細菌偶氮還原研究進展

1、應用與環(huán)境生物學報2005,11(5:642647C h in J A ppl Environ B iol=ISSN10062687X2005210225細菌偶氮還原研究進展3洪義國1,2,3許玫英1,2,3郭俊2岑英華2孫國萍233(1中國科學院華南植物園廣州510650(2廣東省微生物研究所,3廣東省菌種保藏與應用重點實驗室廣州510070摘要細菌偶氮還原是在細菌偶氮還原酶作用下偶氮復合物分解為芳香氨的過程,多種細菌都具有偶氮還原功能.關鍵詞偶氮還原;偶氮還原酶;細菌;偶氮染料;氧化還原中間體CLCX172AD VANCE I N BACTER I AL AZO RED UCT I O N

2、 RESEARCH3HONG Yiguo1,2,3,XU Meiying1,2,3,G UO Jun2,CE N Yinghua2&S UN Guop ing233(1South China Institute of B otany,Chinese Acade m y of Sciences,Guangzhou510650,China(2Guangdong Institute of M icrobiology,3Guangdong P rovincial Key L aboratory of M icrobial Culture Collection and A pplication,

3、Guangzhou510070,China AbstractBacterial azoreducti on is a p r ocess that azo dyes are decomposed int o ar omatic a m ines by the azoreductase fr om bac2 teria.M any kinds of bacteria have the ability of reducing azo dyes.Under aer obic conditi on,bacterial azoreducti on was carried out by s pecial

4、azoreductase,which was not sensitive t o oxygen.But under anaer obic conditi on,bacterial azoreducti on was an uns pecific p r ocess.I n this syste m,azo dyes were catalyzed extracellularly by the redox mediat or compounds,which were either secreted during the metabolis m of certain substrates by th

5、e bacteria the m selves or added exogenously.These mediat ors could transfer redox equivalents fr om the cellme mbrane of the bacteria t o azo dyes.The acti on bet w een azo compounds and redox me2 diat or was a pure che m ical redox reacti on.Moreover,bacterial azoreducti on occurred mainly under a

6、naer obic conditi on.Gener2 ally,bacterial azoreducti on was app lied f or the aer obic/anaer obic treat m ents of dye-containing wastewaters and the research of azo poly meric hydr ogels f or col on targeted drug delivery.Fig2,Tab1,Ref45Keywordsazoreducti on;azoreductase;bacteriu m;azo dye;redox me

7、diat orCLCX172面對被偶氮染料污染的生態(tài)環(huán)境問題,人們積極探索用各種方法去解決,其中生物降解法是最有效的方法.偶氮染料脫色降解的第一步也是最關鍵的一步就是偶氮染料的還原,即偶氮鍵打開生成芳香胺的過程.對偶氮還原的深入研究,將有助收稿日期:2004208230接受日期:20042092133國家863項目(2001AA214111,廣東省科技攻關項目(2002C31605和廣東省自然科學基金項目(032319資助Suppor2 ted by the State Pr ogra m for H igh Technol ogy Research and Devel opment of C

8、hina,Guangdong Pr ovincial Pr ogra m f or Science and Technol ogy De2 vel opment and Guangdong Pr ovincial Natural Science Foundati on1偶氮染料概述偶氮染料是人工合成的偶氮化合物,其分子的主要特征是含有一個或多個偶氮鍵(-N=N-.在眾多的合成染料里,偶氮染料因其產(chǎn)量和品種的繁多堪稱是最重要的,在生產(chǎn)領域廣泛運用的一些直接染料、活性染料、酸性染料、分散染料和金屬絡合染料等,都含有偶氮結構.1876年,W iff提出染料發(fā)色團說,認為染料顏色是由雙鍵共扼體系(-N

9、=N-引起的,這些含雙鍵的基團即為發(fā)色團.現(xiàn)代理論認為,染料的顏色與其結構有密切相關,共軛雙鍵的長度,共軛體系兩端的氨基、羥基、甲基和磺酸基等極性基團,分子的離子化,分子平面性,染料內絡合物等會對染料顏色都會產(chǎn)生影響,當光線射入后發(fā)生選擇性吸收而導致產(chǎn)生出視覺所感受到的各種顏色1.大約有2000種不同的偶氮染料廣泛用于紡織品、皮革、紙張、塑料、化妝品和食物染色.目前世界染料年產(chǎn)量約為8×1059×105t,美國年產(chǎn)量約為9×104t,我國染料年產(chǎn)量達1.5×105t,其中50%以上是偶氮染料.在染料的生產(chǎn)和使用中,約有10%15%的染料隨廢水排入環(huán)境水體

