探索黑豆對SD大鼠腎陰虛癥狀的改善作用

1、探索黑豆對SD大鼠腎陰虛癥狀的改善作用秦珊 高銘 張何威 李大雷 黃寅（上海中醫(yī)藥大學 201203）摘要：目的：通過本次實驗證明黑豆對腎陰虛癥狀的治療和改善作用，提示食療養(yǎng)生的重要性，并擬在糾正現(xiàn)在補品市場上唯推舉壯腎陽藥之偏激。方法：本實驗將SD大鼠分為黑豆灌胃組、生理鹽水灌胃組和正常對照組。用小劑量氫化可的松造模后，再進行治療，并測得大鼠睪酮、體重、腎等相關臟器重量等指標。關鍵詞：腎陰虛 黑豆補腎歷史在中國由來已久，近年來隨著各個補腎類醫(yī)藥保健產(chǎn)品不遺余力的廣告宣傳，現(xiàn)在大有全國流行補腎之勢。在此過程中，也產(chǎn)生了一些“補腎”的誤區(qū)“補腎壯陽”的保健食品鋪天蓋地，而滋補腎陰的食品關注度明顯

2、不足。另據(jù)調(diào)查，上海老年人口中80%以上有腎陰虛癥狀，且50%以上的白領也有不同程度的腎陰虛癥狀，而導致這一現(xiàn)象的原因很多，主要為肝腎陰陽失調(diào)所致。內(nèi)經(jīng)云：“腎者在色為黑，在味為咸,其榮為發(fā)，其谷為豆，”；延年秘錄：“服食黑豆，令人長肌膚，延顏色，添精髓，加氣力，虛補能食?！北静菥V目：“黑豆入腎功多，故能治水，消漲，下氣，制風熱而活血解毒。”現(xiàn)代研究已顯示黑豆具有補腎強身的作用，可有效改善腎虛癥狀。黑豆是一種物美價廉、取材方便的補腎佳品。根據(jù)“藥補不如食補”的原則，為糾正目前補品市場唯壯腎陽的偏激，揭示黑豆滋補腎陰的良好作用，我小組對黑豆治療和改善腎陰虛癥狀的作用進行研究，茲將實驗方法與結果報

3、道討論于下。1材料與方法1.1 動物健康雄性SD大鼠33只，體重（300/20g），月齡8周，由上海中醫(yī)藥大學動物房提供，實驗動物合格證：，溫度 24 2，濕度 40。1.2 藥物與試劑注射用氫化可的松琥珀酸鈉由天津市生物化學制藥廠出品，批號：20070706；睪酮放射免疫分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，國藥準字S10940093，批號：080620。1.3 主要儀器和工具GC-911r放射免疫計數(shù)器，科大創(chuàng)新股份有限公司；雙鹿TH288-1型多用途臺式恒溫振藥器，江蘇省鹿何生化儀器廠； DL-50RC離心機,上海中科生物醫(yī)學高科技開發(fā)有限公司；SHZ-型循環(huán)水真空泵，上海亞榮生化儀器廠

4、；電子稱重計。1.4 動物分組與造模 動物分組將大鼠隨機分為3組：黑豆治療組(11只)、模型組（11只）和正常組(11只)。所有動物在統(tǒng)一條件下(室溫1924 ，相對濕度40)普通飼料喂養(yǎng)，自由飲水。每周稱一次體重并記錄數(shù)據(jù)，觀察精神狀態(tài)等。造模黑豆治療組和模型組每天定時（下午5點）給予注射用氫化可的松琥珀酸鈉按體重18mg/kg計算注射劑量（氫化可的松琥珀酸鈉濃度為25mg/ml）進行腹腔注射，持續(xù)五天。1.5 動物飼養(yǎng)造模成功后，黑豆治療組每天定時給予黑豆勻漿(按黑豆粉蒸餾水為1：4配制)2ml灌胃一次，同時給予正常飲食，持續(xù)5天。模型組每天定時（下午5點）給予生理鹽水2ml灌胃一次，同時

