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文檔簡介

1、生化需氧量( BOD5 )測定一、原理生化需氧量是指在規(guī)定的條件下, 微生物分解存在于水中的某些可氧化物 質, 主要是有機物質所進行的生物化學過程中消耗溶解氧的量。 分別測定水樣 培養(yǎng)前的溶解氧含量和20 士 1 C培養(yǎng)五天后的溶解氧含量,二者之差即為五日 生化過程中所消耗的溶解氧量( BOD5)。對于某些地面水及大多數工業(yè)廢水、生活污水,因含較多的有機物,需要 稀釋后再培養(yǎng)測定,以降低其濃度,保證降解過稱在有足夠溶解氧的條件下進 行的。其具體水樣稀釋倍數可借助于高錳酸鉀指數或化學需氧量(COD)推算。對于不含或少含微生物的工業(yè)廢水, 在測定BOD時應進行接種,以引入能 分解廢水中有機物的微生

2、物。 當廢水中存在難于被一般生活污水中的微生物以 正常速度降解的有機物或含有劇毒物質時,應接種經過馴化的微生物。二、儀器1 、恒溫培養(yǎng)箱2、5-20L 細口玻璃瓶3、10002000mL 量筒4、玻璃攪棒:棒長應比所用量筒高長20 cm。在棒的底端固定一個直徑比 量筒直徑略小,并帶有幾個小孔的硬橡膠板。5、溶解氧瓶:200-300mL,帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。6、宏吸管:供分取水樣和添加稀釋水用。三、試劑1、磷酸鹽緩沖溶液:將 8.5g 磷酸二氫鉀( KH2PO4),21.75g 磷酸氫二鉀(K2HPO), 33.4g 磷酸氫二鈉(NaHPO 7HQ)和 1.7g 氯化銨(NHC

3、I)溶于 水中,稀釋至1000mL。此溶液的PH值應為7.2 。2、硫酸鎂溶液:將22.5g硫酸鎂(MgSQPHQ)溶于水中,稀釋至1000mL。3、氯化鈣溶液:將 27.5g 無水氯化鈣溶于水中,稀釋至 1000mL。4、氯化鐵溶液:將0.25g氯化鐵(FeCl3 - 6H2O)溶于水,稀釋至1000mL5、鹽酸溶液(0.5mol/L ):將40 mL ( p =1.18g/ mL )鹽酸溶于水,稀釋 至 1000mL。6、氫氧化鈉溶液 (0.5mol/L ):將 20g 氫氧化鈉溶于水, 稀釋至 1000mL。7、亞硫酸鈉溶液( C1/2 Na2SO3=0.025 mol/L ):將 1.

4、575g 亞硫酸鈉溶于 水,稀釋至1000mL。此溶液不穩(wěn)定,需每天配制。&葡萄糖一谷氨酸標準溶液:將葡萄糖(GH2O)和谷氨酸鈉(HOOCH CH CHNH COO)在 103 C干燥1h后,各稱取150mg溶于水中,移入1000 mL 容量瓶內并稀釋至標線,混合均勻。此標準溶液臨用前配制。9、稀釋水:在5-20L玻璃瓶內裝入一定量的水,控制水溫在 20 C左右。然后用無油空氣壓縮機或薄膜泵, 將此水曝氣 2-8h ,使水中的溶解氧接近飽和, 也可以鼓入適量純氧。瓶口蓋以兩層經洗滌晾干的紗布, 置于20 C培養(yǎng)箱內放 置數小時,使水中的溶解氧量達到 8mg/L。臨用前于鎂升水中加入氯

5、化鈣溶液、 氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL,并混合均勻。稀釋水的PH值應為7.2,其BOD5應小于0.2 mg/L。10、接種水:可選用以下任一方法,以獲得適用的接種液。(1)城市污水,一般采用生活污水,在在室溫下放至一晝夜,取上層清液使用。(2)表層土壤浸出液, 取 100g 花園土壤或植物生長土壤, 加入 1L 水, 混合并靜置 10min ,取上清液供用。(3)用含城市污水的河水或湖水。(4)污水處理廠的出水。(5)當分析含有難于降解的廢水時, 在排污口下游 3-8km 處取水樣作 為廢水的馴化接種液。如無此種水源,可取中和或經適當稀釋后的廢水進行連 續(xù)曝氣、每天加入少量

6、該種廢水,同時加入適量表層土壤或生活污水,使能適 應該種廢水的微生物大量繁殖。當水中出現大量絮狀物,或檢查其化學需氧量 的降低值出現突變時,表明適用的微生物已進行繁殖,可用作接種液。一般馴 化過程需要 3-8 天。11、接種稀釋水:取適量接種液,加于稀釋水中,混勻。每升稀釋水中接種液加入量生活污水為1-10 mL ;表層土壤浸出液為 20-30mL;河水、湖水為 10-100mL。接種稀釋水的PH值應為7.2,其BOD5值宜在0.3-1.0 mg/L 之間為宜。 接種稀釋水配制后應立即使用。四、測定步驟1、水樣的預處理(1 )水樣的 PH 若超出 6.5-7.5 范圍時, 可用鹽酸或氫氧化鈉溶