10、,對全球的生態(tài)環(huán)境造成影響,威脅生物多樣性,因此染料污染是一個全球的生態(tài)環(huán)境問題.加之偶氮染料的前體及其降解產(chǎn)物的致癌、致畸、致突變的“三致”作用,因此在對染料降解和脫色的研究中,偶氮染料備受重視.偶氮染料本身對人類不會產(chǎn)生有害的影響,其毒性主要是降解產(chǎn)物芳香氨,但并不是所有的偶氮染料都會產(chǎn)生有生物毒性的芳香胺.研究發(fā)現(xiàn),只有化學結構中含有聯(lián)苯胺或苯二胺的偶氮染料,才有此特性.目前全球市場中以聯(lián)苯胺為基體的偶氮染料有200多種,常用的有90多種.偶氮染料在有氧的狀態(tài)下不易礦化分解,在厭氧狀態(tài)下則很容易被微生物分解還原為芳香胺產(chǎn)物,此作用稱為偶氮還原.芳香胺無色無臭,在環(huán)境中不容易分解礦化,會影

11、響接觸者健康;芳香胺被代謝活化成為活潑的親電子代謝物,這些代謝物再與DNA結合成為DNA加合物,DNA加合物會造成基因中的堿基的改變,如果DNA的修復工作沒做好,就會因DNA 堿基的改變而突變.資料表明,與偶氮染料打交道的人患膀胱癌的風險越來越大,這主要是進入人體的偶氮染料被腸道細菌還原,產(chǎn)生致癌芳香胺2.芳香胺除了會誘發(fā)膀胱癌外,也會誘發(fā)人的胃、腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)、口腔、咽喉、食道、肝臟、膽囊、膽管和胰臟腫瘤.同樣,有毒芳香胺也誘發(fā)實驗動物的各種腫瘤.這些芳香胺也有可能誘發(fā)自身免疫性疾病,例如狼瘡3.2偶氮染料脫色菌的多樣性對于染料脫色菌的研究,國內外文獻報道的大部分是偶氮類染料的脫色研究.偶氮

12、染料脫色菌種類多樣,有好氧性細菌,也有厭氧性細菌,同時還有兼性厭氧菌.其中以假單胞菌、芽孢桿菌和腸桿菌數(shù)量最多.2.1好氧性和兼氧性偶氮染料脫色菌早在1977年,Horitsu4分離出可以降解偶氮染料的細菌B acillus subtilis I F O3002.瑞士的Kulla5等人從含有磺酸基和羧基的偶氮染料橙黃I和橙黃II的環(huán)境中經(jīng)過長期富集培養(yǎng)分離,得到兩株假單胞菌K22和KF46,同時進一步研究了兩菌株對染料的代謝途徑.Hu等人6發(fā)現(xiàn)的菌株淺黃假單胞菌(Pseudo m onas luteola在完全靜止或完全搖動的條件下均不降解染料,但在兩天搖動兩天靜止的條件下對染料RedG、RB

13、B、RP2B和V2RP的降解效果分別可達37.4%、93.2%、92.4%和88%,水中含氮量對降解效果沒有影響.Chen7和Chang8等對一株淺黃假單胞菌(P.luteola偶氮染料脫色率與還原產(chǎn)物毒性的關系以及脫色動力學做了進一步研究,得出結論:脫色并不是與生長相關聯(lián)的,而是與代謝相關的. Wong9等人分離得到一種可以降解甲基紅的克雷伯氏菌(Klebsiella pseum onine RS-12,研究發(fā)現(xiàn),該菌無論在靜止條件還是在搖動條件下均對甲基紅有非常好的降解效果,加入葡萄糖或硫酸氨可以促進降解,但加入乙醇沒有促進效果.Suzuli 等10從土壤沉積物中分離到3株具有偶氮染料還原

