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1、植物細(xì)胞工程重點(diǎn),老師上課時(shí)指點(diǎn)的。題型為:名詞解釋?zhuān)羁?,單選,判斷,簡(jiǎn)答。0. 緒論1 細(xì)胞工程( cell engineering ): 應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法,借助工程學(xué)的試驗(yàn)方法或技術(shù),在細(xì)胞水平上改造生物遺傳特性和生物學(xué)特性,已獲得特定的細(xì)胞、細(xì)胞產(chǎn)品或新生物體的有關(guān)理論和技術(shù)方法的學(xué)科。細(xì)胞工程的核心技術(shù):細(xì)胞培養(yǎng)與繁殖。目的:獲得新形狀,新個(gè)體,新物質(zhì)。2 為什么細(xì)胞工程是現(xiàn)代生物技術(shù)的橋梁和紐扣?細(xì)胞工程把蛋白質(zhì)工程,基因工程, 生物制藥等學(xué)科和代謝工程, 動(dòng)植物改良, 組織工程等學(xué)科聯(lián)系在一起。3 細(xì)胞工程研究范疇:細(xì)胞工程研究范疇涉及細(xì)胞,組織,器官,胚胎的培養(yǎng),
2、細(xì)胞融合和亞細(xì)胞操作技術(shù)。4 細(xì)胞工程與相關(guān)學(xué)科的關(guān)系( 1 )細(xì)胞工程的建立依賴于相關(guān)學(xué)科理論的發(fā)展;( 2 )細(xì)胞工程為生物學(xué)研究提供了新的實(shí)驗(yàn)體系,從而又促進(jìn)了生物科學(xué)的迅速發(fā)展;( 3 )細(xì)胞工程必須與其他的生物技術(shù)相結(jié)合才能更好的發(fā)揮作用。5 細(xì)胞工程的應(yīng)用和意義:( 1 )改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù):動(dòng)植物品種改良與繁殖;( 2 )保護(hù)生態(tài)環(huán)境:生物工業(yè)避免化學(xué)工業(yè)污染;名貴藥物的細(xì)胞生產(chǎn)保護(hù)自然資源;( 3 )生物醫(yī)藥、生物材料的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用:以生物技術(shù)為依托的新型產(chǎn)業(yè)具有極大的商業(yè)潛力,也是本世紀(jì)各國(guó)幾句競(jìng)爭(zhēng)的領(lǐng)域之一。6 本章小結(jié)現(xiàn)代生物技術(shù)是一個(gè)綜合技術(shù)體系;細(xì)胞工程在現(xiàn)代生物技術(shù)中起
3、著橋梁和紐帶作用;細(xì)胞工程的產(chǎn)生和發(fā)展依賴于生物科學(xué)相關(guān)領(lǐng)域的理論和技術(shù)發(fā)展;1.第一章1基本實(shí)驗(yàn)室包括:準(zhǔn)備室,無(wú)菌室,培養(yǎng)室。2滅菌(1)接種室滅菌:紫外燈照射(無(wú)菌室、超凈臺(tái));熏蒸滅菌(無(wú)菌室);噴霧消毒(超凈臺(tái);無(wú)菌室)。(2)接種工具、容器的滅菌:干熱滅菌或濕熱滅菌。在無(wú)菌操作時(shí),把鑷子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精中,使用之前取出在酒精燈火焰上灼燒滅菌。冷卻后,立即使用。(3)培養(yǎng)基:一般用高溫蒸汽滅菌。(4)不耐熱類(lèi)物質(zhì)的滅菌。過(guò)濾除菌:某些激素(如天然生長(zhǎng)素IAA、玉米素ZT、赤霉素GA等)、維生素、抗生素等不耐熱或射線照射的物質(zhì)。3 培養(yǎng)基基本成分:水,無(wú)機(jī)鹽(大量元素和
4、微量元素);有機(jī)成分,激素和其他。培養(yǎng)基其他成分:瓊脂糖,活性炭,附加復(fù)合成分(碳水化合物,維生素,肌醇,天然復(fù)合物)。(注:加粗字體部分的答案不確定是否如此)4 常用的植物激素:生長(zhǎng)素(Auxins);細(xì)胞分裂素(Cytokinins);赤霉素(GA)。生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素。高:有利于根的形成和愈傷組織的形成;適中:有利于根芽的分化;低:有利于芽的形成5 常用培養(yǎng)基:M即養(yǎng)基,White 培養(yǎng)基,B5培養(yǎng)基,N6培養(yǎng)基。其中,N6培養(yǎng)基是中國(guó)人朱至青發(fā)明的培養(yǎng)基。6植物離體培養(yǎng)類(lèi)型:組織培養(yǎng),器官培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)。7 外植體取材原則。根據(jù)培養(yǎng)需求選擇植物部位;多年生植物注意樹(shù)齡和季節(jié);在不影響培
