aatcc47-20紡織品的抗菌性平行劃線法

1、AATCC14Z2011紡織品的抗菌性：平行劃線法本標(biāo)準(zhǔn)1976年由AATCC委員會(huì)RA31研發(fā)完成；1977,1982,1998重申， 1980,1982,1983,1986,2010編輯修正；1993,2011（標(biāo)題改變）修正；2004編輯修正并重申。前言平行劃線法能夠滿足對(duì)整理后織物上的抗菌整理劑擴(kuò)散性能的需要，并且這種方法相對(duì)快速，簡(jiǎn)單精確。AATCC100勺方法，是一種對(duì)紡織物材料的抗菌性能的評(píng)價(jià)方法，這種方法需要一定數(shù)量的步驟，這些步驟要有足夠的靈敏度。但是對(duì)于常規(guī)的質(zhì)量控制和篩選、試驗(yàn)，這些步驟比較難于處理并且較耗時(shí)。因此，當(dāng)目的是通過抗菌劑向瓊脂的擴(kuò)散性能來(lái)描述抑菌活性的話，A

2、ATCC147的這種方法能夠滿足這種需要。在平行劃線法中，瓊脂的表面是接種過的，這樣便于區(qū)分測(cè)試的微生物和未殺菌的污染物有機(jī)體。多年來(lái)，平行劃線法用于測(cè)試抗菌性能，革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性菌，已經(jīng)證明是有效的。1 .目的和范圍1.1目的是檢測(cè)紡織材料上的抑菌活性。這個(gè)過程的結(jié)果已經(jīng)被RA31委員會(huì)證明具有可重現(xiàn)性的，不同的實(shí)驗(yàn)室對(duì)材料用多種標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑進(jìn)行水洗之后，材料上仍然存在大量的抗菌劑（通過化學(xué)測(cè)試后得出的結(jié)論）。這種方法對(duì)于得到對(duì)活性的粗略估計(jì)上是有用的，這種方法中，接種液中的微生物從每條劃線的一端逐漸減少到另一端，然后又從一條劃線減少到另一條劃線，導(dǎo)致了敏感程度的增加。抑菌區(qū)域的大小

3、和劃線的變窄是由多次水洗后的殘留抗菌劑的抗菌性能引起的，即剩余抗菌性能的估計(jì)。2 .原理2.1測(cè)試材料的樣品，包括作為對(duì)照但未經(jīng)過處理的同樣的材料，然后把它們放在瓊脂表面。瓊脂事先用測(cè)試細(xì)菌接種液劃線。經(jīng)培養(yǎng)后，在測(cè)試材料的下面或者沿著材料兩邊的一個(gè)清晰的未生長(zhǎng)菌落區(qū)域，這表明樣品具有抗菌性。細(xì)菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株被應(yīng)用，這種標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)于正在測(cè)試的材料的需求是待定的。如果沒有指定的細(xì)菌，金黃色葡萄球菌就可能被應(yīng)用為革蘭氏陽(yáng)性微生物的代表。在第6部分會(huì)列出一些其他推薦的菌株。3 .專業(yè)術(shù)語(yǔ)3.1活性，名詞-對(duì)抗菌劑效能的一種評(píng)估。3.2抗菌劑。名詞-織物上任何可以殺死細(xì)菌（殺菌劑）或干擾其繁殖、生長(zhǎng)或細(xì)