14、的好氧性芽孢桿菌(B acillus s p.OY122,黃單胞菌(Xantho m onas s p.NR2522和假單胞菌(Pseudo m onas s p.PR4121,它們都能夠催化甲基紅的還原.徐文東等11從處理毛紡廠染料廢水活性污泥中分離得到1株高效降解菌,經(jīng)鑒定,該菌為嗜熱鞘氨醇桿菌(Sphingobacterium thalpopilum,5d內對派拉丁藍RRN的脫色率為34%.許玫英等12對9株染料脫色菌的脫色特性及其質粒的攜帶情況進行了初步研究,測定和比較了這9株細菌的16S r DNA序列,并對其進行分子鑒定和分類,經(jīng)檢測的9株細菌均屬于腸桿菌科,其中脫色能力較廣譜的5

15、株細菌均未檢測到質粒的存在,它們在系統(tǒng)分類地位上基本上聚為一類,與埃希氏菌屬的大腸埃希氏菌具有較高的同源性.葡萄牙的M ai2 er13分離到一株堿性熱穩(wěn)定的具偶氮還原活性的細菌(B acil2 lus s p.SF,能夠在高溫下還原偶氮染料.2.2厭氧性偶氮染料脫色菌劉志培等14從活性污泥中分離到幾株具有反硝化能力的偶氮染料脫色菌,它們在合成培養(yǎng)基中能使大多數(shù)所試偶氮染料脫色,而在反硝化條件下很難使偶氮染料脫色.賈省芬15研究了專性厭氧菌硫酸鹽還原菌混合培養(yǎng)物對偶氮染料、三苯甲烷染料、蒽醌染料的脫色作用.在菌的生長過程中,隨著硫化氫的形成,染料的脫色率不斷增加.另外在人的腸道中分離到了具偶氮

16、還原活性的厭氧細菌有產(chǎn)氣夾膜梭菌(C lostridium per2 fringens和腸道糞球菌(Enterococcus faecalis16.2.3能以偶氮染料為唯一碳源和能源的脫色菌Overney17最先研究了以偶氮染料為唯一碳源和能源的脫色菌,分離到在有氧情況下以4,42乙二酸偶氮苯生長的黃桿菌(Flavobacterium.B lu mel18分離到菌株S5在有氧條件下能以偶氮復合物42羧基242磺酸基偶氮苯(CS AB作唯一碳源和能源生長,由偶氮還原酶先打開偶氮鍵,然后再將還原產(chǎn)物完全降解,并產(chǎn)生能量.梁沈平19等分離到Pse4、Pse29兩菌,在非固定化條件下,分別對10mg/

17、L陽離子桃紅FG、活性艷紅K22BP溶液在染料為唯一碳源、能源時,12d脫色80%以上,這兩株菌都屬于假單胞菌屬.2.4具偶氮染料脫色能力的光合細菌張波等20系統(tǒng)地研究了光合細菌(Rhodobacter sphacroides 17023對活性艷紅X23B的脫色條件,并對其脫色與質粒的關系進行了研究.結果表明,光合細菌對活性艷紅X23B具有良好的脫色能力,其脫色效率受其培養(yǎng)條件的影響較大.黃志勇等21從印染廠污泥中分離到1株沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudo m onas palustris H3,在光照厭氧條件下該菌生長細胞可將100mg/L酸性紅B2G L染料去除到30mg/L.完整細

18、胞脫色的最適條件為pH710,溫度30,細胞濃度2025mg/mL(濕重.低濃度的陽離子對脫色影響不大,在通氬氣使嚴格厭氧和加有還原性輔酶I(NADH的條件下,無細胞提取液的脫色活性最高,比活率為1.154×102mg mg(p r otein-1h-1.根據(jù)降解產(chǎn)物的分析,推斷了該菌對酸性紅染料的降解代謝途徑.Zhou22分離到一株光合紅細菌(Rhodobacter sphaeroides AS1.1737能降解幾種偶氮染料,在24h內脫色率達90%(200mg/L.盡管已篩選到的脫色菌種類較多,但單菌株適應性有限,脫色的染料種類單一.即使是對多種染料有良好脫色性能的菌株,其脫色能

19、力很不一致.而染色廢水成分復雜,因此影響菌種降解效率.混合菌種在這方面有其優(yōu)勢,許多細菌之間存在協(xié)3465期洪義國等:細菌偶氮還原研究進展同降解作用,增加了降解效果.國內對混合菌的研究相對較多.曾麗璇等人在實際廢水處理設備中分離出了幾株優(yōu)勢菌株,發(fā)現(xiàn)混合菌群的脫色能力優(yōu)于單菌株,且脫色時間短,適應范圍廣,耐沖擊性能更強.本實驗室分離到1株具有染料降解能力的希瓦氏菌新菌種23,命名為脫色希瓦氏菌She w anella decolorationis S12T瓦氏菌S12T偶氮染料還原機理及與Fe(還原關系的探究,將為開發(fā)有效的在呼吸鏈水平上以調控Fe(還原為基礎的偶氮染料降解全新工藝打下基礎,為