5、給予正常飲食，持續(xù)5天。正常組按SD大鼠常規(guī)飼養(yǎng)。1.6 標本采集與處理在實驗第11天，將3組大鼠眼窩靜脈叢取血1 mL每只均加人肝素抗凝劑制成血漿，取0.1 mL血漿加入200 mL無水乙醇，振搖1 min，靜置5 min，3000 rpm離心10 min。將上清液倒人指形管，殘渣再加人75 乙醇1 mL搖勻，3000 rpm離心10 min。合并上清液，于60C烘箱烘干，待殘渣干后放人4C保存。測量時用10 mL醋酸緩沖液溶解，取01 mL用放免法測其血清睪酮含量。后將大鼠腹腔注射3 戊巴比妥鈉生理鹽水溶液40 mgkg麻醉后進行解剖，分離出腎上腺、腎和睪丸并及時進行稱重記錄數(shù)據(jù)，以便分析

6、比較。1.7 統(tǒng)計學方法采用SPSS 130統(tǒng)計軟件處理。所有數(shù)據(jù)均以(均數(shù)標準差)表示。組間均數(shù)比較采用單因素方差分析檢驗，P005或P001為差別有統(tǒng)計學意義。2 結果2.1體重：Dependent Variable: bw (I) group(J) groupMean Difference (I-J)Std. ErrorLSD1.002.0030.87500(*)14.02522.0391.7080 3.0050.25000(*)14.02522.00221.0830 2.001.00-30.87500(*)14.02522.039-60.0420 3.0019.3750014.0252

7、2.182-9.7920 3.001.00-50.25000(*)14.02522.002-79.4170 2.00-19.3750014.02522.182-48.5420* The mean difference is significant at the .05 level.正常組與黑豆治療組、模型組都有顯著差異，正常對照組與黑豆治療組體重增加呈“J”型曲線，黑豆組曲線明顯平緩。黑豆治療組與模型組體重也有明顯差異，模型組體重呈“n”型曲線，說明腎陰虛造模在第三次（即最后一次）稱重時已經(jīng)成功，黑豆對腎陰虛體重減輕的癥狀有改善作用。2.2腎上腺、腎臟、睪丸重量：(I) GROUP(J) GR

8、OUPMean Difference (I-J)Std. ErrorLSD1.002.0030.8750(*)14.0252.0391.7080 3.0050.2500(*)14.0252.00221.0830 2.001.00-30.8750(*)14.0252.039-60.0420 3.0019.375014.0252.182-9.7920 3.001.00-50.2500(*)14.0252.002-79.4170 2.00-19.375014.0252.182-48.5420正常組與黑豆治療組、造模組都有顯著差異，正常組臟器質(zhì)量重于其他二組。黑豆治療組與造模組沒有顯著差別，反映出腎陰

9、虛造模成功，但黑豆對患腎陰虛的SD大鼠的臟器治療作用尚未能確定。2.3血漿睪酮T正常組模型組黑豆組11.924.429.987.776.073.412.296.283.6313.894.075.632.852.322.294.374.546.658.922.213.043.462.031.63均數(shù)6.933753.99254.5325偏差4.3879351.6845162.754709由于操作有誤，血漿睪酮正常對照組，黑豆治療組，模型組sig值都大于0.05，因此沒有統(tǒng)計學意義。3討論：黑豆又名烏豆、黑豆，味甘性平，入脾經(jīng)、腎經(jīng)。是大豆的一種。傳統(tǒng)中醫(yī)學認為，黑豆是一種既便宜又有助于抗衰老，具

10、有醫(yī)食同療的特殊功能的食品。本草綱目說：“豆有五色，各治五臟，惟黑豆屬水性寒，可以入腎。治水、消脹、下氣、治風熱而活血解毒，常食用黑豆，可百病不生?！薄昂诙谷肽I功多，故能治水、消腫下氣。治風熱而活血解毒?！彼幚硌芯拷Y果顯示，黑豆具有養(yǎng)陰補氣作用，是強壯滋補食品。但黑豆也不可多食。孫思邈說：“黑豆少食醒脾，多食損脾；”千金翼方中說：“久食黑豆令人身重?！北静輩R言說：“黑豆性利而質(zhì)堅滑，多食令人腹脹而痢下?！睘榱巳『诙怪浔?，歷代醫(yī)家善用黑豆制成藥膳、藥豆與藥酒，用于防治疾病與保健。唐代陳藏器的本草拾遺記載，黑豆能”明目鎮(zhèn)心，溫補。久服，好顏色，變白不老?！泵鞔顣r珍所著的本草綱目也有”李守

