HPLC柱前衍生化法測定阿波莫斯注射液的含量

1、    HPLC柱前衍生化法測定阿波莫斯注射液的含量        摘要采用高效液相色譜鄰苯二甲醛柱前衍生化法，測定進(jìn)口藥品阿波莫斯注射液中天門冬鳥氨酸的含量。以Hypersil ODS(125 mm×4 mm，5 m)為色譜柱，20 mmol/L NaAc+=0.5%THF+=0.02%TEA(pH7.2)混合一定比例的100 mmol/L醋酸鈉-乙睛-甲醇(100175225)作流動相，梯度洗脫。結(jié)果在0.201.20 g范圍內(nèi)，積分面積與樣品量呈良好的線性關(guān)系

2、，r=0.9991，平均加樣回收率為100.3%，RSD=1.8%（n=9）。關(guān)鍵詞阿波莫斯；天門冬鳥氨酸；高效液相色譜法中號R 927.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1006-8783(2000)02-0100-02 Determination of Hepa-Merz Injection byPrecolumn Derivatization of HPLCSU Guang-hai(Guangzhou Institute for Drug Control,Guangzhou Guangdong 510160)AbstractA precolumn derivatization with OPA

3、of HPLC method was established for the determination of Hepa-Merz injection. Reversed-phase C18column (Hypersil ODS 125 nm×4 nm,5 m) was used.Mixture of 20 mmol/L sodium acetate, 0.5% tetrahydrrofuran and 0.02% triethylamine pH 7.2 was used as mobile phase A and mixture of 100 mmol/L sodium ace

4、tate-acetonitril-methanol (100175225) as mobile phase B. The detecting wave-length was 338 nm . There was a good linear relationship in the range from 0.20 g to 1.20 g(r=0.9991). The average recovery was 100.3%(n=9,RSD=1.8%).The method was simple,rapid and accurate.Key WordsHepa-Merz,ornithinasparta

5、t, HPLC德國Merz+Co.GmbH & Co.生產(chǎn)的阿波莫斯（Hepa-Merz）注射液是天門冬鳥氨酸1的滅菌水溶液,適用于慢性肝病引發(fā)血氨升高及肝性腦病。本文采用鄰苯二甲醛柱前衍生化法2測定阿波莫斯中的天門冬鳥氨酸的含量，方法簡單、準(zhǔn)確、快捷、重復(fù)性好。1實(shí)驗(yàn)部分表1阿波莫斯加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果m(樣品量)/mgm(加入量)/mgm(測定量)/mg回收率/%1.56804.03404.06224.06224.0259100.7100.799.83.92004.03404.03013.97754.054299.998.6100.55.48804.03404.20343.94534

6、.0663104.297.8100.81.3.6樣品測定精密量取供試品2 mL，置50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度。精密量取稀釋液1 mL，置50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，作為供試品溶液。分別將對照品溶液和供試品溶液適量用自動進(jìn)樣器，按上述色譜分析條件分離測定。供試品色譜見1。以峰面積總和外標(biāo)法計算天門冬鳥氨酸的含量，結(jié)果見表2，1樣品色譜1 天門冬氨酸色譜峰2 鳥氨酸色譜峰表2樣品測定結(jié)果(n=3)批號相當(dāng)于標(biāo)示量/%7090798.099.5100.08091698.8100.1100.58091798.796.998.42討論2.1阿波莫斯注射液是天門冬氨酸的鳥氨酸鹽的水溶液。天門冬

7、鳥氨酸不能直接用紫外、熒光等檢測器檢測，有報道采用薄層掃描法測定天門冬鳥氨酸2，但操作繁瑣，且水溶液點(diǎn)樣困難，顯色易產(chǎn)生誤差。本文以鄰苯二甲醛柱前衍生分別形成可用紫外檢測的天門冬氨酸和鳥氨酸的異吲哚衍生物用紫外檢測,在HPLC色譜記錄中顯示天門冬氨酸和鳥氨酸衍生物的兩個色譜峰，采用兩個峰面積總和的外標(biāo)法直接測定天門冬鳥氨酸的量，方法簡單、準(zhǔn)確、快捷、重復(fù)性好。2.2采用鄰苯二甲醛柱前衍生化法直接測定天門冬鳥氨酸，輔料、衍生試劑等對天門冬鳥氨酸主成分的測定沒有影響。蘇廣海（廣州市藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州 510160）參考文獻(xiàn)1德國藥典S.1999.3522Seitz HG,Verhoef M. Automated amino acid