5、養(yǎng)目的的前提下盡可能選擇自然繁殖器官作為外植體。8 外植體滅菌:外植體-清洗整理-殺菌劑滅菌-無(wú)菌水清洗。外植體無(wú)菌處理:組織清洗-70%酒精浸1030s-滅菌劑處理-無(wú)菌水涮洗。(此步驟應(yīng)在超凈臺(tái)上完成)(?。哼@兩個(gè)知識(shí)點(diǎn)好像說(shuō)的是同一個(gè)意思,大家自己看著辦)9 本章小結(jié)。細(xì)胞工程的核心是無(wú)菌操作和培養(yǎng);實(shí)驗(yàn)室建立在滿足技術(shù)要求的同時(shí)要經(jīng)濟(jì)高效和實(shí)用;設(shè)備配置應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)而定;培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型確定適宜配方;適宜的外植體是培養(yǎng)的前提,光照、溫度是植物離體培養(yǎng)的基本條件。2. 第二章1 細(xì)胞全能性:一個(gè)細(xì)胞所具有的產(chǎn)生完整生物個(gè)體的固有能力稱(chēng)之為細(xì)胞的全能性。脫分化:培
6、養(yǎng)條件下使已分化的細(xì)胞回復(fù)到原始無(wú)分化狀態(tài)或分生細(xì)胞狀態(tài)的過(guò)程。再分化:離體條件下,脫分化后具有分生能力的細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)細(xì)胞分化,重新形成各類(lèi)組織和器官、形成新個(gè)體的過(guò)程。愈傷組織:由外植體組織增生的細(xì)胞產(chǎn)生的一團(tuán)不定型的疏散排列的薄壁細(xì)胞。2 離體培養(yǎng)條件下,細(xì)胞全能性的表達(dá)是通過(guò)細(xì)胞脫分化和再分化實(shí)現(xiàn)的。3 細(xì)胞的脫分化分為3個(gè)階段:?jiǎn)?dòng)階段:液體蛋白體出現(xiàn)是脫分化的標(biāo)志;演變階段:細(xì)胞核向中央移動(dòng),質(zhì)體演變成原生質(zhì)體;終結(jié)階段:細(xì)胞回復(fù)到分生細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞分裂即將開(kāi)始。4 細(xì)胞脫分化調(diào)控的實(shí)質(zhì)就是G0期細(xì)胞回復(fù)到分裂周期的調(diào)控過(guò)程。5 器官發(fā)生方式:先芽后根,先根后芽,芽根同時(shí)。6 器官發(fā)
7、生過(guò)程。經(jīng)過(guò)愈傷組織的器官發(fā)生:愈傷組織的形成;生長(zhǎng)中心的形成;器官原基及器官形成。不經(jīng)過(guò)愈傷組織的器官發(fā)生:細(xì)胞第一次平周分裂;生長(zhǎng)中心形成;原初分生組織;芽原基形成。7 本章小結(jié)。細(xì)胞全能性是細(xì)胞工程的基本理論基礎(chǔ);細(xì)胞全能性的表達(dá)能力與細(xì)胞分化程度有關(guān);離體培養(yǎng)下細(xì)胞全能性表達(dá)是通過(guò)細(xì)胞分化和再分化實(shí)現(xiàn)的;器官發(fā)生和體細(xì)胞胚胎發(fā)生是植物細(xì)胞再生個(gè)體的基本途徑;植物細(xì)胞離體再生能力是受遺傳調(diào)控和培養(yǎng)條件的雙重調(diào)節(jié)。3. 第三章1 細(xì)胞工程技術(shù)的雙重性:遺傳穩(wěn)定性,變異性。2本章小結(jié)細(xì)胞工程技術(shù)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞具有遺傳穩(wěn)定性和變異性的雙重影響體細(xì)胞變異在培養(yǎng)類(lèi)型中具有普遍性,在變異形狀上具有局限性
