大學(xué)-細(xì)胞工程試題及答案

1、細(xì)胞模擬試題及答案填空（每空一分，共25分）1. 實(shí)驗(yàn)室的物理防護(hù)是由隔離的設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)驗(yàn)實(shí)施等三個(gè)方面組成，根據(jù)其密封程度的不同，分為P1、P2、P3 P4四個(gè)生物安全等級(jí)。典型的 P4實(shí)驗(yàn)室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。2. 細(xì)胞系是原代培養(yǎng)經(jīng)初步純化獲得的以一種細(xì)胞為主的、能在體外長(zhǎng)期生存的不均一細(xì)胞群體。3. 細(xì)胞株是指從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。自穩(wěn)性。4. 干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。干細(xì)胞的增殖特性為緩慢性和5. 培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是

2、基于動(dòng)物細(xì)胞的全能性。7.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和半連續(xù)培養(yǎng)。8.植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消毒過程中,消毒的基本原則是既要?dú)⑺栏街渖系奈⑸镉植粨p傷材料。9.細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定的一般方法為：細(xì)胞計(jì)數(shù)、測(cè)定細(xì)胞密實(shí)體積、細(xì)胞鮮重或干重。10.體外培養(yǎng)的細(xì)胞根據(jù)其生長(zhǎng)方式主要分為貼附型細(xì)胞和非貼附型細(xì)胞。11.人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細(xì)胞融合主要經(jīng)過了兩原生質(zhì)體或細(xì)胞互相靠近、細(xì)胞橋形成、胞質(zhì)滲透、細(xì)胞核融合幾個(gè)步驟。其中細(xì)胞橋形成是最關(guān)鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有形態(tài)鑒定、細(xì)胞學(xué)鑒定、雜交鑒定、分子標(biāo)記鑒定。14. 胚胎工程主要是

3、對(duì)哺乳類動(dòng)物的胚胎進(jìn)行某種人為的工程技術(shù)操作，然后讓它繼續(xù)發(fā)育,獲得人們所需要的成體動(dòng)物。15. 人工誘導(dǎo)單倍體形成的方法包括：遠(yuǎn)緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養(yǎng)等。單項(xiàng)選擇題（每題1分，共10分）1. 人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分，以前只能從人參中提取產(chǎn)量極低，因而價(jià)格昂貴。目前人參皂甙粉可以通過下列哪項(xiàng)技術(shù)迅速大量獲取（B）A .基因工程B.植物組織培養(yǎng)C .植物體細(xì)胞雜交D .發(fā)酵工程2. 下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述不正確的是（ C）通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理，以使細(xì)胞分散細(xì)胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中3.目前使用的或冷凍保存的

4、正常細(xì)胞通常為 10 代以內(nèi)的，以保持其正常核型盡管各種合成培養(yǎng)基給動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)帶來(lái)極大方便， 但許多實(shí)驗(yàn)表明， 單純使用合成培養(yǎng)基細(xì)胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時(shí)通常仍然需要加入一定量的(C)A.平衡鹽溶液B. 瓊脂糖C. 動(dòng)物血清D. 甘露醇4. 制備人工種子的關(guān)鍵是控制(A)A. 胚狀體的同步發(fā)育B.人工種皮的同步發(fā)育C. 胚狀體的單獨(dú)發(fā)育D.人工種皮的單獨(dú)發(fā)育5.細(xì)胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導(dǎo)細(xì)胞融合。A. 仙臺(tái)病毒法B.PEG誘導(dǎo)C. 電融合誘導(dǎo)法D.高Ca+和pH誘導(dǎo)法6. 中胚層來(lái)源的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)一般表現(xiàn)為哪種形態(tài)（A）A. 成纖維細(xì)胞型細(xì)胞B

5、.多形型細(xì)胞C. 上皮型細(xì)胞D.游走型細(xì)胞7. 在每一代貼附生長(zhǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)過程中,哪一個(gè)時(shí)期的細(xì)胞數(shù)隨時(shí)間變化成倍增長(zhǎng) ,活力最佳 ,最適合進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究（ D）A. 穩(wěn)定期B. 衰亡期C.潛伏期D.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期8. 以下哪種方法或技術(shù)適合進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)？（D）A. 懸滴培養(yǎng)法B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法C.旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法D.多孔載體培養(yǎng)技術(shù)9. 單克隆抗體制備選擇親本時(shí)應(yīng)選擇（A)A. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動(dòng)物屬于同一品系B. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動(dòng)物屬于不同品系C. B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤屬細(xì)胞屬于不同品系D. B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞無(wú)親緣關(guān)系10. 下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（

