培養(yǎng)基適用性檢查報告

1、培養(yǎng)基適用性檢查報告1. 試驗目的：對培養(yǎng)基性能的質量控制，以保證微生物檢驗的質量。2. 適用范圍：適用于細菌、霉菌及酵母菌計數用培養(yǎng)基和控制菌檢查用的培養(yǎng)基的適用性檢查。需檢查的培養(yǎng)基包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基和按處方配制的培養(yǎng)基。3. 試驗內容：3.1 .計數培養(yǎng)基的適用性檢查3.1.1. 菌種：大腸埃希菌CMCC( B)44102金黃色葡萄球菌CMCC( B)26003枯草芽抱菌CMCC( B)63501白色念珠菌CMCC (F) 98001黑曲霉CMCC ( F) 980033.1.2. 菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或瓊脂斜面培養(yǎng)基

2、中，33C培養(yǎng) 24小時，接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或 改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26C培養(yǎng) 48小時。上述培養(yǎng)物用 0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含菌數50100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中， 26C培養(yǎng)7天，加入4ml含0.05% ( ml/ml )聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉溶液，將抱子洗 脫。然后，用管口帶有薄的無菌棉花吸出抱子懸液至無菌試管內，用含0.05% (ml/ml )聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含菌數50100cfu的菌懸液。內使用。黑曲霉孢子懸液可保存在28C，在驗證過的貯存期內使用。3.

3、1.3.適應性檢查3.1.3.1.細菌計數用培養(yǎng)基適應性檢查1ml (50100cfu ),2個平皿，混勻，凝取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備 固，置33C培養(yǎng)48小時，計數。用被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基(若無對照培養(yǎng)基可用其他廠家生產的培養(yǎng) 基)按上述方法進行試驗，并記錄。試驗結果報告見表 1。報檢測日期告日期生 被檢培養(yǎng)基名產廠 稱家對照培養(yǎng)基名稱生產廠家菌落數：單位腸埃黃色草芽(cfu )希菌葡萄抱桿球菌菌被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基平均菌落數比值菌落形態(tài)大小結果判定備注表1細菌計數用培養(yǎng)基適用性檢查檢驗人：復核人：3.131

4、.霉菌及酵母菌計數用培養(yǎng)基適應性檢查取白色念珠菌、黑曲霉各 1ml （50100cfu ），分別注入無菌平皿中，立即 傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置 26C培養(yǎng)72小時，計數。用被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（若無對照培養(yǎng)基可用其他廠家生產的培養(yǎng)基）按上述方法進行試驗，并記錄。3.14結果判定若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數的70% （或與其他廠家生產培養(yǎng)基上菌落平均數相互比值不小于70%，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）上的菌落一致，判該培養(yǎng)基的適 用性檢查符合規(guī)定。試驗結果報告見表2。表2霉菌及酵母菌計數用培養(yǎng)基適用性

5、檢查報檢測日期告日期生稱被檢培養(yǎng)基名產廠家號批生批稱對照培養(yǎng)基名產廠家號菌落數：單位色念(cfu)曲霉珠菌被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基平均菌落數比值菌落形態(tài)大小 結果判定 備注檢驗人：復核人:32控制菌(大腸埃希菌)培養(yǎng)基的適用性檢查321.菌種:大腸埃希菌CMCC (B) 44102金黃色葡萄球菌CMCC (B) 26003322.菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33C培養(yǎng)24小時，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含菌數為10100cfu的菌懸 液。菌液制備后若在室溫下放置，應在2小時內使用；若保存在 28C，可在24小時內使用。3.2.

6、3.適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示能力 的檢查。大腸埃希菌培養(yǎng)基的檢測項目及所用菌株見表3。試驗表3大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)性特菌株膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌大腸埃希菌4-甲基傘形酮匍萄甘 促生長能力+指示酸培養(yǎng)基(MUG能力曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基（ EMB或麥康促生長能力+指示大腸埃希菌凱瓊脂培養(yǎng)基能力（MacC膽鹽乳糖培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml （不大于100cfu ）的大腸埃希菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和 對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）

7、中，33C培養(yǎng)18小時，與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管大腸埃希菌應生長良好。膽鹽乳糖培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml （不少于100cfu ）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和 對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）中， 33E培養(yǎng)24小時，金黃色葡萄球菌 不得生長。4-甲基傘形酮葡萄苷酸培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）分別接種0.2ml （不大于100cfu ）的大腸埃希菌至5mlMUG被檢培養(yǎng)基和對照 培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）的試管內，33°C培養(yǎng)，于5小時、24小時在366nm紫外光下觀察，被檢培養(yǎng)基應與對照培養(yǎng)

