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文檔簡介
1、醫(yī)院污水監(jiān)測方法 細菌總數(shù)及糞大腸菌群的測定1. 采樣時間在消毒后 1 小時,排放前進行采樣2. 采樣方法1) 水樣瓶采集前必須進行滅菌,并需保證在裝運、保持過程中不受污染2) 在采集水樣時,先將出水口消毒, 然后將水龍頭完全打開, 放水 5-10min, 以排除管道內的貯水后再采水樣。3) 如果是經加氯處理的污水,應按每 500ml 加 1.5% 硫代硫酸鈉 2ml 中和 余氯,終止余氯的殺菌作用。4) 所才的水量為采樣瓶容量的 80% 左右,以便在檢驗時可以充分搖動水樣。5) 水樣從采集到檢驗一般不超過 2h, 如放冰箱保存,也應不超過 4h.3. 細菌總數(shù)的測定:細菌總數(shù)是指1ml水樣在
2、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,于 37 C培養(yǎng)48h后,所生長的細菌菌落 數(shù)。操作方法:1) 無菌操作吸取 10ml 充分混勻的水樣注入盛有 90mln 滅菌蒸餾水的玻璃 瓶中,混勻成 1:10 稀釋液。2) 吸取 1:10 稀釋液 1ml 注入盛有 9ml 滅菌水的試管中,混勻成 1:100 稀 釋液。3) 用涂抹法或傾注法接種平皿。4) 置37 °C培養(yǎng)48h后計數(shù)菌落數(shù),報告1ml水樣的細菌總數(shù)。精品資料4. 糞大腸菌群的檢驗方法采用發(fā)酵法。步驟: 初發(fā)酵試驗 平板分離 復發(fā)酵試驗初發(fā)酵試驗1) 將水樣作 1:10 及 1:100 稀釋2) 水樣的接種 1:100 稀釋水樣 (相當于原水樣
3、 0.1ml)1ml原水樣 1ml 以上分別注入 10ml 普通濃度 (單料)乳糖蛋白胨液中 (內有 倒管)。原水樣 10ml 注入 5ml3 倍濃縮(三料)乳糖蛋白胨液中(內有倒管) 如水樣較清潔,再取原水樣 10ml 注入50ml3 倍濃縮乳糖蛋白胨液中,上述發(fā)酵管置 44 C, 24h 培養(yǎng)。平板分離將產酸產氣及只產酸不產氣的發(fā)酵管,分別接種伊紅美藍培養(yǎng)基上,于37 C培養(yǎng)18 24 小時,挑去深紫黑色、 具有金屬光澤的菌落 (或紫黑色, 不帶或略帶金屬光澤的菌落; 淡紫紅色、中心色較深的菌落) ,進行涂片、染色、鏡檢。復發(fā)酵試驗挑取鏡檢為革蘭陰性無芽孢桿菌的典型菌落 13 革,接種于一
4、支單料乳糖發(fā)酵管內,44 C培養(yǎng)24h,產酸產氣即證實有大腸菌群存在。精品資料結果報告根據證實有大腸菌群存在的陽性管(瓶)數(shù)查表 1或表2,報告沒升水樣中 的糞大腸菌群數(shù)。5、污水中沙門菌、志賀菌檢驗步驟:污水樣品過濾、稀釋、增菌處理:取 200ml污水,用滅菌濾膜進行抽濾;用 100ml二倍濃度SF (亞硒酸鹽增菌液)把濾膜上截留的雜質洗脫倒滅菌三角 燒瓶內,充分搖勻,置于37 C培養(yǎng)24 48h ;挑選可疑菌落接種于雙糖37 C 培養(yǎng)18 24小時。鑒定:生化、血清學試驗,檢驗結果報告一定體積樣品中存在或不存在沙門三、報告填寫編號:格式:ZG-XJ-JL 細菌總數(shù)檢測報告樣品名稱:檢測日期:生產日期:稀釋度101001000菌落計數(shù)(CFU)3503302802603238平均數(shù)(CFU)結果(CFU)檢測人:審核人:編號:格式:ZG-XJ-JL精品資料大腸桿菌檢測報告樣品名稱:檢測日期:生產日期:稀釋度10100100
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