11、愚每晨水吞黑豆二七枚，到老不衰”的記載。 這與黑豆滋養(yǎng)腎之元陰關系密切?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)黑豆含較豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物以及胡蘿卜素、維生素B1、B2、煙酸及粗纖維，鈣，磷，鐵等營養(yǎng)物質(zhì)，并含少量的大豆黃酮甙染料木苷。這兩種物質(zhì)均有雌激素樣作用。黑豆葉中含葉酸、亞葉酸、核黃素、維生素A及類胡蘿卜素等。黑豆衣含果膠、乙酰丙酸和多種糖類。黑豆具有一般食物沒有的獨特物質(zhì)，正是這些獨特物質(zhì)，提升了黑豆在豆類中的營養(yǎng)保健地位。科學研究顯示：黑豆具有高蛋白、低熱量的特性，其蛋白質(zhì)含量高達3640，相當于肉類含量的2倍、雞蛋的3倍、牛奶的12倍；富含18種氨基酸，特別是人體必須的8種酸含量，比美國FDA規(guī)

12、定的高蛋白質(zhì)標準還高。黑豆還含有19種油脂，不飽和酸含量達80，吸收率高達95以上，除能滿足人體對脂肪的需要外，還有降低血液中膽固醇的作用。因為黑豆基本不含膽固醇，只含植物固醇，而植物固醇不被人體吸收利用，卻有抑制人體吸收膽固醇、降低膽固醇在血液中含量的作用。因此，常食黑豆，能軟化血管，滋潤皮膚，延緩衰老，特別是對高血壓、心臟病，以及肝、腎和動脈等方面的疾病有好處。 本次實驗中，從黑豆治療組與模型組的SD大鼠的在平均體重，睪酮T水平的差異上看黑豆對腎陰虛證的是有改善作用的，遺憾的是由于實驗操作不規(guī)范出現(xiàn)了較大誤差，使得實驗數(shù)據(jù)意義打折。4 實驗體會和心得經(jīng)過幾個月的準備和最后階段的實際操作，我

13、們組的探索性實驗接近尾聲，回顧這些天的實驗過程，充滿了新奇與挑戰(zhàn)。整個實驗過程是愉快的，我們也通過每一名組員的努力，做出了一些實驗結果。誠然，由于實驗經(jīng)驗的缺乏和眾多不定因素的干擾，讓我們的實驗遇到了種種困難，結果并不如愿。我們經(jīng)過總結，對實驗的具體過程和技巧，以及對待實驗的態(tài)度有了進一步的認識和思考。由于我們的實驗準備時間較長，所以對于實驗器材的準備和實驗理論的探究做的較為完備和理想。在實驗過程中，我們小組對大鼠的分組及體重等實驗數(shù)據(jù)的采集比較及時和準確。但是由于期末考試及小學期醫(yī)院實習等因素的影響，我組開始實驗的日期一再后延，從五月上旬推遲到了六月上旬，直接導致了最終實驗設想未能全部完成。當然，其中由于奧運安全及環(huán)保工作的緣故，學校的核醫(yī)學實驗室提前關閉。為了能夠得到必要的實驗數(shù)據(jù)，我們的實驗只得提前五天結束，以取得到核醫(yī)學實驗室測量數(shù)據(jù)的機會。但是回想實驗的開展過程，我們確實應從自身尋找原因。小組有五名成員，互相之間可以交叉配合，盡量提早實驗的日期，為最后的數(shù)據(jù)整理和論文撰寫爭取時間。即使課業(yè)再緊張，也總應該抽出時間按時開展實驗，保證實驗進行，這點我們要向所有完成實驗的小組學習。盡早實驗，不僅給予實驗過程充足的時間，也能預防和應變可能的突發(fā)事件。另外，在實