7、液調節(jié) 至近于 7 ,但用量不要超過水樣體積的 0.5%。若水樣的酸度或堿度很高, 可改 用高濃度的堿或酸進行調節(jié)中和。(2) 水樣中含有銅、鉛、鋅、鉻、鎘、砷、氰等有毒物質時,可使用經過 馴化的微生物接種液的稀釋水進行稀釋, 或增大稀釋倍數, 以減少毒物的濃度。(3) 含有少量游離氯的水樣,一般放置 1-2h ,游離氯即可消失。對于游離 氯在短時間內不能消散的水樣,可加入亞硫酸鈉溶液,以除去之。其加入量的 計算方法是:取中和好的水樣 100 mL加入1+1乙酸10mL, 10%(m/v)碘化 鉀溶液 1 mL ,混勻。以淀粉溶液為指示劑,用亞硫酸鈉標準溶液滴定游離碘。 根據壓硫酸鈉標準溶液消

8、耗的體積及濃度,計算水樣中所需要加入亞硫酸鈉溶 液的量。(4) 從水溫較低的水域中采集的水樣,可遇到含有過飽和溶解氧,此時應將水樣迅速升溫至20 C左右,充分振搖,以趕出過飽和的溶解氧。從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣,則應迅速使其冷卻至20 C左右,并充分振搖,使與空氣中氧分壓接近平衡。2、水樣的測定(1)不經稀釋水樣的測定:溶解氧含量較高、有機物含量較少的地面水, 可不經稀釋,而直接以虹吸法將約20 C的混勻水樣轉移至兩個溶解氧瓶內, 轉 移過程中應注意不使其產生氣泡。以同樣的操作使兩個溶解氧瓶充滿水樣,加 塞水封。立即測定其中一瓶溶解氧。將另一瓶放入培養(yǎng)箱中,在20 士 1C培養(yǎng)5

9、 天后,測其溶解氧。2)需經稀釋水樣的測定稀釋倍數的確定:地面水可由測得的高錳酸鹽指數乘以適當的系數求出稀釋倍數(見下表)mg/L)<55-1010-20>高錳酸鹽指數 系 數0.2 、0.30.4 、0.60.5 、 0.7 、1.0工業(yè)廢水可由重鉻酸鉀法測得的 COD 值確定。 通常需作三個稀釋比, 即使 用稀釋水時,由 COD 值分別乘以系數 0.075 、0.15 、0.225 ,即獲得三個稀釋 倍數;使用接種稀釋水時,則分別乘以 0.075 、0.15 和 0.225 ,獲得三個稀釋 倍數。稀釋倍數確定后按照下述方法之一測定水樣 一般稀釋法 :按照選定的稀釋比例,用虹吸法

10、沿筒壁先引入部分稀釋 水(或接種稀釋水)于 1000 mL 量筒中,加入需要量的均勻水樣,再引入稀釋 水(或接種稀釋水)至800mL,用帶膠板的玻璃棒小心上下攪勻。攪拌時勿使 攪棒的膠板露出水面,防止產生氣泡。按不經稀釋水樣的測定步驟,進行瓶裝,測定每天溶解氧和培養(yǎng) 5 天后的 溶解氧量。另取兩個溶解氧瓶,用虹吸法裝滿稀釋水(或接種稀釋水)作為空白,分別測 定 5 天前、后的溶解氧含量。 直接稀釋法:直接稀釋法是在溶解氧瓶內直接稀釋。在已知倆個容積相同(其差小于1mL)的溶解氧瓶內,用虹吸法加入部分稀釋水(或接種稀釋 水),再加入根據瓶容積和稀釋比例計算出的水樣量, 然后引入稀釋水 (或接種

11、稀釋水)至剛好充滿,加塞,勿留氣泡于瓶內。其余操作與上述稀釋法相同。在BOD5測定中,一般采用疊氮化鈉改良法測定溶解氧。如遇干擾物質,應根據 具體情況采用其它測定法。溶解氧的測定方法附后。五、計算1、不經稀釋直接培養(yǎng)的水樣BOD (5 mg/L) =C1-C2式中:G水樣在培養(yǎng)前的溶解氧濃度(mg/L);C2水樣經5天培養(yǎng)后,剩余溶解氧濃度(mg/L)。2、經稀釋后培養(yǎng)的水樣式中:BOD( mg/L) = (G-C2) ( B1-B2) f1 / f2C1水樣在培養(yǎng)前的溶解氧濃度( mg/L);C2水樣經5 天培養(yǎng)后,剩余溶解氧濃度( mg/L);B1稀釋水(或接種稀釋水)在培養(yǎng)前的溶解氧濃度( mg/L);B2稀釋水(或接種稀釋水)在培養(yǎng)后的溶解氧濃度( mg/L);稀釋水(或接種稀釋水)在培養(yǎng)液中所占比例;水樣在培養(yǎng)液中所占比例。六、注意事項1、測定一般水樣的 BOD5 時,硝化作用很不明顯或根本不發(fā)生。但對于生 物處理池出水,則含有大量硝化細菌。因此,在測定BOD5 時也包括了部分含氮化合物的需氧量。對于這種水樣,如只需測定有機物的需氧量,應加入硝化抑 制劑,如丙烯基硫脲(ATU C 4H8

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