8、體細(xì)胞變異可自發(fā)產(chǎn)生,也可以通過(guò)理化因子誘導(dǎo)產(chǎn)生體細(xì)胞變異包括染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)變異,但大多數(shù)可利用變異多為基因突變利用體細(xì)胞變異可以直接培育品種也可作為生物學(xué)相關(guān)研究的基礎(chǔ)材料4. 第四章1 廣義的組織培養(yǎng)依explant不同,可分為:器官培養(yǎng),莖尖分生組織培養(yǎng),愈傷組織培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng),原生質(zhì)體培養(yǎng)。2 植物脫毒的基本原理和流程?;驹恚翰《驹谥参矬w內(nèi)的分布具有不均勻性?;玖鞒蹋海?)母體植株的選擇和預(yù)處理;(2)莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株;(3)脫毒效果檢測(cè);(4)脫毒苗的保存與繁殖。3 脫毒植物的鑒定方法:直觀鑒定,指示植物鑒定,抗血清反應(yīng)鑒定,電鏡技術(shù)鑒定。4 離體無(wú)性繁殖(快繁):人
9、工控制的無(wú)菌環(huán)境下,使植物在培養(yǎng)基上繁殖的技術(shù),跟常規(guī)繁殖技術(shù)相比是一種微型操作過(guò)程,有時(shí)稱(chēng)之為微繁。5 離體無(wú)性繁殖的操作過(guò)程:外植體選擇;外植體培養(yǎng);植物再生育增殖;生根培養(yǎng)。6 花藥培養(yǎng)屬于器官培養(yǎng)范疇,花粉培養(yǎng)也稱(chēng)小孢子培養(yǎng),屬于細(xì)胞培養(yǎng)范疇。7 花藥培養(yǎng):把發(fā)育到一定階段的花藥接種在人工培養(yǎng)基上,使其發(fā)育和分化成為植株的過(guò)程?;ǚ叟囵B(yǎng)(小孢子培養(yǎng)):從花藥中分離出花粉粒,使之成為分散的或游離狀態(tài),通過(guò)培養(yǎng)使花粉粒脫分化,進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過(guò)程。8 花藥或花粉培養(yǎng)在作物育種中的作用:(1)縮短育種年限;(2)提高了目標(biāo)基因型的選擇效率;(3)誘變育種中的作用;(4)利于篩選隱性突變體
10、,提高誘變效率,(5)利于獲得優(yōu)良植株,(6)應(yīng)用于遠(yuǎn)緣雜交,克服不育性。9 胚胎培養(yǎng):胚胎培養(yǎng)是將植物的胚胎與母體分離,培養(yǎng)在已知化學(xué)成分的培養(yǎng)基獲得再生植株的培養(yǎng)過(guò)程。幼胚培養(yǎng):對(duì)發(fā)育早期的胚進(jìn)行培養(yǎng)。幼胚培養(yǎng)的方法:1、材料的選擇與滅菌:確定授粉后天數(shù)與胚胎發(fā)育的相應(yīng)關(guān)系,對(duì)于遠(yuǎn)緣雜種胚,要在其夭折前培養(yǎng)。2、幼胚的分離及培養(yǎng)。(1)分離:先取出胚珠,剝離珠被,取出完整的幼胚,后培養(yǎng)。(2)培養(yǎng):胚離體培養(yǎng)發(fā)育時(shí)期分為異養(yǎng)期和自養(yǎng)期。在心形期轉(zhuǎn)入自養(yǎng)生長(zhǎng)。對(duì)于難培養(yǎng)的幼胚,可利用胚乳看護(hù)培養(yǎng)。10 植物胚乳的發(fā)育特性。植物胚乳可以分為兩大類(lèi):被子植物胚乳和裸子植物胚乳。被子植物胚乳是雙受
11、精的產(chǎn)物,它由二個(gè)極核和一個(gè)雄配子融合形成,所以,在染色體倍性上它屬于三倍體組織。裸子植物很特殊,它的胚乳在受精前就已形成。裸子植物的胚乳為配子體的一部分,由大孢子直接分裂發(fā)育而成,因此它是單倍體組織。胚乳按發(fā)育初期是否形成細(xì)胞壁可分為三種類(lèi)型:核型胚乳:胚乳最初發(fā)育經(jīng)過(guò)一段游離核階段,絕大多數(shù)被子植物的胚乳屬于核型胚乳。游離核階段時(shí)間長(zhǎng)短因植物不同而異。細(xì)胞型胚乳:和核型胚乳不同,細(xì)胞型胚乳的發(fā)育不經(jīng)過(guò)游離核階段而按正常的細(xì)胞分裂方式進(jìn)行。胚乳初生核第一次分裂后即形成兩個(gè)子細(xì)胞,以后每次分裂都形成細(xì)胞壁。沼生目型胚乳:沼生目型胚乳是核型與細(xì)胞型之間的中間型。初生胚乳核第一次分裂為細(xì)胞型,以后