4、菌活性的化學(xué)物質(zhì)（抑菌劑）。3.3抑菌圈，名詞-在一種瓊脂培養(yǎng)基的表面，一個(gè)明顯的生物有機(jī)物不生長(zhǎng)的地方。生物有機(jī)體養(yǎng)殖到瓊脂表面并與樣品直接接觸。注：抑菌圈的出現(xiàn)是由于試樣釋放出的抗微生物因子的擴(kuò)散而造成的。4 .安全防范注：這些安全防范僅僅是告知的目的。這些防范只是一些測(cè)試步驟的輔助，并不是所有的要進(jìn)行的步驟都要有的。在這個(gè)測(cè)試方法中，安全并適當(dāng)?shù)厥褂眉夹g(shù)對(duì)材料進(jìn)行處理是操作者應(yīng)有的責(zé)任。我們也必須向生產(chǎn)廠商咨詢一些特殊的細(xì)節(jié)，例如：材料的安全數(shù)據(jù)表和其他一些廠家的建議。我們也必須咨詢和遵守所有的職業(yè)衛(wèi)生條例的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)則。4.1這個(gè)測(cè)試由經(jīng)過培訓(xùn)的員工進(jìn)行操作，并且還需要參考美國(guó)的健康和人

5、類服務(wù)刊物；微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室。（見12.1）4.2警告：這個(gè)測(cè)試?yán)镉玫降囊恍┘?xì)菌是致病的；也就是說，能夠感染人類和產(chǎn)生疾病。因此，我們要采取一些必要的合理的措施去消除這種對(duì)是實(shí)驗(yàn)員和相關(guān)的環(huán)境所造成的風(fēng)險(xiǎn)。穿防護(hù)衣服和呼吸防護(hù)可阻止細(xì)菌的滲透。4.3我們應(yīng)該遵循良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范：在所有的試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)戴防護(hù)眼鏡。4.4小心所有的化學(xué)藥品。4.5洗眼水和消防設(shè)備（安全噴淋設(shè)備）應(yīng)該就近放置以備緊急使用。4.6在處理所有的被污染樣品和測(cè)試樣之前都要先滅菌4.7在這個(gè)程序中暴露在空氣中的化學(xué)藥品的含量應(yīng)當(dāng)控制在或者低于政府部門所規(guī)定的例如，1989年的29CFR1910.1000;詳情可見網(wǎng)址：的

6、最后一段。另外，美國(guó)政府及工業(yè)衛(wèi)生協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)化學(xué)品毒性規(guī)定的閥限值由時(shí)間加權(quán)平均值，短期暴露限值還有上限組成，一般推薦這些作為能夠空氣污染物限值（見12.2）0.5 .適用局限性5.1這種方法不適用于那些易于凝聚或者阻抗菌劑分散的材料或包含抗菌中和物質(zhì)的材料。6 .測(cè)試菌種金黃色葡萄球菌，ATCC6538CIP4.83,DSM799NBRC13276NCIMB951減等同菌種（見12.3）。肺炎克雷伯菌，ATCC4352CIP104216,DSM789NBRC13277NCIMB10341或等同菌種（見12.3）。其他適合的菌種是否可用取決于測(cè)試樣品的最終用途。根據(jù)良好的實(shí)驗(yàn)室操作標(biāo)準(zhǔn)來(lái)轉(zhuǎn)接菌

7、種。在任何可能的時(shí)候，用已知抑菌活性的標(biāo)準(zhǔn)樣品（陽(yáng)性控制）來(lái)測(cè)試菌種的活性。為了確定抗菌作用是否是由抗菌劑所產(chǎn)生的，使用其他同樣的處理試劑，但是不使用這種抗菌劑，用同種材料同種方法對(duì)樣品再進(jìn)行測(cè)試。許多標(biāo)準(zhǔn)的織物經(jīng)化學(xué)處理，特別是抗皺助劑和耐久壓燙助劑，通常能在多次洗滌后仍具有很強(qiáng)的抗菌活性。.設(shè)備，培養(yǎng)基和試劑培養(yǎng)基和試劑，合適的肉湯/瓊脂培養(yǎng)基有：營(yíng)養(yǎng)肉湯/瓊脂培養(yǎng)基（NBNA）胰蛋白月東大豆肉湯/瓊脂（TSB,TSA腦心浸出液肉湯/瓊脂（BH舊，BHIA）Muller-Hinton肉湯/瓊脂根據(jù)測(cè)試的菌種選擇合適的培養(yǎng)基設(shè)備培養(yǎng)箱，372（994F）接種環(huán)酒精燈水浴鍋，45-50C（11