20、人類更合理利用自然資源和進行環(huán)境修復提供理論依據(jù).3細菌偶氮還原機理偶氮染料降解的第一步也是最關鍵的一步就是偶氮鍵的打開,生成芳香氨化合物.這一步是由一類還原酶催化完成的,這類種酶叫偶氮還原酶(azoreductase.在有氧條件下,偶氮還原是由特異性的偶氮還原酶直接催化完成;在厭氧條件下,這一反應通常是由非特異性的還原酶催化一類氧化還原中間體,再由此還原了的氧化還原中間體還原偶氮鍵.3.1有氧條件下的細菌偶氮還原機理對于在有氧條件下的細菌偶氮還原,現(xiàn)在基本認為是由特異性的酶催化完成的.這些偶氮還原酶,在有氧條件下,都能降解多種偶氮染料,但每一種酶對染料的特異性是不同的.最早純化的偶氮還原酶是

21、由羧基橙降解菌株K22產(chǎn)生的O range I偶氮還原酶和菌株KF46產(chǎn)生的O range II偶氮還原酶,這兩個偶氮還原酶都是單體非黃素依賴的還原酶,NADPH是酶最適輔助因子.O range II偶氮還原酶嚴格要求偶氮鍵的位上為羥基基團,而O range I偶氮還原酶要求在偶氮鍵的位上為羥基基團24,25.到目前為止,僅有6個在有氧條件下作用的偶氮還原酶被純化、特征分析并得到其基因序列(表1.從表中可以看出,這些酶都有一個NAD(PH結合位點,表明都以NAD(PH作為輔酶,但對NADH和NADPH的Km值有很大的不同.另外,Escherichia coli與Enterococcus fae

22、calis偶氮還原酶是F MN 依賴的NADH偶氮還原酶.大連理工大學的Yan36用PCR的方法從類球紅細菌(Rhodobacter sphaeroides AS1.1737克隆到偶氮還原酶基因,并在大腸桿菌中表達純化,用純化酶研究了偶氮還原過程中羥基化偶氮中間體的存在,為偶氮染料還原必須通過一個非完全的的還原過渡階段提供了理論依據(jù)(圖1.表1有氧條件下作用的偶氮還原酶Table1Azoreductases acting under aer obic conditi on6Enterococcus faecalis23000208F MN2dependent aer obic az oredu

23、ctase,is oelectric point4.830 圖1偶氮還原酶作用機制Fig.1Mechanis m of az oreducti on by az oreductase目前已經(jīng)得到的6個偶氮還原酶基因,序列分析表明,幾種酶基因之間沒有顯著的同源性.這表明,這幾個蛋白是按不同的方式進化為具偶氮還原活性的酶,偶氮還原酶的進化很可能是趨同進化的結果.同時也表明,有氧狀態(tài)下偶氮復合物的降解并沒有被偶氮鍵的代謝所限制.另外,在有氧條件下,很多好氧菌在含有復雜化合物的培養(yǎng)基中搖動培養(yǎng),雖然菌體大量生長但并不表現(xiàn)很好的脫色特性.當把培養(yǎng)的細菌細胞放置以后,卻有很好的脫色效果.在靜置狀態(tài)下,菌體

24、可能快速消耗了液體中的氧,偶氮還原是在厭氧狀態(tài)下進行的.所以這類細菌的偶氮還原是好氧生長、厭氧還原,與上面論述的好氧偶氮還原酶的作用機理是不同的.有關厭氧偶氮還原機理將在下面討論.3.2厭氧偶氮還原機理446應用與環(huán)境生物學報C h in J A ppl Environ B iol11卷與偶氮染料競爭還原型電子載體.在偶氮染料與還原型電子載體之間自發(fā)發(fā)生的反應是非特異性的還原過程,反應的發(fā)生是由氧化還原中間體和偶氮復合物的氧化還原電勢來決定的.近來的研究表明,氧化還原電勢(E 0大約在-320mV 到-50mV 之間的醌類氧化還原中間體通常都能在細菌厭氧偶氮還原中發(fā)揮有效的功能.這一限度是由細