12、兩個(gè)細(xì)胞中的核進(jìn)行游離核分裂。單子葉植物的某些類(lèi)群。11 本章小結(jié)植物脫毒快繁是無(wú)性植物種苗生產(chǎn)的最有效技術(shù)植物花胚是創(chuàng)造單倍體的有效途徑,被子植物胚乳培養(yǎng)可獲得三倍體外植體選擇是植物組織培養(yǎng)的基本環(huán)節(jié),根據(jù)不同培養(yǎng)目的確定取材原則培養(yǎng)物增殖方式和植株再生途徑直接影響遺傳穩(wěn)定性,應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)類(lèi)型和目的慎重選擇5. 第五章(細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是重點(diǎn))1 懸浮培養(yǎng):懸浮培養(yǎng)是指將單個(gè)游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。2 由愈傷組織誘導(dǎo)進(jìn)行懸浮培養(yǎng)的過(guò)程(由組織器官經(jīng)愈傷組織分離單細(xì)胞)。(1)誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織;(2)愈傷組織反復(fù)繼代,使組織不斷增殖,提高愈傷組織松散性;(3)將愈傷組織在
13、液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立懸浮培養(yǎng)物。3 進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),幼胚、胚軸、子葉是最常使用的外植體。4 一個(gè)成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個(gè)條件:懸浮培養(yǎng)物分散性良好,均一性好,細(xì)胞生長(zhǎng)迅速。(這道題很重要,你懂的)5 細(xì)胞同步化:細(xì)胞同步化是指統(tǒng)一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時(shí)通過(guò)細(xì)胞周期的某個(gè)特定時(shí)期。6 獲得同步化細(xì)胞的方法:饑餓法,抑制劑法,分選法,低溫處理。7 單細(xì)胞培養(yǎng)的方法。平板培養(yǎng)法:將一定密度的懸浮細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合后平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)法;看護(hù)培養(yǎng):操作方法是在固體培養(yǎng)基上置入一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織,再在愈傷組織上放一小片濾紙,待濾紙濕潤(rùn)后將細(xì)胞接種到濾紙上。
14、當(dāng)培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)出微小細(xì)胞團(tuán)以后,將其直接轉(zhuǎn)置瓊脂培養(yǎng)基上讓其迅速生長(zhǎng);微室培養(yǎng):對(duì)單細(xì)胞活體連續(xù)觀察。這一方法同樣也可用于原生質(zhì)體培養(yǎng)觀察細(xì)胞壁的再生與細(xì)胞分裂過(guò)程;雙層濾紙植板培養(yǎng):Horsch等(1980)將平板培養(yǎng)與飼養(yǎng)層培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合,建立了雙層濾紙植板培養(yǎng)方法。8 本章小結(jié)細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)有可能成為新型生化工業(yè)的重要途徑,細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)的基礎(chǔ)各種單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞克隆的基礎(chǔ)技術(shù),也適用于植物花粉培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)高等生物細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)體系的建立必須與生物反應(yīng)器的研制相匹配根據(jù)目的產(chǎn)物建立包括培養(yǎng)基、種細(xì)胞、培養(yǎng)方式等在內(nèi)的一系列配套技術(shù)是商業(yè)化的前提6. 第六章1 原生質(zhì)
