抗生素4pp課件

1、 抗生素生產(chǎn)抗生素生產(chǎn)沙土孢子沙土孢子冷凍孢子冷凍孢子斜面孢子斜面孢子種子（液）種子（液）種子（固）種子（固）種子罐種子罐種子罐種子罐發(fā)酵罐發(fā)酵罐菌種篩選菌種篩選搖瓶實(shí)驗(yàn)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)1 菌種選育v抗生素工業(yè)生產(chǎn)的三個主要環(huán)節(jié) 菌種選育、發(fā)酵、提煉 青霉素發(fā)酵： 2u/ml250u/ml1000u/ml80000u/ml 1929年 1943年 1945年 現(xiàn)在v選育(mutation and selection): 菌種經(jīng)過誘變因素處理，然后用隨機(jī)方法或理性的方法進(jìn)行篩選，獲得目的菌種菌種選育技術(shù) v經(jīng)驗(yàn)育種：自然選育、誘變育種v現(xiàn)代菌種選育：雜交育種、原生質(zhì)體融合、分子育種自然選育v利用微生物

2、在一定條件下產(chǎn)生自發(fā)突變的原理，通過分離，篩選排除衰退型菌株，從中選擇維持原有生產(chǎn)水平的菌株 v是一種純種選育的方法 誘變育種v利用誘變劑處理微生物群體，使其中部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而引起微生物性狀發(fā)生改變，然后從群體中篩選出目的菌株的過程v特點(diǎn)：速度快、收效大、方法簡便 缺乏定向性、工作量大v主要包括出發(fā)菌株的選擇、誘變處理和篩選突變株三個部分出 發(fā) 菌 種 ( 沙 土 管 或 冷 凍 管 ) 原 種 特 性 考 察 斜 面 或 肉 湯 培 養(yǎng)2 4 h 單 孢 子 懸 液 細(xì) 菌 懸 液 誘 變 處 理 處 理 前 后 的 孢 子 液 或 細(xì) 菌 懸 液 作 活 菌 計(jì) 數(shù) 并

3、 統(tǒng) 計(jì) 其存 活 率 稀 釋 涂 布 平 皿 觀 察 單 菌 落 形 態(tài) 并 統(tǒng) 計(jì) 其 形 態(tài) 變 異 率 挑 取 單 菌 落 傳 種 斜 面 搖 瓶 初 篩 對 照 組 挑 出 高 產(chǎn) 斜 面 傳 種 斜 面 搖 瓶 復(fù) 篩 ( 重 復(fù)3 5 次 ) 對 照 組 挑 出 高 產(chǎn) 菌 株 作 穩(wěn) 定 性 試 驗(yàn) 和 菌 種 特 性 考 察 放 大 中 試 考 查 ， 保 藏 菌 種 大 型 投 產(chǎn) 試 驗(yàn) 誘變劑v凡能顯著提高生物體突變頻率的各種因素都稱為誘變劑v 誘變劑種類：v1.物理誘變劑：主要包括紫外線（uv）、x射線（xray）、射線(-ray)、快中子(fn)、射線、超聲波、激光

4、等。 紫外線胞嘧啶光化產(chǎn)物v形成胸腺嘧啶二聚體形成胸腺嘧啶二聚體 影響影響dna復(fù)制復(fù)制ctaggatcctaggatc紫外線紫外線紫 外 線 2.化學(xué)誘變劑v烷化劑：亞硝基胍、甲基磺酸、亞硝酸等v堿基類似物： 5-溴尿嘧啶、 6-氨基嘌呤等v嵌合劑：吖啶類染料、溴化乙錠等v抗生素：絲裂霉素c 、放線菌素d等 烷化鳥嘌呤與胸腺嘧啶錯誤配對烷化鳥嘌呤與胸腺嘧啶錯誤配對3.生物誘變劑v噬菌體：溶源性噬菌體v轉(zhuǎn)座因子影響誘變效果的因素1、選擇合適的出發(fā)菌株v即通過選育能有效提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量的菌株v用作誘變的出發(fā)菌株必須產(chǎn)量高，對誘變劑的敏感性大，變異幅度大2、采用分散狀態(tài)的孢子懸浮液處理3、采用單核細(xì)胞（或核質(zhì)體）處理4、注意微生物的生理狀態(tài)v對數(shù)期的細(xì)菌、霉菌或放線菌的分生孢子稍稍萌發(fā)5、適宜的誘變劑量v同一誘變劑一次使用、先后多次使用v不同誘變劑同時使用、先后多次使用等v誘變劑的復(fù)合處理常常呈現(xiàn)一定的協(xié)同效應(yīng)