到人或動(dòng)物的安全。論述題簡答題4:植物原生質(zhì)體培養(yǎng)主要用于哪些領(lǐng)域？答：C類型的原生質(zhì)體融合克服傳統(tǒng)育

21、種方法所而臨的生殖障礙，創(chuàng)造新的種質(zhì)材料。（3）、篩選 突變體。 由于原生質(zhì)體在培養(yǎng)過程中能夠產(chǎn)生體細(xì)胞無性系變異，可以從中選出具有優(yōu) 良性狀的變異體，因此可成為農(nóng)作物改良的重要遺傳資源。（4）、遺傳轉(zhuǎn)化。（5）、基礎(chǔ)研究。 原生質(zhì)體為細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、細(xì)胞生理學(xué)、病毒學(xué)等學(xué)科的呈礎(chǔ)理論研究提供了想 的實(shí)驗(yàn)體系。論述題簡答題5.轉(zhuǎn)基因沉默的原因及對(duì)策？.匕 V 1 I I 殺：答：轉(zhuǎn)基因在受體植物中往往不能穩(wěn)定表達(dá)，有時(shí)械至完全不表達(dá)，出現(xiàn)轉(zhuǎn)基因 沉默現(xiàn)象。轉(zhuǎn)基因沉默的原因是多方面的，根據(jù)外源基因失活或沉默的分子機(jī)制, 可將其分為三類：位置效應(yīng)、轉(zhuǎn)錄水平的基因沉默（TGS）和轉(zhuǎn)錄后水半的

22、基因沉 默（PTGS）。防止基因沉默的對(duì)策主要從以下方面實(shí)現(xiàn)：（1）轉(zhuǎn)化載體中應(yīng)盡量 避免使用相同的啟動(dòng)子及重復(fù)序列并保證載體上的構(gòu)建序列在同一個(gè)方向閱讀 以免產(chǎn)生異?；蚍戳xRA,盡量使用植物偏愛密碼子。（2）使用去I卩基化試劑。（3）轉(zhuǎn)基因的側(cè)翼接上核基質(zhì)結(jié)合序列NAR）會(huì)在一左程度上避 免位宜效應(yīng)，提高基因表達(dá)。（4）將外源DNA整合到染色體的特泄位點(diǎn)上。論述題簡答題3.在植物病毒檢測中將涉及到單克隆抗體的制備，簡述制備的基本步驟？參考答案：（1）免疫注射C用病毒抗原免疫注射實(shí)驗(yàn)用小白鼠。（2）細(xì)胞融合。取免疫小 白鼠的脾細(xì)胞,jtl瘤細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，使兩者融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。（3）克隆

23、化。 采 用稀釋法，取單細(xì)胞在培養(yǎng)板中進(jìn)行培養(yǎng)。（4）、篩選。采用血淸學(xué)方法，用已知的抗原病 毒對(duì)單細(xì)胞培養(yǎng)液中的抗體進(jìn)行檢測，保留抗體分泌陽性的單細(xì)胞系。（5抗體生產(chǎn)?？捎?一定濃度的雜交瘤細(xì)胞注射小白鼠腹腔，使英產(chǎn)生腹水，取腹水離心后獲得含抗體的腹水" 或?qū)⑺@的雜交瘤細(xì)胞株在盛有培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得含單克隆抗體的培養(yǎng)液。 第五批作業(yè)論述題1、一個(gè)完整的組織培養(yǎng)室由哪些部分所構(gòu)成？參考答案：答：（1）洗滌室。洗滌室用于組織培養(yǎng)用的玻璃器皿、塑料器IlIL和其他實(shí)驗(yàn)用 具清洗。（2）儲(chǔ)存室。用于各類器肌和用具的存放與保管。配備各種規(guī)格的貨 架、貨柜、塑料框等。（3）培養(yǎng)基

24、配制室。培養(yǎng)基配制室主要用來完成培養(yǎng)基 配制的各個(gè)環(huán)節(jié)的工作，如藥品的稱量、溶解，培養(yǎng)基的配制和分裝等。（4） 滅菌室。滅菌室用于培養(yǎng)基、玻璃器皿及接種匸具的滅菌。（3）接種室。（6） 培養(yǎng)室。培養(yǎng)室要求衛(wèi)生清潔、保溫和隔熱效果要好。窗戶用雙層玻璃，以利于 隔熱保溫，還可防1匕灰塵、昆蟲及微生物的進(jìn)入，達(dá)到清潔效果。（7）研究室。 研究室用于對(duì)培養(yǎng)材料及培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察、鑒定、記錄和分析。（8）溫室或 苗圃。 溫室用來對(duì)培養(yǎng)的再生植株的馴化和移栽。論述題4.如何對(duì)轉(zhuǎn)入植物基因組中的外源目的基因進(jìn)行檢測？參考答案：答：（1）對(duì)轉(zhuǎn)入的Ll的基因序列片段進(jìn)行檢測。包括兩種手段：一是PCR方法 檢測外

25、源基因：】是用SOUthern 交方法，以目的基因Dm為探針，檢測植物 展因組中與其同源的部分。常見有SOUthern斑點(diǎn)朵交和SOUthern印跡雜交兩種。（2）轉(zhuǎn)入I的基因的RNA轉(zhuǎn)錄水平檢測。包括兩種方式:一是NOrthern雜交，通 過總RM或mRA與探針的雜交來分析：二是RT-PCR,以植物總RNA或mRNA為 模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后經(jīng)PCR擴(kuò)增Ll的基因特異條帶。（3）外源基因表達(dá)蛋口的檢測。外源基因編碼蛋白在轉(zhuǎn)基因植物中能夠正常表 達(dá)并表現(xiàn)出應(yīng)有的功能乃是植物基因轉(zhuǎn)化的最終Ll的。外源基因表達(dá)蛋白檢測主 要利用免疫學(xué)原理，主要采用ELISA檢測、Western雜交檢測。ELISA檢測程序 包括抗體制備、抗體或抗原的包被、免疫反應(yīng)及檢岀三個(gè)階段。Western雜交程 序包括轉(zhuǎn)基因植株蛋口提取、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)條帶 印跡、探針制備、朵交檢出五個(gè)步驟。論述題3、植物培養(yǎng)基由哪些成分構(gòu)成，具有何作用？參考答案：答：（1）、無機(jī)營養(yǎng)成分。主要包括氮、磷、硫、鉀、鈣、鎂、鐵、鐳、銅、 鋅