25、胞氧化還原輔助因子NAD (P H 的氧化還原電勢和偶氮復合物的氧化還原電勢(-180mV -430mV 共同決定的31 .圖2厭氧條件下依賴氧化還原中間體的偶氮還原機制Fig .2Pr oposed mechanis m f or redox mediat or dependent reducti on of az o dyes under anaer obic conditi on對嗜熱鞘氨醇桿菌S.xenophaga BN6菌偶氮還原酶的定位實驗表明,細胞中存在兩套偶氮還原酶系統(tǒng).一套是位于胞質中的黃素氧化還原酶;另外一套是位于細胞膜上的與呼吸鏈有關的NADH:泛醌氧化還原酶.AQS 能

26、顯著提高細胞的厭氧偶氮還原率,但對胞質抽提物卻影響不大.早期的研究表明,胞質黃素還原酶催化產(chǎn)生的還原型黃素在兼性厭氧菌的非特異性的偶氮還原過程中發(fā)揮重要作用32.近來,在不同的菌株中重組表達黃素還原酶,充分證明了黃素還原酶具有偶氮還原酶活性.胞質黃素還原酶在完整細胞的厭氧偶氮還原中可能發(fā)揮較小的作用,因為極性偶氮染料不易透過細胞膜進入細胞內部.在靜置的重組黃素還原酶基因(fre 的菌體細胞中添加F AD,對偶氮還原影響很小,而向其細胞裂解物中添加F AD時,卻能顯著提高其偶氮還原率33.xenophaga BN6菌體細胞的酶催化還原,還原型的醌在還原偶氮復合物,這是一個純化學氧化還原過程.細胞

27、裂解實驗表明,醌氧化還原酶活性定位在細胞膜上32.在研究菌株S.xenophaga BN6的萘磺酸(naphthalenesulfo 2nic acid 降解途徑時,得到另外一個不同的厭氧偶氮還原模型.在好氧條件下萘磺酸降解產(chǎn)生水楊酸鹽(salicylate ,水楊酸鹽在S.xenophaga BN6的厭氧偶氮還原中做為氧化還原中間體起到重要作用.水楊酸的還原可能是由與呼吸鏈相關的NADH:泛醌氧化還原酶催化的,它作為一穿梭體不斷的把胞內的還原力帶到胞外還原偶氮復合物.這個實驗表明,這種在細胞的代謝中形成的氧化還原中間體在環(huán)境污染物的降解中起到重要作用,可以用來發(fā)展好氧-厭氧生物降解反應器34

28、.在厭氧培養(yǎng)的大腸桿菌中添加la ws one 能顯著提高對不同的磺基化的偶氮復合物還原率.進一步研究在胞質中發(fā)現(xiàn)了一種NADH 依賴的la ws one 還原酶,分析表明,NADH 依賴的la w 2s one 還原酶就是氧不敏感的硝酸還原酶Nfs B.另外,對硝酸還原酶Nfs A 的研究表明,此酶也具有l(wèi)a ws one 還原酶活性35.細胞分離實驗表明,la ws one 還原酶活性幾乎完全存在于胞質部分,膜部分只有5%的酶活性.Nfs A 和Nfs B 突變株與野生型相比,僅表現(xiàn)5%的la ws one 還原酶活性.作者推測更可能的是la ws one 和它的還原形式原力從胞內帶到胞外

29、.la ws one 作為一個適合的氧化還原中間體不僅僅因為它的氧化還原電勢,而且通過菌體細胞膜擴散,而不是偶氮復合物的的跨膜擴散.這樣,這些氧化還原中間體復合物就能把就能把還原力從胞內帶到胞外.la ws one 作為一個適合的氧化還原中間體不僅僅因為它的氧化還原電勢,而且因為它的具好的脂溶性.在其他細菌中也存在與Nfs A 和Nfs B 功能相似的酶,這些酶也有可能與Nfs A 和Nfs B 一樣,在厭氧條件下作為la ws one 依賴的偶氮還原酶.另外在研究嚴格厭氧腸道菌過程中,得到一個不同的厭氧偶氮還原模型,在這個模型中也不要求偶氮染料的跨膜轉運.C lostridium perfr