8、基管（或與其他廠家生產培養(yǎng)基） 大腸埃希菌生長情況一致，并呈現(xiàn)熒光。觀察后，分別沿被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）的管壁加入數滴靛基質試液，液面均應呈玫瑰紅色。曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml （含菌數50100cfu ）分別涂布于曙紅亞甲藍瓊脂被檢 培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時，被 檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培 養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：紫黑色、淺紫色、藍紫 色或粉紅色，菌落中心呈深紫

9、色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表 面光滑，濕潤，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml （含菌數50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：鮮桃紅色或微紅色，菌落中 心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。表4大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日期報告日期培養(yǎng)基促生長膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性名稱能力

10、試驗菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間被檢培批號生長養(yǎng)基廠家情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結果判疋備注培養(yǎng)基抑制能特性力名稱膽鹽乳糖培養(yǎng)基試驗困培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間被檢培生長養(yǎng)基廠批號情況家對照培生長養(yǎng)基廠批號情況家結果判疋備注試驗困株被檢培養(yǎng)基廠家培養(yǎng)溫培養(yǎng)度時間批號對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況5小時 24小時觀察 觀察靛基質指示培養(yǎng)基促生長能特性力、指示MUG名稱能力被檢培養(yǎng)基廠對照培養(yǎng)基廠家結果判疋備注培養(yǎng)基曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基名稱促生長能特性力、指示能力試驗菌培養(yǎng)溫株度培養(yǎng)時間批號批號被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家菌落大菌落形 生長情況小 態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結果判疋備注培養(yǎng)基促生長能培養(yǎng)基麥康

11、凱瓊脂培養(yǎng)基名稱特性力、指示能力試驗菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間被檢培批號養(yǎng)基廠對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況菌落大菌落形小 態(tài)33控制菌（乙型副傷寒沙門菌）培養(yǎng)基的適用性檢查被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結果判疋備注檢驗人：I復核人：3.3.1.菌種:乙型副傷寒沙門菌CMCC(B) 50094金黃色葡萄球菌CMCC( B) 260033.32菌液制備接種乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33°C培養(yǎng)24小時，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數 為10100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應在 2小時內使用；若保存在28C，可在2

12、4 小時內使用。3.3.3.適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示能力 的檢查。沙門菌培養(yǎng)基的檢測項目及所用菌株見表50表5沙門菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基抑制能力特性 試驗菌株促生長能力 乙型副傷寒沙門菌 促生長能力 乙型副傷寒沙門菌 金黃色葡萄球菌促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門菌膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基或沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門困 脂培 口養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型副傷寒沙門菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接

13、種1ml （不大于100cfu ）的乙型副傷寒沙門菌于200ml營養(yǎng)肉湯被檢培 養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）中， 33C培養(yǎng)18小時，與對照培 養(yǎng)基管（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管沙門菌應生長良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml （不大于100cfu ）的乙型副傷寒沙門菌于10ml四硫磺酸鈉亮綠 被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）中，33E培養(yǎng)18小時，與對照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管乙型副傷寒沙門菌 應生長良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml （不少于100cfu ）的金

14、黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基被檢培 養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）中， 33C培養(yǎng)24小時，金黃色葡 萄球菌不得生長。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數50100cfu）分別涂布于膽鹽硫乳瓊脂 被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況 等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淺橙色，半 透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色。沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基

15、（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數50100cfu ）分別涂布于沙門、志賀瓊 脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33°C培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況 等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淡紅色， 半透明或不透明，菌落中心有時帶黑褐色。曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍瓊 脂被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)

16、基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況 等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透 明或半透明，光滑濕潤的圓形菌落。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被 檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應情況等應 與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一

17、致。半透明，菌落中心有時為暗色三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各 0.1ml （不大于 100cfu ）分別涂布于三糖鐵被檢培養(yǎng)基 和對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種， 33°C培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、 指示劑反應情況等應與對照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產培養(yǎng)基）一致。在三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面見紅色、底層見黃色；或斜面黃色、底層黑色表6 乙型副傷寒沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日報告日期期培養(yǎng)基促生長營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 特性名稱能力試驗菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間被檢培生長 養(yǎng)基廠批號情況 家

18、對照培生長養(yǎng)基廠批號情況 家結果判疋被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家備注培養(yǎng)基促生長四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性名稱能力試驗困培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間生長 批號情況生長 批號情況結果判疋備注培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性 抑制能名稱試驗困株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間被檢培養(yǎng)基廠家批號生長情況對照培養(yǎng)基廠家批號生長情況結果判疋備注培養(yǎng)基膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基名稱特性促生長能力、指示能力試驗菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時間被檢培批號養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠批號家菌落形態(tài)菌落大 生長情況小被檢培養(yǎng)基廠家對照培養(yǎng)基廠家結果判疋備注培養(yǎng)基 沙門、志賀菌屬瓊脂培名稱特性養(yǎng)基促生長能力、指示能力培養(yǎng)時間試驗菌培養(yǎng)溫株度被檢培養(yǎng)基廠批號家對照培養(yǎng)基廠批號家菌落大菌落形 生長情況小