15、體:指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說(shuō)一個(gè)被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。2 本章小結(jié)原生質(zhì)體是植物除去細(xì)胞壁后的裸露細(xì)胞,是進(jìn)行各種細(xì)胞操作的理想系統(tǒng)原生質(zhì)體的分離和純化是原生質(zhì)體操作和培養(yǎng)的前提分離的原生質(zhì)體活性受供體材料和分離條件的影響原生質(zhì)體屬于細(xì)胞工程精細(xì)技術(shù),培養(yǎng)技術(shù)的成熟程度將直接影響體系的應(yīng)用性細(xì)胞原生質(zhì)體操作因具有眾多的優(yōu)點(diǎn)而成為未來(lái)研究的熱點(diǎn)7. 第七章1 體細(xì)胞雜交:兩個(gè)離體細(xì)胞通過(guò)一定誘導(dǎo)技術(shù)使質(zhì)膜接觸而融合在一起隨后導(dǎo)致兩個(gè)細(xì)胞核物質(zhì)融合的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交則是指除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體融合。2 根據(jù)融合時(shí)細(xì)胞的完整程度,原生質(zhì)體融合可分為兩大類(lèi):對(duì)稱(chēng)融合(asymmetricfusio
16、n)即兩個(gè)完整的細(xì)胞原生質(zhì)體融合。非對(duì)稱(chēng)融合(symmetricfusion)利用物理或化學(xué)方法使某親本的核或細(xì)胞質(zhì)失活后再進(jìn)行融合。3 .原生質(zhì)體融合的方法。PEG融合優(yōu)點(diǎn):融合成本低,勿需特殊設(shè)備;融合子產(chǎn)生的異核率較高;融合過(guò)程不受物種限制。缺點(diǎn):融合過(guò)程繁瑣,PEG可能對(duì)細(xì)胞有毒害。電融合與PEG融合比較起來(lái),電融合有三大優(yōu)點(diǎn):不存在對(duì)細(xì)胞的毒害問(wèn)題;融合效率高;融合技術(shù)操作簡(jiǎn)便。4 體細(xì)胞雜種的運(yùn)用獲得新物種;獲得新種質(zhì)和新品種;轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)基因控制形狀。5 影響原生質(zhì)體融合的因素原生質(zhì)體質(zhì)量對(duì)細(xì)胞的融合起著至關(guān)重要的作用,高質(zhì)量的原生質(zhì)體是細(xì)胞融合的首要條件;融合方法;融合參數(shù),包括
17、各種融合液都應(yīng)選擇適當(dāng)。6 本章小結(jié)植物體細(xì)胞雜交即原生質(zhì)體融合,是獲得胞質(zhì)雜種的理想途徑體細(xì)胞雜交在遠(yuǎn)緣育種和新物種、新資源創(chuàng)造中具有深遠(yuǎn)意義原生質(zhì)體融合技術(shù)主要有PEG融合和電融合雜種的成功培養(yǎng)是建立在原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)上的,選擇和鑒定是獲得細(xì)胞雜種的關(guān)鍵提高融合效率和培養(yǎng)重復(fù)性是該技術(shù)研究的重點(diǎn)細(xì)胞雜種是體細(xì)胞遺傳研究的良好體系8. 第八章1 人工種子:任何一種繁殖體,無(wú)論是在涂膜膠囊中包裹的、裸露的或經(jīng)過(guò)干燥的,只要能夠發(fā)育成完整的植株,均可稱(chēng)之為人工種子。2 人工種子的類(lèi)型。根據(jù)包被的需要程度可分為三類(lèi):裸露的或休眠的繁殖體、人工種皮包被的繁殖體、水凝膠包埋再包被人工種皮的繁殖體。根據(jù)