6、D）A卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加B胚胎分割時(shí)需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割C胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)D胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可從早期胚胎中分離獲取多項(xiàng)選擇（每題 3份，共 15分）1. 由外植體或單個(gè)細(xì)胞形成愈傷組織一般要經(jīng)過三個(gè)步驟（ABD）A.啟動(dòng)期B.生長(zhǎng)期C.分裂期D.分化期2. 植物單細(xì)胞培養(yǎng)方法有（ ABCD）A. 平板培養(yǎng)法B.看護(hù)培養(yǎng)與飼養(yǎng)層培養(yǎng)法C. 液體淺層靜置培養(yǎng)法D.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)法3. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)室，無(wú)論細(xì)胞種類和供體的年齡如何，在細(xì)胞的全生長(zhǎng)過程中大致都要經(jīng)過三個(gè)主要階段（ ABC）A. 原代培養(yǎng)期B.傳代期C. 衰退

7、期D.穩(wěn)定期4. 干細(xì)胞從所具有的分化功能上分為（ABC)A. 單能干細(xì)胞B.多能干細(xì)胞C. 全能干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞5. 動(dòng)物多倍體育種的方法有（ ABC）A. 溫度休克法B.水靜壓法C. 細(xì)胞松弛素 BD.秋水仙素四、簡(jiǎn)答題（共 35分）1. 二級(jí)生物安全適用于處理什么材料，具體要求有哪些（ 8 分）答：適用于：（1）來(lái)自于來(lái)自于靈長(zhǎng)類動(dòng)物的材料和細(xì)胞系（2） 接觸過靈長(zhǎng)類的病毒或被其轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系（3） 含有支原體的細(xì)胞系。要求：1）2）所有污染物都應(yīng)放入裝滿蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中；3）大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進(jìn)行高壓消毒；所有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作都應(yīng)使用垂直層流生物安全小室

8、；在處理或沖洗用過的器皿前，應(yīng)先進(jìn)行高壓消毒； 進(jìn)行操作時(shí)要帶乳膠手套。2. 原生質(zhì)體分離的方法有哪些，各有何優(yōu)缺點(diǎn)（ 6 分）答：（1）機(jī)械法優(yōu)點(diǎn)：可避免酶制劑對(duì)原生質(zhì)體的破壞。缺點(diǎn)：獲得完整原生質(zhì)體的數(shù)量少，使用此法的植物種類有限。2）酶解法優(yōu)點(diǎn)：可獲得大量原生質(zhì)體，條件溫和，原生質(zhì)體完整性好，幾乎所有植物都可用此法。缺點(diǎn)：影響原生質(zhì)體的活力。3. 植物組織培養(yǎng)的基本步驟（ 6 分）答：（1）培養(yǎng)材料的采集2）培養(yǎng)材料的消毒3）制備外植體接種和培養(yǎng) 根的誘導(dǎo) 組織苗的練苗移栽4. 細(xì)胞系和細(xì)胞株的鑒定指標(biāo)及方法（ 8 分）答：鑒定指標(biāo)：（ 1）純度：分析以何種細(xì)胞為主， 所占比例為多少，

9、混雜有哪些其他細(xì)胞。2）細(xì)胞生物學(xué)特征：細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色體組型、生長(zhǎng)曲線、分裂指數(shù)、倍增時(shí)間是否與來(lái)源細(xì)胞一致。3）穩(wěn)定性：傳代過程中細(xì)胞學(xué)特征是否發(fā)生變化。4）污染情況：檢查是否有微生物或其他細(xì)胞系的污染。鑒定方法：細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察； 繪制生長(zhǎng)曲線， 計(jì)算分裂指數(shù)； 染色體組型和帶型分析；同工酶譜檢測(cè)4. 植物細(xì)胞固定化的方法及特點(diǎn)答：吸附法：利用固體吸附劑將細(xì)胞吸附在其表面而使細(xì)胞固定化的方法。包埋法：將細(xì)胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細(xì)胞的方法。特點(diǎn)：（1）5）由于載體的保護(hù)作用，減小剪切力作用，提高細(xì)胞存活率和穩(wěn)定性。細(xì)胞束縛在一定空間內(nèi)，不易聚集成團(tuán)，促進(jìn)代謝產(chǎn)物的分散?？珊?jiǎn)便地在不同培養(yǎng)階段更換不同的培養(yǎng)液。固定化植物細(xì)胞可連續(xù)反復(fù)使用，可縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率。容易與培養(yǎng)液分離，有利于產(chǎn)品的分離純化，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。五、綜合分析題（15 分）植物單細(xì)胞培養(yǎng)的程序及各步中應(yīng)注意的事項(xiàng)答：1. 建立細(xì)胞株1） 材料準(zhǔn)備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細(xì)胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c. 借助酶處理：酶的種類、濃度、處理時(shí)間都對(duì)材料有一定影響2） 制備細(xì)胞懸浮液a. 培養(yǎng)基成分篩選b.懸浮培養(yǎng)，振蕩次數(shù)為8090次/min c. 用 200300目鋼網(wǎng)過濾盒離心沉降2. 選擇細(xì)胞株平板篩選a.