30、ingens 菌體培養(yǎng)基的上清液中仍然有偶氮還原酶活性,表明菌體分泌了一類胞外的偶氮還原酶36,37.對其分泌的胞外偶氮還原酶分析,結果發(fā)現(xiàn)其活性與黃素無關,且能被氧氣快速抑制.對這類酶的作用機制研究較少.最近的研究表明,硫細菌在厭氧呼吸中產(chǎn)生的H 2S 能導致偶氮染料Reactive O range 96的有效還原.在環(huán)境中,Fe 2+、H 2S 這樣的還原庫在偶氮染料的降解中可能起到重要作用.NADH 作為一個純化學還原劑在偶氮染料的還原中也被探討.NADH 通過轉移4個電子還原多種偶氮染料,還原反應具很強的pH 依賴性,隨著pH 的下降還原增強38.綜上所述,細菌在厭氧條件下發(fā)生的偶氮還

31、原是在非特異性還原酶作用下的電子傳遞過程.偶氮復合物作為末端電子受體,接受從電子氧化還原中間體傳來的電子而被還原.通過上面的分析,我們推測,偶氮復合物可能在細菌的厭氧呼吸過程中作為末端電子受體接受電子而被還原,所以厭氧偶氮還原過程也是厭氧偶氮呼吸過程,細菌可能在這一過程中獲得生長所需的能量.對這一問題的研究具有重要的理論和實踐意義,我們實驗室正致力于此方面的研究.5465期洪義國等:細菌偶氮還原研究進展4細菌偶氮染料還原的應用研究基于對細菌偶氮還原的基礎研究,人們也積極致力于其在應用領域的研究.目前細菌偶氮還原主要應用于兩個研究領域:一個是染料廢水處理系統(tǒng)的應用,另一個就是偶氮聚合物作為結腸靶

32、向給藥載體的研究.4.1厭氧-好氧染料廢水的處理系統(tǒng)通過大量的實驗表明,染料的脫色反應(偶氮鍵的斷裂主要是在厭氧條件下進行.因為厭氧偶氮還原是在一些氧化還原中間體作用下的非特異性的反應,所以厭氧偶氮還原更適于含有多種染料的廢水的前期處理.厭氧偶氮還原的結果是雖然廢水被脫色,但卻產(chǎn)生了多種芳香氨類有毒化合物,這些化合物往往在厭氧條件下難于進一步被降解.這些在厭氧條件下產(chǎn)生的對人及環(huán)境有毒害甚至致癌作用的芳香胺類中間產(chǎn)物,在好氧條件下易被降解.基于以上的研究結果,對染料脫色的工藝流程一般為厭氧-好氧串聯(lián)操作,最終達到去除色度,降低COD的目的,使出水達標39.厭氧-好氧染料廢水的處理策略最先用于磺

33、基化偶氮染料Mordant Yell ow3的脫色研究40.近幾年來,發(fā)展了多種不同的厭氧-好氧染料廢水的處理系統(tǒng),如厭氧-好氧接觸生物反應器,厭氧膜固定流體床-好氧懸浮床活性污泥反應器,厭氧-好氧旋轉鼓反應器.近來,已報道了幾個利用醌從菌體細胞中轉運還原力到胞外還原多種天然或人工合成的復合物,如鐵離子、硝基芳香化合物、多聚鹵代化合物41,42.象Nfs A和Nfs B這樣的酶也許參與了環(huán)境中的多種污染物的還原降解.我們也可以調控這些酶的活性,加快環(huán)境中偶氮污染物的降解.在研究菌株S.xenophaga BN6的萘磺酸(naphthalenesulfo2 nic acid降解途徑時,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生的

34、氧化還原中間體水楊酸鹽在其厭氧偶氮還原中做為氧化還原中間物起到重要作用34.我們可以調控萘磺酸類的細菌代謝途徑,發(fā)展可控的好氧-厭氧生物降解反應器.4.2偶氮交聯(lián)聚合物作為結腸靶向給藥載體的研究5研究展望細菌偶氮還原研究涉及生物能學和環(huán)境污染等基本問題,且與資源利用、環(huán)境修復等重要社會實踐相關,拓寬并深化此類研究具有一定意義.未來的研究應重點解決如下問題:(1細菌厭氧偶氮還原機理的研究;(2細菌偶氮還原系統(tǒng)蛋白系統(tǒng)的定位;(3偶氮鍵作為末端電子受體是否支持細菌的的厭氧呼吸;(4氧化還原中間體在偶氮還原過程的的作用;(5拓寬細菌偶氮還原應用研究.References1Hao LJ(郝魯江,Xu

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