18、繁殖體的類(lèi)型可分為兩類(lèi):體細(xì)胞胚人工種子、非體細(xì)胞胚人工種子。3 人工種子的生產(chǎn)流程。繁殖體的人工誘導(dǎo)與生產(chǎn)增殖;繁殖體的篩選和預(yù)處理;人工種子的包埋。4 本章小結(jié)人工種子是在實(shí)驗(yàn)室人工控制條件下生產(chǎn)的繁殖體,其應(yīng)用具有眾多生物學(xué)意義和社會(huì)意義人工種子繁殖體包括體細(xì)胞胚、微型變態(tài)器官和微芽,根據(jù)植物種類(lèi)不同可適當(dāng)選擇人工種子應(yīng)用的基本條件是繁殖體的工廠化生產(chǎn)和配套技術(shù)的成熟無(wú)性繁殖的植物種子有望最先得以應(yīng)用9. 第九章(了解即可)10. 本章小結(jié)生物細(xì)胞的低溫凍存是防止生物種質(zhì)滅絕的重要途徑低溫凍存技術(shù)的應(yīng)用取決于凍存技術(shù)和再培養(yǎng)技術(shù)的成熟程度根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇凍存和解凍方法是再培養(yǎng)成功的前提凍
19、存和恢復(fù)過(guò)程中的遺傳變異值得關(guān)注各位,這是植物細(xì)胞工程平時(shí)的小測(cè)題目,答案是我自己填上去的,可以參考下一、名詞解釋?zhuān)杭?xì)胞工程:應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法,借助工程學(xué)的試驗(yàn)方法或技術(shù),在細(xì)胞水平上改造生物遺傳特性和生物學(xué)特性,已獲得特定的細(xì)胞、細(xì)胞產(chǎn)品或新生物體的有關(guān)理論和技術(shù)方法的學(xué)科細(xì)胞脫分化:培養(yǎng)條件下使一個(gè)已經(jīng)分化的細(xì)胞回復(fù)到原始無(wú)分化狀態(tài)或者分生細(xì)胞狀態(tài)的過(guò)程就是細(xì)胞脫分化體細(xì)胞無(wú)性系:把由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株統(tǒng)稱(chēng)為體細(xì)胞無(wú)性系懸浮培養(yǎng):是指將單個(gè)游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)花粉培養(yǎng):從花藥中分離出花粉粒,使之成為分散的或游離狀態(tài),通過(guò)培養(yǎng)使花粉粒脫
20、分化,進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過(guò)程.外植體:指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織和器官等材料,它是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料極性:指植物的器官、組織甚至單個(gè)細(xì)胞在不同軸向上存在著某種形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理生化上的梯度差異植物原生質(zhì)體:指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說(shuō)一個(gè)被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交:兩個(gè)離體細(xì)胞通過(guò)一定誘導(dǎo)技術(shù)使質(zhì)膜接觸而融合在一起隨后導(dǎo)致兩個(gè)細(xì)胞核物質(zhì)融合的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交則是指除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體融合細(xì)胞同步化:是指統(tǒng)一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時(shí)通過(guò)細(xì)胞周期的某個(gè)特定時(shí)期種質(zhì)資源低溫保存:是指將植物的細(xì)胞或組織經(jīng)過(guò)防凍處理后,在-80C以下的超低溫下保存的方法。一、填空題:1、離體培養(yǎng)中器
