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1、唾液淀粉酶活性觀察唾液淀粉酶活性觀察 食品生物化學(xué) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了解T、pH、抑制劑和激活劑 酶活力的影響酶活性受T、pH、S、E、激活劑和抑制劑影響藍(lán)藍(lán)紫紅紫紅黃黃 表示酶促反應(yīng)又慢到快碘遇淀粉變藍(lán) 吸收波長(zhǎng)峰值:660nm酶活力單位定義:100ml唾液中的淀粉酶 37 15min 5mg淀粉試劑:0.5%硫酸銅溶液、0.5%蔗糖溶液、0.5%氯化鈉溶液、1g/L淀粉溶液、碘化鉀-碘溶液、緩沖溶液器材:試管及試管架、移液管、量筒、鑷子、脫脂棉球、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)唾液淀粉酶的制備唾液淀粉酶的制備稀釋唾液:唾液原液稀釋100倍T對(duì)酶活性的影響對(duì)酶活性的影響T 試管號(hào) 淀粉溶液/ml 稀釋唾液/
2、ml 蒸餾水/ml 0冰水浴 1 5 1 0 0冰水浴 2 5 0 1 37水浴 3 5 1 0 37水浴 4 5 0 1 沸水浴 5 5 1 0 沸水浴 6 5 0 1+2滴 碘化鉀-碘溶液 搖勻 測(cè)量吸光度(660nm)pH對(duì)酶活性的影響對(duì)酶活性的影響編號(hào) pH 緩沖液A/ml 緩沖液B/ml A 5.9 90.0 10.0 B 6.2 81.5 18.5 C 6.5 68.5 31.5 D 6.8 51.0 49.0 E 7.1 33.0 67.0 F 7.4 19.0 81.0 G 7.7 10.5 89.5 H 8.0 5.3 94.7緩沖溶液的配制pH對(duì)酶活性的影響對(duì)酶活性的影響最
3、適pH的測(cè)定16支試管+5ml淀粉溶液+1ml緩沖液奇數(shù)號(hào)偶數(shù)號(hào)+ 1ml稀釋唾液+ 1ml蒸餾水混勻 , 37水浴 15min測(cè)吸光度激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響試管號(hào) 淀粉溶液/ml 1%硫酸銅/ml 0.5%NaCl/ml 稀釋唾液/ml 蒸餾水/ml 1 5 1 0 1 0 2 5 1 0 0 1 3 5 0 1 1 0 4 5 0 1 0 1 5 5 0 0 1 1 6 5 0 0 0 2+2滴 碘化鉀-碘溶液 搖勻 測(cè)量吸光度(660nm)T對(duì)酶活性的影響激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響pH對(duì)酶活性的影響n(yōu) . . .12 A編號(hào)唾液淀粉酶活力= A(A - A)51/151/10051/151/0.01A空白管的吸光度A
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