8、3-122F）滅菌移液管：1ml帶蓋試管：10ml無(wú)菌培養(yǎng)皿：100mmx15mm無(wú)菌鑲子立體顯微鏡（40 x倍鏡）直尺.測(cè)試樣品測(cè)試樣品（未殺菌）試樣采用手切或者模切，可以是任意大小。建議切成25x50mmt勺長(zhǎng)方形樣品。長(zhǎng)為50mm證了樣品可以放在寬度從8mnM小到4mmi勺5條相互平行的接種線上。.試驗(yàn)步驟將152ml無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂（冷卻至472C）倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后進(jìn)行接種。接種前，取1.00.1ml、24h的液體培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移到裝有9.00.1ml蒸儲(chǔ)水的測(cè)試管或者小瓶中，適當(dāng)攪拌使其混合均勻。采用一根直徑4mm勺接種環(huán)，蘸一環(huán)稀釋培養(yǎng)液并轉(zhuǎn)移到無(wú)菌瓊脂平板的表面，在瓊脂表面劃

9、5條長(zhǎng)約60mm空間間隔10mm#且覆蓋了培養(yǎng)皿中間區(qū)域的接種線。輕壓測(cè)試樣（橫穿5條接種線）以確保樣品與瓊脂表面緊密接觸,子或者抹刀（使用前先經(jīng)火焰滅菌并且在空氣中立即冷卻）。若樣品有彎曲，從而阻止樣品與瓊脂表面緊密接觸，這時(shí)可以在樣品末端放置無(wú)菌玻璃片以固定樣品。培養(yǎng)在372下進(jìn)行，時(shí)間為18-24h。.評(píng)價(jià)檢查培養(yǎng)平板：菌種沿接種線在樣品附近間斷繁殖，在樣品邊緣形成一明顯抑菌區(qū)。沿著測(cè)試樣品每邊的接種線的抑制區(qū)的平均寬度可由下式計(jì)算：或者可以通過使用鎮(zhèn)W=（T-D）/2式中：W抑制區(qū)的寬度（毫米）T=測(cè)試樣品和抑菌區(qū)的總直徑（毫米）D=測(cè)試樣品的直接（毫米）抑制區(qū)的大小不能作為抗菌活性的

10、定量評(píng)價(jià)。經(jīng)抗菌劑處理的材料應(yīng)該同未經(jīng)處理的材料以及具有已知抑菌活性的樣品材料進(jìn)行對(duì)比。測(cè)試結(jié)果報(bào)告包括對(duì)抑菌區(qū)的觀察以及樣品下面細(xì)菌的生長(zhǎng)情況（若存在的話）。通過測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)必須同相關(guān)的當(dāng)事人達(dá)成一致。為了建立可接受的抗菌活性，要求在測(cè)試緊密接觸的下方必須無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。.精度和偏差這種方法的精度還沒有確立。在這種方法的精度和陳述還沒有產(chǎn)生之前，我們用標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)計(jì)技術(shù)對(duì)測(cè)試結(jié)果的組內(nèi)平均值或者組間平均值進(jìn)行對(duì)比。.附注和參考出版物可從美國(guó)健康與人類服務(wù)機(jī)構(gòu)-CDC/NH-HHHSB版物獲彳導(dǎo)。電話84-8395;網(wǎng)址：0小冊(cè)子可從出版局索?。篈CGIHKemperWoodsCenter,1330KemperMeadowDr.,CincinnatiOH45240;電話：513/742-2020;網(wǎng)址：。ATCC即美國(guó)典型微生物菌種保藏：P.O.Box1549,ManassasVa20108;電話：703/365-2700;傳真：703/365-2701;CIP即法國(guó)巴斯德研究所