21、官發(fā)生的方式有:先芽后根、先根后芽、在愈傷組織的不同部位形成芽和%。2、細(xì)胞工程技術(shù)的雙重性:遺傳穩(wěn)定性、變異性3、花粉原生質(zhì)體的具有單倍體、原生質(zhì)體雙重優(yōu)點(diǎn)。4、原生質(zhì)體融合的種類(lèi):對(duì)稱(chēng)融合、非對(duì)稱(chēng)融合。三、問(wèn)答:1、什么是細(xì)胞全能性?其內(nèi)在含義有哪些?一個(gè)細(xì)胞所具有的產(chǎn)生完整生物個(gè)體的固有能力稱(chēng)之為細(xì)胞的全能性。內(nèi)在含義:細(xì)胞全能性的相對(duì)性(1)不是所有基因型的所有細(xì)胞在任何條件下都具有良好的培養(yǎng)反應(yīng)(2)即使對(duì)于植物細(xì)胞而言,細(xì)胞全能性也并不意味著任何細(xì)胞均可以直接產(chǎn)生植物個(gè)體(3)動(dòng)、植物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度存在明顯的差異2、什么是體細(xì)胞胚?其內(nèi)含包括哪些方面?概念:離體培養(yǎng)下沒(méi)有受精
22、過(guò)程,但經(jīng)過(guò)了胚胎發(fā)生過(guò)程形成的胚的類(lèi)似物(不管培養(yǎng)的細(xì)胞是體細(xì)胞還是生殖細(xì)胞),統(tǒng)稱(chēng)為體細(xì)胞胚或胚狀體。內(nèi)含有:(1)體細(xì)胞胚是離體培養(yǎng)的產(chǎn)物,只限于離體范圍使用,以區(qū)別于無(wú)融合生殖胚(2)體細(xì)胞胚起源于非合子細(xì)胞,以區(qū)別于合子胚(3)體細(xì)胞胚形成經(jīng)過(guò)了胚胎發(fā)育過(guò)程,以區(qū)別與離體培養(yǎng)器官發(fā)生形成個(gè)體的途徑3、植物脫毒原理以及基本流程?原理:病毒在植物體內(nèi)的分布具有不均勻性基本流程:(1)母體植株的選擇和預(yù)處理(2)莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株(3)脫毒效果檢測(cè)(4)脫毒苗的保存與繁殖4、人工種子的概念和類(lèi)型?概念:人工種子又稱(chēng)合成種子或體細(xì)胞種子,任何一種繁殖體,無(wú)論是在涂膜膠囊中包裹的、裸露的
23、或經(jīng)過(guò)干燥的,只要能夠發(fā)育成完整的植株,均可稱(chēng)之為人工種子。類(lèi)型:人工種子根據(jù)包被情況和繁殖體類(lèi)型有兩種分類(lèi)方法(1)根據(jù)包被的需要程度可分為三類(lèi):裸露的或休眠的繁殖體、人工種皮包被的繁殖體、水凝膠包埋再包被人工種皮的繁殖體(2)根據(jù)繁殖體的類(lèi)型可分為兩類(lèi):體細(xì)胞胚人工種子、非體細(xì)胞胚人工種子5、金屬制品、玻璃器皿、活性物質(zhì)、溶液分別采用何種滅菌的方法?(不好意思,這題的答案不是很確定)金屬制品:使用前可采用干熱滅菌;使用過(guò)程中的滅菌通常是將其浸泡在70%酒精中,再以火焰將酒精燒去,待冷卻后使用。玻璃器皿:干熱滅菌:160-180C,;濕熱滅菌:121C,20-30min活性物質(zhì):不耐熱類(lèi)物質(zhì)
24、:過(guò)濾滅菌:某些激素(如天然生長(zhǎng)素IAA、玉米素ZT、赤霉素GA等)、維生素、抗生素等不耐熱或射線照射的物質(zhì)。溶液:不穩(wěn)定的藥品溶液:過(guò)濾滅菌。穩(wěn)定的溶液:高壓蒸汽滅菌一、填空題20”1、培養(yǎng)基的固化劑有瓊脂、等。2、植物細(xì)胞工程是一門(mén)以條件下的植物組織和細(xì)胞的和_3、時(shí)變異幅度大的品系,可以從這些群體中選擇,進(jìn)行,生產(chǎn)出的大量種苗。4、是區(qū)別于和的一種特殊的誘變方法。5、技術(shù)用于克服遠(yuǎn)源雜交不親和,技術(shù)用于得到雜合細(xì)胞,技術(shù)只可用于品種復(fù)壯。6、組培中污染的原因主要有:、設(shè)備和設(shè)備、等原因。二、判斷題10”1、 植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的同義詞或近義詞2、 培養(yǎng)基不凝固可能是缺鈣。3、 MSW養(yǎng)基沒(méi)有加入氯化鈣,但是加入了碘化鉀。4、 由不定胚誘導(dǎo)出愈傷組織是脫分化而不是再分化。5、 植物組織培養(yǎng)中出現(xiàn)的突變有一些只是表型上的變異。6、 在植物組織培養(yǎng)的滅菌與處理中,熱療法是具有普遍效果的方法。7、 化學(xué)滅菌劑中的次
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